外周P2X3受體在不同炎性痛模型中的作用比較

肖　婷，杜俊英，樂小琴，俞　婕，潘寧芳，房軍帆，方劍喬

(浙江中醫(yī)藥大學(xué)第三臨床醫(yī)學(xué)院，杭州　310053)

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外周P2X3受體在不同炎性痛模型中的作用比較

肖婷，杜俊英，樂小琴，俞婕，潘寧芳，房軍帆，方劍喬*

(浙江中醫(yī)藥大學(xué)第三臨床醫(yī)學(xué)院，杭州310053)

P2X3亞單位是嘌呤受體P2X家族成員之一，高度選擇性的表達(dá)于傷害感受器上，參與炎性痛病理過程。目前炎性痛的動物模型主要包括福爾馬林炎性痛模型、弗氏佐劑炎性痛模型、角叉菜膠炎性痛模型、蜜蜂毒炎性痛模型等。不同的炎性痛模型具有不同的病理特征，福爾馬林模型的主要特點(diǎn)是雙時相的自發(fā)痛，由于炎癥持續(xù)時間的不同，角叉菜膠模型一般用于亞急性的炎癥模型，而弗氏佐劑模型和蜜蜂毒模型，以及松節(jié)油模型則用于慢性炎性痛模型研究，P2X3受體在其中的表達(dá)和功能可能有所不同，本文就外周P2X3受體在不同炎性痛模型中的作用做一綜述。

P2X3受體；炎性痛；動物模型

疼痛作為人類第五大生命體征，也是臨床上常見癥狀之一，嚴(yán)重困擾人類健康，其中炎性痛是最常見的病理類型之一，其他慢性疼痛大多與這類疼痛有關(guān)。P2X3亞單位是嘌呤受體P2X家族成員之一，高度選擇性的表達(dá)于傷害感受器上，在傷害感受器中起重要作用，參與疼痛通路的傳導(dǎo)[1]。目前國內(nèi)外很多研究都表明外周的P2X3受體參與炎性痛的產(chǎn)生，但其具體機(jī)制尚未完全清楚[2,3]。由于疼痛機(jī)制復(fù)雜，利用動物模型研究疼痛機(jī)制迫切需要，目前有多種用于研究炎性疼痛的動物模型，并且每種模型的特性不同，不同的炎性痛模型中外周的P2X3受體的可能作用不同，目前尚未有研究對其進(jìn)行總結(jié)，故本文將圍繞不同炎性痛模型闡述P2X3受體的作用。

1　各類炎性痛模型的一般特點(diǎn)

1.1福爾馬林炎性痛模型

福爾馬林模型是一種無菌性炎癥模型，福爾馬林又稱甲醛，經(jīng)過一定倍數(shù)的稀釋后，注射于大鼠后足掌部皮下，產(chǎn)生一種明顯的自發(fā)性痛行為反應(yīng)，即注射足表現(xiàn)出縮腿、舔爪及顫抖等反應(yīng)，此模型具有良好的重復(fù)性，操作簡單，該模型所導(dǎo)致的疼痛行為反應(yīng)分為兩個時相，第一時相為急性疼痛期，持續(xù)約3～5 min； 之后是 10～15 min的間歇期；第二時相為強(qiáng)直期，持續(xù)約20～60 min[4]。國內(nèi)另有研究發(fā)現(xiàn)微量甲醛皮下注射，造成的炎性熱痛敏可持續(xù)7 d[5]。

1.2弗氏佐劑炎性痛模型

1.2.1多發(fā)性佐劑關(guān)節(jié)炎模型

本模型一般采用動物足底皮內(nèi)注射高濃度的弗氏佐劑，表現(xiàn)為多個關(guān)節(jié)的紅腫，多數(shù)動物在18～25 d炎癥最明顯，由于弗氏佐劑是一種免疫佐劑，故此模型誘導(dǎo)的是免疫反應(yīng)性炎癥，其缺點(diǎn)是病變范圍廣泛，除炎癥外，還伴有免疫系統(tǒng)疾病的產(chǎn)生，不利于單一的研究[6]。

