殼寡糖對幼建鯉生長性能、脂肪代謝、非特異性免疫功能和腸道健康的影響

黃鑫瑋 楊莎莎 劉 毅 范 濤 明 偉 林榮楠 溫安祥（四川農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，雅安625014）

?

殼寡糖對幼建鯉生長性能、脂肪代謝、非特異性免疫功能和腸道健康的影響

黃鑫瑋 楊莎莎 劉 毅 范 濤 明 偉 林榮楠 溫安祥?
（四川農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，雅安625014）

摘 要：為探究殼寡糖對幼建鯉生長性能、脂肪代謝、非特異性免疫功能和腸道健康的影響，選擇初始體重為（8．78±0．38）g的健康幼建鯉225尾，隨機(jī)分為5組（每組設(shè)3個重復(fù)，每個重復(fù)15尾），分別飼喂殼寡糖添加量為0（對照組）、0．30%、0．60%、0．90%和1．50%的飼料80 d。結(jié)果表明：與對照組相比，各殼寡糖添加組幼建鯉的特定生長率和增重率均有所升高（P＞0．05）；0．6%組血漿甘油三酯和總膽固醇含量顯著低于其余各組（P＜0．05），而血漿高密度脂蛋白膽固醇含量則顯著高于其余各組（P＜0．05）；各殼寡糖添加組血漿丙二醛含量顯著低于對照組（P＜0．05），0．6%組血漿總抗氧化能力顯著高于對照組（P＜0．05）；各殼寡糖添加組白細(xì)胞吞噬率、腸道皺襞密度顯著高于對照組（P＜0．05），0．6%和0．9%組腸壁厚度顯著大于對照組（P＜0．05）；各殼寡糖添加組腸道大腸桿菌數(shù)量均顯著低于對照組（P＜0．05），0．6%和0．9%組腸道雙歧桿菌和大腸桿菌數(shù)量顯著高于對照組（P＜0．05）。由結(jié)果可知，殼寡糖可增強(qiáng)幼建鯉的生長性能和非特異性免疫功能，調(diào)節(jié)脂肪代謝；通過回歸曲線的X極值分析得出，當(dāng)飼料中殼寡糖的添加量在0．86%～1．09%之間時，對幼建鯉的非特異性免疫及腸道健康的保護(hù)性最佳。

關(guān)鍵詞：殼寡糖；幼建鯉；生長；脂肪代謝；免疫；腸道

殼寡糖（chitosan oligosaccharides，COS）是甲殼質(zhì)脫乙?；漠a(chǎn)物殼聚糖經(jīng)降解獲得，是由2～10個氨基葡萄糖通過β－1，4糖苷鍵連接而成的低聚糖，也是自然界中大量存在的堿性氨基多糖，具有水溶性好、易吸收的特點［1］。殼寡糖具有提高免疫力、抗腫瘤、調(diào)控脂肪代謝、調(diào)節(jié)腸道生長情況以及消化道微生物區(qū)系等作用，已廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥以及畜牧飼料方面，但在水產(chǎn)飼料中的應(yīng)用卻少見報道。為此，本試驗通過在飼料中添加不同劑量的殼寡糖，研究其對幼建鯉（Cypri?nus carpio var．Jian）生長性能、脂肪代謝相關(guān)指標(biāo)、非特異性免疫指標(biāo)、腸道組織結(jié)構(gòu)及腸道菌落的影響，探討殼寡糖影響鯉魚生長性能和免疫抗病的作用機(jī)制，為殼寡糖在水產(chǎn)動物飼料中的運用提供理論依據(jù)。

1　材料與方法

1．1 試驗設(shè)計與飼料

基礎(chǔ)飼料組成及營養(yǎng)水平見表1。在基礎(chǔ)飼料中分別添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0（對照組）、0．30%、0．60%、0．90%和1．50%的殼寡糖（由青島云宙生物技術(shù)有限公司提供，脫乙酰度大于90%，殼寡糖含量大于93%，pH為7．0～9．0），配制成5種試驗飼料，并將上述試驗飼料制成直徑為2 mm的顆粒飼料。

表1　基礎(chǔ)飼料組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干物質(zhì)）Table 1　Composition and nutrient levels of the basal diet（air?dry basis）　%

