陰道炎五聯(lián)檢聯(lián)合10%KOH濕片法在診斷念珠菌性陰道炎的應(yīng)用研究

姜蕾

【摘要】 目的 探討運(yùn)用陰道炎五聯(lián)檢聯(lián)合10% KOH濕片法檢測念珠菌性陰道炎， 提高念珠菌性陰道炎的檢出率， 為臨床診斷治療提供依據(jù)。方法 522例婦科門診患者的陰道分泌物用陰道炎五聯(lián)檢卡檢測， 同時(shí)聯(lián)合應(yīng)用五聯(lián)檢卡和10% KOH對其進(jìn)行檢測， 并將522例患者的陰道分泌物分別接種至念珠菌顯色培養(yǎng)基培養(yǎng)， 評價(jià)陰道炎五聯(lián)檢聯(lián)合10% KOH濕片法在檢測念珠性陰道炎中應(yīng)用價(jià)值。結(jié)果 聯(lián)合檢測法較陰道炎五聯(lián)檢法檢測陽性率更高， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 在念珠球菌陰道炎診斷中， 五聯(lián)檢與10% KOH濕片法的聯(lián)合應(yīng)用陽性率較高， 有利于念珠菌性陰道炎的準(zhǔn)確快速診斷。

【關(guān)鍵詞】 陰道炎五聯(lián)檢；KOH濕片法；念珠菌性陰道炎

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.02.045

陰道炎五聯(lián)檢為陰道分泌物的檢驗(yàn)提供了一種新的理論和方法， 其優(yōu)越性國內(nèi)已有多篇文獻(xiàn)報(bào)道。經(jīng)過本科室近1年的使用， 發(fā)現(xiàn)五聯(lián)檢試劑在判定陰道微生態(tài)菌群、白細(xì)胞數(shù)量以及濕片鏡檢符合率較高， 在判定細(xì)菌性陰道病方面較為快速準(zhǔn)確， 但陰道炎五聯(lián)檢法受方法學(xué)所限制， 只能檢測出白色念珠菌和熱帶念珠菌， 易造成臨床上的誤診誤治。為了彌補(bǔ)陰道炎五聯(lián)檢在檢測念珠性陰道炎方面的不足之處， 本研究旨在研究聯(lián)合陰道炎五聯(lián)檢和10%KOH濕片在診斷念珠菌性陰道炎中臨床意義。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 2013年4月～2014年5月本院婦科門診患者， 年齡16～65歲。

1. 2 試劑與方法 陰道炎五聯(lián)檢試劑盒購自江蘇碩世生物科技有限公司；10% KOH用蒸餾水配置；科瑪嘉顯色培養(yǎng)基購自鄭州博賽生物技術(shù)股份有限公司。每份標(biāo)本同時(shí)用五聯(lián)檢試劑盒檢測和10% KOH濕片鏡檢， 并接種至念珠菌顯色培養(yǎng)基培養(yǎng)， 以念珠菌顯色培養(yǎng)基培養(yǎng)結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)。五聯(lián)檢試劑盒嚴(yán)格按照說明書操作；10% KOH濕片法為1滴10% KOH加1滴用五聯(lián)檢稀釋液處理過的分泌物混勻后觀察20個(gè)高倍鏡視野；念珠菌顯色培養(yǎng)基法為接種經(jīng)五聯(lián)檢稀釋液處理過的分泌物1滴， 然后于35℃培養(yǎng)24～48 h后觀察。

1. 3 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) 五聯(lián)檢試劑盒檢測結(jié)果的判斷按說明書進(jìn)行；10% KOH濕片法以高倍鏡下見到孢子、芽生孢子或管狀假菌絲為陽性， 反之為陰性；念珠菌顯色培養(yǎng)基通過對24～48 h生長的菌落的顏色可判斷出白色念珠菌、熱帶念珠菌、克柔念珠菌和光滑念珠菌， 而其他念珠菌為白色， 用API-20C AUX鑒定試劑盒鑒定。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 522例陰道分泌物中共培養(yǎng)出念珠菌172株， 分別為白色念珠菌108株（62.8%）， 熱帶念珠菌20株（11.6%）， 光滑念珠菌16株（9.3%）， 克柔念珠菌12株（7.0%）， 近平滑念珠菌8株（4.7%）， 都柏林念珠菌3株（1.7%）， 葡萄牙念珠菌2株（1.2%）， 季也蒙念珠菌2株（1.2%）， 乳酒念珠菌1株（0.6%）。