1.2.2單發(fā)性佐劑關(guān)節(jié)周圍炎模型

此模型克服了多發(fā)性佐劑關(guān)節(jié)炎模型的缺點(diǎn)，將弗氏佐劑注入足底皮下而非足內(nèi)，造成局部組織周圍炎癥，注射1 d后即產(chǎn)生明顯的紅腫，運(yùn)動障礙和自我保護(hù)，以及機(jī)械和熱痛過敏，本模型痛敏持續(xù)時間一般是1～3周，隨著時間延長，也會出現(xiàn)多發(fā)性關(guān)節(jié)炎模型的缺點(diǎn)。有研究發(fā)現(xiàn)大鼠后爪完全弗氏佐劑(CFA)皮下注射3 h后注射側(cè)發(fā)生水腫和紅斑等炎癥反應(yīng)，4～5 h發(fā)生炎性痛覺過敏，1～4 d達(dá)到高峰，可持續(xù)長達(dá) 14 d[7]。

1.3角叉菜膠炎性痛模型

角叉菜膠是從一種紅藻類鹿角菜種提取的，具有過敏刺激的作用，最早開始一般與白陶土混合液注射，增強(qiáng)其致炎效果，之后則發(fā)展為直接單獨(dú)角叉菜膠皮下注射，一般在注射后2 h即出現(xiàn)紅腫，皮膚溫度顯著升高，24～48 h內(nèi)出現(xiàn)自發(fā)痛，PWT顯著降低[8]。亦有研究發(fā)現(xiàn)角叉菜膠皮下注入后，0.5 h開始腫脹，2.5～3 h腫脹達(dá)到高峰，8 h后腫脹開始消退。此模型致炎強(qiáng)烈，一般用于亞急性炎癥模型[9]。

1.4蜜蜂毒炎性痛模型

此模型是一種化學(xué)組織損傷性炎性痛模型，能夠呈現(xiàn)多種疼痛表現(xiàn)型，包括持續(xù)性自發(fā)痛相關(guān)行為，與福爾馬林試驗自發(fā)痛相似，原發(fā)性熱和機(jī)械痛敏以及鏡像熱痛敏，其優(yōu)點(diǎn)是能夠極大的避免個體間和實(shí)驗間的差異[10]。大鼠足底皮下注入蜜蜂毒溶液后，引起局部組織炎性紅腫，并且引起單相自發(fā)痛反應(yīng)和較長時間的熱和機(jī)械性痛覺過敏。即注射側(cè)足產(chǎn)生持續(xù)1～2 h單相性自發(fā)痛，誘發(fā)長達(dá)3～4 d熱痛和機(jī)械痛敏[11,12]。

1.5松節(jié)油炎性痛模型

動物局部皮下注射松節(jié)油，可出現(xiàn)紅腫、發(fā)熱，出現(xiàn)明顯的抽搐，并出現(xiàn)熱痛覺過敏，至注射后第5 d最明顯， 隨后逐漸增大，于第13 d左右后恢復(fù)到正常值，故此模型主要用于慢性炎性痛的研究[13,14]。

2　P2X3受體的發(fā)現(xiàn)、一般特性及分布特點(diǎn)

2.1P2X3受體的發(fā)現(xiàn)

1995年，Chen等[1]首次用大鼠背根神經(jīng)節(jié)的cDNA編碼，克隆出P2X3亞基，發(fā)現(xiàn)其高度選擇性表達(dá)于傷害性初級傳入神經(jīng)元上。之后在孤束核和三叉神經(jīng)脊束核中檢測到P2X3陽性細(xì)胞間接參與疼痛信號傳導(dǎo)[15]。

2.2P2X3受體的一般特性

P2X3受體通過形成同源( P2X3)或異源( P2X2/3)三聚體而成為功能性通道[16,17]。P2X3受體亞基由兩個跨膜區(qū)、胞內(nèi)的N末端和C末端及細(xì)胞外環(huán)組成，細(xì)胞外環(huán)包含大多數(shù)的氨基酸，其中包含的10個氨基酸殘基，以二硫鍵相互連接[18]。細(xì)胞外環(huán)含有通道調(diào)控位點(diǎn)，有相應(yīng)的激動劑、拮抗劑和調(diào)節(jié)劑的作用位點(diǎn)，其中的賴氨酸及精氨酸殘基為激動劑結(jié)合位點(diǎn)[19]。C端Src抑制酶(Csk)可直接磷酸化P2X3受體酪氨酸393殘基，并且抑制受體電流[20]?？缒^(qū)參與離子中心孔道的形成，并涉及離子通道開放控制[21]。

