細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞臨床療效影響因素的研究進(jìn)展

張 蓉，武 霞，趙振峰，劉學(xué)鍵

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細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞臨床療效影響因素的研究進(jìn)展

張 蓉，武 霞，趙振峰，劉學(xué)鍵

［摘要］細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（cytokine-induced killer cells，CIK）又稱為自然殺傷樣T淋巴細(xì)胞，具有非主要組織相容性復(fù)合物特異性殺傷力，廣泛應(yīng)用于多種腫瘤疾病的輔助性治療。細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞療效受多種因素的影響，特別是與腫瘤的種類與時期、治療方案的選擇、細(xì)胞的質(zhì)量以及患者的個人因素方面有一定的相關(guān)性。作者從腫瘤、治療方案、細(xì)胞質(zhì)量等多個方面對CIK免疫治療療效影響進(jìn)行綜述，以期促進(jìn)CIK治療療效水平的提高。

［關(guān)鍵詞］細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞；影響因素；評價標(biāo)準(zhǔn)；療效

［作者單位］276000山東臨沂，臨沂市生科轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究中心（張蓉，趙振峰）；276000山東臨沂，臨沂市第三人民醫(yī)院腫瘤科（武霞，劉學(xué)鍵）

細(xì)胞免疫治療已成為繼手術(shù)、放療、化療之后的第四大腫瘤治療手段，歷經(jīng)了多代免疫細(xì)胞的發(fā)展，因前幾代免疫細(xì)胞的低抗瘤性而未被臨床廣泛應(yīng)用［1-2］。1993年，斯坦福大學(xué)的Schmidt-Wolf等［3］發(fā)現(xiàn)，在多種細(xì)胞因子的作用下，從外周血中提取的單個核細(xì)胞可以被定向誘導(dǎo)并大量增殖成為具有強(qiáng)大抗腫瘤活性的細(xì)胞群，即細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（cytokine-induced killer cells，CIK）。CIK具有非主要組織相容性復(fù)合物（major histocompatibility complex，MHC）限制性殺瘤特點(diǎn)，增殖能力較浸潤的淋巴細(xì)胞、淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞更強(qiáng)，而相關(guān)不良反應(yīng)較少，在腫瘤治療領(lǐng)域具有潛在的應(yīng)用價值［3］。

目前，在臨床試驗(yàn)方面，無論國內(nèi)外CIK治療血液性腫瘤和實(shí)體瘤的臨床研究及其安全性已得到較為普遍的認(rèn)可［4-9］。但是其廣泛應(yīng)用于臨床為近5年的時間［10］。作者發(fā)現(xiàn)在實(shí)際應(yīng)用中CIK的療效受多方面的影響，故對影響CIK治療腫瘤療效的因素作一綜述。

1　影響CIK免疫治療的因素

1.1腫瘤種類和分期的不同 不同種類的腫瘤以及同一類型腫瘤的不同時期對CIK的敏感度不同，影響了CIK免疫治療療效，對患者預(yù)后也具有明顯的影響。李新靈等［11］應(yīng)用四甲基偶氮唑鹽比色法檢測CIK對人紅白血病細(xì)胞系K562、人B淋巴瘤細(xì)胞系BJAB、人肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549、人乳腺癌細(xì)胞系MCF-7、人肝癌細(xì)胞系HepG2的細(xì)胞毒作用，發(fā)現(xiàn)在培養(yǎng)第13天，效靶比為40∶1的情況下對人紅白血病細(xì)胞系K562殺傷力為（88. 89±7. 22）%、人肝癌細(xì)胞系HepG2為（42. 63±7. 69）%。Sangiolo［12］報(bào)道了CIK治療腫瘤的臨床療效數(shù)據(jù)，如對腸癌、腎癌完全緩解率為10%，非霍奇金淋巴瘤完全緩解率25%。羅虎等［13］以CIK作為維持手段，選取42例中晚期肺癌患者進(jìn)行CIK治療，同時選擇38例同期行最佳支持治療的患者作為對照組；經(jīng)2周期4個療程治療后發(fā)現(xiàn)，在接受CIK治療患者中腫瘤分期為Ⅲ期的緩解率為75. 0%，Ⅳ期緩解率為23. 1%，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0. 05），而在疾病控制率上兩者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0. 05）；同時，對于出現(xiàn)腦、肝轉(zhuǎn)移與未出現(xiàn)腦、肝轉(zhuǎn)移的疾病控制率分別為37. 5%與94. 1%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0. 05）。