1．2 試驗動物及飼養(yǎng)管理

試驗用幼建鯉購于四川通威魚種養(yǎng)殖基地，試驗開始前將健康幼建鯉消毒后暫養(yǎng)2周，然后選取健壯幼建鯉225尾［初始體重為（8．78± 0．38）g］，隨機(jī)分為5組，每組設(shè)3個重復(fù)，每個重復(fù)15尾，飼養(yǎng)于60 cm×45 cm×45 cm的玻璃缸中，24 h充氧，每天投喂2次（08：30和17：00各1次）。按魚體重的5%投喂，投喂量根據(jù)實際情況適時調(diào)整。試驗期為80 d。每天定時清除缸內(nèi)幼建鯉的排泄物和殘餌，控制水溫在26～28℃，pH 7～8，溶氧濃度保持在7 mg／L。記錄試驗期內(nèi)幼建鯉攝食情況和死亡數(shù)。

1．3 樣品采集

試驗結(jié)束后，停食24 h后，每個重復(fù)隨機(jī)挑選10尾作為測定樣本。測定體重和體長后尾靜脈取血，置于抗凝管中。血液分為2份，一份用于白細(xì)胞吞噬率的測定，另一份于4℃條件下3 000 r／min離心10 min，制備血漿，測定總膽固醇（TCH）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL?C）、丙二醛（MDA）含量和總抗氧化能力（T?AOC）。在每個重復(fù)的測定樣本中，隨機(jī)挑選4尾進(jìn)行解剖，取出腸道組織，用生理鹽水沖洗腸道內(nèi)容物，做菌落檢測，然后將腸道組織迅速浸泡于10%的中性甲醛溶液中，用于組織切片。

1．4 指標(biāo)測定

1．4．1 生長指標(biāo)測定

增重率（WGR，%）＝100×（Wt－W0）／W0。

特定生長率（SGR，%／d）＝100×（lnWt－lnW0）／d。

存活率（SR，%）＝100×Nt／N0。

肥滿度（CF，%）＝100×Wt／L3。

式中：Wt為末體重（g）；W0為初體重（g）；d為飼養(yǎng)天數(shù)（d）；Nt為成活尾數(shù)；N0為初始尾數(shù)；L為魚體長度（cm）。

1．4．2 脂肪代謝相關(guān)指標(biāo)測定

血漿TCH、TG和HDL?C含量，按南京建成生物工程研究所試劑盒說明書方法，用酶標(biāo)儀測定。

1．4．3 非特異性免疫相關(guān)指標(biāo)的測定

1．4．3．1 白細(xì)胞吞噬能力的測定

參照王軍等［2］的方法改進(jìn)后進(jìn)行測定，具體如下：在0．1 mL的血液中滴加20 μL的致敏酵母，37℃溫浴，2 000 r／min離心后制成白細(xì)胞血涂片，吉姆薩染色，油鏡下觀察，隨機(jī)計數(shù)100個白細(xì)胞中有吞噬現(xiàn)象的細(xì)胞數(shù)，計算白細(xì)胞吞噬率。

1．4．3．2 血漿中抗氧化指標(biāo)的測定

血漿T?AOC和MDA含量，按南京建成生物工程研究所試劑盒說明書方法，用Unico－2000型分光光度計測定。

1．4．4 腸道的組織學(xué)觀察以及腸道菌群檢測

1．4．4．1 前、中、后腸組織學(xué)觀察

將中性甲醛固定液中的腸道組織取出，依次經(jīng)過沖洗、逐級脫水、透明、浸蠟、包埋后切片機(jī)連續(xù)切片（厚度為6 μm），烘干、脫蠟后復(fù)水，蘇木精－伊紅（HE）染色，中性樹脂封片。采用Olym?pus?DP70顯微鏡觀察并拍照。

每組取6張腸道切片進(jìn)行腸皺襞高度、腸皺襞密度（腸上皮細(xì)胞表面伸出的細(xì)長指狀突起的個數(shù)）和腸壁厚度的測量，觀察腸道發(fā)育情況。

