植物乳桿菌NCU116發(fā)酵胡蘿卜漿對免疫抑制小鼠腸道黏膜免疫的影響

謝俊華，聶少平，丁 翹，余 強，胡婕倫，熊 濤，謝明勇

（南昌大學 食品科學與技術(shù)國家重點實驗室，江西 南昌 330047）

植物乳桿菌NCU116發(fā)酵胡蘿卜漿對免疫抑制小鼠腸道黏膜免疫的影響

謝俊華，聶少平*，丁 翹，余 強，胡婕倫，熊 濤，謝明勇

（南昌大學 食品科學與技術(shù)國家重點實驗室，江西 南昌 330047）

目的：探討植物乳桿菌NCU116發(fā)酵胡蘿卜漿對免疫抑制小鼠腸道黏膜免疫的影響。方法：利用環(huán)磷酰胺建立免疫抑制小鼠模型，將小鼠隨機分為5 組，即正常對照組、模型組、胡蘿卜原漿組、發(fā)酵胡蘿卜漿組、滅活發(fā)酵胡蘿卜漿組。小鼠以灌胃的方式給予胡蘿卜原漿、發(fā)酵胡蘿卜漿和滅活發(fā)酵胡蘿卜漿后，分別測定各組小鼠胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)，酶聯(lián)免疫吸附實驗（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）方法測定小腸組織白細胞介素-2（interleukin-2，IL-2）、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、IL-10和分泌型免疫球蛋白A（secretory immunglobulin A，sIgA）含量，小腸組織病理學觀察及直接免疫熒光檢測IgA分泌B細胞數(shù)。結(jié)果：實驗組與模型組相比，植物乳桿菌NCU116發(fā)酵胡蘿卜漿能顯著提高小鼠胸腺和脾臟指數(shù)，增加IgA分泌B細胞數(shù)量，提高細胞因子IL-2和sIgA的水平，改善腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)，但TNF-α和IL-10含量沒有顯著增加。結(jié)論：植物乳桿菌NCU116發(fā)酵胡蘿卜漿能有效拮抗環(huán)磷酰胺對小鼠免疫功能的抑制作用和腸道結(jié)構(gòu)損傷作用，提高免疫抑制小鼠的免疫功能和改善腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)。

植物乳桿菌NCU116；發(fā)酵胡蘿卜漿；腸道黏膜免疫

腸道不僅是消化吸收的重要場所，也是機體最大的免疫器官，腸道黏膜表面積龐大，它的結(jié)構(gòu)和功能構(gòu)成強大的黏膜免疫系統(tǒng)[1]。乳酸菌作為機體腸道中重要的生理菌群，在預防和治療急性胃腸炎、緩解過敏、抑制腸道炎癥反應等免疫調(diào)節(jié)方面有重要作用[2]。但是由于不同乳酸菌細胞壁的蛋白表達譜和DNA未甲基化的胞嘧啶鳥嘌呤（cytidine-phosphatte-guanine，CpG）二核苷酸含量存在差異，因此不同益生菌對機體的免疫調(diào)節(jié)作用存在特異性[3]。乳酸菌可以通過調(diào)節(jié)相關免疫細胞的增殖分化、表面分子的表達以及細胞因子的分泌等作用增強機體免疫能力，如增強腸道巨噬細胞的吞噬能力[4]、增加腸道樹突狀細胞（dendritic cells，DCs）及巨噬細胞表達CD80、CD86、MHCⅡ分子[5]、增加小腸固有層IgA分泌B細胞數(shù)量[6]、增加腸道中抗炎性因子白細胞介素-10（interleukin-10，IL-10）和干擾素-γ（interferon-γ，IFN-γ）的分泌量[7]。