P2X3受體是配體門控非選擇性陽離子通道，激活時，能夠通透Na+、 K+、Ca2+，但對Ca2+通透性較高，P2X3受體激活時，通道開放，細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度升高[22,23]。同聚P2X3受體對pH不太敏感，在分離的哺乳動物感覺神經(jīng)元上，酸性pH值可以增加三磷酸腺苷(ATP)的興奮性作用，在炎癥局部的酸化環(huán)境中，感覺神經(jīng)節(jié)上的異聚體P2X2/3對傷害性刺激敏感性增加。低溫能夠顯著下降P2X3受體的反應(yīng)性，RhoA激酶依賴性P2X3受體膜轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞膜對溫度高敏感[24]。根據(jù)對P2X受體激動劑αβ-meATP的敏感性和電流脫敏的速率，P2X家族分為快速脫敏和αβ-meATP敏感受體(P2X1和P2X3)；緩慢或乏脫敏和αβ-meATP不敏感受體(P2X2、P2X4、P2X7)，而異聚體P2X2/3屬于乏脫敏但αβ-meATP敏感受體[25]。

2.3P2X3受體的分布特點(diǎn)

最初研究報道發(fā)現(xiàn)P2X3受體mRNA高度選擇性的表達(dá)于大鼠背根神經(jīng)節(jié)(DRG)和結(jié)狀神經(jīng)節(jié)(NG)的神經(jīng)元上，且主要表達(dá)于大鼠DRG的中小直徑神經(jīng)元中[1,26]，后繼研究表明也有P2X3受體選擇性表達(dá)于三叉神經(jīng)節(jié)(TG)上[27]。P2X3受體高度表達(dá)于對膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)敏感的神經(jīng)元細(xì)胞上，大鼠DRG中P2X3受體陽性細(xì)胞高度與凝集素B4(IB4)、抗氟離子酸性磷酸酶(FRAP)、瞬時受體電位香草酸亞型 1(TRPV1)共表達(dá)，少量與降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)共表達(dá)[28-30]。亦有研究表明在DRG和TG上，P2X3受體和P物質(zhì)(SP)共表達(dá)[31]。然而，有研究發(fā)現(xiàn)人類DRG中，P2X3受體陽性細(xì)胞不表達(dá)酪氨酸激酶(TrkA)[32]。

3　外周P2X3在不同類型炎性痛模型中的作用比較

3.1福爾馬林模型

足底注射活性藍(lán)(一種P2X3和P2X2/3受體活性變構(gòu)增強(qiáng)子)增強(qiáng)福爾馬林大鼠的痛反應(yīng)[33]。大鼠后肢足底注射福爾馬林后，免疫熒光檢測L5-6DRG中P2X3受體的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)其主要表達(dá)于中小神經(jīng)元的細(xì)胞質(zhì)和膜上，DRG中P2X3轉(zhuǎn)錄的表達(dá)在注射福爾馬林后30 min和1 h時無改變，而在12 h后顯著增加，注射后24 h發(fā)現(xiàn)P2X3受體功能上調(diào)。這些表明福爾馬林注射可以引起DRG中P2X3受體的早期上調(diào)[34]。亦有研究發(fā)現(xiàn)皮下注射福爾馬林產(chǎn)生60 min自發(fā)痛行為反應(yīng)(第一時相0～6 min，第二時相36～60 min)，并且一種選擇性P2X3受體拮抗劑或反義寡核苷酸都可以減輕福爾馬林產(chǎn)生的兩個時相自發(fā)痛，運(yùn)用反義寡核苷酸抗P2X3受體減少隱神經(jīng)中P2X3受體表達(dá)，并且研究表明了通過調(diào)節(jié)外周炎癥組織中瞬間受體電位離子通道亞型A1(TRPA1)受體，5-羥色胺3(5-HT3)受體，5-羥色胺1A(5-HT1A)受體調(diào)節(jié)P2X3受體的活化和ATP的釋放導(dǎo)致了炎性痛產(chǎn)生[35]。

