新輔助化療對Ⅱ/Ⅲ期乳腺癌患者臨床療效及P53表達水平的影響

王新宇 徐景偉

(吉林大學第二醫(yī)院，吉林 長春 130041)

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新輔助化療對Ⅱ/Ⅲ期乳腺癌患者臨床療效及P53表達水平的影響

王新宇 徐景偉

(吉林大學第二醫(yī)院，吉林 長春 130041)

目的 探討新輔助化療對Ⅱ/Ⅲ期乳腺癌患者臨床療效，研究P53表達水平與臨床療效的關(guān)系。方法 選擇Ⅱ/Ⅲ期乳腺癌患者45例，采用新輔助化療方案〔紫杉醇(TAX)175 mg·m-2·d-1，表阿霉素(EPI)60 mg·m-2·d-1〕：21 d/周期，治療3個周期。觀察并記錄臨床療效；于患者治療前及治療結(jié)束后收集穿刺樣本，免疫組化染色標記P53陽性細胞表達；觀察并記錄骨髓抑制、消化道反應(yīng)、過敏反應(yīng)、皮膚反應(yīng)等臨床常見不良反應(yīng)情況。結(jié)果 經(jīng)過新輔助化療治療后，Ⅱ期患者的臨床緩解率為67.74%，顯著高于Ⅲ期患者的50.00%(P<0.05)；在PR + CR化療有效的病例中P53陽性表達占47.37%，P53陰性占73.08%，化療有效患者中P53陰性患者顯著高于P53陽性患者(P<0.05)；Ⅱ期患者化療后骨髓抑制、皮膚反應(yīng)、消化道反應(yīng)、過敏反應(yīng)的發(fā)病率分別為9.68%、25.81%、45.16%及32.26%，Ⅲ期患者化療后上述不良反應(yīng)的發(fā)病率分別為14.29%、42.86%、42.86%及50.00%。結(jié)論 新輔助化療能夠提高Ⅱ/Ⅲ期乳腺癌患者臨床療效；P53可作為獨立的療效判斷因子，能夠一定程度反映乳腺癌患者對新輔助化療的敏感性；同時，P53也可作為乳腺癌新藥研究的靶點。

新輔助化療；Ⅱ/Ⅲ期乳腺癌；P53

新輔助化療從 1970 年開始用于轉(zhuǎn)移性乳腺癌的治療，目前在乳腺癌的綜合治療中占據(jù)重要地位〔1，2〕。該療法一方面能夠降低腫瘤分級、縮小原發(fā)病灶，便于后續(xù)手術(shù)治療的開展；同時能夠消滅微小轉(zhuǎn)移病灶，減少腫瘤細胞耐藥性〔3〕。本研究對Ⅱ/Ⅲ期乳腺癌患者采用新輔助化療方案治療，取得較好臨床療效。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年1月至2014年1月在我院普外科治療的Ⅱ/Ⅲ期乳腺癌患者45例，年齡30～71歲，平均(50.61±20.65)歲。診斷標準參考美國癌癥研究委員會(AJCC)與國際抗癌聯(lián)盟聯(lián)合制定的NM分類及分期標準〔4〕。瘤體最大直徑<2 cm 16例，2.1～5 cm 27例，>5 cm 2例。按國際抗癌聯(lián)盟UICC分期標準行TNM分期：Ⅱ期 31例、Ⅲ期 14例。被納入研究的患者符合以下條件：符合診斷標準，確診為Ⅱ/Ⅲ期乳腺癌患者，并自愿簽署知情同意書；化療前血常規(guī)、胸片、B超及ECT等未發(fā)現(xiàn)遠處轉(zhuǎn)移；術(shù)前未接受放療、內(nèi)分泌等抗癌治療。排除標準：凝血功能異常；化療及相關(guān)治療禁忌證。

1.2 方法 新輔助化療方案：所有患者靜脈注射紫杉醇(TAX，海南中化聯(lián)合制藥工業(yè)股份有限公司，規(guī)格：5 ml∶30 mg，批準文號：國藥準字H20057065)，175 mg·m-2·d-1；表阿霉素(EPI，海口市制藥，規(guī)格5 ml∶30 mg，批準文號：國藥準字H10980170)，60 mg·m-2·d-1，21 d/周期，治療3個周期。

