黑果枸杞組織培養(yǎng)技術(shù)

胡相偉，馬彥軍，李毅，羅慶紅

（1.蘭州市林木種苗繁育中心，甘肅蘭州 730085；2.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)院，甘肅蘭州 730070）

黑果枸杞組織培養(yǎng)技術(shù)

胡相偉1，馬彥軍2，李毅2，羅慶紅1

（1.蘭州市林木種苗繁育中心，甘肅蘭州 730085；2.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)院，甘肅蘭州 730070）

采用黑果枸杞野生優(yōu)良單株上一年生休眠枝芽為材料，利用組織培養(yǎng)技術(shù)，經(jīng)消毒滅菌，芽誘導(dǎo)、繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)，進(jìn)行煉苗移栽，成活率可達(dá)80%以上。

黑果枸杞；組織培養(yǎng)；培養(yǎng)基

黑果枸杞（Lycium ruthenicum Murr）是茄科枸杞屬多年生耐鹽、抗旱植物，分布于我國西部地區(qū)，其成熟漿果中富含紫紅色色素，屬于典型的天然花色苷類植物色素資源，具有重要的藥食保健價值［1～2］。為遏制近年來市場需求量猛增、黑果枸杞價格上漲帶來的亂挖亂墾亂采局面［3～4］，使這一特色植物資源盡快向生態(tài)經(jīng)濟(jì)良性發(fā)展，我們優(yōu)選優(yōu)良株系，采用組培技術(shù)生產(chǎn)穴盤苗以期為工廠化育苗提供可能，并保證遺傳特性優(yōu)良。

1 外植體的建立

材料采自青海諾木洪農(nóng)場野生優(yōu)良單株，優(yōu)選結(jié)果性好、生長健壯的優(yōu)良株系一年生休眠枝條，用自來水沖洗20 min，剪成帶1個芽的小段。在超凈工作臺上，用75%酒精浸泡30 s，再置于0.1%升汞溶液（加1～2滴吐溫20）中消毒15 min，然后用無菌水沖洗5次，用消毒濾紙吸干莖段表面水分。

2 初代培養(yǎng)

將外植體接種到芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS+0.5 mg/L 6-BA+30 mg/g蔗糖+6 mg/g瓊脂上，培養(yǎng)基pH 6.0，培養(yǎng)溫度（22±1）℃、光照12 h/d、光照度40 μmol/（m2·s），培養(yǎng)30 d后可有新莖形成。

3 繼代培養(yǎng)

將誘導(dǎo)的新莖剪段轉(zhuǎn)接入繼代培養(yǎng)基MS+0.3 mg/L6-BA+0.05 mg/L NAA+30 mg/g蔗糖+6 mg/g瓊脂中，培養(yǎng)基pH和培養(yǎng)條件同初代培養(yǎng)，約20 d后叢生芽產(chǎn)生，40 d后有5～6個芽體長至5～6 cm，此時可轉(zhuǎn)瓶剪段在繼代培養(yǎng)基中繼續(xù)擴(kuò)繁（圖1）。

圖1 黑果枸杞的組織培養(yǎng)繼代苗

4 生根培養(yǎng)

將繼代培養(yǎng)出的嫩莖剪成1.5～2.0 cm小段，接入生根培養(yǎng)基1/2MS+0.5 mg/L IAA+15 mg/g蔗糖+6 mg/g瓊脂中進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)基pH和培養(yǎng)條件同初代培養(yǎng)，約20 d長出不定根，30 d后多數(shù)試管苗生3～5條根（圖2），生根率可達(dá)90%以上。

圖2 黑果枸杞的組織培養(yǎng)生根苗

5 煉苗及移栽

將高5 cm、具有3～5條根的試管苗，閉瓶逐步移到散射光的自然環(huán)境中煉苗7 d，然后從瓶中取出，35℃以下溫水洗凈根部培養(yǎng)基，用63穴育苗盤、營養(yǎng)缽、花盆裝蛭石和珍珠巖（1∶1）基質(zhì)進(jìn)行移栽，在智能溫室中，將育苗盤放在育苗床上，相對濕度控制在65%，溫度控制在25℃進(jìn)行培養(yǎng)煉苗［5］，成活率可達(dá)80%以上。

［1］甘青梅，駱桂法，李普衍，等.藏藥黑果枸杞開發(fā)利用的研究［J］.青海科技，1997，4（1）：17-19.

［2］王龍強(qiáng)，藺海明.黑果枸杞苗期耐鹽機(jī)制研究［J］.科技導(dǎo)報，2011，29（10）：29-33.

［3］王海秀.柴達(dá)木黑果枸杞培育技術(shù)［J］.防護(hù)林科技，2010（2）：121.

［4］李世忠.永靖縣黑果枸杞育苗技術(shù)［J］.林業(yè)實用技術(shù)，2011（7）：48-49.

［5］聶玉鴻，儲朝霞，任廷貴，等.黑果枸杞塑料大棚育苗技術(shù)［J］.甘肅農(nóng)業(yè)科技，2014（1）：64-65.

（本文責(zé)編：陳珩）

S567.1

A

1001-1463（2015）05-0073-02

10.3969/j.issn.1001-1463.2015.05.024

2014-12-29

國家國際科技合作計劃項目（2012DFR30830）

胡相偉（1975—），男，甘肅榆中人，高級工程師，主要從事林木花卉繁育和育種工作。聯(lián)系電話：（0931）6262121；（0）13619310667。E-mial：hxw5129@126.com