苜蓿皂苷促進(jìn)血鸚鵡魚對(duì)蝦青素的吸收及其最適添加水平

韋敏俠宋紅梅蔣燕玲劉 奕劉 超汪學(xué)杰胡隱昌?（．中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院珠江水產(chǎn)研究所，廣州50380；2．上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院，上海20306）

?

苜蓿皂苷促進(jìn)血鸚鵡魚對(duì)蝦青素的吸收及其最適添加水平

韋敏俠1，2宋紅梅1蔣燕玲1，2劉 奕1劉 超1汪學(xué)杰1胡隱昌1?
（1．中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院珠江水產(chǎn)研究所，廣州510380；2．上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院，上海201306）

摘 要：本試驗(yàn)旨在探索苜蓿皂苷促進(jìn)血鸚鵡魚對(duì)蝦青素吸收的效果及其最適添加水平。選取平均體重為（10．63±0．30）g的血鸚鵡魚630尾，隨機(jī)分為7組（每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30尾）：空白對(duì)照組投喂基礎(chǔ)飼料，蝦青素對(duì)照組投喂添加300 mg／kg蝦青素的基礎(chǔ)飼料，試驗(yàn)組分別投喂添加300 mg／kg的蝦青素及800、1 200、1 600、2 000或2 400 mg／kg苜蓿皂苷的基礎(chǔ)飼料，試驗(yàn)期為60 d。結(jié)果表明：1）在添加300 mg／kg蝦青素的飼料中添加苜蓿皂苷能提高魚體的生長(zhǎng)指標(biāo)，苜蓿皂苷添加水平為2 000 mg／kg時(shí)特定生長(zhǎng)率達(dá)到最高值。2）苜蓿皂苷添加水平達(dá)到1 200 mg／kg后，鱗片、尾鰭和皮膚中類胡蘿卜素含量較蝦青素對(duì)照組和空白對(duì)照組顯著提高（P＜0．05），且在苜蓿皂苷添加水平為2 000 mg／kg時(shí)同時(shí)達(dá)到最大值。3）在苜蓿皂苷添加水平達(dá)到1 200 mg／kg后，魚體背部和尾鰭的紅度值顯著高于蝦青素對(duì)照組和空白對(duì)照組（P＜0．05），分別在苜蓿皂苷添加水平為1 600和2 000 mg／kg時(shí)達(dá)到最大值。由此可知，在含有蝦青素的飼料中添加苜蓿皂苷能促進(jìn)血鸚鵡魚的生長(zhǎng)和對(duì)蝦青素的吸收；綜合特定生長(zhǎng)率結(jié)果，在添加了300 mg／kg蝦青素的飼料中苜蓿皂苷的最適添加水平為2 000 mg／kg。

關(guān)鍵詞：血鸚鵡魚；苜蓿皂苷；類胡蘿卜素；生長(zhǎng)；紅度值

魚類的體色，尤其觀賞魚的體色，是決定其市場(chǎng)價(jià)值的重要指標(biāo)。血鸚鵡魚是紅頭麗體魚［Vieja synspila（Hubbs，1935）］♀×橘色雙冠麗魚［（Amphilophus citrinellus（Günther，1864）］的雜交子代，是觀賞界十分成功的屬間雜交種之一，從問(wèn)世至今一直深受廣大消費(fèi)者的喜愛(ài)。其嘴呈心形，與雙親體形差異較大，比雙親更具觀賞價(jià)值，在觀賞魚養(yǎng)殖生產(chǎn)中，常利用完全褪黑的血鸚鵡魚進(jìn)行揚(yáng)色，從而改善魚體的色澤和純度，大幅度提高其市場(chǎng)價(jià)值。因?yàn)轸~類自身不能從頭合成類胡蘿卜素［1］，必須通過(guò)外界攝食含一定類胡蘿卜素的著色飼料以達(dá)到增色目的［2］。蝦青素（astax? anthin，AST）是觀賞魚增色飼料中最常見的增紅著色劑［3］，它具有著色、增強(qiáng)免疫、強(qiáng)抗氧化性作用，可提高動(dòng)物成活率、促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中具有重要的作用。然而蝦青素價(jià)格昂貴，每千克純蝦青素的國(guó)際市場(chǎng)價(jià)高達(dá)2 500美元［4］，導(dǎo)致增色飼料價(jià)格居高不下，而且目前魚類對(duì)于蝦青素的消化利用率較低，因此，如何提高蝦青素的消化利用率，節(jié)約蝦青素用量是解決這一問(wèn)題的關(guān)鍵。影響魚類著色效果的因素有很多，如魚類的種類、年齡、體重和生理生長(zhǎng)階段等自身因素，以及光照、水溫、投飼率等外部因素都會(huì)影響類胡蘿卜素的吸收和利用［5］，蝦青素被吸收、沉積和代謝轉(zhuǎn)化

