動(dòng)物布魯氏菌病的特征研究與診斷技術(shù)分析

王笑笑，李芳琴

(1.甘肅省平?jīng)鍪徐o寧縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，743400;2.甘肅省平?jīng)鍪徐o寧縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所)

動(dòng)物布魯氏菌病的特征研究與診斷技術(shù)分析

王笑笑1，李芳琴2*

(1.甘肅省平?jīng)鍪徐o寧縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，743400;2.甘肅省平?jīng)鍪徐o寧縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所)

布魯氏菌?。ê?jiǎn)稱(chēng)布?。?，根據(jù)我國(guó)動(dòng)物疫病分析報(bào)告，布病的影響以及危害已經(jīng)名列前茅，發(fā)病數(shù)量和上升速度都已達(dá)到歷史新高。布病主要感染對(duì)象為牛、羊、豬、鹿、犬等，其臨床癥狀表現(xiàn)為：雌性無(wú)征兆流產(chǎn)，雄性單、雙側(cè)睪丸炎和附睪炎，直接導(dǎo)致動(dòng)物生育能力低下甚至不育。布病可以通過(guò)直接接觸患病動(dòng)物、動(dòng)物產(chǎn)品、排泄物以及吸入病菌感染的空氣、粉塵等被感染，潛伏期約為兩周。人類(lèi)感染布病后臨床表現(xiàn)為乏力、頭疼、發(fā)熱、肌肉和骨關(guān)節(jié)疼痛等癥狀。上世紀(jì)六七十年代，我國(guó)曾開(kāi)展大規(guī)模動(dòng)物布病防治工作，但隨著時(shí)間的推移效果呈現(xiàn)反彈趨勢(shì)，甚至有些地區(qū)出現(xiàn)暴發(fā)流行，對(duì)畜牧業(yè)產(chǎn)生了極其不利的影響，同時(shí)也對(duì)從事畜牧工作的人員造成了人身和財(cái)產(chǎn)的雙重威脅，形勢(shì)不容樂(lè)觀(guān)。

1 布病的特征和傳播途徑

布魯氏菌為革蘭氏陰性短桿菌或球桿菌，當(dāng)細(xì)胞與布魯氏菌接觸時(shí)，病菌通過(guò)受體侵入細(xì)胞。侵入細(xì)胞后立即與早期吞噬體結(jié)合，改變其在細(xì)胞內(nèi)的運(yùn)輸方向，抵達(dá)復(fù)制部位內(nèi)質(zhì)網(wǎng)后開(kāi)始大批量復(fù)制。其特點(diǎn)為既不損傷細(xì)胞也不會(huì)引起細(xì)胞基礎(chǔ)功能的異常。

布病的傳播媒介主要有流產(chǎn)物、內(nèi)臟、肉、乳以及乳制品等。布魯氏菌主要集中在懷孕母畜的泌尿生殖道、消化道和呼吸道中，不小心吸食到會(huì)造成感染，接觸也有很大概率造成感染。

2 我國(guó)目前對(duì)布病的監(jiān)測(cè)情況

2010年，在農(nóng)業(yè)部關(guān)于布病的監(jiān)測(cè)制訂了以下計(jì)劃：監(jiān)測(cè)所有奶牛、奶羊、種牛、種羊（包括羔羊、牛犢），對(duì)發(fā)現(xiàn)布魯氏病菌檢測(cè)出現(xiàn)陽(yáng)性的養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行定期的跟蹤檢測(cè)，存欄50頭以上的牛場(chǎng)、60頭以上的豬場(chǎng)、70只以上的羊場(chǎng)采取10%抽檢，最多不超過(guò)100份，鹿場(chǎng)存欄量超過(guò)50只以上按10%抽檢。其余豬、牛、羊鹿場(chǎng)以鄉(xiāng)縣為單位，采取0.1%-0.5%進(jìn)行抽檢，出現(xiàn)布病疑似癥狀的地區(qū)以50%的比例進(jìn)行抽檢，設(shè)備條件先進(jìn)的地區(qū)可以進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)。如果一個(gè)地區(qū)爆發(fā)布病，那么需要對(duì)疫區(qū)內(nèi)所有家畜進(jìn)行檢驗(yàn)。在確保每年一次集中檢測(cè)的同時(shí)，采取全年隨時(shí)隨機(jī)檢測(cè)。