IL-2、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）是主要由機體活化T細胞分泌的促炎細胞因子[8]；IL-10是重要的抗炎因子，能抑制輔助性T細胞、自然殺傷性細胞（natural killer cells，NKs）和巨噬細胞的活性[9]。分別調(diào)節(jié)機體細胞免疫和體液免疫水平，兩者的平衡和適度的分泌水平在維持機體正常免疫功能方面有重要作用[10]。乳酸菌通過識別腸道上皮細胞及相關免疫細胞如DCs的模式識別受體（pattern recognition receptors，PRRs），由促分裂原激活蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases，MAPKs）、核轉(zhuǎn)錄因子κB（nuclear factor κB，NF-κB）等通路將信號級連放大并傳遞給下游相關免疫細胞如T細胞、巨噬細胞等，介導免疫細胞增殖和分化并分泌相關細胞因子、趨化因子和其他效應因子[11]，如促進IgA分泌B細胞的增殖和分化，提高腸道黏膜分泌型免疫球蛋白A（secretory immunglobulin A，sIgA）分泌水平。

植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum）NCU116是由本課題組從泡菜老液中分離得到的一株益生菌[12]。研究表明，它具有較好的培養(yǎng)特性[13-16]，能有效改善機體的一些疾病，如非酒精性脂肪肝[17]、高血脂[18]、2型糖尿病[19]。胡蘿卜是常食用的蔬菜之一，富含功能性成分維生素和礦物質(zhì)，尤其含有大量類胡蘿卜素，研究表明攝入一定量的類胡蘿卜素能提高機體免疫功能和抑制腫瘤生長[20-21]，并且經(jīng)益生菌發(fā)酵的果蔬產(chǎn)品能增加它的營養(yǎng)和益生作用[19]。但目前還沒有研究報道植物乳桿菌NCU116發(fā)酵產(chǎn)品對腸道黏膜免疫的影響，為此本實驗采用化療藥環(huán)磷酰胺誘導建立小鼠免疫抑制模型，探討植物乳桿菌NCU116發(fā)酵胡蘿卜漿對小鼠腸道黏膜免疫的影響，以期為植物乳桿菌NCU116在果蔬發(fā)酵產(chǎn)品中的應用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

植物乳桿菌NCU116菌粉發(fā)酵胡蘿卜漿產(chǎn)品由本課題組提供。

清潔級BALB/c小鼠40 只，雌性，6～8 周齡，體質(zhì)量（20±2） g，購自北京華阜康生物科技股份有限公司，許可證號：SCXK（京）2014-0004。

環(huán)磷酰胺（批號：07112221） 江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司；小鼠TNF-α、IL-2、IL-10酶聯(lián)免疫吸附實驗（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）試劑盒 武漢博士德生物工程有限公司；小鼠sIgA ELISA試劑盒 武漢優(yōu)爾生科技股份有限公司；IgA-異硫氰酸熒光素（fluorescein isothiocyanate，F(xiàn)ITC）標記抗體 英國Abcam公司；檸檬酸鈉修復液、4’,6-二脒基-2-苯基吲哚（4’,6-diamidino-2-phenylindole，DAPI）復染液、蘇木精-伊紅（hematoxylin-eosin，HE）染色液 上海碧云天生物技術(shù)有限公司；其他試劑為國產(chǎn)分析純。

1.2 儀器與設備

3K15高速冷凍離心機 德國Sigma公司；E-330酶標儀 美國Thermo公司；生物顯微鏡、倒置顯微鏡 日本Olympus公司；SHP-150型生化培養(yǎng)箱 上海森信實驗儀器有限公司；自動組織脫水機、生物組織包埋機、電腦生物組織攤烤片機、輪轉(zhuǎn)式切片機 浙江省金華市科迪儀器設備有限公司。

1.3 方法

1.3.1 樣品制備

當?shù)厥惺坌迈r胡蘿卜經(jīng)過如下加工流程[22]制得未發(fā)酵胡蘿卜原漿（A）、發(fā)酵胡蘿卜漿（B）和滅菌胡蘿卜漿（C）。

為保證發(fā)酵胡蘿卜漿中活菌含量，在實驗之前，對其活菌數(shù)進行測定。用MRS（Man-Rogosa-Sharpe）培養(yǎng)基梯度稀釋發(fā)酵胡蘿卜漿樣品至合適濃度，37 ℃培養(yǎng)48 h后對菌落進行計數(shù)。結(jié)果顯示發(fā)酵胡蘿卜漿活菌含量為109CFU/g。