3.2完全弗氏佐劑模型

外周炎癥損傷會引起P2X3受體表達(dá)的變化，大鼠足底注射CFA建立的外周慢性炎性痛模型中，發(fā)現(xiàn)L4-6DRG中P2X3受體表達(dá)增加，說明炎癥可以上調(diào)DRG中P2X3受體的表達(dá)[36]，小鼠下唇CFA炎性痛模型可以引起須墊皮膚機(jī)械痛敏，并且支配須墊皮膚和下唇的P2X3受體TG神經(jīng)元數(shù)量增加，研究表明TG中P2X3受體的過度表達(dá)是小鼠CFA炎性須墊皮膚異位機(jī)械痛敏的基礎(chǔ)[37]。大鼠前列腺CFA炎性模型中，檢測模后第3 d和10 d的L6-S1 DRG神經(jīng)元，發(fā)現(xiàn)P2X3受體表達(dá)和功能上調(diào)，促進(jìn)了神經(jīng)元敏化，從而導(dǎo)致了慢性前列腺炎性痛[38]。大鼠顳下頜關(guān)節(jié)CFA單發(fā)性關(guān)節(jié)炎模型中，出現(xiàn)持續(xù)的口面部的深組織痛敏(持續(xù)至模后15 d)，并且模后第15 d時TG中的小型神經(jīng)元細(xì)胞中P2X3陽性細(xì)胞數(shù)增加，而在中和大型神經(jīng)元細(xì)胞中無改變，P2X3受體參與大鼠顳下頜關(guān)節(jié)炎癥深組織痛的產(chǎn)生[39]。而Zhu發(fā)現(xiàn)在CFA炎性痛模型大鼠中，P2X3mRNA的表達(dá)頻率未發(fā)現(xiàn)改變，其可能原因是對CFA炎癥反應(yīng)的P2X3受體調(diào)節(jié)發(fā)生于蛋白表達(dá)或?qū)ε潴w的通道敏感性層面[40]。

3.3松節(jié)油炎性痛模型

大鼠足底注射松節(jié)油建立的慢性炎性痛模型中發(fā)現(xiàn)熱痛閾下降，直至14 d后恢復(fù)正常，DRG神經(jīng)元中，中小型P2X3受體陽性細(xì)胞數(shù)增加，表明P2X3受體在中小型DRG神經(jīng)元中的改變可能參與了炎性痛過敏的產(chǎn)生和維持[41]。大鼠面部皮下注射松節(jié)油建立面部慢性炎性痛模型，發(fā)現(xiàn)TG中P2X3受體陽性神經(jīng)元增多，其胞體上P2X3受體蛋白表達(dá)上調(diào)[42]。

3.4角叉菜膠炎性痛模型

有研究發(fā)現(xiàn)鞘內(nèi)注射或足底注射A-317491不能減輕角叉菜膠炎性痛模型大鼠的熱痛覺過敏，而能夠緩解角叉菜膠致炎的機(jī)械性痛敏，說明可能是P2X3受體介導(dǎo)角叉菜膠炎性熱痛敏和機(jī)械痛敏機(jī)制不同[43,44]。亦有研究發(fā)現(xiàn)大鼠顳下頜關(guān)節(jié)角叉菜膠炎性痛模型中，TNP-ATP(一種 P2X1, P2X3 和 P2X2/3 受體拮抗劑)顯著減輕炎性痛敏，而P2X1受體不參與此模型痛敏，說明可能是P2X3和P2X2/3受體參與了大鼠顳下頜關(guān)節(jié)角叉菜膠模型的炎性痛敏[45]。國內(nèi)另有研究發(fā)現(xiàn)大鼠足底皮下注射角叉菜膠后，患足出現(xiàn)熱痛敏和機(jī)械性痛敏，于 12 h達(dá)最明顯，72 h后恢復(fù)至正常。L4-6DRG中P2X3受體陽性神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)于注射后12 h開始明顯增加，24 h達(dá)到高峰，然后逐漸下降，于第7 d恢復(fù)正常水平[46]，大鼠的痛閾在模后3 d恢復(fù)正常，而P2X3受體的水平至模后7 d恢復(fù)正常，其原因可能是P2X3受體去磷酸化失活，即使表達(dá)量高于正常，痛閾仍為正常水平，具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究[46]。

