水產(chǎn)養(yǎng)殖細(xì)菌性病害檢測方法

唐黎標(biāo)

水產(chǎn)養(yǎng)殖細(xì)菌性病害檢測方法

唐黎標(biāo)

水產(chǎn)養(yǎng)殖在陸地資源減少和天然漁業(yè)的衰退中得到重大發(fā)展。通過增加養(yǎng)殖面積來提高產(chǎn)量的方式受到了有限水土資源的制約，因此需要進(jìn)行規(guī)?；?、集約化和高密度型的水產(chǎn)養(yǎng)殖。而在實(shí)際的水產(chǎn)養(yǎng)殖過程中，出現(xiàn)了以細(xì)菌性病害為主的大量病害問題，需要進(jìn)行及時(shí)有效的檢測，保證經(jīng)濟(jì)利益。

一、主要的水產(chǎn)養(yǎng)殖細(xì)菌性病害

1.弧菌病害

弧菌病害是由鰻弧菌、副溶血弧菌、創(chuàng)傷弧菌、哈維氏弧菌以及溶藻弧菌和殺鮭弧菌等病菌引起一種疾病，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中較為常見?；【〉闹饕≡泅牷【瑢?jīng)濟(jì)價(jià)值較高的養(yǎng)殖品危害較大，主要引起鰻魚的鰻弧菌病、香魚的弧菌病、牙鲆的牙鲆鰻弧菌病和暗紋東方豚暗紋東方豚腸炎病等。而殺鮭弧菌主要存在于冷水弧菌病中，在加拿大和北歐國家出現(xiàn)較頻繁，主要影響大馬哈魚和鱈魚。

2.愛德華氏菌病

愛德華氏菌病主要有兩種致病菌，即遲緩愛德華氏菌和鮰愛德華氏菌。大菱鲆、鰻鱺、黃顙魚、漠斑牙鲆以及黑鱸、真鯛是遲緩愛德華氏菌的主要感染對象。而鮰愛德華氏菌主要感染斑點(diǎn)叉尾鮰。

3.假單細(xì)胞菌病

假單細(xì)胞菌病主要致病菌包括熒光假單包菌、鰻敗血假單胞菌、水刑點(diǎn)狀假單胞菌和惡臭假單包菌。其中熒光假單胞菌的感染對象較多，主要有斑點(diǎn)叉尾鮰、泥鰍、羅非魚、鯉魚、草魚以及青魚、團(tuán)頭魴等。另外羅非魚、鯉魚、草魚、金魚和鰱魚是水刑點(diǎn)狀假單胞菌的主要感染種類。

4.細(xì)菌性腎病

主要由鮭魚桿菌造成的細(xì)菌性腎病對水產(chǎn)養(yǎng)殖的魚種危害性較大，其感染后的致死率較高。細(xì)菌性腎病主要影響太平洋鮭魚，其感染具有遺傳性，通過有性垂直傳播給下一代。

5.屈撓桿菌病

屈撓桿菌病也是細(xì)菌性病害中一種，其致病菌主要有柱狀屈撓桿菌、海生屈撓桿菌和嗜冷屈撓桿菌。柱狀屈撓桿菌的主要感染對象為暗紋東方豚、鰻魚和泥鰍，產(chǎn)生爛鰓病。真鯛和黑鯛是海生屈撓桿菌的主要感染者，導(dǎo)致其產(chǎn)生細(xì)菌病。而嗜冷屈撓桿菌主要影響虹鱒和大鱗大馬哈，產(chǎn)生尾部潰瘍病。

6.鏈球菌病

海豚鏈球菌、無乳鏈球菌以及副乳房鏈球菌是鏈球菌病的主要致病菌。羅非魚、香魚和鯉魚是海豚鏈球菌的主要感染對象，而無乳鏈球菌主要影響大菱鲆、香魚和大龍六線魚，引發(fā)鏈球菌病。副乳房鏈球菌主要感染羅非魚，引起羅非魚海豚鏈球菌病。

二、水產(chǎn)養(yǎng)殖細(xì)菌性病害的主要檢測方法

1.利用微生物生理生化檢測技術(shù)的方法

運(yùn)用生理生化檢測試劑和進(jìn)行微生物的鑒定從而實(shí)現(xiàn)快速的細(xì)菌病害診斷，是1970年法國生物梅里埃公司所研發(fā)出來的一項(xiàng)新的檢測方法。在運(yùn)用生理生化檢測試劑進(jìn)行細(xì)菌的同時(shí)還可以利用簡便的顯色培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行特殊的細(xì)菌性病源檢測。將細(xì)菌特異性酶的顯色底物加入培養(yǎng)基中，通過出現(xiàn)不同顏色的菌落進(jìn)行分離鑒定。例如將副溶血弧菌置于選擇性顯色弧菌培養(yǎng)基上，其長出紫色的菌落與其他弧菌藍(lán)綠色菌落相區(qū)別，實(shí)現(xiàn)較好的區(qū)分。

2.利用聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)的檢測方法

根據(jù)生物信息學(xué)等方法進(jìn)行特定病原菌特異性基因序列設(shè)計(jì)特異性引物的尋找，使其擴(kuò)增后產(chǎn)生特異性片段，實(shí)現(xiàn)病源菌的監(jiān)測就是聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)的主要方法。為了提高檢測方法的靈敏性可以對不同的細(xì)菌性病害針對其特異性基因序列設(shè)計(jì)引物。

