代森聯(lián)在葡萄和土壤中的殘留和消解規(guī)律

張文紅+張慧+邵輝

摘 ? ?要：為評(píng)價(jià)代森聯(lián)在葡萄上使用的安全性，并建立其使用規(guī)范，對(duì)代森聯(lián)在葡萄及其種植土壤中的殘留及消解動(dòng)態(tài)進(jìn)行研究。建立了葡萄和土壤中代森聯(lián)GC/MS殘留量測(cè)定法，葡萄和土壤中平均回收率分別為98%～103%和87%～100%。并于2013—2014年在天津和南京進(jìn)行了田間試驗(yàn)，代森聯(lián)在葡萄中的半衰期為6.8～9.4 d，在土壤中的半衰期為5.7～7.7 d。葡萄中代森聯(lián)的殘留量為0.069～0.890 mg·kg-1，土壤中代森聯(lián)的殘留量為0.027～0.418 mg·kg-1。按照我國(guó)規(guī)定，代森聯(lián)在葡萄上的最大殘留限量（MRL）標(biāo)準(zhǔn)為5 mg·kg-1，60%代森聯(lián)·嘧菌酯水分散粒劑按照推薦劑量和次數(shù)使用，推薦安全間隔期為7 d。

關(guān)鍵詞：代森聯(lián);葡萄;土壤;殘留;消解

中圖分類號(hào)：S481+.8 ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A ? ? ? ? DOI 編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2016.01.004

Residue and Degradation Dynamics of Metiram in Grape and Soil

ZHANG Wenhong1， ZHANG Hui1， SHAO Hui2

（1. China Organic Food Certification Center of Beijing， Beijing 100081，China;2.Tianjin Institute of Agricultural Quality Standard and Testing Technology，Tianjin 300381，China ）

Abstract： To evaluate the safety of metiram in grape and establish its use specification， the final residues and degradation dynamics of metiram were tested. A method for determination of metiram in grape and soil by GC/MS was developed. The average recoveries of metiram in grape and soil were 98%～103% and 87%～100 %.The supervised residue trials indicated that the half-life of metiram in grape and soil were 6.8～9.4 d and 5.7～7.7 d， respectively. The residues of metiram in grape and soil were 0.069～0.890 and 0.027～0.418 mg·kg-1. The final residues of metiram were below the maximum residue limit （MRL， 5 mg·kg-1） set by China， which suggested that this fungicide was comparably safe to apply in grape when sampling 7 d after the last application.

Key words： metiram; grape; soil; residue; degradation

代森聯(lián)，英文通用名為Metiram，化學(xué)名稱為三[氨（乙烯雙（二硫氨基甲酸酯）鋅（2+））][四氫-1，4，7-二噻二氮芳辛-3，8-連二硫酮]，聚合體。代森聯(lián)是一種優(yōu)良的保護(hù)性殺菌劑，屬低毒農(nóng)藥，主要用于防治蔬菜霜霉病、炭疽病、褐斑病等，對(duì)代森錳鋅產(chǎn)生抗性的病害，改用代森聯(lián)可收到良好的防治效果。因?yàn)槠錃⒕秶鷱V，不易產(chǎn)生抗性，且防治效果明顯優(yōu)于其他同類殺菌劑，所以在國(guó)內(nèi)外一直被大量使用。

代森聯(lián)殘留量測(cè)定最常用的方法是氣相色譜-火焰光度檢測(cè)器硫?yàn)V光片法[1-2]和氣相色譜-電子捕獲檢測(cè)器法[3]，此外還有高效液相色譜-紫外檢測(cè)器法[4-5]和液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法[6-7]。本研究建立了葡萄和土壤中的代森聯(lián)殘留量氣質(zhì)聯(lián)用測(cè)定法，該方法靈敏度高，可作為其他方法的重要補(bǔ)充。目前，關(guān)于代森聯(lián)的消解行為和最終殘留量的研究?jī)H見(jiàn)于大蒜及其土壤、西瓜及其土壤的研究報(bào)道[1，4]，未見(jiàn)代森聯(lián)在葡萄及其土壤中的研究。為掌握代森聯(lián)在葡萄上的消解動(dòng)態(tài)規(guī)律和最終殘留量情況，2013—2014年在天津市和南京市開(kāi)展了60%代森聯(lián)·嘧菌酯水分散粒劑在葡萄及其土壤中的消解動(dòng)態(tài)與最終殘留量的研究，為評(píng)價(jià)代森聯(lián)在葡萄上使用的安全性和建立其使用規(guī)范提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)農(nóng)藥及作物