1.3.2 動物分組與處理

將小鼠適應飼養(yǎng)一周后，隨機分為5 組，每組8 只，分別為正常對照組（A組）、模型組（B組）、胡蘿卜原漿組（C組）、發(fā)酵胡蘿卜漿組（D組）、滅活發(fā)酵胡蘿卜漿組（E組）。除正常對照組外，各組小鼠連續(xù)3 d腹腔注射環(huán)磷酰胺80 mg/（kg·d）建立免疫抑制小鼠模型，造模結(jié)束后隨機選取正常對照組和模型組各2 只小鼠，測定免疫器官指數(shù)和血清中IL-2含量，結(jié)果顯示模型組小鼠器官指數(shù)和血清中IL-2含量明顯低于正常對照組，說明免疫抑制小鼠模型建立成功。然后實驗組分別灌胃10 mL/（kg·d）胡蘿卜原漿、發(fā)酵胡蘿卜漿和滅活發(fā)酵胡蘿卜漿，正常對照組、模型組給予等體積的生理鹽水，每天上午9點灌胃一次，連續(xù)灌胃21 d。飼養(yǎng)環(huán)境溫度（22±1）℃，相對濕度（50±10）%，按照12 h光照/12 h黑暗，自由飲食、飲水。

1.3.3 計算小鼠胸腺和脾臟指數(shù)

末次給藥24 h后，稱體質(zhì)量，頸椎脫臼處死小鼠，立即分離出胸腺和脾臟。以胸腺或脾臟質(zhì)量和體質(zhì)量的比值表示胸腺和脾臟指數(shù)（mg/g）。

1.3.4 小腸組織細胞因子含量的檢測

取約100 mg空腸組織用冷生理鹽水制成10%組織勻漿，3 000 r/min離心15 min，收集上清液，分別按照IL-2、IL-10、TNF-α和sIgA ELISA試劑盒操作說明，測定相應細胞因子的含量。

1.3.5 小腸組織病理學觀察

取適量空腸組織，參照Chen Changying等[23]的方法進行HE染色，100 倍光學顯微鏡下詳細觀察和比較空腸黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化，并應用圖像分析系統(tǒng)（Image-Pro Plus 6.0），具體測量腸絨毛長度和隱窩深度。每段空腸取3 張切片進行拍照，每張切片隨機選取2 個視野對5 根最長腸絨毛的長度（以腸腺絨毛連接處到絨毛頂端為準）和最深隱窩深度（以腸腺絨毛連接處到腸腺基部為準）進行測量，并取平均值。

1.3.6 小腸組織直接免疫熒光法檢測IgA分泌B細胞

直接免疫熒光法檢測IgA分泌B細胞參照de Moreno等[24]的方法，每段空腸取1 張切片進行200 倍熒光顯微鏡視野下觀察拍照，每張切片隨機選取2 個視野運用Image-Pro Plus 6.0計數(shù)IgA分泌B細胞數(shù)，并取平均值。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

2 結(jié)果與分析

2.1 植物乳桿菌NCU116發(fā)酵胡蘿卜漿對免疫抑制小鼠胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)的影響

免疫系統(tǒng)是生物必備的防御機構(gòu)，由免疫器官、免疫細胞、免疫分子組成。胸腺、脾臟組織是機體的主要免疫器官，胸腺、脾臟指數(shù)的高低客觀地反映機體非特異性免疫能力強弱[25]。由表1可知，環(huán)磷酰胺造模后，模型組小鼠的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)顯著低于正常對照組（P＜0.05），說明小鼠免疫抑制模型造模成功。與模型組胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)比較，胡蘿卜原漿組、發(fā)酵胡蘿卜漿組、滅活發(fā)酵胡蘿卜漿組胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)都顯著增加（P＜0.05）。與正常對照組相比，胡蘿卜原漿組胸腺指數(shù)顯著降低（P＜0.05），而脾臟指數(shù)沒有顯著性差異；發(fā)酵胡蘿卜漿組的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)和滅活發(fā)酵胡蘿卜漿組的脾臟指數(shù)都明顯高于正常對照組（P＜0.05）。

