中藥抗瘢痕增生作用的實驗研究進展

王　暢　高永翔

成都中醫(yī)藥大學，四川　成都　610075

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中藥抗瘢痕增生作用的實驗研究進展

王暢高永翔

成都中醫(yī)藥大學，四川成都610075

【摘要】動物及離體實驗均發(fā)現(xiàn)多種單味中藥、中藥有效提取成分及中藥復方制劑具有不同程度的抗瘢痕增生作用，有部分實驗還從信號傳導通路等層面對其抗瘢痕增生的機理進行了進一步說明，本文對近年來中藥抗瘢痕增生作用的實驗研究進行綜述。

【關鍵詞】抗瘢痕增生；中藥；實驗研究；研究進展

病理性瘢痕(Pathological scar，PS)主要包括增生性瘢痕(hypertrophic scar，HS)和瘢痕疙瘩(keloid，K)，是創(chuàng)傷后最常見的并發(fā)癥[1]。中醫(yī)藥在防治瘢痕方面歷史久遠，多認為與氣血壅滯、經(jīng)絡瘀阻、痰濕互結(jié)或三者相輔有關，治療上以活血化瘀、軟堅散結(jié)、祛痰除濕為主。近年來，除有大量中藥抗瘢痕增生的臨床研究文獻[2-3]以外，亦有較多學者開始注重對中藥抗瘢痕增生的實驗研究。本文對近年來中藥抗瘢痕增生作用的實驗研究進行綜述如下。

1單味中藥

紅花具有活血通經(jīng)、散瘀止痛的功效。劉燕等[4-5]對兔耳瘢痕內(nèi)注射不同濃度的紅花注射液6周后，結(jié)果發(fā)現(xiàn)紅花能使瘢痕軟化、變薄，并能使Ⅰ型膠原蛋白表達下調(diào)，且與濃度呈正相關，從而達到治療增生性瘢痕的目的。黃芪具有補氣固表、利水退腫、托毒排膿、生肌等功效。張艷等[6-7]對兔耳增生性瘢痕內(nèi)局部注射不同濃度的黃芪注射液，發(fā)現(xiàn)瘢痕厚度、硬度與黃芪濃度呈負相關性，且能呈劑量效應地減少TGF-βmRNA的合成及其蛋白的表達 ，從而推斷黃芪注射液可能通過減少TGF-βmRNA的合成來抑制增生性瘢痕。丹參具有祛瘀止痛、活血通經(jīng)等作用，其在創(chuàng)傷修復過程中有一定作用。劉流等[8]對兔耳增生性瘢痕基底部注射不同濃度的丹參注射液28d后，組織形態(tài)學顯示成纖維細胞數(shù)量較少，膠原染色較淡且較為疏松，可見明顯的凋亡小體。劉德明等[9]的動物實驗亦有相似證明。劉流等[10]進一步用將含不同濃度的丹參注射液DMEM培養(yǎng)液加入人增生性瘢痕成纖維細胞(Human hypertrophic scar fibroblasts，HSFB)中，結(jié)果發(fā)現(xiàn)丹參可明顯抑制細胞的生長及增殖，且與濃度呈正相關效應。冀黎平等[11]用丹參涂膜劑(丹參提取液制成涂膜劑)在裸鼠背部瘢痕用藥1周、4周和8周后，微循環(huán)觀察及計數(shù)結(jié)果發(fā)現(xiàn)丹參涂膜劑可能對瘢痕微循環(huán)具有雙向調(diào)節(jié)作用。雷曉紅等[12]亦通過離體實驗證明丹參可抑制HSFB增殖，并呈劑量依賴性，2.5g/L以上劑量組還可顯著降低細胞的活性，同時細胞凋亡數(shù)量及培養(yǎng)液上清LDH活性也顯著增加，從而得出丹參具有抑制HSFB的增殖及活性的能力。王益民[13]的實驗研究則證明丹參具有抑制瘢痕的增殖及TGF-β1的分泌，減少膠原的合成。上述實驗從不同角度證明丹參通過抑制HSFB增殖、促進凋亡、抑制TGF-β1的分泌及膠原合成從而發(fā)揮抗瘢痕的作用。當歸具有活血、補血、化瘀等功效。劉德武等[14]用當歸注射液局部注射到兔耳增生性瘢痕組織內(nèi)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)當歸治療后瘢痕組織內(nèi)成纖維細胞數(shù)量及膠原含量均明顯降低，瘢痕纖維化明顯減輕。另有學者對雷公藤、姜黃、莪術、五倍子、蜈蚣等單味中藥展開了實驗研究。