1．4．4．2 腸道菌群檢測

腸道微生物的測定采用點種法［3］。將腸道內(nèi)容物取出稱取0．1 g后用0．9 mL生理鹽水混勻，取上清液10倍系列梯度稀釋至10－6，然后用微量進(jìn)樣器取稀釋梯度樣品100 μL，接種于各種培養(yǎng)基［大腸桿菌用伊紅美蘭瓊脂（EMB）培養(yǎng)基，乳酸桿菌用MRS瓊脂（MRSA）培養(yǎng)基，雙歧桿菌用MRS＋X?gal瓊脂培養(yǎng)基］中，每個稀釋梯度做4個平行。在37℃下培養(yǎng)48 h，培養(yǎng)結(jié)束后選取菌落清晰分散的進(jìn)行計數(shù)。菌群數(shù)量以每克腸道內(nèi)容物所含細(xì)菌群落總數(shù)的對數(shù)［lg（CFU／g）］表示。

1．5 數(shù)據(jù)處理

試驗結(jié)果采用SPSS 17．00進(jìn)行單因素方差分析（one?way ANOVA），并采用Duncan氏法進(jìn)行組間的多重比較，除SR外的所有數(shù)據(jù)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差來表示，P＜0．05表示差異顯著。線性回歸方程通過曲線估計進(jìn)行建立和分析，并得出R2和X極值。

2　結(jié)果與分析

2．1 殼寡糖對幼建鯉生長性能的影響

如表2所示，與對照組相比，添加殼寡糖后幼魚的WGR、SGR和SR均有所提高，但均無顯著差異（P＞0．05）；隨殼寡糖添加量的增加，WGR和SGR呈先上升后下降的趨勢，但均高于對照組。各殼寡糖添加組的CF與對照組相比亦無顯著差異（P＞0．05）。

表2　殼寡糖對幼建鯉生長性能的影響Table 2　Effects of COS on growth performance of juvenile Jian carp（Cyprinus carpio var．Jian）

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同字母表示差異顯著（P＜0．05）。下表同。

Values in the same row with different letter superscripts were significantly different（P＜0．05）．The same as below．

2．2 殼寡糖對幼建鯉脂肪代謝相關(guān)指標(biāo)的影響

如表3所示，0．6%組與其他各組比較，血漿中TCH含量顯著降低（P＜0．05），其他殼寡糖添加組血漿中TCH含量與對照組比較均有所降低，但差異不顯著（P＞0．05）；0．6%組血漿中TG含量顯著低于其他各組（P＜0．05），其他殼寡糖添加組血漿中TG含量較對照組均有所降低，但未達(dá)到顯著水平（P＞0．05）；與對照組比較，各殼寡糖添加組血漿中HDL?C含量均有所升高，其中0．6%和0．9%組顯著高于對照組（P＜0．05），0．3%和1．5%組較對照組差異不顯著（P＞0．05）。

表3　殼寡糖對幼建鯉脂肪代謝相關(guān)指標(biāo)的影響Table 3　Effects of COS on lipid metabolism related indices of juvenile Jian carp（Cyprinus carpio var．Jian）　mmol／L

2．3 殼寡糖對幼建鯉非特異性免疫指標(biāo)的影響

如表4所示，各殼寡糖添加組的白細(xì)胞吞噬率均顯著高于對照組（P＜0．05）；各殼寡糖添加組血漿中T?AOC較對照組均有所提高，但僅0．6%組與對照組的差異達(dá)顯著水平（P＜0．05）；各殼寡糖添加組血漿中MDA含量均顯著低于對照組（P＜0．05）。

表4　殼寡糖對幼建鯉非特異性免疫指標(biāo)的影響Table 4　Effects of COS on non?specific immune indices of juvenile Jian carp（Cyprinus carpio var．Jian）

2．4 殼寡糖對幼建鯉腸道組織結(jié)構(gòu)的影響

如表5所示，各殼寡糖添加組的腸皺襞密度均顯著大于對照組（P＜0．05），但各殼寡糖添加組之間差異不顯著（P＞0．05）；各殼寡糖添加組的腸皺襞高度均高于對照組，但差異不顯著（P＞0．05）；此外，0．6%和0．9%組的腸壁厚度顯著大于對照組（P＜0．05）。