3.5其他

有研究表明在人類腸道炎癥疾病中發(fā)現(xiàn)腸道中P2X3受體陽性細(xì)胞增多，說明P2X3受體可能參與腸道炎癥和疼痛發(fā)病機(jī)制[47]。亦有研究發(fā)現(xiàn)慢性食管炎增加P2X3mRNA表達(dá)并且伴隨TRPV1、NGF、GDNF的上調(diào)，該食管粘膜基因改變可能調(diào)節(jié)人類食管炎的敏化[48]。脂多糖引起的大鼠牙髓炎模型中，發(fā)現(xiàn)V1-V2 TG中P2X3受體表達(dá)增加，并且主要表達(dá)于中小型神經(jīng)元中，上調(diào)的P2X3受體可能引起神經(jīng)元敏化，介導(dǎo)慢性炎性疼痛[49]。三硝基苯磺酸(TNBS)性慢性胰腺炎模型大鼠中，TNBS的注射顯著上調(diào)胰腺DRG中P2X3受體的表達(dá)和功能，并且研究表明通過初級感覺神經(jīng)元中腎上腺素信號介導(dǎo)P2X3受體的敏化，從而導(dǎo)致了胰腺炎的痛敏[50]。膠原蛋白抗體關(guān)節(jié)炎模型(CAIA)大鼠中，檢測大鼠模后15 d和47 d的DRG發(fā)現(xiàn)P2X3受體表達(dá)顯著增高[51]，大鼠模后15 d是炎癥的高峰期，而模后47 d則是炎癥消退，疼痛持續(xù)期。所以可能P2X3受體不僅參與炎性痛，而且還有后期的神經(jīng)病理性痛，此關(guān)節(jié)炎模型是一種神經(jīng)化學(xué)損傷模型。

4　結(jié)語

綜上所述，以上各種炎性痛模型特點(diǎn)不同，一般福爾馬林模型的主要特點(diǎn)是雙時相的自發(fā)痛，分為急性疼痛期和強(qiáng)直期。角叉菜膠模型一般用于亞急性的炎癥模型，而弗氏佐劑模型和蜜蜂毒模型，以及松節(jié)油模型則用于慢性炎性痛的研究。配體門控非選擇性通道P2X3受體在不同炎性痛中的作用不同，福爾馬林炎性痛模型中，主要是早期外周組織中小神經(jīng)元的細(xì)胞質(zhì)和膜上P2X3受體表達(dá)和功能上調(diào)介導(dǎo)疼痛的產(chǎn)生。不同組織CFA慢性炎性痛模型中，主要表現(xiàn)晚期外周P2X3受體表達(dá)和功能上調(diào)，但P2X3mRNA層面卻無改變。相比CFA模型，角叉菜膠模型炎癥持續(xù)時間較短，并且外周P2X3受體主要參與機(jī)械痛敏，而不參與熱痛敏，主要表現(xiàn)為較早期P2X3受體表達(dá)的上調(diào)，但其具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。松節(jié)油模型中，主要是晚期外周DRG中小神經(jīng)元P2X3表達(dá)增加。而目前尚未有研究涉及蜜蜂毒模型P2X3的改變，需要進(jìn)一步的探討。

[1]Chen CC, Akopian AN, Sivilotti L,etal. A P2X purinoceptor expressed by a subset of sensory neurons[J]. Nature, 1995, 337(6548): 428-431.

[2]Hemmings-Mieszczak M, Dorn G, Natt FJ,etal. Independent combinatorial effect of antisenseoligonucleotides and RNAi-mediated specific inhibition of the recombinantRat P2X3 receptor[J]. Nucleic Acids Res, 2003, 31(8): 2117-2126.

[3]Honore P, Kage K, Mikusa J,etal.Analgesic profile of intrathecal P2X(3) antisenseoligonucleotide treatment in chronic inflammatory and neuropathic painstates in rats[J]. Pain, 2002, 99(1-2): 11-19.[4]黃浩，丁明敏，陳雅娟.兩種福爾馬林試劑對大鼠炎性痛誘導(dǎo)的行為學(xué)比較[J]. 福建師范大學(xué)學(xué)報, 2008, 24(5): 75-78.

[5]代小奇，劉金鋒，都興光，等.小鼠微量甲醛炎性痛模型的建立及其脊髓背角c_fos的表達(dá)[J]. 哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報, 2011, 45(5): 421-424.

