不同方法學(xué)檢測(cè)乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果的評(píng)價(jià)分析

程廣翠

（吉林省遼源市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，吉林 遼源 136200）

不同方法學(xué)檢測(cè)乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果的評(píng)價(jià)分析

程廣翠

（吉林省遼源市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，吉林 遼源 136200）

目的 分析ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）、TRFIA（時(shí)間分辨免疫熒光法）、ECLIA （化學(xué)發(fā)光法免疫分析法）三種乙型肝炎血清標(biāo)志物檢測(cè)方式的精密度與靈敏度。方法通過(guò)對(duì)168例血清樣本采用ELISA、ECLIA及TRFIA三種方法平行測(cè)定乙型肝炎病毒DNA定量檢測(cè)陽(yáng)性患者的HBsAg水平，并根據(jù)結(jié)果分析三種檢測(cè)方法的靈敏度和精密度。結(jié)果進(jìn)行低濃度HBsAg檢測(cè)時(shí)，ECLIA的陽(yáng)性檢出率較ELISA吸附試驗(yàn)和TRFIA的檢出比率值均高，且有明顯差異，并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論在進(jìn)行HBV血清流行病學(xué)調(diào)查中采用ELISA法檢驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其具有靈感度高，對(duì)HBsAg進(jìn)行陽(yáng)性測(cè)試時(shí)驗(yàn)出率也較高，并在檢測(cè)低濃度HBsAg時(shí)更能凸顯其優(yōu)勢(shì)，因而ELISA法作為對(duì)低濃度HBsAg檢測(cè)上值得臨床推廣。

腫瘤血清標(biāo)志物；ECLIA（化學(xué)發(fā)光法免疫分析法）；檢測(cè)分析

血清標(biāo)志物HBsAg（乙型肝炎表面抗原）在1963年起很長(zhǎng)時(shí)間被稱為“奧抗”，1974年被定名為乙型肝炎表面抗原。在血清檢測(cè)時(shí)，血清HBsAg呈陽(yáng)性作為HBV感染的標(biāo)志。根據(jù)我院收治的168例患者，采集其血清樣本后，使用ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）、TRFIA（時(shí)間分辨免疫熒光法）、ECLIA（化學(xué)發(fā)光法免疫分析法）對(duì)乙型肝炎病毒的DNA定量檢測(cè)的陽(yáng)性患者的HBsAg水平進(jìn)行檢測(cè)，分析三種方法的檢測(cè)靈敏度和精密度，及臨床應(yīng)用價(jià)值。

1　材料與方法

1.1測(cè)試資料：根據(jù)我院收治的168例患者，采集其血清樣本后，使用ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）、TRFIA（時(shí)間分辨免疫熒光法）、ECLIA（化學(xué)發(fā)光法免疫分析法）［1］對(duì)乙型肝炎病毒的DNA定量檢測(cè)的陽(yáng)性患者的HBsAg水平進(jìn)行檢測(cè)。其中男性74例，女性94例，且年齡在16～60歲。

1.2研究方法

1.2.1樣本采集：對(duì)檢查者進(jìn)行空腹采血后，檢驗(yàn)人員盡快將標(biāo)本血清分離，選擇立即測(cè)定或是放置冰箱冷凍室，并將溫度調(diào)至-18～- 20 ℃保存，確保2 d內(nèi)檢測(cè)完成。

1.2.2檢測(cè)方法：使用ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）、TRFIA（時(shí)間分辨免疫熒光法）、ECLIA （化學(xué)發(fā)光法免疫分析法）三種乙型肝炎血清標(biāo)志物檢測(cè)方式，按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定，并按照全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光儀和配套試、酶標(biāo)儀等儀器設(shè)備的使用說(shuō)明書進(jìn)行操作檢測(cè)樣本。

1.2.3靈敏度實(shí)驗(yàn)：根據(jù)國(guó)家臨檢中心提供的臨界標(biāo)準(zhǔn)將血清稀釋成不同的濃度，ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）、TRFIA（時(shí)間分辨免疫熒光法）、ECLIA（化學(xué)發(fā)光法免疫分析法）分別進(jìn)行連續(xù)五次重復(fù)測(cè)驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)出測(cè)定每次結(jié)果，并加以分析。