如圖1所示，添加殼寡糖后幼魚腸皺襞上黏膜脫落、斷裂現(xiàn)象較對照組減少。如圖2所示，各殼聚糖添加組皺襞內(nèi)肥大細(xì)胞數(shù)量較對照組有明顯的增加，杯狀細(xì)胞緊密排列在皺襞外緣下，結(jié)構(gòu)完整。從整體上來看，添加殼寡糖后腸道組織的生長發(fā)育情況較對照組好，皺襞排列緊密，高度有所增加。

表5　殼寡糖對幼建鯉腸道結(jié)構(gòu)的影響Table 5　Effects of COS on intestinal structure of juvenile Jian carp（Cyprinus carpio var．Jian）

2．5 殼寡糖對幼建鯉腸道菌群的影響

如表6所示，添加殼寡糖后幼魚腸道內(nèi)雙歧桿菌數(shù)量增加，其中0．6%、0．9%和1．5%組幼魚腸道內(nèi)雙歧桿菌數(shù)量顯著高于對照組（P＜0．05）；各殼寡糖添加組幼魚腸道內(nèi)大腸桿菌數(shù)量均顯著低于對照組（P＜0．05）；0．6%和0．9%組幼魚腸道內(nèi)乳酸桿菌數(shù)量顯著高于對照組（P＜0．05），其他殼寡糖添加組較對照組有所提高，但差異均不顯著（P＞0．05）。

2．6 回歸分析

回歸方程中R2越大，回歸曲線的可信度越高。通過分析回歸曲線中R2大于0．9的測試指標(biāo)，求出曲線的X極值，該值即為對應(yīng)指標(biāo)的最適添加量。如表7所示，飼料中殼寡糖添加量為1．01%時，白細(xì)胞吞噬率最高；飼料中殼寡糖添加量為0．93%時，血漿中MDA含量最低；飼料中殼寡糖添加量為0．86%時，腸皺襞密度最大；飼料中殼寡糖添加量分別為0．97%和0．88%、1．09%時，雙歧桿菌和乳酸桿菌、大腸桿菌的數(shù)量最佳。如前所述，幼建鯉非特異性免疫和腸道免疫相關(guān)指標(biāo)的最適添加量均被包含在0．86%～1．09%之間。

圖1　幼建鯉腸道顯微鏡結(jié)構(gòu)觀察（HE染色，200×）Fig．1　The observed of intestinal microscopic structure of juvenile Jian carp（Cyprinus carpio var．Jian）（HE?staining，200×）

圖2　幼建鯉腸道顯微鏡結(jié)構(gòu)觀察（HE染色，400×）Fig．2　The observed of intestinal microscopic structure of juvenile Jian carp（Cyprinus carpio var．Jian）（HE?staining，400×）

表6　殼寡糖對幼建鯉腸道菌群的影響Table 6　Effects of COS on intestinal bacteria of juvenile Jian carp（Cyprinus carpio var．Jian）lg（CFU／g）

表7　回歸分析Table 7　Regression analysis

3　討 論

3．1 殼寡糖對幼建鯉生長性能的影響

寡糖在水產(chǎn)飼料中作為添加劑早有報道。Refstie等［4］研究發(fā)現(xiàn)，投喂寡糖后的大西洋鮭生長情況明顯優(yōu)于未添加寡糖的對照組，增重率有顯著提高。于艷梅等［5］在飼料中分別添加0．1%、0．2%、和0．3%的甘露寡糖，結(jié)果表明，甘露寡糖提高了試驗組黃顙魚的增重率，添加量為0．2%組的效果最佳。孫立威等［6］在羅非魚飼料中添加不同量的殼寡糖并飼養(yǎng)10周，其結(jié)果顯示添加殼寡糖的各組的增重率、特定生長率等情況均優(yōu)于未添加殼寡糖的對照組，添加量為0．5%時效果最佳。本試驗結(jié)果表明，在飼料中添加殼寡糖后，幼建鯉的增重率和特定生長率均得到了提高，但各組的增重倍數(shù)較低，這可能與養(yǎng)殖密度及日投喂次數(shù)有關(guān)。上述結(jié)果說明，添加殼寡糖等寡糖類物質(zhì)對魚類的生長有促進(jìn)作用，其原因可能是殼寡糖能促進(jìn)礦物質(zhì)元素的吸收，殼寡糖分子上含有氨基（—NH2）和羥基（—OH）等活性基團(tuán)，很容易與礦物質(zhì)元素結(jié)合后在小腸被吸收［7］。殼寡糖還能夠使腸道絨毛密度和高度增加，加大腸道內(nèi)吸收面積，進(jìn)而促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收［8］；同時，殼寡糖還具有改善腸道菌群的作用，保護(hù)腸黏膜的完整性，進(jìn)而提高飼料的利用率［9］。