試驗(yàn)農(nóng)藥為60%代森聯(lián)·嘧菌酯水分散粒劑 （其中代森聯(lián)質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50%、嘧菌酯質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%）;試驗(yàn)作物為葡萄，品種：天津?yàn)檎?，南京為小黑?/p>

1.2 測(cè)定儀器設(shè)備及試劑

代森聯(lián)標(biāo)準(zhǔn)品：純度78%，由Dr.Ehrenstorfer GmbH提供;抗壞血酸：分析純;正己烷：色譜純;SnCl2-HCl溶液：將2 g SnCl2 ·2H2O溶解在100 mL 5 mol·L-1 HCl中，得到質(zhì)量濃度為16.8 g·L-1的SnCl2-HCl溶液;水：蒸餾水。

Agilent 7890/5975氣質(zhì)聯(lián)用儀;電子天平（感量0.01 g）、電熱鼓風(fēng)干燥箱、100 mL頂空瓶、精密移液槍以及其它實(shí)驗(yàn)室常用儀器設(shè)備。

1.3 田間試驗(yàn)方法

試驗(yàn)時(shí)間為2013年6月至2014年8月，試驗(yàn)地點(diǎn)為天津市武清區(qū)汊沽港鎮(zhèn)胡柳子村和江蘇省南京市浦口區(qū)江浦街道光明村。按農(nóng)藥殘留試驗(yàn)準(zhǔn)則要求設(shè)試驗(yàn)小區(qū)，小區(qū)面積30 m2，重復(fù)3次，隨機(jī)排列，小區(qū)間設(shè)保護(hù)帶，另設(shè)對(duì)照小區(qū)。

1.3.1 消解動(dòng)態(tài)試驗(yàn) 葡萄：施藥時(shí)期為葡萄果實(shí)生長(zhǎng)至成熟個(gè)體一半大小時(shí)施藥，施藥時(shí)應(yīng)保證葡萄果實(shí)均勻著藥，施藥劑量為405 g a.i·hm-2，施藥1次，于施藥后2 h、1，2，3，7，14，21，28 d取葡萄樣品。處理重復(fù)3次，處理間設(shè)保護(hù)隔離區(qū)，另設(shè)清水空白對(duì)照。

土壤：選一塊10 m2的白地，單獨(dú)施藥，按高劑量405 g a.i·hm-2，施藥1次，藥液量2 L，于施藥后2 h、1，2，3，7，14，21，28 d取土壤樣品。處理重復(fù)3次，另設(shè)清水空白對(duì)照。

1.3.2 最終殘留試驗(yàn) 設(shè)兩個(gè)施藥劑量：低劑量按270 g a.i·hm-2，高劑量按405 g a.i·hm-2。各設(shè)3次和4次施藥，施藥間隔期為7 d，每個(gè)處理重復(fù)3次，小區(qū)面積30 m2。按照試驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)間開(kāi)始第1次施藥，施藥間隔期7 d。采樣時(shí)間距離最后1次施藥的間隔時(shí)間為3，7，14 d。另設(shè)清水空白對(duì)照，處理間設(shè)保護(hù)帶。

1.3.3 樣本的采集 葡萄：按設(shè)計(jì)方案采樣時(shí)間要求，用隨機(jī)的方式在小區(qū)內(nèi)上、下、左、右不同部位采集6～8串（不少于1 kg）生長(zhǎng)正常、無(wú)病害的葡萄果實(shí)，裝入樣本容器中包扎妥當(dāng)，粘好標(biāo)簽，貯存于-20 ℃冰柜中保存。