的效率決定其對(duì)魚體的著色程度。由于類胡蘿卜素被吸收后經(jīng)過(guò)一系列復(fù)雜的變化后，通過(guò)與血漿中脂蛋白結(jié)合方式進(jìn)入血液中［6］，并通過(guò)相應(yīng)的載體運(yùn)輸?shù)桨薪M織［7］；此外，蝦青素化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，具有強(qiáng)抗氧化作用［8］，本身極易被氧化。因此，本試驗(yàn)?zāi)康囊环矫媸峭ㄟ^(guò)蝦青素的脂質(zhì)代謝途徑，增加其被吸收和沉積的效率，如飼料中添加脂質(zhì)代謝調(diào)節(jié)劑；另一方面是防止其沉積過(guò)程中的類胡蘿卜素被氧化代謝掉，在飼料中添加一定量的抗氧化劑等，以提高蝦青素的利用率。目前著色飼料增效相關(guān)報(bào)道尚不多見，如添加適量脂肪［9］、維生素［10］和?；悄懰徕c［11］等可有效提高類胡蘿卜素的利用率。但這些方法也存在不足，如脂肪添加易導(dǎo)致飼料腐敗、維生素易被氧化、?；悄懰徕c不易于分離提取等，因此尋求一種綠色安全環(huán)保的著色飼料增效劑將是最佳選擇。苜蓿皂苷（alfalfa saponin）是從苜蓿中提取的一種具有獨(dú)特生物學(xué)性質(zhì)的活性物質(zhì)，其結(jié)構(gòu)為五環(huán)三萜烯類化合物，苜蓿皂苷能清除自由基［12］、具備藥用價(jià)值［13］，還有促進(jìn)脂質(zhì)代謝［14］和抗氧化［15］的作用，在動(dòng)物生產(chǎn)中取得了良好的應(yīng)用效果［16－17］。李小慧等［2］、張曉紅等［18］的研究結(jié)果表明飼料中蝦青素的含量為500 mg／kg時(shí)，血鸚鵡魚著色效果最好，目前市場(chǎng)上普遍使用的商品蝦青素的添加量為500 mg／kg。因此，本研究擬添加不同水平的苜蓿皂苷和定量300 mg／kg的蝦青素飼喂血鸚鵡魚，以確定苜蓿皂苷作為血鸚鵡魚對(duì)蝦青素著色增效添加劑的效果和最適添加量，節(jié)約飼料成本，為觀賞魚著色研究提供一定的科學(xué)依據(jù)。

1　材料與方法

1．1 材料

試驗(yàn)對(duì)象為630尾平均體重為（10．63± 0．30）g血鸚鵡魚，取自中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院珠江水產(chǎn)研究所觀賞魚基地，魚體褪黑率均超過(guò)95%，試驗(yàn)用基礎(chǔ)飼料為稚魚0號(hào)配合飼料，購(gòu)于廣東泰峰膨化飼料有限公司，并加一定比例的脂肪，使脂肪含量達(dá)到8．6%，基礎(chǔ)飼料營(yíng)養(yǎng)水平為：粗蛋白質(zhì)≥44%，粗脂肪≥4．6%，粗纖維≤4%，粗灰分≤18%，總磷0．8%～3．0%，鈣1．0%～4．0%，賴氨酸≥2．3%，含硫氨基酸≥1．1%，水分≤12%，食鹽0．3%～3．0%。添加劑蝦青素購(gòu)于德國(guó)巴斯夫，純度為10%。苜蓿皂苷產(chǎn)品由河北寶恩生物技術(shù)有限公司提供，產(chǎn)品中苜蓿皂苷含量為20%。

1．2 試驗(yàn)方法

將試驗(yàn)魚隨機(jī)分成7組，每組3個(gè)重復(fù)（水族缸），共21個(gè)水族缸，每個(gè)缸30尾魚。7個(gè)組分別為飼喂基礎(chǔ)飼料的空白對(duì)照組（BD組），飼喂基礎(chǔ)飼料并添加300 mg／kg蝦青素的蝦青素對(duì)照組（AST3組），飼喂基礎(chǔ)飼料并添加300 mg／kg蝦青素及800、1 200、1 600、2 000或2 400 mg／kg苜蓿皂苷的試驗(yàn)組（分別為ASS8、ASS12、ASS16、ASS20、ASS24組）。養(yǎng)殖用的水族缸不間斷充氣，水溫（27±1）℃，每周換曝氣水3次，每次換水量為全部水量的1／3。每天09：00和16：00各飼喂1次，每次投喂量為魚體重的3%。