1.3 臨床療效及觀察指標 療效評價標準：采用WHO關(guān)于實體瘤療效評價標準對腫瘤消退情況進行評價〔5〕。化療前及化療結(jié)束后分別進行超聲或乳腺 X 線檢查?；颊吣[瘤實體完全消失，臨床癥狀好轉(zhuǎn)，無新病灶發(fā)生，為完全緩解(CR)；腫瘤實體最大直徑與最大垂直直徑乘積較治療前縮小超過50%，轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)無變化，為部分緩解(PR)；腫瘤實體最大直徑與最大垂直直徑乘積較治療前縮小不超過50%，增大不超過25%，為無效(SD)；治療后腫瘤實體最大直徑與最大垂直直徑乘積較治療前增大超過25%，為進展(PD)。緩解率=CR+PR。

觀察指標：于患者治療前及治療結(jié)束后收集穿刺樣本，使用10%甲醛固定，石蠟包埋后組織切片。切片厚度為4 μm，采用免疫組化染色后HE復(fù)染。使用P53單克隆抗體標記陽性細胞位置。400倍光鏡下計算1 000 個腫瘤細胞中陽性細胞所占百分比，≥10%以上為陽性組織。治療前后檢查血常規(guī)、肝腎功能和心電圖，按化療藥急性及亞急性毒性分級標準統(tǒng)計，觀察并記錄骨髓抑制、消化道反應(yīng)、過敏反應(yīng)、皮膚反應(yīng)等臨床常見不良反應(yīng)情況。

1.4 統(tǒng)計學分析 采用SPSS13.0軟件，計量資料采用t檢驗；計數(shù)資料進行χ2檢驗。

2 結(jié) 果

2.1 新輔助化療臨床療效 經(jīng)過新輔助化療后，Ⅱ期患者的臨床緩解率為67.74%(CR 8例，PR 13例，SD 7例，PD 3例)顯著高于Ⅲ期患者的臨床緩解率50.00%(CR 4例，PR 3例，SD 5例，PD 2例)(P<0.05)。

2.2 P53 表達與不同療效的關(guān)系 經(jīng)新輔助化療治療后，在PR + CR的化療有效病例中P53陽性表達占47.37%(CR 5例，PR 4例，SD 8例，PD 2例)，P53陰性占73.08%(CR 7例，PR 12例，SD 4例，PD3例)，化療有效患者中P53陰性患者顯著高于P53陽性患者(P<0.05)。

2.3 患者化療后不良反應(yīng)情況 Ⅱ期患者化療后骨髓抑制、皮膚反應(yīng)、消化道反應(yīng)、過敏反應(yīng)的發(fā)病率分別為9.68%、25.81%、45.16%及32.26%；Ⅲ期患者化療后上述不良反應(yīng)的發(fā)病率分別為14.29%、42.86%、42.86%及50.00%。上述不良反應(yīng)經(jīng)相應(yīng)處理后癥狀均有所緩解，不影響試驗的完成，所有患者均無明顯肝腎損傷。

3 討 論

乳腺癌是發(fā)生在乳腺腺上皮組織的惡性腫瘤，婦科最常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率占全身各種惡性腫瘤的7%～10%。新輔助化療又稱術(shù)前化療，指在實施局部治療方法前所做的全身化療，以縮小腫瘤、殺滅轉(zhuǎn)移的癌細胞為治療目的，便于后續(xù)手術(shù)、放療的進行，在乳腺癌綜合治療中占有重要地位〔6〕。目前，傳統(tǒng)的診斷及療效評價指標主要依靠影像學診斷，如B超、鉬靶X線片、CT 及磁共振成像(MRI)對腫瘤的測量，但是費用較高，且存在一定誤差〔7〕。近年來，隨著分子生物學技術(shù)在癌癥領(lǐng)域研究的深入，目前的研究重點轉(zhuǎn)移到是否能夠找到有效可靠的分子標記物來預(yù)測和反映乳腺癌進展〔8〕。

P53是一種分子量為53 kD的蛋白質(zhì)，在健康人體中是一種腫瘤抑制基因，50%以上惡性腫瘤患者會出現(xiàn)P53基因突變〔9〕。在生理狀態(tài)下，P53與其抑制劑MDM2特異性結(jié)合，處于穩(wěn)態(tài)，發(fā)揮維持細胞基因的完整性，修復(fù)DNA損傷及維持細胞的正常運轉(zhuǎn)，對細胞分裂起著減慢或監(jiān)視的作用〔10〕。疾病或應(yīng)激狀態(tài)下，P53基因發(fā)生突變，失去對細胞生長、凋亡、DNA修復(fù)等的調(diào)控作用，由抑癌基因轉(zhuǎn)變成癌基因〔11〕。在乳腺癌早期，突變的P53基因能夠抑制血管增生的凝血酶反應(yīng)素-1且上調(diào)促進血管增生的內(nèi)皮生長因子，從而加速了腫瘤細胞的血管生長。臨床研究發(fā)現(xiàn)，P53能夠參與乳腺癌發(fā)生發(fā)展，且隨著P53突變程度不斷增加，乳腺癌的惡性程度也相應(yīng)增加；同時，P53基因的改變可能與腫瘤細胞耐藥性的形成有一定相關(guān)性〔12〕。因此，P53基因異常表達在乳腺癌發(fā)生、發(fā)展過程中起著非常重要的作用。

