UPLC-Q-TOF/MS法鑒定獸藥磺胺二甲嘧啶在小鼠血液和尿液中的代謝產(chǎn)物

孫漢文，孟哲, 2,石志紅,呂運(yùn)開

(1.河北大學(xué)化學(xué)與環(huán)境科學(xué)學(xué)院,河北省分析科學(xué)技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,河北保定　071002；

2.寧夏大學(xué)能源化工重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,寧夏銀川　753200)

UPLC-Q-TOF/MS法鑒定獸藥磺胺二甲嘧啶在小鼠血液和尿液中的代謝產(chǎn)物

孫漢文1，孟哲1, 2,石志紅1,呂運(yùn)開1

(1.河北大學(xué)化學(xué)與環(huán)境科學(xué)學(xué)院,河北省分析科學(xué)技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,河北保定071002；

2.寧夏大學(xué)能源化工重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,寧夏銀川753200)

摘要：采用UPLC-Q-TOF/MS聯(lián)用技術(shù)鑒定了獸藥磺胺二甲嘧啶在小鼠血漿和尿液樣品中的代謝產(chǎn)物.并運(yùn)用Q-TOF質(zhì)譜儀進(jìn)行MS和MS/MS精確質(zhì)量數(shù)的測(cè)定，得到磺胺二甲嘧啶和各個(gè)代謝產(chǎn)物的準(zhǔn)確分子質(zhì)量和化學(xué)組成.依據(jù)精確質(zhì)量數(shù)據(jù)，結(jié)合Metabolynx XS輔助軟件鑒定獸藥磺胺二甲嘧啶在ESI源正離子模式下的代謝產(chǎn)物.研究結(jié)果表明，磺胺二甲嘧啶在小鼠的血樣和尿樣中主要的目標(biāo)代謝途徑為乙?；磻?yīng)，非目標(biāo)代謝途徑主要為甲基化和結(jié)合反應(yīng).

關(guān)鍵詞：獸藥；磺胺二甲嘧啶；UPLC-Q-TOF/MS；代謝產(chǎn)物

DOI：10.3969/j.issn.1000-1565.2015.02.005

中圖分類號(hào)：O65

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：志碼：A

文章編號(hào)：編號(hào)：1000-1565(2015)02-0131-07

收稿日期:2014-10-15

基金項(xiàng)目：河北省應(yīng)用基礎(chǔ)研究計(jì)劃重點(diǎn)基礎(chǔ)研究項(xiàng)目(10967126D)

Abstract:In the present study, the metabolic profile of sulfamethazine in vivo, a veterinary drug, was investigated using ultra-performance liquid chromatography coupled to high resolution quadrupole time-of-flight mass spectrometry to acquire structural information on sulfamethazine metabolites. The corresponding product ion spectra were acquired and interpreted, and structures were proposed. Accurate mass measurement using ESI-Q-TOF/MS was using to determine the elemental composition of metabolites, thereby confirming the proposed structures of these metabolites. This study demonstrated that acetylating metabolic reaction was predominantly observed in mice plasma and urine, including target metabolite N4-Acetylsulfamethazine, subcardinal metabolites come from methylating renction and conjugates reaction.

Identification of metabolites of veterinary drug sulfamethazine in mice

plasma and urine using ultra performance liquid chromatography

coupled to high resolution quadrupole time-of-flight mass spectrometry

SUN Hanwen1, MENG Zhe1,2, SHI Zhihong1, Lü Yunkai1

(1. Key Laboratory of Analytical Science and Technology of Hebei Province,

College of Chemistry and Environmental Science, Hebei University, Baoding 071002, China;

2.Key Laboratory of Energy Chemical Engineering, Ningxia University, Yinchuan 753200, China)

第一作者：孫漢文(1945- )，男，河北魏縣人，河北大學(xué)教授，博士生導(dǎo)師，主要從事光學(xué)分析、分離科學(xué)技術(shù)、環(huán)境分析化學(xué)和農(nóng)獸藥殘留分析研究.E-mail： hanwen@hbu.edu.cn