3．2 殼寡糖對幼建鯉脂肪代謝相關(guān)指標(biāo)的影響

動物血液是營養(yǎng)和代謝物質(zhì)的重要載體，血液中TG和TCH含量的升高會危害動物健康［10］。研究發(fā)現(xiàn)，殼寡糖可以降低動物血液中TG和TCH的含量，進(jìn)而調(diào)節(jié)脂肪代謝，降低體內(nèi)脂肪沉積［11］。劉冰等［12］在對正常大鼠和糖尿病大鼠的研究中發(fā)現(xiàn)，添加殼寡糖后的試驗大鼠血清中TG 和TCH的含量顯著低于正常對照組和糖尿病對照組。王際英等［13］在對星斑川鰈幼魚的研究中發(fā)現(xiàn)，添加殼寡糖后各組幼魚血清中TG和TCH的含量均低于對照組。本試驗結(jié)果表明，在飼料中添加殼寡糖后，幼建鯉血漿中TG和TCH的含量較對照組也有所降低，血漿中HDL?C的含量得到了提高，且在0．6%組有顯著的改善。HDL?C被認(rèn)為是“好”膽固醇，它是膽固醇由組織細(xì)胞運輸回肝臟的主要工具，可將肝外的自由膽固醇逆向運輸回肝臟代謝，調(diào)節(jié)肝臟和血液中脂肪的平衡，清除血液和組織細(xì)胞中過剩的膽固醇。馬利等［14］在飼料中添加殼寡糖飼喂南美白對蝦，8周后發(fā)現(xiàn)，殼寡糖可以有效地降低南美白對蝦血清中TG和TCH的含量，提高HDL?C的含量，從而促進(jìn)脂肪代謝。

3．3 殼寡糖對幼建鯉非特異性免疫指標(biāo)的影響

非特異性免疫是魚類主要的免疫系統(tǒng)。白細(xì)胞吞噬能力、血漿T?AOC和MDA含量都是衡量魚類非特異性免疫的重要指標(biāo)。白細(xì)胞的主要功能是吞噬細(xì)菌和異物，在非特異性免疫中起到重要的作用。T?AOC反映機(jī)體防御體系的抗氧化能力的強(qiáng)弱，其與健康程度存在著密切聯(lián)系。MDA是生物體內(nèi)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的氧化終產(chǎn)物，脂質(zhì)過氧化會引起細(xì)胞損傷，因此血漿中MDA的含量可以間接地反映機(jī)體內(nèi)細(xì)胞的損傷程度。本試驗結(jié)果表明，各殼寡糖添加組幼魚的白細(xì)胞吞噬率與對照組相比均有顯著提高；血漿中T?AOC含量均高于對照組，且在0．6%組有顯著的提高；血漿中MDA含量與對照組比較均有顯著降低。王樹芹等［15］在飼料中添加殼聚糖后飼喂異育銀鯽，發(fā)現(xiàn)殼寡糖可以提高白細(xì)胞吞噬能力。張國啟等［16］研究發(fā)現(xiàn)，殼寡糖可以提高黃河鯉血清T?AOC，同時抑制MDA的產(chǎn)生。殼寡糖能提升魚類的非特異性免疫能力，可能是因為殼寡糖具有清除羥自由基（·OH）的能力，從而提升魚體的抗氧化能力，保護(hù)免疫器官，進(jìn)而加強(qiáng)免疫作用的效果［17］；此外，殼寡糖能激活巨噬細(xì)胞釋放白細(xì)胞介素－1 （IL?1），提升巨噬細(xì)胞的活性［18］。巨噬細(xì)胞源自單核細(xì)胞，單核細(xì)胞作為白細(xì)胞的種類之一，其吞噬活性的提升可能是在某些因子的刺激下發(fā)生的。