表1 各組小鼠胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)測定結(jié)果Table 1 Thymus and spleen indices in immunosuppressed mice

2.2 植物乳桿菌NCU116發(fā)酵胡蘿卜漿對免疫抑制小鼠細胞因子水平的影響

表2 各組小鼠小腸組織細胞因子含量Table 2 Contents of cytokines in the small intestine of immunosuppressed mice

取空腸組織勻漿上清，適當梯度稀釋，采用ELISA法測定IL-2、IL-10、TNF-α和sIgA含量，結(jié)果如表2所示。IL-2、TNF-α和IL-10是3 個重要介導免疫反應的細胞因子，sIgA是介導體液免疫的一個重要抗體。由表2可知，模型組與正常對照組相比，小鼠空腸組織IL-2、TNF-α、IL-10和sIgA分泌水平都顯著降低（P＜0.05）。發(fā)酵胡蘿卜漿組sIgA含量較模型組顯著增加（P＜0.05），但是IL-2、TNF-α和IL-10含量與模型組相比并無顯著性差異。滅活發(fā)酵胡蘿卜漿組IL-2含量與模型組相比顯著增加（P＜0.05），滅活發(fā)酵胡蘿卜漿組sIgA含量與模型組相比顯著增加（P＜0.05），而TNF-α含量與模型組相比顯著降低（P＜0.05），IL-10含量與模型組相比無顯著性差異。胡蘿卜原漿組發(fā)酵IL-2和TNF-α含量與模型組相比無統(tǒng)計學差異，sIgA含量顯著高于模型組（P＜0.05），而IL-10含量顯著低于模型組（P＜0.05），其分泌水平低于發(fā)酵胡蘿卜漿組和滅活發(fā)酵胡蘿卜漿組。

2.3 小腸組織病理學觀察

圖1 各組小鼠空腸組織病理學觀察（HE，×100）Fig.1 Histopathological observations of the jejunum from different groups (HE, × 100）

小腸組織病理學觀察如圖1所示，正常對照組（圖1A）小腸絨毛排列整齊、較深隱窩、腸壁厚實明確的刷狀緣，而模型組（圖1B）絨毛長度明顯下降、隱窩變淺或無、腸壁變薄、輕微水腫并且部分細胞有炎性浸潤。免疫抑制小鼠在給予植物乳桿菌NCU116發(fā)酵胡蘿卜漿（圖1D）和滅活發(fā)酵胡蘿卜漿（圖1E）后腸道相關結(jié)構(gòu)形態(tài)得到不同程度的改善。而胡蘿卜原漿組（圖1C）小鼠空腸組織結(jié)構(gòu)改善作用相比發(fā)酵胡蘿卜漿組和滅活發(fā)酵胡蘿卜漿組不明顯。

圖2 各組小鼠空腸組織絨毛長度和隱窩深度（HE，×100）Fig.2 Villus length and crypt depth in the jejunum from different groups (HE, × 100)

如圖2所示，模型組空腸絨毛長度和隱窩深度較正常對照組都顯著降低（P＜0.05）。免疫抑制小鼠在給予植物乳桿菌NCU116發(fā)酵胡蘿卜漿和滅活發(fā)酵胡蘿卜漿后空腸絨毛長度和隱窩深度顯著增加（P＜0.05），部分已經(jīng)恢復到正常對照組小鼠的狀態(tài)。而胡蘿卜原漿組小鼠空腸組織結(jié)構(gòu)沒有得到顯著的改善，隱窩深度還有降低的趨勢。

2.4 植物乳桿菌NCU116發(fā)酵胡蘿卜漿對免疫抑制小鼠IgA分泌B細胞數(shù)量的影響

圖3 直接免疫熒光法檢測各組小鼠空腸IgA分泌B細胞（IF，×200）Fig.3 Immunofluorescence assay for IgA-secreting B cells in the jejunum of mice (IF, × 200)

每段空腸取3 張切片進行直接免疫熒光法檢測IgA分泌B細胞，DAPI復染核和IgA-FITC標記抗體如圖3所示，每張切片隨機選取2 個視野運用Image-Pro Plus 6.0計數(shù)IgA分泌B細胞數(shù)，并取平均值如圖4所示。