Key words: veterinary drug; sulfamethazine; UPLC-Q-TOF/MS; metabolite

磺胺類藥物是一類人工合成抗菌藥，廣泛應(yīng)用于預(yù)防和治療細(xì)菌感染性疾病，其中磺胺二甲嘧啶與其他磺胺類藥物一樣，可用作飼料添加劑，以提高奶牛、生豬的抗病能力，提高飼料的轉(zhuǎn)化率和促進(jìn)動(dòng)物的生長發(fā)育[1].獸藥殘留是動(dòng)物用藥普遍存在的問題，而磺胺二甲嘧啶又是所有磺胺中殘留超標(biāo)的主要藥物.許多國家和國際組織制定了磺胺類藥物總和的最大允許殘留限<0.1 mg/kg[2-3].中國和日本等國家規(guī)定牛奶中磺胺二甲嘧啶不得超過0.025 mg/kg和0.01 mg/kg[3].獸藥的使用無疑會(huì)導(dǎo)致原形藥物、代謝產(chǎn)物或雜質(zhì)在動(dòng)物細(xì)胞、組織和器官內(nèi)以及可食性動(dòng)物產(chǎn)品中滯留和蓄積[4].磺胺類藥物的主要代謝物為乙?；前?，在尿中溶解度低，易在腎小管中結(jié)晶，導(dǎo)致對(duì)腎臟的損害[5].

體內(nèi)各組織器官中藥物代謝產(chǎn)物的分析研究，往往會(huì)受到生物樣品中內(nèi)源性物質(zhì)如脂質(zhì)、類固醇、膽紅素、糖類和蛋白質(zhì)等成分的干擾，往往要求在復(fù)雜生物樣品基質(zhì)中進(jìn)行痕量藥物分析.傳統(tǒng)代謝物表征實(shí)驗(yàn)使用液相色譜-放射性流動(dòng)檢驗(yàn)[6]和最新開發(fā)的放射性色譜與質(zhì)譜法結(jié)合用于表征代謝物的技術(shù)[7]，均受獲得放射性標(biāo)記物的制約.隨著現(xiàn)代質(zhì)譜技術(shù)的快速發(fā)展，高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(HPLC-MS)已經(jīng)成為檢測(cè)和鑒定代謝物首選的分析工具.采用三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜進(jìn)行產(chǎn)物離子掃描、中性丟失掃描和前體離子掃描是進(jìn)行目標(biāo)代謝產(chǎn)物篩查的常用手段，而采用離子阱質(zhì)譜進(jìn)行多級(jí)質(zhì)譜分析(MSn)更是確認(rèn)目標(biāo)代謝物結(jié)構(gòu)解析的有力工具[8-9].然而，新型質(zhì)譜技術(shù)的出現(xiàn)，飛行時(shí)間(time-of-flight，TOF)質(zhì)譜和傅里葉變換離子回旋共振質(zhì)譜(FTICR-MS)等，可以獲得準(zhǔn)分子離子和碎片離子的精確分子質(zhì)量和分子組成，更有助于鑒定生物基質(zhì)中可預(yù)測(cè)代謝途徑或不可預(yù)測(cè)代謝途徑產(chǎn)生的代謝物，并且大大縮短了鑒定藥物代謝物的研究時(shí)間.

目前，在缺少對(duì)照品情況下，超高效液相色譜-四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜(UPLC-Q-TOF-MS)聯(lián)用技術(shù)結(jié)合代謝物尋找軟件MetaboLynxTM已經(jīng)用于藥物代謝產(chǎn)物的鑒定[10-12].通過對(duì)含藥樣品與空白樣品的比對(duì)分析，去除所有干擾離子而簡化質(zhì)譜圖，從而能從復(fù)雜生物基質(zhì)中快速檢測(cè)藥物代謝產(chǎn)物.但用于動(dòng)物性食品中殘留獸藥代謝產(chǎn)物的研究尚未見報(bào)道.

本實(shí)驗(yàn)通過收集小鼠灌胃給予磺胺二甲嘧啶獸藥后的血漿和尿液樣品，利用UPLC-Q-TOF/MS聯(lián)用技術(shù)，結(jié)合Masslynx Metabolynx XS輔助軟件，將Q-TOF/MS測(cè)定的準(zhǔn)確質(zhì)量用于鑒定和確認(rèn)磺胺二甲嘧啶獸藥在動(dòng)物體液中的代謝物.通過對(duì)磺胺二甲嘧啶獸藥在動(dòng)物體液中代謝產(chǎn)物的研究，為更好地認(rèn)識(shí)動(dòng)物源性食品中獸藥及其代謝物的殘留提供科學(xué)的依據(jù).