[6]汪偉，王文，武勝昔，等. 炎癥性痛和神經(jīng)病理性痛模型[J]. 神經(jīng)解剖學(xué)雜志, 2007, 23(1): 93-98.

[7]馮繼英. 脊髓 HMGB1 在大鼠炎性痛中的作用[D]. 蘇州大學(xué)學(xué)位論文, 2014.

[8]Yang LC, Marsala M, Yaksh TL. Characterization of time course of spinal amino acids, citrulline and PGE2 release after carrageenan /kaolin- induced knee joint inflammation: a chronic microdialysis study[J]. Pain, 1996, 67(2-3): 345 -354.

[9]肖百全，朱少璇，楊威，等. 角叉菜膠致大鼠足腫脹模型探討及其機(jī)制研究[J]. 中國實(shí)用醫(yī)藥, 2008, 3(23): 63-64.

[10]Yang F, Yang Y, Wang Y,etal. Selective class I histone deacetylase inhibitors suppress persistent spontaneous nociception and thermal hypersensitivity in a rat model of bee venom-induced inflammatory pain[J]. Sheng Li Xue Bao., 2015, 67(5): 447-454.

[11]Chen HS, Lei J, He X,etal. Pivotal involvement of neurogenic mechanism in subcutaneous bee venom induced inflammation and allodynia in nanesthetized conscious rats[J]. Experimental Neurology, 2006, 200(2): 386-391.

[12]Chen HS, Lei J, He X,etal. Peripheral involvement of PKA and PKC in subcutaneous bee venom-induced persistent nociception,mechanical yperalgesia,and inflammation in rats[J]. Pain, 2008, 135(1-2): 31-36.

[13]Neumarm S, Doubell TP, Leslie T,etal. Inflammatory pain hypersensitivity mediated by phenotypic primary sensory neurons. Nature, 1996, 384(6607): 360-364.

[14]劉羊. 大鼠面部慢性炎癥痛導(dǎo)致三叉神經(jīng)節(jié)表達(dá)P2X3神經(jīng)元表型的轉(zhuǎn)變[D]. 華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文, 2006.

[15]Llewellyn-Smith IJ, Burnstock G. Ultrastructural localization of P2X3 receptors in rat sensory neurons[J]. Neuroreport, 1998, 9(11): 2545-2550.

[16]Virginio C, North RA, Surprenant A. Calcium permeability and block at homomeric and heteromeric P2X2 and P2X3 receptors, and P2X receptors in rat nodose neurones[J]. Physiol, 1998, 510(1): 27-35.

[17]K?les L,Gerevich Z,Oliveira JF,etal. Interaction of P2 purinergic receptors with cellular macromolecules[J].Naunyn-Schmiedeberg’s Arch Pharmacol, 2008, 377(1): 1-33.

[18]North RA. Molecular physiology of P2X receptors[J]. Physiol Rev, 2002, 82(4): 1013-1067.

[19]Fischer W, Zadori Z, Kullnick Y,etal. Conserved lysin and arginin residues in the extracellular loop of P2X( 3) receptors are involved in agonist binding[J]. Eur J Pharmacol, 2007, 576(1-3): 7-17.

[20]D，Arco M,Giniatullin R,Leone V,etal. The c-terminal src inhibitory kinase (Csk)-mediated tyrosine phosphorylation is a novel molecular mechanism to limit P2X3 receptor function in mouse sensory neurons[J]. J Biol Chem, 2009, 284(32): 21393-21401.

[21]Burnstock G. Introduction: P2 receptors[J]. Curr Top Med Chem, 2004, 4(8): 793-803.

[22]Bean BP. Pharmacology and electrophysiology of ATP-activated ion channels[J]. Trends Pharmacol Sci, 1992, 13(3): 87-90.

[23]Khakh BS, North RA. P2X receptors as cell-surface ATP sensors in health and disease[J]. Nature, 2006,442(7102): 527-532.

[24]Pryazhnikov E, Fayuk D, Niittykoski M,etal. Unusually strong temperature dependence of P2X3 receptor traffic to the plasma membrane[J]. Front Cell Neurosci, 2011, 5: 27.