1．3 指標(biāo)測(cè)定

類胡蘿卜素含量測(cè)定取樣時(shí)間為15、30、45 和60 d，共取樣4次，每次分別取約0．05 g鱗片、皮膚和尾鰭提取類胡蘿卜素，鱗片和皮膚取至魚體側(cè)線兩側(cè)。類胡蘿卜素的提取和測(cè)定參考Boonyaratpalin等［19］的方法。類胡蘿卜素含量的計(jì)算公式如下：

S＝（A×K×V）／（E×G）。

式中：S為類胡蘿卜素含量（mg／kg）；A為吸光度值；K為常數(shù)（10 000）；V為提取液體積（mL）；E為吸光系數(shù)（2 500）；G為樣品重量（g）。

使用CR－400型色彩色差計(jì)（柯尼卡－美能達(dá)，日本）測(cè)定各組魚體表的紅度（a?）值，色差計(jì)使用前用白板校準(zhǔn)。每缸隨機(jī)選取6尾魚，每組共取18尾魚進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定部位為尾鰭和背部，背部為魚體背鰭下方及側(cè)線上方之間的區(qū)域。

1．4 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 21．0軟件分別對(duì)血鸚鵡魚的生長(zhǎng)、類胡蘿卜素含量和紅度值進(jìn)行顯著性分析。使用單因素方差分析（one?way ANOVE）進(jìn)行分析，差異顯著者進(jìn)行LSD多重比較，顯著性水平為P＜0．05，結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤（mean±SE）表示。各時(shí)期，魚體中類胡蘿卜素含量用SigmaPlot 11．0作圖。

2　結(jié) 果

2．1 不同添加水平苜蓿皂苷對(duì)血鸚鵡魚生長(zhǎng)和死亡率的影響

整個(gè)試驗(yàn)周期，所有的血鸚鵡魚均正常生長(zhǎng)，未出現(xiàn)病變，未發(fā)生死亡，所有飼料均能相對(duì)均衡的被魚攝食。由表1可知，投喂試驗(yàn)飼料60 d以后，各組魚體重約比初期增加1倍，且苜蓿皂苷添加水平為1 200、2 000、2 400 mg／kg的組體重增加顯著高于蝦青素對(duì)照組和空白對(duì)照組（P＜0．05）。苜蓿皂苷添加水平達(dá)到1 200 mg／kg后，魚體特定生長(zhǎng)率顯著高于蝦青素對(duì)照組和空白對(duì)照組（P＜0．05），且以2 000和2 400 mg／kg苜蓿皂苷組魚體的表現(xiàn)較佳，同時(shí)具有較佳的末體長(zhǎng)。

表1　不同添加水平苜蓿皂苷對(duì)血鸚鵡魚生長(zhǎng)和死亡率的影響Table 1　Effects of different supplemental levels of alfalfa saponin on growth and mortality of blood parrot fish

2．2 不同添加水平苜蓿皂苷對(duì)血鸚鵡魚體內(nèi)類胡蘿卜素含量的影響

在蝦青素投喂量相同的情況下，魚體鱗片、尾鰭和皮膚中類胡蘿卜素含量隨著飼料中苜蓿皂苷添加水平的增加基本呈先增加后降低趨勢(shì)（圖1、圖2和圖3）。60 d時(shí)，當(dāng)苜蓿皂苷添加水平達(dá)到1 200 mg／kg后，魚體鱗片、尾鰭和皮膚中類胡蘿卜素含量均顯著高于蝦青素對(duì)照組和空白對(duì)照組（P＜0．05），當(dāng)苜蓿皂苷添加水平為2 000 mg／kg時(shí)，魚體鱗片、尾鰭和皮膚中類胡蘿卜素含量分別達(dá)到最大值（表2）。試驗(yàn)開始時(shí)魚體鱗片、尾鰭和皮膚中類胡蘿卜素含量分別為85．41、121．29和10．88 mg／kg，試驗(yàn)結(jié)束后2 000 mg／kg苜蓿皂苷組魚體鱗片、尾鰭和皮膚中類胡蘿卜素含量分別為151．67、288．14和59．90 mg／kg，分別增加了1．78、2．38和4．95倍（表2）。