1實(shí)驗(yàn)部分

1.1　實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與樣品處理方法

1.1.1動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法

隨機(jī)選擇健康 ICR小鼠6只，8周齡，雌雄各半，體質(zhì)量(28±5)g.其中1對(duì)雌雄作為空白，另外2對(duì)雌雄進(jìn)行平行實(shí)驗(yàn).

給藥方案：健康小鼠實(shí)驗(yàn)前禁食5 h，自由飲水.灌胃給磺胺二甲嘧啶0.5%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))的KCl生理鹽水混懸液(相當(dāng)于30 mg/kg).給藥后繼續(xù)禁食5 h，自由飲水.每天早晚灌胃給藥各1次，每次1 mL，連續(xù)灌胃4 d.停藥后，收集ICR小鼠新鮮尿樣，于-20 ℃保存.停藥后，禁食8 h后眼眶取血，置含有肝素的試管，6 ℃離心(6 000 r/min，15 min)，取上層血漿，于-20 ℃保存.

1.1.2樣品的處理方法

準(zhǔn)確移取體液樣品(200 μL)于10 mL離心管，加入1 mL酸性甲醇(pH 4.0)，渦旋混均1 min，靜止10 min，6 ℃離心(11 000 r/min，15 min)，將提取液轉(zhuǎn)移至已用3 mL甲醇和3 mL水活化的Oasis HLB固相萃取小柱(3 mL, 60 mg)，待淋洗液流干后，以3 mL甲醇洗脫，收集洗脫液置于50 ℃下氮吹至近干，以甲醇-水(體積比50∶50)溶解， 0.22 μm微孔濾膜過慮，轉(zhuǎn)移至自動(dòng)進(jìn)樣瓶，待UPLC-Q-TOF/MS分析.

1.2　儀器與試劑

超高液相色譜儀(ACQUITY UPLC?Ultra Performance LC，美國waters公司)；四極桿/飛行時(shí)間質(zhì)譜儀(SYNAPT G2TMHDMS，美國waters公司)；MassLynxTM4.1軟件用于數(shù)據(jù)采集及處理；Acquity UPLCTMBEH C18色譜柱(50 mm×2.1 mm，1.7 μm，美國 waters公司)；TGL-16M高速冷凍離心機(jī)(湘儀)；MX-F渦流混合器(2 500 r/min, 美國 SCILOGEX，LLC公司)；SZ-97自動(dòng)三重水蒸餾器(上海亞榮生化儀器廠)；Oasis HLB 固相萃取柱(3 mL, 60 mg, 美國waters公司)；0.22 μm尼龍膜(美國 Waters公司)

磺胺二甲嘧啶及其代謝物N4-乙?；前范奏奏べ徸约幽么骉RC公司，純度均大于98%(質(zhì)量分?jǐn)?shù)).甲醇、乙腈和甲酸(色譜純，迪馬公司)；正己烷(分析純).

標(biāo)準(zhǔn)混合溶液包括10 μg/L的磺胺二甲嘧啶和200 μg/L的代謝物N4-乙?；前范奏奏?

1.3　UPLC色譜條件

Acquity UPLCTMBEH C18色譜柱(50 mm×2.1 mm×1.7 μm)；柱溫40 ℃；進(jìn)樣量5 μL；流動(dòng)相(A)是體積分?jǐn)?shù)0.1%甲酸的水溶液；流動(dòng)相(B)是體積分?jǐn)?shù)0.1%甲酸的甲醇溶液.梯度洗脫條件見表1.

表1　流動(dòng)相梯度洗脫程序

1.4　四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜(Q-TOF/MS)條件

最佳的Q-TOF/MS質(zhì)譜條件:電噴霧離子源(ESI)：正離子模式ESI+，毛細(xì)管電壓3 kV，錐孔電壓35 V；萃取錐孔電壓4 V；脫溶劑氣溫度350 ℃；離子源溫度110 ℃；脫溶劑氣流速650 L/h；錐孔氣流速50 L/h；四極桿采集質(zhì)量數(shù)30～800 u.數(shù)據(jù)采集模式：棒狀；參比溶液：2 μg/L亮氨酸腦啡肽(LE)；采集時(shí)間0.5 s；采集間隔時(shí)間10 s；掃描精確質(zhì)量數(shù)556.2771(ESI+).分辨率>20 000 FWHM.