3 我國(guó)目前的布病診斷技術(shù)

我國(guó)對(duì)布病的診斷主要手段為病原診斷、細(xì)菌分離培養(yǎng)和血清診斷3種方法。

病原診斷是通過(guò)顯微鏡。對(duì)流產(chǎn)動(dòng)物絨毛膜、淋巴結(jié)、肝、脾、胎衣、胃內(nèi)容物等組織進(jìn)行制片，用科茲洛夫斯基染色法染色進(jìn)行鏡撿，布魯氏菌呈紅色桿狀或球桿狀，其他菌群為藍(lán)色。對(duì)于新采集的病料，可以使用細(xì)菌分離培養(yǎng)的方式對(duì)菌落特征檢驗(yàn)以及抗血清凝集實(shí)驗(yàn)。為達(dá)到更好的防治效果，須對(duì)布魯氏菌做種型鑒定，如病料含菌量較少或被污染時(shí)，可以采用健康豚鼠進(jìn)行培養(yǎng)，方法為：用生理鹽水對(duì)病料稀釋10倍，腹腔注射0.2ml/只-0.4ml/只，經(jīng)過(guò)5-7周后，從豚鼠脾、肝分離布魯氏菌。細(xì)菌分離培養(yǎng)和病原學(xué)診斷具有檢測(cè)周期長(zhǎng)的特點(diǎn)，對(duì)于實(shí)用檢測(cè)有一定的局限性。

血清學(xué)檢測(cè)方法又分為幾種，其中，虎紅平板凝聚試驗(yàn)、試管凝集試驗(yàn)及補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)等應(yīng)用最為廣泛。徐春厚等于九八年采用虎紅平板凝聚試驗(yàn)、二硫基乙醇試管凝集試驗(yàn)、致敏紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)等4種方法對(duì)32份牛布魯氏菌病血清抗體進(jìn)行檢測(cè)，比較了這4種方法的符合率、檢出率及優(yōu)缺點(diǎn)。其中，虎紅平板凝聚試驗(yàn)檢出率最高，其他3種方法效果差些，陰、陽(yáng)符合率僅為50%?；⒓t平板凝聚試驗(yàn)易與其他菌產(chǎn)生交叉反應(yīng)，其他3種方法的血清用量和抗原用量都偏大，操作步驟也過(guò)于繁瑣，試管凝集試驗(yàn)需要時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，往往24小時(shí)后才能得出結(jié)果，補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)試劑敏感性低、穩(wěn)定性差，影響檢測(cè)結(jié)果。一般情況下先虎紅平板凝聚試驗(yàn)是初步篩選陽(yáng)性，然后才用試管凝集或其他方法確定陽(yáng)性。

4 布病診斷技術(shù)發(fā)展趨勢(shì)

為了進(jìn)一步增強(qiáng)布魯氏菌病的篩查與檢測(cè)，我國(guó)已經(jīng)引入布病抗體快速檢測(cè)試紙條技術(shù)對(duì)血清、牛奶中的布病抗體進(jìn)行定性檢測(cè)。試紙條快速檢測(cè)主要呈現(xiàn)以下幾方面特點(diǎn)：一是明顯縮短檢測(cè)時(shí)間，提升檢測(cè)效率，適用于大批量樣品快速初篩；二是攜帶方便、操作簡(jiǎn)單，可以進(jìn)行各種場(chǎng)合的現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)督檢驗(yàn)；三是既可檢測(cè)單份樣品，也可檢測(cè)多份混合樣品，便于對(duì)牛群開(kāi)展布病實(shí)時(shí)監(jiān)控。通過(guò)對(duì)國(guó)外先進(jìn)技術(shù)的學(xué)習(xí)和自身的不斷努力研發(fā)，我國(guó)布病診斷分析也必將走向先進(jìn)行列。

S858.2

B

1003-8655（2016）06-0086-01