2．3 不同添加水平苜蓿皂苷對(duì)血鸚鵡魚體表紅度值的影響

試驗(yàn)60 d后，魚體尾鰭和背部紅度值如表3所示。尾鰭紅度值隨著苜蓿皂苷添加水平的增加先增加后降低，苜蓿皂苷添加水平為1 600 mg／kg時(shí)，尾鰭紅度值為34．13，達(dá)到最大；苜蓿皂苷添加水平達(dá)到1 200 mg／kg后，尾鰭紅度值顯著高于蝦青素對(duì)照組和空白對(duì)照組（P＜0．05）。背部紅度值也隨著苜蓿皂苷含量增加先增加后降低，苜蓿皂苷添加水平為2 000 mg／kg時(shí)，背部紅度值為12．80，達(dá)到最大值；苜蓿皂苷添加水平達(dá)到1 200 mg／kg后，尾鰭紅度值顯著高于蝦青素對(duì)照組和空白對(duì)照組（P＜0．05）。

圖1　不同添加水平苜蓿皂苷對(duì)血鸚鵡魚鱗片中類胡蘿卜素含量的影響Fig．1　Effects of different supplemental levels of alfalfa saponin on carotenoid content in scales of blood parrot fish

圖2　不同添加水平苜蓿皂苷對(duì)血鸚鵡魚尾鰭中類胡蘿卜素含量的影響Fig．2　Effects of different supplemental levels of alfalfa saponin on carotenoid content in caudal fin of blood parrot fish

圖3　不同添加水平苜蓿皂苷對(duì)血鸚鵡魚皮膚中類胡蘿卜素含量的影響Fig．3　Effects of different supplemental levels of alfalfa saponin on carotenoid content in skin of blood parrot fish

表2　飼喂60 d后不同添加水平苜蓿皂苷對(duì)血鸚鵡魚體內(nèi)類胡蘿卜素含量的影響Table 2　Effects of different supplemental levels of alfalfa saponin on carotenoid content in body of blood parrot fish after feeding 60 days　mg／kg

表3　不同添加水平苜蓿皂苷對(duì)血鸚鵡魚尾鰭和背部紅度值的影響Table 3　Effects of different supplemental levels of alfalfa saponin on a?value on caudal fin and dorsa of blood parrot fish

3　討 論

3．1 不同添加水平苜蓿皂苷對(duì)血鸚鵡魚生長(zhǎng)的影響

本試驗(yàn)結(jié)果表明，在添加了300 mg／kg蝦青素的飼料中添加不同水平的苜蓿皂苷可提高血鸚鵡魚的生長(zhǎng)，苜蓿皂苷添加水平為2 000 mg／kg時(shí)，血鸚鵡魚的末體重、末體長(zhǎng)及特定生長(zhǎng)率均達(dá)到最大值，超過(guò)2 000 mg／kg后，各生長(zhǎng)指標(biāo)有所降低，但差異不顯著。苜蓿皂苷對(duì)血鸚鵡魚生長(zhǎng)的影響尚未見報(bào)道，但是有研究苜蓿粉對(duì)金魚生長(zhǎng)影響的報(bào)道，結(jié)果表明飼料中苜蓿粉含量達(dá)到25%以后會(huì)降低金魚的生長(zhǎng)［20］；15‰的苜蓿皂苷含量時(shí)對(duì)斷奶仔豬的生長(zhǎng)有促進(jìn)作用［21］；對(duì)于苜蓿皂苷含量超過(guò)1%的苜蓿，鵝更喜歡低苜蓿皂苷含量的苜蓿［22］。上述研究表明一定添加量的苜蓿皂苷能夠促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)，但是超過(guò)某一值后，對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)的促進(jìn)作用有所減弱。本試驗(yàn)中，苜蓿皂苷添加水平為2 000 mg／kg時(shí)，對(duì)血鸚鵡魚各生長(zhǎng)指標(biāo)具最佳的促進(jìn)作用，與上述研究結(jié)果有所不同。這與不同物種對(duì)苜蓿皂苷的吸收利用率不同有關(guān)，且苜蓿皂苷的加工程序不同、飼料其他成分不同等都會(huì)影響到動(dòng)物對(duì)苜蓿皂苷的吸收利用；另外，本試驗(yàn)中同時(shí)還添加了300 mg／kg的蝦青素，可能會(huì)影響苜蓿皂苷對(duì)生長(zhǎng)的促進(jìn)作用。整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中，各組均未見魚體死亡現(xiàn)象，說(shuō)明本試驗(yàn)飼料中苜蓿皂苷添加水平不影響血鸚鵡魚的健康，是一種綠色安全的血鸚鵡魚著色飼料增效劑。