3．4 殼寡糖對幼建鯉腸道健康的影響

魚類的腸道是消化與吸收營養(yǎng)物質(zhì)的主要場所，也是魚類最大的黏膜免疫器官和最脆弱的免疫屏障［19］。腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的正常是營養(yǎng)物質(zhì)吸收和腸道免疫正常的基礎(chǔ)。殼寡糖是由N－乙酰－D－葡萄糖胺以β－1，4糖苷鍵結(jié)合而成的多糖，可以不被消化酶和胃酸降解而被腸道上皮細(xì)胞直接吸收［20］，促進(jìn)腸道生長發(fā)育。腸道菌落的變化對腸道結(jié)構(gòu)具有重要的影響。殼寡糖分子中的游離氨基帶正電荷，它能抑制微生物和真菌的生長。殼寡糖中含有雙歧桿菌促生長因子，對雙歧桿菌的生長具有促進(jìn)作用，可以增加腸道內(nèi)有益菌群數(shù)量，有效地保護(hù)腸道黏膜。王秀武等［21］在對肉雞生產(chǎn)性能的研究中指出，添加殼寡糖可改變?nèi)怆u的腸道結(jié)構(gòu)。連國琦等［22］在對環(huán)江香豬的研究中發(fā)現(xiàn)，添加殼寡糖對大腸桿菌、鏈球菌等腸道有害菌有明顯的抑制作用，而對雙歧桿菌和乳酸桿菌有明顯的促進(jìn)作用。蔡雪峰等［23］報道了殼寡糖對虹鱒腸道菌群的影響，研究發(fā)現(xiàn)添加殼寡糖后腸道菌群總數(shù)沒有變化，但是菌群的種類發(fā)生了明顯的變化，能夠利用殼寡糖作為唯一碳源的菌株種類，其數(shù)量均多于對照組。本試驗結(jié)果表明，添加殼寡糖后幼魚腸道菌落的分布有了明顯的變化，有益菌落雙歧桿菌和乳酸桿菌的數(shù)量較對照組都有所增加，其中0．6%和0．9%組效果顯著，大腸桿菌的數(shù)量均顯著低于對照組。雙歧桿菌可以黏附在腸黏膜細(xì)胞表面，對腸黏膜起到保護(hù)作用，同時，雙歧桿菌釋放B族維生素，增強(qiáng)腸道蠕動和腸黏膜表面對蛋白質(zhì)的吸收能力，促進(jìn)腸道的生長發(fā)育［24］。添加殼寡糖后腸道內(nèi)皺襞高度、密度、皺襞肥大細(xì)胞和杯狀細(xì)胞數(shù)量都優(yōu)于對照組，說明腸道菌落的組成與腸道的生長發(fā)育情況以及完整性有一定的相關(guān)性。其原因可能是因為殼寡糖促進(jìn)了雙歧桿菌的生長繁殖，形成優(yōu)勢菌群，產(chǎn)生了短鏈脂肪酸，降低了腸道內(nèi)的pH，從而抑制了腸道內(nèi)其他病原菌的生長［25］。

4　結(jié) 論

飼料中添加殼寡糖可提高幼建鯉的生長性能和非特異性免疫功能，調(diào)節(jié)脂肪代謝。通過回歸曲線的X極值分析得出，當(dāng)飼料中殼寡糖的添加量在0．86%～1．09%時，對幼建鯉的非特異性免疫及腸道健康的保護(hù)性最佳。

參考文獻(xiàn)：

［1］ 徐魏，谷薇薇，于勇，等．功能性殼寡糖的生物學(xué)活性［J］．生命的化學(xué)，2012，32（5）：460－463．

［2］ 王軍，鄢慶枇，蘇永全，等．免疫添加物對大黃魚血液白細(xì)胞數(shù)量及其吞噬功能的影響［J］．海洋科學(xué)，2001，25（9）：44－46．

［3］ 莫照蘭，俞勇，李會榮，等．弧菌拮抗菌的篩選［J］．青島海洋大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版，2001，31（2）：225－231．