[25]Franklin C,Braam U,Eisele T,etal. Lack of evidence for direct phosphorylation of recombinantly expressed P2X2 and P2X3 receptors by protein kinase C[J]. Purinergic Signalling, 2007, 3(4): 377-388.

[26]Wang L, Feng D, Yan H,etal. Comparative analysis of P2X1, P2X2, P2X3, and P2X4 receptor subunits in rat nodose ganglion neurons[J]. PLoS One, 2014, 9(5): e96699.

[27]Burstock G. P2X receptors in sensory neurons[J]. BR J Anaesth, 2000, 84(4): 476-488.

[28]Bradbury EJ, Burnstock G, McMahon SB. The expression of P2X3 purinoceptors in sensory neurons:effects of axotony and glial derived neurotrophic factor[J]. Mol Cell Neurosci,1998, 12(4-5): 256-268.

[29]Vulchannova L, Riedl MS, Shuster SJ,etal. Immunohistochemical study of the P2X2 and P2X3 receptor subunits in rat and monkey sensory neurons and their centrai terminals[J]. Neuropharmacology, 1997,36(9): 1229-1242.[30]Guo A, Vulchanova L, Wang J,etal. Immunocytochemical localization of the vanilloid receptor 1(VR1): Relationship to neuropeptides, the P2X3 purinoceptor and IB4 binding sites[J]. Eur J Neurosci, 1999, 11(3): 946-958.

[31]趙士潔，殷光甫，谷遠(yuǎn)征，等. 大鼠初級感覺神經(jīng)元 P2X3 受體的表達(dá)及其與 SP 的關(guān)系[J]. 中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志, 2006, 15(1): 91- 94.

[32]Yiangou Y,Facer P, Birch R,etal. P2X3 receptor in injured human sensory neurons[J]. NeuroReport, 2000, 11(5): 993-996.

[33]Jarvis MF, Wismer CT, Schweitzer E,etal. Modulation of BzATP and formalin induced nociception[J]. British Journal of Pharmacology, 2001, 132(1): 259 -269.

[34]Pan AH, Lu DH, Luo XG. Formalin-induced increase in P2X(3) receptor expression in dorsal root ganglia: implications for nociception[J]. Clin Exp Pharmacol Physiol., 2009, 36(8): 6-11.

[35]Krimon S, Araldi D, do Prado FC,etal. P2X3 receptors induced inflammatory nociception modulated by TRPA1,5-HT3 and 5-HT1A receptors[J]. Pharmacology, Biochemistry and Behavior, 2013, 112: 49-55.

[36]Xu GY, Huang LY. Peripheral inflammation sensitizes P2X receptor-mediated responses in rat dorsal root ganglion neurons[J]. J.Neurosci, 2002, 22(1): 93-102.

[37]Yasuda M, Shinoda M, Kiyomoto M,etal. P2X3 receptor mediates ectopic mechanical allodynia with inflamed lower lip in mice[J]. Neurosci Lett, 2012, 528(1): 67-72.

[38]Zhang H, Liu L, Lu G,etal. Chemical irritation of the prostate sensitizes P(2)X(3) receptor-mediated responses in rat dorsal root ganglion neurons[J]. Neurourol Urodyn, 2011, 30(4): 612-618.

[39]Shinoda M, Ozaki N, Asai H,etal. Changes in P2X3 receptor expression in the trigeminal ganglion following monoarthritis of the temporomandibular joint in rats[J]. Pain 2005, 116(1-2): 42-51.

[40]Zhu H, Yu Y, Zheng L,etal. Chronic inflammatory pain upregulates expression of P2Y receptor in small-diameter sensory neurons[J]. Metab Brain Dis, 2015,30(6):1349-1358.

[41]楊友華，楊榮，黃丹，等. 慢性炎癥痛引起 DRG感覺神經(jīng)元P2X3 受體表達(dá)的改變[J]. 中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志, 2009, 18(5): 515-520.

[42]林琳. 面部慢性炎癥疼痛模型大鼠三叉神經(jīng)節(jié) CB1 和 P2X3受體表達(dá)的改變[D]. 華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文, 2011.

[43]McGaraughty S, Wismer CT, Zhu CZ,etal. Effects of A-317491, a novel and selective P2X3/P2X2/3 receptor antagonist, on neuropathic, inflammatory and chemogenic nociception following intrathecal and intraplantar administration[J]. Br J Pharmacol, 2003, 140(8): 1381-1388.