由此可見，CIK雖然對大多數(shù)腫瘤細(xì)胞有一定的殺傷力，但是對不同的腫瘤以及同一腫瘤的不同時期的殺傷力具有一定差異。所以，在應(yīng)用CIK免疫治療時應(yīng)多方面考慮如腫瘤的性質(zhì)、種類、時期等，采取不同方式的CIK免疫治療，并非盲目地、一統(tǒng)式地采用，并堅(jiān)持早發(fā)現(xiàn)、早治療的觀點(diǎn)，這對腫瘤患者的治療及預(yù)后具有重要意義。

1.2治療方案

1.2.1CIK聯(lián)合手術(shù)治療 CIK與手術(shù)聯(lián)合應(yīng)用，相輔相成。手術(shù)可以切除疾病的原發(fā)病灶，為CIK免疫治療降低腫瘤負(fù)荷；CIK免疫治療可有效地清除患者手術(shù)后體內(nèi)殘留的腫瘤細(xì)胞及微小轉(zhuǎn)移病灶，預(yù)防疾病的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。Takayama等［14］選取150例肝癌患者先行手術(shù)治療后，選取其中的76例行CIK治療（治療組）、74例無輔助治療（對照組），經(jīng)4年隨訪發(fā)現(xiàn)，治療組復(fù)發(fā)率（59%）較對照組復(fù)發(fā)率（77%）降低了18%。Weng等［15］也對肝癌微創(chuàng)術(shù)后患者實(shí)施自體CIK免疫治療，療效顯著，明顯提高了肝癌患者的免疫功能，顯著降低了肝癌的復(fù)發(fā)率。

1.2.2CIK聯(lián)合放化療、介入治療 CIK聯(lián)合放化療、介入治療，適用于手術(shù)、放化療后無法接受常規(guī)治療的腫瘤患者。國內(nèi)外大量研究顯示，CIK免疫治療與放化療相結(jié)合可獲得較佳結(jié)果，既可有效治療腫瘤，又可提高患者的免疫能力、改善患者的生活質(zhì)量、延長生存期［16-18］。Wang等［19］報(bào)道應(yīng)用化療與CIK結(jié)合治療胃癌患者，發(fā)現(xiàn)與CIK聯(lián)合治療組的患者化療耐受性較優(yōu)，通過腹腔介入CIK的方式，患者腹腔積液引流的周期比單純化療組減少，且延長了中位疾病進(jìn)展時間，提高了總生存期。另外有多家中心開展了介入后應(yīng)用CIK細(xì)胞治療，證實(shí)安全、有效，可值得推廣［20-22］。

1.2.3CIK的回輸途徑 CIK歸巢率的高低直接影響腫瘤治療療效的高低，而回輸途徑可以影響CIK在體內(nèi)的分布濃度、到達(dá)靶器官的豐度。李慧等［23］研究不同輸注途徑（皮下、腹腔、瘤周注射）對CIK在活體內(nèi)的分布規(guī)律和抑制瘤活性影響，發(fā)現(xiàn)CIK輸入裸鼠體內(nèi)后，迅速分布至肝、脾、腎、肺、胃、腸器官，其中肝、脾、腎的分布濃度最高。CIK在各臟器的分布規(guī)律與不同的輸注途徑存在一定的關(guān)聯(lián)，裸鼠皮下接種結(jié)腸癌細(xì)胞系HCT-8后，瘤周和尾靜脈注射CIK可以明顯抑制皮下移植腫瘤的生長，而腹腔注射CIK對于皮下腫瘤的抑制無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。所以，CIK體內(nèi)分布的廣泛性表明它可以用于身體各部位惡性腫瘤的治療，針對不同部位的腫瘤可以選擇不同的CIK輸注途徑，最大限度地提高療效。

1.3CIK

1.3.1不同來源的CIK 骨髓、臍血、外周血為CIK培養(yǎng)的主要來源，由于臍血免疫原性低以及外周血采集的方便性，國內(nèi)常采用臍血及外周血作為提取CIK的首選對象。不同來源的CIK表現(xiàn)出的免疫表型、增殖力及殺傷力具有一定的差異，在腫瘤治療時應(yīng)根據(jù)不同的病情選用不同來源的CIK進(jìn)行免疫治療。