1.2.4臨床樣本的檢測(cè)：利用ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）、TRFIA（時(shí)間分辨免疫熒光法）、ECLIA（化學(xué)發(fā)光法免疫分析法）168例患者血液樣本進(jìn)行檢測(cè)的HBsAg水平并與利用電化學(xué)光反應(yīng)檢測(cè)的樣本結(jié)果進(jìn)行比較。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：使用SPSS1.7統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)分析軟件對(duì)所有收集數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。計(jì)量數(shù)據(jù)以（±s）表示，采用配對(duì)t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)采用χ2檢驗(yàn)。其數(shù)據(jù)差異作為統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié) 果

2.1三種方法的靈敏度檢測(cè)：ECLIA（化學(xué)發(fā)光法免疫分析法）與ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）、TRFIA（時(shí)間分辨免疫熒光法）相比，ECLIA（化學(xué)發(fā)光法免疫分析法）靈敏度較高。

2.2ECLIA（化學(xué)發(fā)光法免疫分析法）與ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）測(cè)定HBsAg水平各模式的結(jié)果：對(duì)我院收治的168例血液樣本利用三種檢測(cè)方式檢測(cè)，ECLIA檢測(cè)出129例，檢測(cè)出的比率為76.7%，ELISA檢測(cè)出118例，檢測(cè)出的比率為70.2%。通過(guò)以上資料：發(fā)現(xiàn)ECLIA法較ELISA法與TRFIA法對(duì)于低濃度的HBsAg檢出率較高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與相關(guān)學(xué)者報(bào)道的4種方法檢測(cè)乙型肝炎血清標(biāo)志物的結(jié)果具有高度以上一致性，CLIA和ECLIA在檢測(cè)敏感性上更有優(yōu)勢(shì)［2］相吻合。.

3　討 論

根據(jù)資料顯示，全球目前有乙型肝炎病毒的攜帶者將近3億，而我國(guó)初步統(tǒng)計(jì)患有乙型肝炎病毒攜帶者將近1億之多，目前是世界上乙型肝炎的高發(fā)國(guó)之一。對(duì)于乙型肝炎病毒的檢測(cè)手段需要檢驗(yàn)專家的不斷探索和臨床檢驗(yàn)工作者的認(rèn)真努力，臨床檢驗(yàn)ECLIA（化學(xué)發(fā)光法免疫分析法）與ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）、TRFIA（時(shí)間分辨免疫熒光法）對(duì)于乙型肝炎血清標(biāo)志診斷數(shù)據(jù)一直是作為診斷乙型肝炎患者的標(biāo)準(zhǔn)，長(zhǎng)期受到臨床技術(shù)人員的高度重視，乙型肝炎病毒患者的早期診斷對(duì)治療效果及預(yù)后的影響很大，早期患者的HBsAg一般較低，能找到合適的方法對(duì)低濃度的HBsAg進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)早期乙型肝炎患者的發(fā)現(xiàn)具有重大的臨床意義。一般患病者早期的低濃度HBsAg一般較低，通過(guò)本組資料顯示，ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）、TRFIA（時(shí)間分辨免疫熒光法）、ECLIA（化學(xué)發(fā)光法免疫分析法）測(cè)定的靈敏度較高，ELISA、TRFIA以及ECLIA 3種乙型肝炎血清標(biāo)志物檢測(cè)方法之間一致性程度較高，有利于結(jié)果互認(rèn)［3］，ECLIA法較ELISA法與TRFIA法對(duì)于低濃度的HBsAg檢出率較高，為更好的服務(wù)于臨床，為臨床提供更準(zhǔn)確數(shù)據(jù)，患者檢測(cè)和血液樣本時(shí)應(yīng)盡可能采用ECLIA法，以保證低濃度HBsAg的檢出率。

［1］陳佑明，黃敬，熊符，等.時(shí)間分辨熒光免疫分析法和免疫放射分析法檢測(cè)HBsAg的對(duì)比分析［J］.標(biāo)記免疫分析與臨床，2006，13（1）：50-51.

［2］楊凡，單詠梅，周宏，等.不同方法學(xué)檢測(cè)乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果的評(píng)價(jià)分析［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2010，25（9）：723-726.

［3］歐貴啟.不同方法學(xué)檢測(cè)乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果的評(píng)價(jià)分析［J］.中外醫(yī)療，2011，30（36）：175-176.

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1671-8194（2016）24-0045-01