1.5　代謝產(chǎn)物的鑒定與分析

將磺胺二甲嘧啶可能的Ⅰ相代謝途徑如：還原、氧化、羥化等和可能的Ⅱ相代謝途徑如: 甲基化、乙酰化、磺酸化、葡糖醛酸化、磺酸化葡糖醛酸化等輸入MetaboLynx軟件Metabolite List窗口，同時(shí)定義質(zhì)量缺陷過濾(mass defect filtering，MDF)窗口為50 mu，軟件自動(dòng)根據(jù)采集的數(shù)據(jù)及設(shè)置的處理方法進(jìn)行分析.通過MDF應(yīng)用程序后，大部分內(nèi)源性干擾離子會(huì)被除去，經(jīng)過濾的數(shù)據(jù)有利于對(duì)藥物代謝物離子的鑒定.

2結(jié)果與討論

2.1　UPLC-Q-TOF-MS條件的優(yōu)化

傳統(tǒng)的代謝物表征實(shí)驗(yàn)，常采用反相液相色譜、緩慢的梯度洗脫以及長色譜柱，來確保生物基質(zhì)中極性大于母藥的代謝物的保留及獲得足夠的分離.實(shí)驗(yàn)選用Acquity UPLCTMBEH C18色譜柱(50 mm×2.1 mm，1.7 μm，waters)，由于UPLC優(yōu)越的色譜分辨率和峰容量，大大減少了共洗脫成分的數(shù)目[10-12].磺胺類藥物含有易于和H+結(jié)合的帶有孤對(duì)電子的N或O原子，選擇ESI(+)作為電離模式，以酸性體系為流動(dòng)相，分別考察了體積分?jǐn)?shù)0.1 %甲酸-甲醇和體積分?jǐn)?shù)0.1%甲酸-乙腈流動(dòng)相對(duì)磺胺二甲嘧啶及目標(biāo)代謝物N4-乙?；前范奏奏さ姆蛛x、離子化效率和峰形的影響.與乙腈相比，采用甲醇作為流動(dòng)相時(shí)，更有利于極性更大的代謝物的保留.如圖1給出了在ESI+模式下，50 μg/L磺胺二甲嘧啶及其目標(biāo)代謝物N4-乙?；前范奏奏せ|(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)混合液的總離子流色譜圖(total ion chromatograms，TIC)及提取離子色譜圖(extraction ion chromatograms，EIC).

圖1　在ESI+模式下，磺胺二甲嘧啶及其目標(biāo)代謝物的總離子流色譜及提取離子色譜　Fig.1　TIC and EIC of sulfamethazine and its target metabolite under positive ion mode

2.2　磺胺二甲嘧啶原型藥物裂解規(guī)律解析

由于代謝物的質(zhì)譜圖中通常含有一些和母體化合物相關(guān)的離子碎片，因此首先闡明原型獸藥磺胺二甲嘧啶在ESI源正離子模式下的裂解規(guī)律，為代謝物的結(jié)構(gòu)鑒定提供依據(jù).

在最佳的色譜-質(zhì)譜條件下，增加源內(nèi)碰撞誘導(dǎo)解離能量(collision-induced dissociation，CID)至25 V，獲得磺胺二甲嘧啶的質(zhì)譜圖如圖2.采用ESI-Q-TOF/MSE質(zhì)譜掃描，在低能量區(qū)原獸藥準(zhǔn)分子離子峰[M+H]+對(duì)應(yīng)的準(zhǔn)確分子質(zhì)量為m/z279.092 4，相應(yīng)的化學(xué)式組成為C12H14N4O2S，質(zhì)量誤差為0.6 mu.在高能量區(qū)其相應(yīng)的二級(jí)碎片離子主要有m/z213，204，186，156，124和108，同時(shí)也顯示了少量的[M+Na]+(m/z301)離子峰.通過ESI-Q-TOF/MS測(cè)定了磺胺二甲嘧啶的準(zhǔn)分子離子峰和相應(yīng)碎片的準(zhǔn)確相對(duì)分子質(zhì)量，并且通過準(zhǔn)確相對(duì)分子質(zhì)量數(shù)得到了各個(gè)碎片的化學(xué)式組成和化學(xué)不飽和度(DBE)，結(jié)果列于表2.通過相應(yīng)碎片離子的數(shù)據(jù)，給出了磺胺二甲嘧啶在正離子模式下的裂解途徑，結(jié)果見圖3.這些離子作為診斷離子用于鑒定磺胺二甲嘧啶的代謝物的結(jié)構(gòu).