土壤：隨機(jī)取點(diǎn)5～10個(gè)，消解動(dòng)態(tài)用土鉆采集0～10 cm的土壤1～2 kg（最終殘留量用土鉆采集0～15 cm的土壤1～2 kg），除去土壤中的碎石、雜草和植物根莖等雜物，混勻后采用四分法留樣500 g，裝入樣本容器中，粘好標(biāo)簽，貯存于-20 ℃冰柜中保存。

1.3.4 實(shí)驗(yàn)室樣品制備與保存 葡萄：將葡萄田間樣本棄去病珠、殘珠，除去果梗，用勻漿機(jī)或多功能食品加工機(jī)搗碎成漿液，混合均勻后，取150 g樣品兩份，分別裝入封口容器中，粘好標(biāo)簽，貯存于-20 ℃冰柜中保存。

土壤：將田間樣品碾碎后過(guò)篩（1 mm），充分混勻，用四分法分取250 g兩份，分別裝入封口容器中，粘好標(biāo)簽，貯存于-20 ℃冰柜中保存。

1.4 測(cè)定方法

1.4.1 樣品制備 稱取樣品10.00 g于100 mL頂空瓶中（土壤加10 mL水）、加入0.05 g抗壞血酸、10 mL正己烷、40 mL SnCl2-HCl溶液，待瓶中無(wú)氣泡產(chǎn)生時(shí)，使用壓蓋器迅速將瓶口用聚四氟乙烯/硅橡膠密封墊密封，放入85 ℃烘箱中酸解2 h，每15 min搖1次，取出冷卻至室溫，再放入冰箱冷藏10 min，吸取上層有機(jī)相，供GC-MS測(cè)定。

1.4.2 儀器測(cè)定 進(jìn)樣口溫度：200 ℃;進(jìn)樣方式：分流進(jìn)樣，分流比20∶1;進(jìn)樣體積：2 μL;色譜柱：DB-5MS，30 m×0.25 mm，0.25 μm;柱流速：1 mL·min-1;爐溫程序：50 ℃（2 min），100 ℃·min-1，250 ℃（3 min）;離子源溫度：230 ℃;四極桿溫度：150 ℃;溶劑延遲：1.7 min，1.95 min后質(zhì)譜關(guān)閉;掃描方式：選擇離子監(jiān)測(cè)（SIM）76，78，44 m·z-1，定量離子為76 m·z-1。

1.4.3 計(jì)算方法 殘留量的計(jì)算用外標(biāo)法定量，按照下式計(jì)算樣品中的農(nóng)藥殘留量：

其中，R為樣品中的代森聯(lián)殘留量，以二硫化碳表示（mg·kg-1）;C標(biāo)為二硫化碳濃度（μg·mL-1）;V為最終定容體積（mL）;S樣為樣品溶液目標(biāo)物的峰面積;S標(biāo)為標(biāo)準(zhǔn)溶液目標(biāo)物的峰面積;W為稱樣質(zhì)量（g）。

轉(zhuǎn)化率計(jì)算方法為代森聯(lián)母體反應(yīng)轉(zhuǎn)化的CS2實(shí)測(cè)值除以代森聯(lián)母體反應(yīng)轉(zhuǎn)化的CS2理論值，即為代森聯(lián)母體對(duì)應(yīng)CS2的轉(zhuǎn)化率（%）。

回收率的計(jì)算方法為空白樣品中添加代森聯(lián)母體反應(yīng)轉(zhuǎn)化的CS2的實(shí)測(cè)值 除以代森聯(lián)母體反應(yīng)轉(zhuǎn)化的CS2的理論值再除以轉(zhuǎn)化率，即為方法的添加回收率（%）。

2 結(jié)果與分析

2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線

分別配制二硫化碳濃度為8.4，5.6，2.8，0.022 4， 0.011 2 mg·L-1標(biāo)準(zhǔn)工作液。按照上述儀器條件進(jìn)樣分析，以濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。二硫化碳的線性方程為：y = 21 847x-243，相關(guān)系數(shù)為：r=0.999 5。

