兒童神經(jīng)元特異性烯醇化酶測定標本影響因素的分析

葛麗麗　楊俊梅　李進香

【摘要】 目的 探討神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）測定標本影響因素。方法 采用全自動電化學發(fā)光法， 取50例健康體質(zhì)兒童的血樣6 ml進行研究， 分成六組， 每組1 ml放于監(jiān)測試管中， 按順序進行編號， 1、2、3、4號試管在室溫25℃的環(huán)境中分別放置30 min、1 h、3 h、5 h后分離血清， 測定NSE水平， 5號試管在室溫下放置30 min后離心， 6號試管放置于-20℃的冰箱中24 h后離心， 測定血清中的NSE水平。結(jié)果 血清標本放置3 h組和5 h組與30 min組NSE水平比較， 差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）， 放置1 h組與30 min組NSE水平比較， 差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）， 未冰凍30 min組與冰凍組NSE水平比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。結(jié)論 血清中NSE的含量與標本放置時間長短有關， 與是否經(jīng)過冰凍處理無關。

【關鍵詞】 神經(jīng)元特異性烯醇化酶；標本；影響因素

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.02.023

神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）是臨床上很有價值的分子學標記物[1， 2]。一方面NSE可以作為肺癌和兒童神經(jīng)母細胞瘤的標記物， 用于肺小細胞癌和非小細胞癌的鑒別診斷， 另一方面NSE活性改變同神經(jīng)損傷所致的許多神經(jīng)性疾病關系密切。由于NSE可以同時存在紅細胞和血小板中， 所以在NSE的測定中， 應避免溶血， 血液標本放置時間太長， 血液中血細胞會進行一定的代謝活動， 會導致血清中的成分發(fā)生變化， 影響實驗結(jié)果[3]。本文著重探討不同放置時間對血液中NSE的影響情況， 以及放置條件冰凍與未冰凍對NSE含量的影響， 現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 隨機選取2013年6月～2014年6月本院體檢50例體質(zhì)健康兒童， 年齡5～15歲的血樣6 ml進行研究， 分成六組， 每組1 ml放于監(jiān)測試管中， 按順序進行編號， 1號試管在室溫25℃下放置30 min后離心、2號試管1 h后離心、3號試管3 h后離心、4號試管5 h后離心， 5號試管在室溫下放置30 min后離心， 6號試管放置于-20℃的冰箱中24 h后離心。觀測血清中NSE的含量情況。

1. 2 方法 按Elscsys全制動電化學發(fā)光儀說明書進行嚴格、規(guī)范的操作， 采用雙抗體夾心法檢測血清中的NSE含量， 及用生物素化的抗單克隆抗體和用釕記的抗單克隆抗體與標本中的NSE結(jié)合形成夾心復合物， 通過電化學儀進行測定。

1. 3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計學軟件對研究數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù) ± 標準差（ x-±s）表示， 采用t檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

血清標本放置3 h組和5 h組與30 min組NSE比較， 差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）， 放置1 h組與30 min組NSE比較， 差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）， 未冰凍30 min組與冰凍組NSE比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。見表1。

3 討論

NSE是參與糖酵解途徑的烯醇化酶中的一種， 存在于神經(jīng)組織和神經(jīng)內(nèi)分泌組織中[4， 5]。由于NSE可以同時存在紅細胞和血小板中， 所以在NSE的測定中， 應避免溶血， 血液標本放置時間太長。血液中血細胞會進行一定的代謝活動， 會導致血清中的成分發(fā)生變化[6]。在本實驗中提取出來的血清， 在不同放置時間下， NSE的含量明顯不同， 放置30 min組與1 h組差異不明顯， 而與3 h、5 h組有明顯差異， 說明NSE的含量與放置時間的長短有密切的關系， 進而說明血液標本在久置未及時分離的情況下， 會導致血液中血小板及紅細胞內(nèi)的烯醇化酶進入血清， 使血清中NSE的水平上升， 就容易造成誤診。在冰凍與未冰凍兩種條件下血清中的對比中， NSE水平無顯著差異， 說明冰凍對此酶活性無影響。

實際工作中， 在做檢驗實踐中， 檢驗結(jié)果的準確性除了受到檢驗方法、儀器靈敏度、精密程度的影響外， 對源自標本自身的影響也是一個不容忽視的因素。尤其是病房血液標本在采集后往往不能立即送到檢測中心而導致血清放置時間過長， 就會導致NSE的含量在測定結(jié)果中偏高[7， 8]。

綜上所述， 血清中的NSE含量與放置時間有關。隨著放置時間的增加而有明顯的上升趨勢。因此臨床醫(yī)師在檢測血樣標本， 應盡快從病理區(qū)送到實驗室對血樣立即離心處理， 這樣就可以縮短標本的放置時間， 減少了細胞的破壞， 以便提高檢測的準確性與可靠性。

參考文獻

[1] 隋靖喆， 李山， 秦雪， 等.標本不同處理因素對神經(jīng)元特異性烯醇化酶測定的影響.國際檢驗醫(yī)學雜志， 2014， 25（14）：1950-1951.

[2] 姜艷紅， 劉冰， 呂曉嫻， 等.電化學發(fā)光法檢測神經(jīng)元特異性烯醇化酶影響因素的分析.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學， 2012， 20（9）：1944-1945.

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[5] 佟素香， 王小芳， 曾軼， 等.神經(jīng)元特異性烯醇化酶測定影響因素的研究及在肺癌檢測中的應用.四川醫(yī)學， 2005， 26（12）： 1400-1402.

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[7] 廖琳， 姬芳， 邵宏斌， 等.神經(jīng)元特異性烯醇化酶測定標本影響因素的研究.中原醫(yī)刊， 2007， 34（9）：封4.

[8] 于傳亭， 鹿理友， 由紅蕾， 等. NSE測定影響因素探討.齊魯醫(yī)學檢驗， 2005， 16（2）：61.

[收稿日期：2015-08-06]