3．2 不同添加水平苜蓿皂苷對(duì)血鸚鵡魚體內(nèi)類胡蘿卜素含量的影響

脂肪、蛋白質(zhì)、維生素等因素都可影響魚體對(duì)飼料中類胡蘿卜素的吸收。提高飼料脂肪水平可以顯著提高大西洋鮭（Salmo salar）肌肉中色素含量［23］；與較低蛋白質(zhì)水平相比，投喂蛋白質(zhì)水平為36．20%的飼料使紅草金魚鰭條和皮膚的色素吸光光度值達(dá)到最大［24］；維生素E和類胡蘿卜素能夠協(xié)同吸收［25］，同時(shí)一定量的維生素E可以提高β－胡蘿卜素向血漿轉(zhuǎn)運(yùn)的能力［26］。但高脂肪飼料容易腐敗，高維生素易被氧化，高蛋白質(zhì)飼料會(huì)增加飼料的成本。本研究在相同蝦青素添加量的飼料中添加800～2 400 mg／kg的苜蓿皂苷，結(jié)果表明隨著苜蓿皂苷添加水平的增加，血鸚鵡魚體內(nèi)類胡蘿卜素含量也逐漸增加，苜蓿皂苷添加水平達(dá)到1 200 mg／kg后，血鸚鵡魚體內(nèi)類胡蘿卜素含量與蝦青素對(duì)照組和空白對(duì)照組出現(xiàn)顯著性差異，達(dá)到2 000 mg／kg時(shí)，體內(nèi)類胡蘿卜素含量達(dá)到最大值，隨后不再隨著苜蓿皂苷添加水平的增加而增加。本試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明在添加了300 mg／kg蝦青素的飼料中添加苜蓿皂苷能促進(jìn)血鸚鵡魚對(duì)蝦青素的吸收，且在苜蓿皂苷添加水平達(dá)到2 000 mg／kg時(shí)吸收效果最好，這與血鸚鵡魚的生長(zhǎng)結(jié)果相一致。與脂肪、蛋白質(zhì)及維生素相比，苜蓿皂苷不僅可以提高動(dòng)物體的抗氧化指標(biāo)［21］，調(diào)節(jié)動(dòng)物體的脂質(zhì)代謝，還可以提高動(dòng)物體的免疫力［27］。因此，苜蓿皂苷的添加一方面可以在一定程度上減少蝦青素在吸收過(guò)程中的氧化損失，另一方面苜蓿皂苷具有脂質(zhì)代謝調(diào)節(jié)的功能，而蝦青素的吸收又受到脂質(zhì)代謝的影響，因此推測(cè)苜蓿皂苷能夠增大蝦青素與脂蛋白的接觸面積，增強(qiáng)蝦青素的轉(zhuǎn)運(yùn)和沉積。

試驗(yàn)過(guò)程中，血鸚鵡魚不同組織間類胡蘿卜素含量始終不同，增加量也不同，且一直是尾鰭＞鱗片＞皮膚，試驗(yàn)結(jié)束后，飼料中苜蓿皂苷添加水平為2 000 mg／kg時(shí)，尾鰭、鱗片和皮膚中類胡蘿卜素增加量分別是288．14、151．67和59．90 mg／kg。這表明蝦青素在消化過(guò)程中主要沉積在尾鰭和鱗片中，皮膚中沉積較少。在幼鮭的研究中也發(fā)現(xiàn)了投喂葉黃素后類胡蘿卜素在各個(gè)部位沉積不同，主要在肌肉沉積，其次是皮膚、肝臟和性腺［28］。類胡蘿卜素被吸收后，與血漿中脂蛋白結(jié)合后進(jìn)入血液中［6］，然后再通過(guò)相應(yīng)的載體運(yùn)輸?shù)桨薪M織，魚體內(nèi)不同部位所含脂蛋白載體的數(shù)量不一樣，從而魚體內(nèi)的不同部位類胡蘿卜素沉積量有所差異。