姚文健等［24］抽取健康人的外周血、食道癌患者的外周血和臍血來誘導(dǎo)培養(yǎng)CIK，發(fā)現(xiàn)臍血CIK（cord blood-derived CIK，CB-CIK）增殖速度明顯高于健康人和食管癌患者外周血來源的CIK，且CB-CIK對食管癌細(xì)胞殺傷活性最強(qiáng)。Niu等［25］將40例惡性腫瘤患者分為試驗(yàn)組（于化療1周后輸注CB-CIK共6次）及對照組（僅給予化療藥物），結(jié)果顯示試驗(yàn)組有效率及控制率可達(dá)30%和80%，明顯高于對照組的15%和70%，無進(jìn)展生存期和總生存期高于對照組。

1.3.2CIK的質(zhì)量 細(xì)胞質(zhì)量是細(xì)胞免疫治療療效高低的關(guān)鍵，也是其最佳療效獲取和長期療效維持的核心。金從國等［26］分析肺癌患者外周血CIK培養(yǎng)質(zhì)量與療效的相關(guān)性，表明肺癌患者手術(shù)、化療聯(lián)合CIK免疫治療尤其以輸注高質(zhì)量的CIK，可更有效地激發(fā)機(jī)體的抗腫瘤免疫能力，殺滅殘留癌細(xì)胞，抑制腫瘤的轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)。但是，目前我國對于免疫細(xì)胞質(zhì)量的要求無統(tǒng)一的規(guī)定，全國各個治療中心培養(yǎng)的細(xì)胞各有差異，高低不同，在實(shí)際應(yīng)用中所獲得療效千差萬別。由此可見，建立統(tǒng)一的應(yīng)用規(guī)范制度和免疫細(xì)胞質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，是提高免疫細(xì)胞質(zhì)量和細(xì)胞免疫治療的關(guān)鍵。

1.3.3多細(xì)胞聯(lián)合 CIK具有非MHC限制性殺瘤的特點(diǎn)，目前國內(nèi)許多生物治療中心已趨向于將多種免疫細(xì)胞聯(lián)合應(yīng)用或者交叉應(yīng)用，以提高免疫細(xì)胞治療的效果。CIK與樹突狀細(xì)胞（dendritic cells，DC）等免疫細(xì)胞聯(lián)合應(yīng)用在治療胃癌、乳腺癌、腎癌等疾病上是可行且有效的［27-29］。Salskov-Iversen等［30］將外周血來源的CIK和同源DC共同培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)，兩者的增殖力增強(qiáng)，殺傷性細(xì)胞因子的分泌量增多，CIK對腫瘤細(xì)胞的殺傷活性顯著提高。

CIK的質(zhì)量直接決定著與腫瘤細(xì)胞對抗的強(qiáng)弱，純度越高、數(shù)量越多、形態(tài)越好的CIK清除腫瘤細(xì)胞的能力越強(qiáng)，加之將CIK與MHC限制性免疫細(xì)胞聯(lián)合應(yīng)用或交叉應(yīng)用，增強(qiáng)了CIK的靶向性和殺傷力，從而更加有效地提高了CIK免疫治療的療效。

1.4患者個人因素

1.4.1患者的體質(zhì) 臨沂市生科轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究中心實(shí)驗(yàn)室從2014年2月—2015年5月共觀察記錄120例惡性腫瘤患者應(yīng)用CIK的具體情況，發(fā)現(xiàn)患者的體質(zhì)與CIK的質(zhì)量、不良反應(yīng)的發(fā)生率有直接的關(guān)聯(lián)。從CIK的質(zhì)量來看，機(jī)體能力較佳的患者，CIK的增殖速度、生長總量及純度都優(yōu)于機(jī)體能力較差的患者；從每次回輸細(xì)胞量來看，機(jī)體狀況較差者對單次CIK回輸量的承受力低于機(jī)體狀況較好的患者，易出現(xiàn)發(fā)熱等不良反應(yīng)。所以，在回輸CIK時，應(yīng)依據(jù)患者的體質(zhì)、病情來決定采取的回輸數(shù)量及次數(shù)。