2.2 最低檢出濃度

根據(jù)添加回收率試驗(yàn)，在上述色譜條件下代森聯(lián)在葡萄、土壤中的最低檢出濃度均為0.04 mg·kg-1。

2.3 保留時(shí)間

在上述色譜條件下，二硫化碳保留時(shí)間1.85 min左右。

2.4 添加回收率與相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差

分別在空白葡萄和土壤樣品中添加3個(gè)濃度水平的代森聯(lián)標(biāo)準(zhǔn)溶液，每個(gè)水平重復(fù)5次，用上述分析方法測(cè)定回收率，結(jié)果見(jiàn)表1。

2.5 消解動(dòng)態(tài)

2013—2014年在天津市、南京市的殘留試驗(yàn)結(jié)果表明：代森聯(lián)在葡萄和土壤中消解速率較快，消解規(guī)律符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程。在葡萄中的半衰期（T1/2）為6.8～9.4 d;在土壤中的半衰期為5.7～7.7 d?；貧w方程、相關(guān)系數(shù)和半衰期詳細(xì)見(jiàn)表2，典型譜圖見(jiàn)圖1～圖5。

2.6 最終殘留

2013年代森聯(lián)在葡萄中的最終殘留量為0.069 ～0.890 mg·kg-1;2014年代森聯(lián)在葡萄中的最終殘留量為0.093～0.634 mg·kg-1。2013年代森聯(lián)在土壤中的最終殘留量為0.030 ～0.418 mg·kg-1;2014年代森聯(lián)在土壤中的最終殘留量為0.027 ～0.278 mg·kg-1，典型譜圖見(jiàn)圖6、圖7。

3 結(jié) 論

根據(jù)2013—2014年在天津市、南京市消解動(dòng)態(tài)試驗(yàn)和最終殘留量試驗(yàn)，代森聯(lián)在葡萄和土壤中的降解速度較快，在葡萄和土壤中半衰期均低于10 d。60%代森聯(lián)·嘧菌酯水分散粒劑，用藥量按270和405 g a.i·hm-2，施藥3～4次，施藥間隔7 d，采收間隔期為3，7，14 d，收獲葡萄中代森聯(lián)的殘留量為0.069～0.890 mg·kg-1。我國(guó)GB/T 2763—2012規(guī)定代森聯(lián)在葡萄中的MRL值為5 mg·kg-1，代森聯(lián)在葡萄中的最終殘留量結(jié)果均符合我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，因此推薦安全間隔期為7 d。

參考文獻(xiàn)：

[1] 李亮亮，王明林，于建壘，等.60%唑醚·代森聯(lián)WG在大蒜及土壤中的殘留[J].農(nóng)藥，2013，52（2）：116-118，141.

[2] 秦曙，喬雄梧，王霞，等.氣相色譜法檢測(cè)22種基質(zhì)中的4種二硫代氨基甲酸鹽類農(nóng)藥殘留[J].色譜，2010，28（12）：1162-1167.

[3] 國(guó)家認(rèn)證認(rèn)可監(jiān)督管理委員會(huì).出口茶葉中二硫代氨基甲酸酯總殘留量檢驗(yàn)方法：SN/T 1541—2005 [S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2005.

[4] 余蘋中，賈春虹，趙爾成，等.代森聯(lián)和乙撐硫脲在西瓜和土壤中的消解及安全性評(píng)價(jià)[J].農(nóng)藥，2014，53（5）：350-351，385.

[5] 賀東霞.柱前衍生-HPLC法測(cè)定香菇中二硫代氨基甲酸鹽類農(nóng)藥殘留量[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2014，24（23）：3354-3357.

[6] 祝偉霞， 楊冀州， 劉亞風(fēng).固相萃取凈化-液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜確證茶葉中的6種乙撐雙二硫代氨基甲酸鹽類農(nóng)藥殘留[J].分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2010，29（11）：1109-1113.

[7] 馬婧瑋， 潘燦平， 張玲，等. 二硫代氨基甲酸鹽類（DTCs）殺菌劑殘留分析方法綜述[J]. 農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào)， 2010，12（1）：22-30.