圖2　在ESI+模式下，源內(nèi)碰撞誘導(dǎo)解離能量至25 V時(shí)獲得磺胺二甲嘧啶的MS/MS　Fig.2　MS/MS spectra of sulfamethazine under positive ion mode and proposed CID 25 V

表2　磺胺二甲嘧啶及其碎片離子的質(zhì)譜信息

圖3　在正離子模式下，磺胺二甲嘧啶裂解機(jī)理　Fig.3　Fragment pathway of sulfamethazine under positive ion mode

采用Metabolynx軟件將UPLC-Q-TOF/MSE采集的MS數(shù)據(jù)和MS/MS數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，該軟件以MDF處理為基礎(chǔ)，用于復(fù)雜生物基質(zhì)中快速檢測(cè)藥物代謝物[10-11].通過與空白樣品比較，在給藥后小鼠的血漿樣品和尿液樣品中均發(fā)現(xiàn)了原型獸藥磺胺二甲嘧啶、目標(biāo)代謝物N4-乙?；前范奏奏ず投鄠€(gè)非目標(biāo)代謝產(chǎn)物，相應(yīng)的主要代謝物的提取離子流色譜圖和原獸藥及目標(biāo)代謝物的提取離子色譜見圖4.通過綜合分析每種代謝產(chǎn)物的保留行為、準(zhǔn)分子離子和碎片離子，推測(cè)出磺胺二甲嘧啶在小鼠的血樣和尿樣中的代謝產(chǎn)物.所檢測(cè)到的母體磺胺二甲嘧啶及其在體液血漿和尿液中代謝產(chǎn)物的相關(guān)信息見表3.

根據(jù)所得原型獸藥磺胺二甲嘧啶、目標(biāo)代謝物N4-乙?；前范奏奏ず投鄠€(gè)非目標(biāo)代謝產(chǎn)物的多個(gè)離子碎片信息(包括精確分子質(zhì)量和元素組成)，以表2給出的磺胺二甲嘧啶特征碎片離子作為診斷離子來推測(cè)磺胺二甲嘧啶在動(dòng)物血樣和尿樣中代謝物的結(jié)構(gòu).

2.3.1原型獸藥M0的鑒定

通過單獨(dú)分析磺胺二甲嘧啶基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)品(圖1)，其母體藥物的保留時(shí)間是5.59 min，因此可以確認(rèn)在血樣和尿樣中保留時(shí)間為5.59 min，且m/z279的峰是未被代謝的母體藥物.然而，在給藥之后的小鼠尿液m/z279的通道中在保留時(shí)間為5.61 min出現(xiàn)了另外一個(gè)色譜峰，Q-TOF質(zhì)譜測(cè)定可知其精確分子質(zhì)量為279.093 6(2.0 mu)，相應(yīng)的化學(xué)式C12H14N4O2S，這與磺胺二甲嘧啶的質(zhì)譜信息完全一樣.在分析尿樣中代謝物M4時(shí)，發(fā)現(xiàn)在代謝物M4的提取通道中同時(shí)共存保留時(shí)間為5.61 min且m/z279的峰，因此此峰被推斷為II相結(jié)合代謝物M4的源內(nèi)裂解造成的.

圖4　磺胺二甲嘧啶在小鼠血漿和尿液樣品中主要代謝產(chǎn)物的色譜圖和原獸藥磺胺二甲嘧啶及目標(biāo)代謝物N4-乙酰磺胺二甲嘧啶的提取離子色譜　Fig.4　Metabolites profile of sulfamethazine in mice plasma and urine, and extraction ion chromatogram of sulfamethazine and its target metabolite N4-acltysulfamethazine.