2中藥提取物

川芎嗪系中藥川芎提取出來的無色針狀結(jié)晶生物堿。早期有學者通過實驗證明[15-16]川芎嗪具有抑制HSFB生長及活性、減少膠原合成的作用。近年，蘇毅鵬等[17]通過建立兔耳瘢痕模型，用川芎嗪隔天局部注射瘢痕，用藥40d后從瘢痕指數(shù)及組織病理均說明川芎嗪可減輕兔耳瘢痕組織。張艷青[18]則用川芎嗪局部注射于瘢痕疙瘩患者局部，取材后發(fā)現(xiàn)川芎嗪可顯著抑制瘢痕疙瘩中I型膠原基因及TGF-βl的表達，并通過提高Ⅻ型膠原基因表達，從而對膠原纖維骨架的形成產(chǎn)生作用。

漢防己甲素(Tetrandrine，TET)系千金藤屬防己科植物粉防己的主要生物活性成分。鄭鎣鎣等[19]在兔眼濾過性手術中植入TET緩釋系統(tǒng)(DDS)，術后7d、14d行活體濾過泡組織的共焦顯微鏡及組織病理學檢查提示，0.3 mg TET組兔眼濾過泡組織中炎性細胞浸潤明顯輕于0.2 mg TET組和空白DDS組，從而推論TET能有效抑制術后炎癥反應，防止濾過泡瘢痕化的作用。曹治東等[20]體外實驗顯示TET在2~8mg/L之間可明顯抑制HSFB的增殖，且具有明顯的劑量及時間依賴性(P<0.01)；TET可使成纖維細胞G2-M期細胞比例明顯增多(P<0.01)，S期與G2-M期時相時間明顯延長(P<0.01)；并呈濃度依賴性和時間依賴性地降低成纖維細胞外膠原蛋白量(P<0.01)，從而推論抑制成纖維細胞增殖分裂正是TET抗增生性瘢痕作用機理，但對膠原蛋白的抑制率明顯高于細胞增殖活力抑制率的機理不清楚。

氧化苦參堿(Oxymatrine)、苦參堿(matrine，Mat)是中藥苦參的提取物，兩則均有抗炎、抗腫瘤、抗纖維化、免疫調(diào)節(jié)的藥理作用。姜孟臣等[21]及費燕等[22]通過體外實驗證明了Mat能有效地抑制人增生性瘢痕成纖維細胞增殖。姜孟臣等[21]實驗還說明了Mat能誘導HSFB凋亡及TGF-β1的細胞內(nèi)合成。費燕等[22]的體外實驗中則證明了Mat可以致HSFB的細胞核內(nèi)增殖性抗(proliferatingcell nuclearant igen，PCNA)表達逐漸減弱，但DNA相對含量無明顯變化，從而推論Mat在體外能明顯抑制增生性瘢痕成纖維細胞的增殖而不引起細胞壞死性改變，但對DNA含量無明顯影響。呂建華等[23]則外用Mat的改良劑型——Mat微乳作用于兔耳瘢痕組織，不僅證明使用Mat后，瘢痕組織的炎性細胞減少，從而說明Mat對瘢痕的生長有一定的抑制作用，同時還說明Mat劑型的改變，可以提高Mat的透皮吸收率。氧化苦參堿在某些條件下氮氧鍵裂可轉(zhuǎn)化為Mat，兩者可互相轉(zhuǎn)化。范東良[24]的離體實驗發(fā)現(xiàn)氧化苦參堿可以抑制KFb中I型膠原和III型膠原的合成，并從信號傳導角度發(fā)現(xiàn)氧化苦參堿可以抑制TGF-β/Smad信號轉(zhuǎn)導通路中Smad3的表達及其磷酸化和向核轉(zhuǎn)移，而對TGF-β1，TβRI，TβRII，Smad4，Smad7的表達無明顯影響。

積雪草甙，又稱積雪草苷，是從傘形科植物積雪草全草中提取的白色針狀結(jié)晶。早期的離體實驗說明積雪草苷可抑制HSFB增殖、膠原合成及減少TGF-β的表達[25-27]，潘姝等[28-30]的實驗則進一步說明了積雪草苷抑制HS的機理可能與TGF-β/Smad信號轉(zhuǎn)導通路有關，即通過減少成纖維細胞中磷酸化Smad2的含量和增加smad7蛋白的表達有關。陳明春等[31]通過體外培養(yǎng)KFBs的實驗，發(fā)現(xiàn)在一定濃度下，積雪草甙和Mat均能抑制KFBs的生長及膠原合成，且積雪草甙的抗瘢痕作用強于Mat。另有學者對甲基蓮心堿、三七總甙、血竭素、水蛭素、常山酮、白黎蘆醇等中藥提取物展開研究。