3．3 不同添加水平苜蓿皂苷對(duì)血鸚鵡魚體表紅度值的影響

本試驗(yàn)中，在添加了300 mg／kg蝦青素的飼料中添加不同水平的苜蓿皂苷，苜蓿皂苷添加水平達(dá)到1 200 mg／kg后，尾鰭和背部的紅度值相對(duì)于蝦青素對(duì)照組和空白對(duì)照組顯著增加，這與試驗(yàn)中測(cè)定的血鸚鵡魚體內(nèi)類胡蘿卜素含量的結(jié)果一致。大西洋鮭魚肌肉的紅度值與皮膚和肌肉中沉積的蝦青素有關(guān)系［29］?；_漢［Amphilophus citrinellus（Günther，1864）］×青金虎［Cichlasoma trimaculatum（Günther，1867）］的研究中發(fā)現(xiàn)投喂鮮蝦組的魚體類胡蘿卜素含量比其他組顯著增高，魚體紅度值也是顯著高于其他各組［30］，對(duì)虹鱒（Oncorhynchus mykiss）的研究也是類似結(jié)果［31］。這些研究結(jié)果與本試驗(yàn)的結(jié)果一致，說(shuō)明紅度值與魚體內(nèi)類胡蘿卜含量有正相關(guān)關(guān)系。皮膚紅度值的增加直接歸因于酯化了的蝦青素在皮膚中沉積的增多［32］，因此色差計(jì)測(cè)定的紅度值可以在一定程度上反映血鸚鵡魚對(duì)蝦青素的吸收利用率。本試驗(yàn)中，在添加了300 mg／kg蝦青素的飼料中苜蓿皂苷添加水平達(dá)到1 200 mg／kg后，魚體背部和尾鰭的紅度值與蝦青素對(duì)照組和空白對(duì)照組出現(xiàn)顯著差異，并分別在苜蓿皂苷添加水平為1 600 和2 000 mg／kg時(shí)達(dá)到最大值，這與本試驗(yàn)中測(cè)定鱗片、尾鰭和皮膚中的類胡蘿卜素含量的測(cè)定結(jié)果有所差異。雖然紅度值能在一定程度上反映血鸚鵡魚對(duì)蝦青素的吸收利用率，但是本試驗(yàn)中測(cè)定的類胡蘿卜素是總類胡蘿卜素，其紅度值僅表現(xiàn)的是身體表面的紅度值，兩者本身有一定的差異。

4　結(jié) 論

在含有蝦青素的飼料中添加苜蓿皂苷能促進(jìn)血鸚鵡魚的生長(zhǎng)和對(duì)蝦青素的吸收；綜合特定生長(zhǎng)率結(jié)果，在添加了300 mg／kg蝦青素的飼料中苜蓿皂苷的最適添加水平為2 000 mg／kg。

參考文獻(xiàn)：

［1］ JOHNSON E A，AN G H．Astaxanthin from microbial sources［J］．Critical Reviews in Biotechnology，1991，11（4）：297－326．

［2］ 李小慧，汪學(xué)杰，牟希東，等．飼料中添加蝦青素對(duì)血鸚鵡體色的影響［J］．安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，36（20）：8606－8607．

［3］ MIAO F，LU D，LI Y，et al．Characterization of astax?anthin esters in Haematococcus pluvialis by liquid chromatography?atmospheric pressure chemical ioniza?tion mass spectrometry［J］．Analytical biochemistry，2006，352（2）：176－181．

［4］ LEE P，SCHMIDT?DANNERT C．Metabolic engineer?ing towards biotechnological production of carotenoids in microorganisms［J］．Applied Microbiology and Bio?technology，2002，60（1－2）：1－11．

［5］ WANG X X，SHAO L．Research status of ornamental fish body color［J］．Reservoir Fisheries，2008，28（2）：57－59．

［6］ TOURNIAIRE F，GOURANTON E，VON LINTIG J，et al．β?carotene conversion products and their effects on adipose tissue［J］．Genes＆Nutrition，2009，4（3）：179－187．

［7］ SAMMAR M，LEVI L，HURVITZ A，et al．Studies on retinol?binding protein during vitellogenesis in the rainbow trout（Oncorhynchus mykiss）［J］．General and Comparative Endocrinology，2005，141（2）：141－151．

［8］ NAGUIB Y M．Antioxidant activities of astaxanthin and related caroteniods［J］．Journal of Agricultural and Food Chemistry，2000，48（4）：1150－1154．

［9］ TORRISSEN O，HARDY R，SHEARER K，et al．Effects of dietary canthaxanthin level and lipid level on apparent digestibility coefficients for canthaxanthin in rainbow trout（Oncorhynchus mykiss）［J］．Aqua?culture，1990，88（3）：351－362．

［10］ 劉金海，王安利，王維娜．草金魚總色素穩(wěn)定性研究（Ⅱ）———酸堿度、維生素和有機(jī)物對(duì)草金魚總色素穩(wěn)定性的影響［J］．水產(chǎn)科學(xué)，2005，24（3）：7－9．