獸藥樣品代謝物反應(yīng)化學(xué)式精確分子質(zhì)量(m/z)誤差mu保留時(shí)間/min備注磺胺二甲嘧啶C12H14N4O2Sm/z279.0916血漿血漿M1→去甲基化C11H12N4O2S265.07691.04.81非目標(biāo)MN→乙?；疌14H16N4O3S321.1010-1.15.86目標(biāo)MN→乙?；疌14H16N4O3S321.1004-1.75.99目標(biāo)M2→去甲基化+2×羥化-HNC11H11N3O4S282.0537-1.16.35非目標(biāo)M3→2×羥化C12H14N4O4S311.0809-0.57.28非目標(biāo)尿液M1→去甲基化-NNC11H16N2O5257.1127-1.01.66非目標(biāo)M2→醇脫水-HNC12H11N3OS246.07474.64.52非目標(biāo)M3→3×羥基化-HNC12H13N3O5S312.06620.85.62非目標(biāo)MN→乙?；疌14H16N4O3S321.10270.65.82目標(biāo)MN→乙酰化C14H16N4O3S321.1018-0.36.01目標(biāo)M4→谷胱甘肽結(jié)合物-C6H7N3C16H22N4O7S2447.0917-9.16.67非目標(biāo)

2.3.2目標(biāo)代謝物MN的鑒定

通過分析目標(biāo)代謝物N4-乙?；前范奏奏せ|(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)品(圖1)，其保留時(shí)間是5.99 min，因此可以確認(rèn)在血樣和尿樣中保留時(shí)間為5.9 min，且m/z321的峰是磺胺二甲嘧啶乙?；x產(chǎn)物N4-乙?；前范奏奏?但是，在給藥之后的小鼠血樣和尿液m/z321的通道中同時(shí)出現(xiàn)保留時(shí)間為5.8 min的另外一個(gè)色譜峰，Q-TOF質(zhì)譜測(cè)定可知其精確分子質(zhì)量為321.102 7 (0.6 mu)，相應(yīng)的化學(xué)式C14H16N4O3S，這與N4-乙酰磺胺二甲嘧啶的質(zhì)譜信息完全一樣.實(shí)驗(yàn)表明，N4-乙酰磺胺二甲嘧啶在體內(nèi)代謝存在異構(gòu)體現(xiàn)象.

2.3.3非目標(biāo)代謝產(chǎn)物的鑒定

在血樣和尿樣中發(fā)現(xiàn)了一類羥基化代謝物，如血樣中M2m/z282和M3m/z311，尿樣中M3m/z312，其二級(jí)質(zhì)譜中均顯示磺胺二甲嘧啶的主要碎片m/z108，124和156.表明這類代謝物多為磺胺二甲嘧啶母體的羥基化代謝產(chǎn)物.相對(duì)于血樣的代謝物，尿樣中的代謝物更復(fù)雜，代謝物M4在給藥后小鼠的尿液中被發(fā)現(xiàn).代謝物M4的[M+H]+為m/z447，保留時(shí)間為6.67 min.在M4的二級(jí)質(zhì)譜中發(fā)現(xiàn)特征中性丟失308 u(谷胱甘肽)和母體的特征碎片m/z156和124，因此判斷M4為母體碎片的谷胱甘肽結(jié)合物.

3結(jié)論

本研究采用UPLC-Q-TOF/MS聯(lián)用技術(shù)，運(yùn)用Q-TOF質(zhì)譜儀進(jìn)行MS和MS/MS精確質(zhì)量數(shù)的測(cè)定，得到相應(yīng)碎片離子的分子式.依據(jù)精確質(zhì)量數(shù)據(jù)，結(jié)合Metabolynx XS輔助軟件篩選出獸藥磺胺二甲嘧啶在小鼠血樣和尿樣的代謝產(chǎn)物.在血漿樣品中發(fā)現(xiàn)3個(gè)I相代謝物和1個(gè)II相代謝物；在尿液樣品中發(fā)現(xiàn)3個(gè)I相代謝物和2個(gè)II相代謝物.每個(gè)代謝物中至少含有2個(gè)碎片離子與母藥的碎片離子的信息相同，同時(shí)磺胺二甲嘧啶在體內(nèi)代謝生成的目標(biāo)乙酰代謝物存在異構(gòu)現(xiàn)象.通過對(duì)雌性小鼠和雄性小鼠血樣和尿樣中代謝產(chǎn)物的對(duì)比分析，沒有顯出差別.

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(責(zé)任編輯：梁俊紅)