咪唑喹啉類化合物R848對老年變應(yīng)性鼻炎患者外周血白細(xì)胞介素-5及γ干擾素水平的影響

朱學(xué)偉 陳明星 李松濤

(吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院，吉林 長春 130033)

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咪唑喹啉類化合物R848對老年變應(yīng)性鼻炎患者外周血白細(xì)胞介素-5及γ干擾素水平的影響

朱學(xué)偉 陳明星 李松濤

(吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院，吉林 長春 130033)

目的 探討Toll樣受體7/8激動劑咪唑喹啉類化合物R848對老年變應(yīng)性鼻炎患者外周血IL-5及γ干擾素(IFN-γ)水平的影響。方法 收集45例老年變應(yīng)性鼻炎患者外周血，離心獲得外周血單個核細(xì)胞。所有外周血單個核細(xì)胞均給予R848刺激，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測刺激前后IL-5及IFN-γ水平。結(jié)果 老年變應(yīng)性鼻炎患者外周血IFN-γ水平均有不同程度提高(P<0.05)。所有受試者外周血在R848刺激后，IL-5水平均下降(P<0.01)。結(jié)論 咪唑喹啉R848可能通過強(qiáng)化Th1方向的反應(yīng)、抑制Th2方向的反應(yīng)，限制變應(yīng)性鼻炎的反應(yīng)強(qiáng)度。

咪唑喹啉類化合物R848；變應(yīng)性鼻炎；白介素-5

我國變應(yīng)性鼻炎發(fā)病率高達(dá)12%，是嚴(yán)重影響老年人生活質(zhì)量的一種變態(tài)反應(yīng)性疾病。目前，臨床一線應(yīng)用的藥物包括抗組胺藥、皮質(zhì)類固醇以及特異性免疫治療還不能滿足臨床病人的需要〔1〕。R848是一種小分子咪唑喹啉化合物，是Toll樣受體7和8(TLR7/8)的激動劑。以往的研究發(fā)現(xiàn)，其具有有效的抗病毒活性和抗腫瘤作用〔2〕。這種低分子量的合成分子可通過激活TLR7/8及MyD88信號通路活化樹突細(xì)胞等免疫細(xì)胞〔3〕。目前，R848的各種免疫調(diào)節(jié)作用都在進(jìn)行臨床前的實(shí)驗(yàn)研究，而其對變應(yīng)性疾病的調(diào)節(jié)是近來的重要發(fā)現(xiàn)〔4〕。本研究探討咪唑喹啉類化合物R848對老年變應(yīng)性鼻炎患者外周血Th2方向的細(xì)胞因子白細(xì)胞介素(IL)-5及Th1方向的細(xì)胞因子γ干擾素(IFN-γ)水平的影響。

1 材料和方法

1.1 對象 外周血標(biāo)本獲取于2014年5月至2015年10月，因變應(yīng)性鼻炎就診于吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科門診，年齡在60歲及以上的老年患者，共45例。男28例，女17例；年齡60～65歲20例，>65歲25例；過敏源：塵螨12例，塵螨合并艾蒿15例，艾蒿18例；臨床分級：輕度、間歇性2例，輕度、持續(xù)性10例，中度、間歇性15例，中度、持續(xù)性10例，重度、間歇性5例，重度、持續(xù)性3例。所有病人均未在就診前口服抗組胺藥物及應(yīng)用皮質(zhì)類固醇藥物。

1.2 變應(yīng)原的檢測 采用皮膚點(diǎn)刺及血清IgE檢測，兩種檢測均為陽性視為確定的變應(yīng)原。

1.3 R848 水溶性的R848由InvivoGen公司生產(chǎn)提供。在刺激外周血標(biāo)本時調(diào)整終濃度為1 μg/ml。

1.4 IL-5及IFN-γ水平的測定 將獲得的全部45例外周血標(biāo)本離心，獲得外周血單個核細(xì)胞(PBMC)，調(diào)整細(xì)胞數(shù)為1×106/ml。R848于4℃孵育，時間為48 h。在R848刺激前后，采用ELISA法檢測所有樣本IL-5及IFN-γ水平，具體操作按照試劑盒說明書進(jìn)行，試劑盒購置于武漢博士德生物科技有限公司。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS13.0軟件行t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