［4］ REFSTIE S，STOREBAKKEN T，ROEM A J．Feed consumption and conversion in Atlantic salmon（Sal?mo salar）fed diets with fish meal，extracted soybean meal or soybean meal with reduced content of oligo?saccharides，trypsin inhibitors，lectins and soya anti?gens［J］．Aquaculture，1998，162（3／4）：301－312．

［5］ 于艷梅，吳志新，陳孝煊，等．魔芋甘露寡糖對黃顙魚非特異性免疫功能及生長的影響［J］．華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2010，29（3）：351－355．

［6］ 孫立威，文華，蔣明，等．殼寡糖對吉富羅非魚幼魚生長性能、非特異性免疫及血液學(xué)指標(biāo)的影響［J］．廣東海洋大學(xué)學(xué)報，2011，31（3）：43－49．

［7］ 郭芳寧，李春超，金黎明，等．殼寡糖鐵配合物的合成及抗氧化作用［J］．食品工業(yè)科技，2013，34（20）：119－121．

［8］ LI X，PIAO X，KIM S，et al．Effects of chito?oligosac?charide supplementation on performance，nutrient di?gestibility，and serum composition in broiler chickens ［J］．Poultry Science，2007，86（6）：1107－1114．

［9］ HUANG R L，YIN Y L，WU G Y，et al．Effect of diet?ary oligochitosan supplementation on ileal digestibility of nutrients and performance in broilers［J］．Poultry science，2005，84（9）：1383－1388．

［10］ KIM K N，JOO E S，KIM K I，et al．Effect of chitosan oligosaccharides on cholesterol level and antioxidant enzyme activities in hypercholesterolemic rat［J］．Jour?nal of the Korean Society of Food Science and Nutri?tion，2005，34（1）：26－41．

［11］ 占今舜，胡金杰，林彬彬，等．殼寡糖的生物學(xué)功能及其在動物生產(chǎn)中的應(yīng)用［J］．中國飼料，2012（4）：33－36．

［12］ 劉冰，劉萬順，韓寶芹，等．殼寡糖及其衍生物對實驗性糖尿病大鼠調(diào)節(jié)血脂和抗氧化作用［J］．山東大學(xué)學(xué)報：理學(xué)版，2006，41（4）：158－163．

［13］ 王際英，蔣錦坤，張利民，等．殼聚糖對星斑川鰈幼魚生長、脂肪含量及抗氧化能力的影響［J］．中國農(nóng)學(xué)通報，2013，29（8）：64－70．

［14］ 馬利，曹俊明，吳建開，等．殼寡糖對南美白對蝦生長和血清生化指標(biāo)的影響［J］．淡水漁業(yè)，2006，36 （2）：6－8．

［15］ 王樹芹，周洪琪．殼聚糖對異育銀鯽溶菌酶和白細(xì)胞吞噬活性的影響［J］．上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報，2004，13 （2）：121－125．

［16］ 張國啟．殼寡糖對黃河鯉生產(chǎn)性能、免疫指標(biāo)和腸道菌群影響的研究［D］．碩士學(xué)位論文．鄭州：河南工業(yè)大學(xué)，2012．

［17］ 竺國芳，趙魯杭．幾丁寡糖和殼寡糖的研究進(jìn)展［J］．中國海洋藥物，2000，19（1）：43－46

［18］ SUZUKI K，MIKAMI T，OKAWA Y，et al．Antitumor effect of hexa?N?acetylchitohexaose and chitohexaose ［J］．Carbohydrate Research，1986，151：403－408．

［19］ 吳莉芳，邢秀蘋，賴紅娥，等．大豆抗原蛋白Glycinin對鯉稚魚和幼魚腸道組織的影響［J］．西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版，2014，42（10）：7－14．

［20］ 張麗．殼寡糖的制備及對動物營養(yǎng)功能的研究進(jìn)展［J］．山東畜牧獸醫(yī)，2005（6）：43－44．

［21］ 王秀武，林欣，張麗，等．殼寡糖對肉仔雞生產(chǎn)性能、小腸組織結(jié)構(gòu)和肌組織礦物質(zhì)元素含量的影響［J］．中國糧油學(xué)報，2005，20（2）：83－88．