［11］ YANG H Y，MU X D，LUO D，et al．Sodium tauro?cholate，a novel effective feed?additive for promoting absorption and pigmentation of astaxanthin in blood parrot（Cichlasoma synspilum♀×Cichlasoma citrinel?lum

）［J］．Aquaculture，2012，350：42－45．

［12］ ILSLEY S，MILLER H，KAMEL C．Effects of dietary quillaja saponin and curcumin on the performance and immune status of weaned piglets［J］．Journal of Ani?mal Science，2005，83（1）：82－88．

［13］ 孫彥，龍瑞才，張鐵軍，等．紫花苜蓿皂苷研究進(jìn)展［J］．草業(yè)學(xué)報(bào)，2013，22（3）：274－283．

［14］ COOKSON F，F(xiàn)EDOROFF S．Quantitative relation?ships between administered cholesterol and alfalfa re?quired to prevent hypercholesterolaemia in rabbits［J］．British Journal of Experimental Pathology，1968，49 （4）：348－355．

［15］ YALINKILIC O，ENGINAR H．Effect of X?radiation

on lipid peroxidation and antioxidant systems in rats treated with saponin?containing compounds［J］．Photo?chemistry and Photobiology，2008，84（1）：236－242．［16］ 彭寶安，高永革，王成章，等．妊娠母豬飼糧中不同苜蓿鮮草替代量對(duì)其生產(chǎn)性能的影響［J］．草業(yè)學(xué)報(bào)，2011，20（4）：219－228．

［17］ MLGAARD J，VON SCHENCK H，OLSSON A G．

Alfalfa seeds lower low density lipoprotein cholesterol and apolipoprotein B concentrations in patients withtypeⅡhyperlipoproteinemia［J］．Atherosclerosis，1987，65（1）：173－179．

［18］ 張曉紅，吳銳全，王海英，等．飼料中添加蝦青素對(duì)血鸚鵡魚皮膚類胡蘿卜素含量和體色三色刺激值的影響［J］．廣東海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，30（4）：77－80．

［19］ BOONYARATPALIN M，THONGROD S，SUPAM?ATTAYA K，et al．Effects of β?carotene source，Du?naliella salina，and astaxanthin on pigmentation，growth，survival and health of Penaeus monodon［J］．Aquaculture Research，2001，32（Suppl．1）：182－190．

［20］ YANAR M，ER?EN Z，HUNT A ?，et al．The use of alfalfa，Medicago sativa as a natural carotenoid source in diets of goldfish，Carassius auratus．［J］．Aquacul?ture，2008，284（1）：196－200．

［21］ SHI Y H，WANG J，GUO R，et al．Effects of alfalfa saponin extract on growth performance and some an?tioxidant indices of weaned piglets［J］．Livestock Sci?ence，2014，167：257－262．

［22］ CHEEKE P，POWLEY J，NAKAUE H，et al．Feed preference responses of several avian species fed alfal?fa meal，high?and low?saponin alfalfa，and quinine sulfate［J］．Canadian Journal of Animal Science，1983，63：707－710．

［23］ YOUNG A，MORRIS P C，HUNTINGFORD F A，et al．Replacing fish oil with pre?extruded carbohydrate in diets for Atlantic salmon，Salmo salar，during their entire marine grow?out phase：effects on growth，composition and colour［J］．Aquaculture，2006，253 （1－4）：531－546．

［24］ 黃辨非，徐志維，羅靜波．蛋白質(zhì)水平對(duì)辣椒色素在紅草金魚體內(nèi)沉積及魚生長(zhǎng)的影響［J］．淡水漁業(yè)，2008，38（4）：49－52．

［25］ 王岳飛，徐平，李磊，等．茶多酚與幾種天然抗氧化物質(zhì)的協(xié)同作用研究［J］．茶葉科學(xué)，2010，30（2）：109－114．

［26］ WANG X D，MARINI R P，HEBUTERNE X，et al．Vitamin E enhances the lymphatic transport of β?caro?tene and its conversion to vitamin A in the ferret［J］．Gastroenterology，1995，108（3）：719－726．

［27］ 王成章，王彥華，史瑩華，等．苜蓿皂苷對(duì)斷奶仔豬脂質(zhì)代謝、抗氧化和免疫的影響［J］．草業(yè)學(xué)報(bào)，2011，20（4）：210－218．

［28］ METUSALACH，SYNOWIECKI J，BROWN J，et al．Deposition and metabolism of dietary canthaxanthin in different organs of arctic charr（Salvelinus alpinus L．）［J］．Aquaculture，1996，142（1）：99－106．