本研究發(fā)現(xiàn)，P53的表達情況與新輔助化療的臨床療效有一定相關(guān)性，P53陰性表達患者對新輔助化療更為敏感。臨床藥理學研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤細胞對紫杉類藥物耐藥性主要是由于微管蛋白突變引起，而微管蛋白突變常伴有P53突變，P53功能喪與腫瘤細胞對紫杉類藥物耐藥性密切相關(guān)〔13〕。同時，有臨床研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌患者P53在腫瘤組織代謝旺盛，合成DNA和RNA聚合酶活性增高，細胞增殖旺盛，通過分子生物學檢測可見，Ki67、P53 抗原出現(xiàn)高表達，nm23出現(xiàn)低表達。上述指標的改變有助于對乳腺癌病人的臨床療效及預(yù)后作出判斷〔14〕。這與本研究結(jié)果一致，P53的表達與乳腺癌患者對新輔助化療的敏感程度有一定相關(guān)性。由于本研究的樣本量較小，且本研究僅是對短期療效的判斷，有待在今后的研究中進一步擴大樣本量，在多中心大規(guī)模的前瞻對照研究中進一步驗證本試驗結(jié)果。

1 Fernández-Cuesta L,Oakman C,Falagan-Lotsch P,etal.Prognostic and predictive value of TP53 mutations in node-positive breast cancer patients treated with anthracycline- or anthracycline/taxane-based adjuvant therapy:results from the BIG 02-98 phase Ⅲ trial〔J〕.Breast Cancer Res,2012;14(3):R70.

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3 姜鵬玲,尼 杰,谷 峰,等.乳腺癌新輔助化療前后常用化療藥物敏感性的變化〔J〕.中華實驗外科雜志,2015;32(5):959-61.

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5 黃建軍,楊海松.新輔助化療對乳腺癌ER、PR、C-erbB-2、p53表達的影響〔J〕.中國藥房,2008;19(11):841-3.

6 Kornegoor R,Verschuur-Maes AH,Buerger H,etal.Immunophenotyping of male breast cancer〔J〕.Histopathology,2012;61(6):1145-55.

7 Thike AA,Tan PH,Ikeda M,etal.Increased ID4 expression,accompanied by mutant p53 accumulation and loss of BRCA1/2 proteins in triple negative breast cancer adversely affects survival〔J〕.Histopathology,2016;epub of published.

8 Lee SK,Bae SY,Lee JH,etal.Distinguishing low-risk luminal a breast cancer subtypes with Ki-67 and P53 is more predictive of long-term survival〔J〕.PLoS One,2015;10(8):e0124658.

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10 Gurunathan S,Park JH,Han JW,etal.Comparative assessment of the apoptotic potential of silver nanoparticles synthesized by Bacillus tequilensis and Calocybe indica in MDA-MB-231 human breast cancer cells:targeting p53 for anticancer therapy〔J〕.Int J Nanomedicine,2015;10:4203-22.

11 包 剛,楊德啟,周 波,等.新輔助化療對乳腺癌組織中雌激素、孕激素受體及P53和CerbB-2表達的影響〔J〕.中華醫(yī)學雜志,2007;87(40):2843-5.

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13 楊海松,黃建軍,毛大華,等.新輔助化療對乳腺癌雌激素受體和P53基因及人表皮生長因子受體-2的影響及意義〔J〕.中國全科醫(yī)學,2011;14(12):1292-5.

14 胡贇宏,宋和平,林曉燕,等.Ki67、P53抗原和nm23蛋白在乳腺癌中的表達及其臨床意義〔J〕.中國醫(yī)藥指南,2008;6(3):14-6.

〔2016-08-15修回〕

(編輯 曲 莉)

徐景偉(1967-)，男，碩士，教授，主要從事乳腺病研究。

王新宇(1990-)，男，碩士，主要從事乳腺病研究。

R73

A

1005-9202(2016)22-5622-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.22.058