1.4.2患者的個人意識 CIK免疫治療作為腫瘤治療的新興手段，患者對此知之甚少，加之治療費(fèi)用較高，易產(chǎn)生過高期望或者出現(xiàn)焦慮、抑郁負(fù)面情緒。特別是在患者選擇應(yīng)用CIK治療1個療程未見明顯療效時，便對CIK免疫治療產(chǎn)生了懷疑的態(tài)度，終止后續(xù)治療，這對后續(xù)治療帶來了困難。

所以，醫(yī)護(hù)人員應(yīng)加強(qiáng)與患者的溝通，更多、更好地了解患者的身體狀態(tài)，選取最佳的時機(jī)給予患者CIK免疫治療；讓患者真正了解細(xì)胞免疫治療，建立正確的評價觀念，消除不良的心理刺激，調(diào)動患者的主觀能動性，使其積極主動地做好“自我護(hù)理”以利于病體的康復(fù)和心理健康的保持。

2　CIK治療療效評價標(biāo)準(zhǔn)

免疫治療療效具有滯后現(xiàn)象，免疫細(xì)胞治療后會出現(xiàn)暫時性的腫瘤負(fù)荷增加，而后才出現(xiàn)明顯的抗腫瘤活性，所以免疫治療效果評價不能簡單套用世界衛(wèi)生組織或?qū)嶓w瘤治療療效評價標(biāo)準(zhǔn)。免疫相關(guān)反應(yīng)評價標(biāo)準(zhǔn)的出臺，彌補(bǔ)了世界衛(wèi)生組織或?qū)嶓w瘤治療療效評價標(biāo)準(zhǔn)的不足，重新定義了疾病進(jìn)展并將新發(fā)病灶納入腫瘤總負(fù)荷中。但是，有研究表明，免疫相關(guān)反應(yīng)評價標(biāo)準(zhǔn)不適用于腦腫瘤患者［31］。

所以，就目前來說，還沒有一個確切的標(biāo)準(zhǔn)可應(yīng)用于細(xì)胞免疫治療的評價。新標(biāo)準(zhǔn)的亟待確定，對于細(xì)胞免疫治療療效的正確評價刻不容緩。

CIK免疫治療作為腫瘤治療的輔助手段，在腫瘤治療中具有不可比擬的優(yōu)越性，但其療效的高低受多種因素的影響。所以，在采取CIK治療時，應(yīng)依據(jù)患者病情發(fā)展、目前所采用的治療方案以及患者的個人因素，選擇最佳的細(xì)胞回輸方案。同時，作為細(xì)胞的制備單位，應(yīng)致力于CIK的數(shù)量、純度、殺傷力以及發(fā)現(xiàn)增殖力、殺傷力更強(qiáng)的免疫細(xì)胞。再次，完善市場管理制度，加強(qiáng)監(jiān)督管理，完善臨床資料，嚴(yán)控患者選擇應(yīng)用，提高免疫細(xì)胞的療效。

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Progress of clinical efficacy in cytokine induced killer cell related factors

ZHANG Rong1，WU Xia2，ZHAO Zhenfeng1，LIU Xuejian2
（1. Linyi Life-Science Translational Medicine Research Center，Linyi Shandong 276000，China；2. Department of Tumor，the Third People Hospital of Linyi，Linyi Shandong 276000，China）

［Abstract］Cytokine-induced killer（CIK）cell known as natural killer like T lymphocytes has non-MHC-restricted tumor-killing activity and is widely used in many kinds of tumor diseases. Now，the results show that the efficacy of cytokine induced killer cells is affected by many factors，especially tumors types，quality of CIK cell and patients. So in the review，we summarize the influence factors of clinical efficacy in cytokine induced killer cells，in order to improve the therapeutic effect of CIK cells.

［Key words］Cytokine-induced killer cells（CIK）；Influence factors；Evaluation criterion；Curative effect

［中圖分類號］R329. 2

［文獻(xiàn)標(biāo)志碼］A

［文章編號］2095-3097（2016）02-0125-04

doi：10. 3969/ j. issn. 2095-3097. 2016. 02. 015

［基金項(xiàng)目］山東省科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目（2013GSF11909）

［通訊作者］劉學(xué)鍵，E-mail：liuxj168@sina.com

收稿日期：（2015-11-26 本文編輯：徐海琴）