［29］ YAGIZ Y，KRISTINSSON H G，BALABAN M O，et al．Correlation between astaxanthin amount and a?val?ue in fresh Atlantic salmon（Salmo salar）muscle during different irradiation doses［J］．Food Chemistry，2010，120（1）：121－127．

［30］ SORNSUPHARP B，LOMTHAISONG K，DAHMS H U，et al．Effects of dried fairy shrimp Streptocephalus sirindhornae meal on pigmentation and carotenoid dep?osition in flowerhorn cichlid；Amphilophus citrinellus （Günther，1864）×Cichlasoma trimaculatum （Günther，1867）［J］．Aquaculture Research，2015，46 （1）：173－184．

［31］ CHOUBERT G，MENDES?PINTO M M，MORAIS R．Pigmenting efficacy of astaxanthin fed to rainbow trout Oncorhynchus mykiss：effect of dietary astaxanthin and lipid sources［J］．Aquaculture，2006，257（1）：429－436．

［32］ PU J，BECHTEL P J，SATHIVEL S．Extraction of shrimp astaxanthin with flaxseed oil：effects on lipid oxidation and astaxanthin degradation rates［J］．Bio?systems Engineering，2010，107（4）：364－371．

Alfalfa Sapoinin Promotes Astaxanthin Absorbtion of Blood Parrot Fish and Its Optimum Supplemental Level

WEI Minxia

1，2

SONG Hongmei

1

JIANG Yanling

1，2

LIU Yi

1

LIU Chao

1

WANG Xuejie

1

HU Yinchang

1?

（責(zé)任編輯 菅景穎）

（1．Pearl River Fisheries Research Institute，Chinese Academy of Fishery Sciences，Guangzhou 510380，China；2．College of Fisheries and Life Science，Shanghai Ocean University，Shanghai 201306，China）

?Corresponding author，professor，E?mail：Huyc22＠163．com

Abstract：This study was conducted to explore the promoting effect of alfalfa saponins on astaxanthin absorb?tion of blood parrot fish and to determine the optimum supplemental level of alfalfa saponins．A total of 630 blood parrot fish，with the average body weight of（10．63±0．30）g，were divided into the following 7 groups：blank control group in which fish were fed a basal diet；astaxanthin control group in which fish were fed the basal diet supplemented with 300 mg／kg astaxanthin；five experimental groups in which fish were fed the basal diet supplemented with 300 mg／kg astaxanthin plus 800，1 200，1 600，2 000 and 2 400 mg／kg alfalfa sapo?nin，respectively．The experiment lasted for 60 days．The results showed as follows：1）the diet supplemented with 300 mg／kg astaxanthin plus alfalfa saponin could enhance the growth indexes of fish．When alfalfa sapo?nin supplemental level was 2 000 mg／kg，the specific growth rate reached its maximum value．2）While the al?falfa saponin supplemental level arrived at 1 200 mg／kg，the scals，skin and caudal fin carotenoid contents were significantly higher than those in the astaxanthin control group and blank control group（P＜0．05），and they reached their maximum values synchronously when alfalfa saponin supplemental level was 2 000 mg／kg．3）While the alfalfa saponin supplemental level arrived at 1 200 mg／kg，the dorsa and caudal fin a?values were significantly higher than those in the astaxanthin control group and blank control group（P＜0．05），but they reached their maximum values when the alfalfa saponin supplemental level was 2 000 and 1 600 mg／kg，respectively．These results demonstrate that adding alfalfa saponin to the diet supplemented with astaxanthin speed up growth and improve astaxanthin absorption of blood parrot fish．Combining with the results of specific growth rate，we suggest that the optimum supplemental level of alfalfa saponin added in the diet supplemented with 300 mg／kg astaxanthin was 2 000 mg／kg．［Chinese Journal of Animal Nutrition，2015，27（8）：2589?2596］

Key words：blood parrot fish；alfalfa saponin；carotenoid；growth；a?value

通信作者：?胡隱昌，研究員，碩士生導(dǎo)師，E?mail：huyc22＠163．com

作者簡(jiǎn)介：韋敏俠（1989—），女，安徽阜陽(yáng)人，碩士研究生，研究方向?yàn)橛^賞魚著色。E?mail：weiminxia8945＠163．com

基金項(xiàng)目：廣東省科技計(jì)劃（2013B020401004）；國(guó)家科技基礎(chǔ)條件平臺(tái)子項(xiàng)目（2015DKA30470）

收稿日期：2015－02－20

doi：10．3969／j．issn．1006?267x．2015．08．033

文章編號(hào)：1006?267X（2015）08?2589?08

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

中圖分類號(hào)：S963