3中藥復方制劑

黃芪桂枝五物湯(黃芪、桂枝、白芍，生姜，大棗)源自《金匱要略·血痹虛勞病脈證并治》。劉凱英等[32]在上方基礎上加入桃仁、紅花、當歸、秦艽、桑寄生、獨活等藥物，對SD大鼠行腰1椎板切除術，術后均連續(xù)4周灌服中藥，術后12周電鏡觀察其超微結(jié)構(gòu)，結(jié)果顯示加味黃芪桂枝五物湯組可能通過減少瘢痕中成纖維細胞以及細胞內(nèi)細胞器的數(shù)量，降低細胞外膠原的沉積從而減輕SD大鼠術后硬膜外瘢痕的形成。

黑布藥膏 (老黑醋、五倍子、蜈蚣、蜂蜜、冰片)是中醫(yī)皮膚外科泰斗趙炳南的外用中藥經(jīng)驗方。中醫(yī)認為老黑醋軟堅解毒，五倍子收斂解毒，蜈蚣破瘀以毒攻毒，冰片鎮(zhèn)癢止痛解毒，蜂蜜調(diào)和諸藥，諸藥合用共奏破瘀軟堅之功，在臨床亦取得診治瘢痕的良好效果。曹為等[33]通過瘢痕增生指數(shù)、成纖維細胞數(shù)密度及膠原纖維面積密度等指標說明黑布藥膏可明顯減輕兔耳的瘢痕。趙麗等[34-36]的動物實驗則說明了黑布藥膏可使兔耳瘢痕處的I膠原mRNA表達顯著增強,Ⅲ膠原mRNA及基質(zhì)金屬蛋白酶-1mRNA表達顯著減弱(P<0.01)、PCNA蛋白表達明顯減弱(P<0.05)及細胞凋亡增加(P<0.05)，從而推論黑布藥膏抗瘢痕增生的作用機制可能與抑制兔耳瘢痕處HSFB的增殖、膠原合成及誘導細胞凋亡有關。

其他中藥復方亦多以外用藥為主。如陳遠征等[37]用自擬復方中藥(丹參酮、積雪苷、黃芩苷、甘草酸、苦參堿等)在兔耳模型上用藥28d后，對兔耳瘢痕組織微循環(huán)血流量及微血管色計數(shù)進行監(jiān)測，結(jié)果表明該復方中藥對兔耳微循環(huán)灌注及增生性瘢痕血管形成有明顯的抑制作用。異常瘢痕增生除了影響外貌和功能障礙外，也可導致瘙癢等主觀癥狀。李威等[38]通過右旋糖酐法對小白鼠和組胺所致豚鼠局部皮膚瘙癢兩個實驗，證明自擬的丹芎瘢痕涂膜劑(苦參、川芎、甘草)外用抗瘢痕增生具有顯著的止癢作用。

4小結(jié)

中藥防治瘢痕具有獨特優(yōu)勢，但目前中藥抗瘢痕增生機制并不完全清楚，其實驗研究主要還存在一些問題。如目前中藥抗瘢痕增生的實驗主要集中在對單味中藥或中藥提取物的研究，而對中藥復方制劑，特別是內(nèi)服復方中藥的實驗研究較少。盡管中藥有效成分及機理較為復雜，因考慮復方中藥對機體產(chǎn)生的綜合作用，故復方中藥新劑型的藥物研究仍舊是未來挖掘抗PS的發(fā)展新方向。筆者認為應運用中醫(yī)整體及辨證論治等理論，挖掘臨床確有療效的中藥復合制劑，特別是中藥內(nèi)服復方藥物的研究。如可以結(jié)合血清藥理學等新方法，從整體出發(fā)，探討復方中藥內(nèi)服制劑在離體實驗的抗瘢痕增生作用機理，為臨床運用提供有利的科研數(shù)據(jù)；或?qū)σ炎C明有抗瘢痕作用的單味中藥或中藥提取物進行藥物配伍，研制出具有不同藥理作用、多靶點、既能抗PS又能止癢的復方新劑型。

目前動物實驗主要以裸鼠、兔耳瘢痕模型為主，但其與人體皮膚在創(chuàng)面愈合與轉(zhuǎn)歸方面因種屬差異，實驗結(jié)果很難真正反映藥物在人體的真實情況。大部分離體實驗主要圍繞對HSFB或KFBs的細胞增殖、凋亡及膠原合成等方面的研究，對細胞因子及細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導等的影響報道相對較少。筆者認為離體實驗還需要更多地采用基因芯片技術、反義技術等藥理新技術來對中藥抗瘢痕增生的靶點等問題做更深層次的實驗研究。

目前，上市的抗瘢痕藥物主要以外用藥為主，故不少學者已從藥物劑型的研究開發(fā)著手，最大限度地提高外用藥物的透皮吸收生物利用度。因此，以新型的高分子材料為輔料的中藥外用制劑將也是以后臨床及藥學工作者的一項艱巨任務。

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(收稿日期：2015.11.04)

【中圖分類號】R28,R275

【文獻標志碼】A

【文章編號】1007-8517(2016)01-0031-02