[44]Oliveira MC, Pelegrini-da-Silva A, Tambeli CH. Peripheral mechanisms underlying the essential role of P2X3,2/3 receptors in the development of inflammatory hyperalgesia[J]. Pain 2009, 141(1-2): 127-134.

[45]Teixeira JM, Oliveira MC, Jr Nociti FH Jr,etal. Involvement of temporomandibular joint P2X3 and P2X2/3 receptors in carrageenan-induced inflammatory hyperalgesia in rats[J]. Eur J Pharmacol., 2010, 645(1-3): 79-85.

[46]杜璐，張金海，阮懷珍. 炎性痛大鼠脊髓和背根節(jié)P2X_3受體的表達(dá)變化[J]. 第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報, 2010, 32(2): 99-102.

[47]Yiangou Y,Facer P,Baecker PA,etal. ATP-gated ion channel P2X3 is increased in human inflammatory bowel disease[J]. Neurogastroenterol, 2001, 13(4): 365-369.

[48]Shieh KR, Yang SC, Tseng HL,etal. Evidence for up-regulation of purinergic receptor genes associating with TRPV1 receptors and neurotrophic factors in the inflamed human esophagus[J]. Curr Mol Med, 2014, 14(9): 1205-1214.

[49]Chen Y,Zhang L,Yang J,etal. LPS-induced dental pulp inflammation increases expression of ionotropic purinergic receptors in rat trigeminal ganglion[J]. Neuroreport, 2014, 25(13): 991-997.[50]Wang S, Zhu HY, Jin Y,etal. Adrenergic signaling mediates mechanical hyperalgesia through activation of P2X3 receptors in primary sensory neurons of rats with chronic pancreatitis[J]. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol, 2015, 308(8): G710- G719.

[51]Su J, Gao T, Shi T,etal. Phenotypic changes in dorsal root ganglion and spinal cord in the collagen antibody-induced arthritis mouse model[J]. J Comp Neurol, 2015, 523(10): 1505-1528.

Comparison of the effects of periphery P2X3 receptors in different inflammatory pain models

XIAO Ting，DU Jun-ying，LE Xiao-qin，YU Jie，PAN Ning-fang，F(xiàn)ANG Jun-fan，F(xiàn)ANG Jian-qiao*

( The Third Clinical Medical College，Zhejiang Chinese Medical University，Hangzhou 310053，China)

P2X3 subunit was one of the P2X receptor family members, which highly selective expressd in the nociceptors, and involved in the pathological process of inflammatory pain. Currently, animal inflammatory pain models included formalin inflammatory pain model, Freund’s adjuvant inflammatory pain model , the carrageenan inflammatory pain model, bee venom inflammatory pain model,et al.Different inflammatory pain model had different pathological features, the main features of the formalin pain model is double phase of spontaneous pain, due to different duration time of inflammation, carrageenan inflammatory pain model is commonly used in sub acute inflammation model, Freund’s adjuvant inflammatory pain model , bee venom inflammatory pain model, and turpentine inflammatory pain model are for chronic inflammatory pain model research, the expression and function of P2X3 may be different.This paper focused on the effects of P2X3 receptors in different inflammatory pain models.

P2X3 receptors;Inflammatory pain;Animal models

國家自然科學(xué)基金項目(81473772)；浙江省醫(yī)藥衛(wèi)生科技項目省部共建項目(WKJ-ZJ-1419)；浙江省自然科學(xué)基金項目(LQ15H270003)；浙江省醫(yī)藥衛(wèi)生科技項目一般項目(2015KYB281)。

肖婷(1991-)，女，碩士生研究生，研究方向：針灸鎮(zhèn)痛與免疫調(diào)節(jié)的相關(guān)性研究。E-mail:741409838@qq.com。

方劍喬(1961-)，男，教授，研究方向：針灸鎮(zhèn)痛與免疫調(diào)節(jié)的相關(guān)性研究。E-mail：fangjianqiao7532@163.com。

研究進(jìn)展

R-332

A

1671-7856(2016)07-0074-06

10.3969.j.issn.1671-7856.2016.07.013

2015-12-28