3.酶聯(lián)免疫吸附法

最早出現(xiàn)于1971年的酶聯(lián)免疫吸附法是以抗原抗體特異性反應(yīng)為基礎(chǔ)的方法，競爭法測抗原、間接法測抗體和雙抗體夾心法是其主要手段。抗體的特異性是決定特異性的最關(guān)鍵因素。利用酶聯(lián)免疫吸附法對魚癤病的高靈敏性診斷，將其推廣到副溶血弧菌的檢測中。

4.芯片技術(shù)檢測方法

隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖細(xì)菌性病害檢測大規(guī)模、高通量的要求，生物芯片技術(shù)得到運(yùn)用。其中基因芯片技術(shù)與蛋白芯片技術(shù)是病原菌檢測的主要技術(shù)。利用芯片技術(shù)對多種靶基因進(jìn)行鑒定，具有高通量、平行化的特點(diǎn)，提高鑒定的準(zhǔn)確性，構(gòu)建了菌種鑒定的技術(shù)平臺。利用蛋白芯片檢測，在載體上有序的排列固定各蛋白，將特異性標(biāo)記的抗體或抗原蛋白與微陣列作用，通過掃描對蛋白間是否存在相互作用進(jìn)行檢測。

三、水產(chǎn)養(yǎng)殖細(xì)菌性病害的預(yù)防措施

1.對養(yǎng)殖魚塘進(jìn)行及時(shí)的清整與消毒

在魚、蝦、蟹等的養(yǎng)殖過程中，會產(chǎn)生大量的食物殘?jiān)团判刮铩Ｔ陂L時(shí)間內(nèi)這些廢物殘?jiān)鼤纸飧癄€所形成淤泥，會成為細(xì)菌生長的重要場所。清除淤泥可以清理掉細(xì)菌生長的場所以及細(xì)菌生長所需的營養(yǎng)，另外在清除淤泥的同時(shí)也帶走了其中所含的大量寄生蟲卵及孢子，減少侵襲性病害的發(fā)生。還要對池底進(jìn)行有效的消毒，保證池底每年15d左右的曝曬和冰凍，通過這種方法殺死池底的細(xì)菌，同時(shí)改善池底的土質(zhì)。同時(shí)還可以運(yùn)用生石灰進(jìn)行消毒，發(fā)揮其特性，在殺死細(xì)菌的同時(shí)改善土質(zhì)。

2.選擇健壯的苗種進(jìn)行養(yǎng)殖

健壯的苗種是有效預(yù)防細(xì)菌性病害發(fā)生的重要前提。在養(yǎng)殖苗種的選擇上要選取體質(zhì)健壯、規(guī)格均勻且沒有畸形的苗種。要檢查體表、鰭條以及附枝有無炎癥、爛鰓和白肝等病癥，另外還要檢查苗種是否攜帶病毒，尤其是羅氏藻蝦和對蝦。通過對苗種的嚴(yán)格檢測，有效預(yù)防細(xì)菌性病害的發(fā)生。

3.做好餌料的選購

優(yōu)質(zhì)的餌料是養(yǎng)殖品健康成長的關(guān)鍵。在餌料的選取上要保證餌料顆粒均勻、在水中的穩(wěn)定性較好、營養(yǎng)全面等。同時(shí)將誘食劑和維生素C添加到餌料之中，使養(yǎng)殖品更好的進(jìn)行攝食、消化和吸收，在快速生長的同時(shí)提高抗病的能力。強(qiáng)求餌料的多樣化，滿足養(yǎng)殖品生長所需的多種營養(yǎng)元素，減少營養(yǎng)性疾病的發(fā)生。

4.采用生物調(diào)控水質(zhì)

良好的生態(tài)環(huán)境對于提高魚、蝦等養(yǎng)殖品的抗病能力具有重要作用。利用種植水草、放養(yǎng)螺螄以及添加有益菌、培養(yǎng)浮游生物等方法實(shí)現(xiàn)生物調(diào)控水質(zhì)。利用浮游植物的光合作用，增加水體的含氧量，抑制病菌的同時(shí)為養(yǎng)殖品的生長提供良好的生態(tài)環(huán)境。在水體中通過有益活性微生物制劑進(jìn)行光合細(xì)菌、復(fù)合型活菌生物凈水劑的施放，通過其在水體中迅速繁殖的優(yōu)勢菌群，產(chǎn)生抗生素物質(zhì)。利用生物方法進(jìn)行水質(zhì)的調(diào)控，可以減少池水的排換量，減少排換過程中外界水源帶來的污染，對養(yǎng)殖品的生長提供一個(gè)相對穩(wěn)定的環(huán)境。

四、結(jié)語

隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的不斷發(fā)展，致病菌的準(zhǔn)確檢測對水產(chǎn)動(dòng)物病害的確診和有效治療都極其重要。根據(jù)生產(chǎn)實(shí)際情況選擇有效的檢測方法，并做好水產(chǎn)養(yǎng)殖細(xì)菌性病害的有效預(yù)防，才是保證水產(chǎn)品的健康生長的根本所在。本文主要闡述了當(dāng)前水產(chǎn)養(yǎng)殖細(xì)菌性病害的檢測方法，以及有效的預(yù)防措施，希望推動(dòng)水產(chǎn)養(yǎng)殖的發(fā)展，提高水產(chǎn)養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益。

（作者單位：杭州市農(nóng)業(yè)局）