45例老年變應(yīng)性鼻炎患者在R848刺激后PBMC中IFN-γ水平均有不同程度升高 〔刺激前(5 044±230)pg/ml，刺激后(26 440±5 210)pg/ml，P<0.05〕，IL-5水平下降〔刺激前(3 452±1 430)pg/ml，刺激后(1 125±354)pg/ml,P<0.01〕。

3 討 論

目前，臨床治療變應(yīng)性鼻炎的藥物包括糖皮質(zhì)激素、白三烯受體拮抗劑、抗組胺藥等，抗IgE抗體和可溶性IL-4受體α鏈等還處于研究階段。它們分別作用于處于反應(yīng)下游的T細(xì)胞、肥大細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和效應(yīng)細(xì)胞因子〔5〕。與此同時，作用于初始化過敏上游階段的樹突細(xì)胞的藥物卻研究進(jìn)展緩慢。本研究結(jié)果提示R848可能通過作用于包括樹突細(xì)胞的PBMC強(qiáng)化Th1方向的反應(yīng)，抑制Th2細(xì)胞的反應(yīng)。此外，也有研究表明R848刺激的樹突細(xì)胞可能通過抑制胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP)分泌和調(diào)節(jié)IL-10的表達(dá)來減輕或預(yù)防過敏性炎癥〔6〕。作為咪唑喹啉衍生物，R848可能通過介導(dǎo)Th2應(yīng)答的抑制從而限制過敏性炎癥的反應(yīng)強(qiáng)度。本結(jié)果表明，咪唑喹啉類化合物可能作為有效的免疫佐劑，用于變應(yīng)性鼻炎的治療。

1 朱學(xué)偉，朱冬冬，董 震.Toll樣受體9配體CpG寡核苷酸在特異性免疫治療中的作用〔J〕.中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志，2008；43(7)：546-8.

2 Grela F，Aumeunier A，Bardel E，etal.The TLR7 agonist R848 alleviates allergic inflammation by targeting invariant NKT cells to produce IFN-gamma〔J〕.J Immunol，2011；186(1)：284-90.

3 Boghdadi G，Hammad N，Amer A，etal.R848，a Toll-like receptors 7 and 8 agonist，a potential therapy for allergic rhinitis patients〔J〕.Inflamm Allergy Drug Targets，2014；13(2)：144-9.

4 Siebeneicher S，Reuter S，Krause M，etal.Epicutaneous immune modulation with Bet v 1 plus R848 suppresses allergicasthma in a murine model〔J〕.Allergy，2014；69(3)：328-37.

5 Witczak P，Pietrzak A，Wódz K，etal.Mast cells generate cysteinyl leukotrienes and interferon-beta as well as evince impaired IgE-dependent degranulation upon TLR7 engagement〔J〕.Indian J Exp Biol，2014；52(6)：589-96.

6 Torii Y，Ito T，Amakawa R，etal.Imidazoquinoline acts as immune adjuvant for functional alteration of thymic stromal lymphopoietin mediated allergic T cell response〔J〕.J Immunol，2008；181(8)：5340-9.

〔2016-06-14修回〕

(編輯 曲 莉)

高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專項(xiàng)科研基金資助課題(20120061120095)

李松濤(1973-)，男，副主任醫(yī)師，主要從事神經(jīng)內(nèi)科老年病研究。

朱學(xué)偉(1981-)，男，主治醫(yī)師，主要從事鼻炎、耳聾及耳鳴研究。

R6

A

1005-9202(2016)20-5108-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.20.080