［22］ 連國琦，周笑犁，孔祥峰，等．殼寡糖對環(huán)江香豬生化參數(shù)及腸道菌群組成的影響［J］．天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2012，24（11）：1605－1609．

［23］ 蔡雪峰，羅琳，戰(zhàn)文斌，等．殼寡糖對虹鱒幼魚腸道菌群影響的研究［J］．中國海洋大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版，2006，36（4）：606－610．

［24］ 杜昱光，白雪芳，虞星矩，等．寡聚糖類物質(zhì)生理活性的研究［J］．中國生化藥物雜志，1997，18（5）：268－271．

［25］ VAN DER WERF M J，VENEMA K．Bifidobacteria：genetic modification and the study of their role in the colon［J］．Journal of Agricultural and Food Chemistry，2001，49（1）：378－383．

Effect of Dietary Chitosan on Growth Performance，Lipid Metabolism，Non?Specific Immune Function and Intestinal Health of Juvenile Jian Carp（Cyprinus carpio var．Jian）

HUANG Xinwei YANG Shasha LIU Yi FAN Tao MING Wei LIN Rongnan WEN Anxiang

?

（責(zé)任編輯 菅景穎）

（College of Life Sciences，Sichuan Agricultural University，Ya’an 625014，China）

Abstract：This experiment was conducted to investigate the effects of chitosan oligosaccharides on growth per?formance，lipid metabolism and non?specific immune function and intestinal health of juvenile Jian carp（Cyp?rinus carpio var．Jian）．A total of 225 juvenile Jian carp with an average body weight of（8．78±0．38）g were randomly divided in 5 groups with 3 replicates per group and 15 fish per replicate．The fish in the 5 groups were fed the diets supplemented with 0（control group），0．3%，0．6%，0．9%and 1．5%of chitosan oligosac?charides for 80 days，respectively．The results showed as follows：compared with the control group，specific growth rate and weight gain rate in different chitosan oligosaccharides groups were increased（P＞0．05）；plas?ma triglyceride and total cholesterol contents of 0．6%group were significantly lower than those of other groups （P＜0．05），while plasma high density lipoprotein cholesterol content was significantly higher than that of other groups（P＜0．05）；plasma malondialdehyde content of each chitosan oligosaccharides group was significantly lower than that of control group（P＜0．05），and plasma total antioxidant capacity of 0．6%group was signifi?cantly higher than that of control group（P＜0．05）；the phagocytic rate of leukocyte and intestinal fold density of each chitosan oligosaccharides group were significantly higher than those of control group（P＜0．05），and intestinal wall thickness of 0．6%and 0．9%groups was significantly bigger than that of control group（P＜0．05）；the amount of Escherichia coli in intestine of chitosan oligosaccharides group was significantly lower than that of control group（P＜0．05），while the amounts of Bifidobacterium and Lactobacillus in intestine of 0．6%and 0．9%groups were significantly higher than those of control group（P＜0．05）．Collectively，these findings suggest that the chitosan oligosaccharides can improve growth performance and non?specific immune function，and adjust lipid metabolism of juvenile Jian carp．According to the X extreme value analysis of regres?sion curves of non?specific immunity and intestinal health，it can be concluded that the optimal supplemental level of chitosan oligosaccharides in the diet of juvenile Jian carp is 0．86%to 1．09%．［Chinese Journal of Ani?mal Nutrition，2015，27（7）：2106?2114］

Key words：chitosan oligosaccharides；juvenile Jian carp（Cyprinus carpio var．Jian）；growth performance；lipid metabolism；immune；intestine

Corresponding author?，professor，E?mail：waxwbw＠aliyun．com

通信作者：?溫安祥，教授，博士生導(dǎo)師，E?mail：waxwbw＠aliyun．com

作者簡介：黃鑫瑋（1988—），男，四川成都人，碩士研究生，研究方向為水生動物營養(yǎng)免疫。E?mail：739941347＠qq．com

基金項目：四川省教育廳重點項目（11ZA292）

收稿日期：2015－02－03

doi：10．3969／j．issn．1006?267x．2015．07．016

文章編號：1006?267X（2015）07?2106?09

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

中圖分類號：S963