2. 2 522例陰道分泌物中， 五聯(lián)檢法的陽性率為24.9%（130/522）， 聯(lián)合檢測法的陽性率為32.0%（167/522）。聯(lián)合檢測法與念珠菌顯色培養(yǎng)法符合率為97.1%， 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=6.44， P>0.05）。

3 討論

念珠菌性陰道炎是陰道感染疾病中最常見疾病之一， 患者主要臨床表現(xiàn)是外陰瘙癢、分泌物增多或異常， 是影響女性健康的世界性問題。白色念珠菌被認(rèn)為是引起感染的主要真菌菌種。濕片法鏡檢念珠菌存在背景差、靈敏度低、對操作者經(jīng)驗(yàn)要求高等缺點(diǎn)， 分離培養(yǎng)法雖然準(zhǔn)確度、陽性率高， 但其診斷周期長， 不利于快速診斷。

從顯色培養(yǎng)基培養(yǎng)的結(jié)果看， 白色念珠菌檢出率占62.8%， 熱帶念珠菌占 11.6%， 而其他念珠菌占25.6%。陰道炎五聯(lián)檢是依據(jù)乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）及pH<4.6來判定念珠菌性陰道炎。而NAG是白色念珠菌、熱帶念珠菌的特異性酶， 同時(shí)也是滴蟲特異性酶[1]， 另外不可避免的會存在不合格標(biāo)本及NAG靠肉眼判斷， 個(gè)人主觀性較強(qiáng)等原因， 陰道炎五聯(lián)檢在念珠菌性陰道炎判定上易造成假陽性及假陰性。過高的假陽性及假陰性會給臨床的診斷和治療帶來困擾， 尤其是勢必會被漏檢的有些菌種對某些藥物天然耐藥， 如葡萄牙念珠菌對兩性霉素B、克柔念珠菌對氟康唑天然耐藥， 光滑念珠菌對氟康唑有劑量的依賴性， 往往需增加70%劑量臨床上才有療效， 這些菌種的檢出及準(zhǔn)確鑒定對抗真菌藥物的選擇具有重要的價(jià)值。

鹽水濕片法操作簡便、快速， 但靈敏度比較低， Sobel認(rèn)為是40%～60%[2]。10% KOH濕片法操作簡便、快速， KOH可以改善背景， 并使孢子和假菌絲更容易觀察。本研究的10% KOH法為觀察20個(gè)高倍鏡視野， 比程向方等[3]報(bào)道的高倍鏡下觀察10個(gè)視野多了一倍， 其報(bào)道的10% KOH法的檢出率為60.25%， 國內(nèi)大多數(shù)學(xué)者認(rèn)為陽性率可達(dá)70%～80%。本研究利用五聯(lián)檢法與10% KOH法對收集的患者標(biāo)本進(jìn)行聯(lián)合檢測， 對于診斷過程中出現(xiàn)檢測結(jié)果不一致的標(biāo)本， 經(jīng)謹(jǐn)慎詳細(xì)研究得出最終診斷， 研究發(fā)現(xiàn)聯(lián)合法較五聯(lián)檢法檢出率較好， 且與培養(yǎng)法符合率較高。

綜上所述， 為了更好的滿足臨床的需求， 提高念珠菌陰道炎檢測的敏感度和特異性， 陰道炎五聯(lián)檢應(yīng)與10%KOH濕片法聯(lián)合開展。

參考文獻(xiàn)

[1] 饒榮， 馮申亮.五聯(lián)檢檢測3988例陰道分泌物結(jié)果分析.中國微生態(tài)學(xué)雜志， 2011， 23（2）：173-174.

[2] Sobel JD. Vaginitis. N Engl J Med， 1997， 337（26）：1896-1903.

[3] 程向方， 王雷.陰道念珠菌4種常用檢驗(yàn)方法的比較及應(yīng)用.中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)， 2011， 15（8）：1390-1391.

[收稿日期：2015-09-01]