圖4 實驗各組小鼠空腸IgA分泌B細胞數(shù)量（IF，×200）Fig.4 IgA-secreting B cells in the jejunum of mice (IF, × 200)

IgA分泌B細胞是分泌sIgA抗體的重要免疫細胞。如圖4所示，模型組的IgA分泌B細胞數(shù)量顯著低于正常對照組（P＜0.05），在給予植物乳桿菌NCU116發(fā)酵胡蘿卜漿后，發(fā)酵胡蘿卜漿組、滅活發(fā)酵胡蘿卜漿組分別較模型組的IgA分泌B細胞數(shù)量顯著性增加（P＜0.05）。胡蘿卜原漿組IgA分泌B細胞數(shù)量與模型組無顯著差異，并且顯著低于正常對照組水平（P＜0.05）。

3 討 論

胸腺和脾臟是機體重要的免疫器官，發(fā)育情況的好壞決定機體免疫力的強弱。石峰等[26]用添加0.3%乳酸菌微生態(tài)制劑飼喂AA肉雞，結(jié)果顯示，添加0.3%乳酸菌微生態(tài)制劑組與對照組比較，脾臟和胸腺指數(shù)分別提高了44.26%、13.51%。可能是由于乳酸菌在腸道內(nèi)大量繁殖并合成了許多有益物質(zhì)如維生素和氨基酸等，為免疫器官的發(fā)育提供了營養(yǎng)物質(zhì)，另外，也可能是乳酸菌作為抗原物質(zhì)刺激了免疫器官的生長發(fā)育。實驗結(jié)果表明，發(fā)酵胡蘿卜漿組和滅活發(fā)酵胡蘿卜漿組的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)都不同程度的高于模型組；并且顯著高于正常對照組，推斷可能由于給予小鼠發(fā)酵胡蘿卜漿劑量太大，超過小鼠的免疫耐受范圍，引起過度的免疫反應。表明攝入適量的植物乳桿菌NCU116發(fā)酵胡蘿卜漿可以促進機體免疫器官的生長發(fā)育，從而可以增強動物體的免疫機能。

腸道是機體最大的免疫器官，其中腸相關淋巴組織（gut associated lymphoid tissues，GALT）是發(fā)揮免疫功能的主要部分，主要作用是防止病原體通過黏膜免疫系統(tǒng)侵害機體[27]。GALT由派伊爾結(jié)、腸系膜淋巴結(jié)、固有層和腸上皮中的大量淋巴細胞組成。而固有層中的B細胞被激活后，可分化成IgA分泌B細胞。de Merono等[28]研究也表明，長期攝入益生菌發(fā)酵乳能增加腸道相關免疫因子分泌細胞如IgA分泌B細胞的數(shù)量顯著增加。有研究表明乳酸菌可通過腸道黏膜DCs，刺激B細胞遷移，進而促進IgA分泌B細胞分化[29]。實驗結(jié)果表明在給予植物乳桿菌NCU116發(fā)酵胡蘿卜漿后能刺激腸道IgA分泌B細胞的增殖。

IL-2、TNF-α和IL-10是3 個重要的細胞因子，IL-2主要由活化的T淋巴細胞分泌并參與淋巴細胞的增殖、成熟和分化，在調(diào)節(jié)黏膜免疫中有重要作用[30]；TNF-α主要由單核細胞/巨噬細胞和T淋巴細胞產(chǎn)生，并且參與調(diào)節(jié)炎癥反應和細胞免疫反應包括吞噬作用[31]；IL-10是調(diào)節(jié)機體免疫反應水平的重要細胞因子，能抑制輔助型T細胞、NK細胞和巨噬細胞的活性，防止機體過度免疫反應[9]。免疫球蛋白是機體分泌能與抗原發(fā)生反應的一類蛋白質(zhì)，其含量的高低決定著機體免疫力的強弱[32]，sIgA是腸道黏膜免疫中重要的應答抗體，分泌至腸腔可以通過免疫排斥作用防止病原菌在腸上皮細胞的黏附[33]。研究表明IL-5能刺激B細胞的增殖與分化，促進活化的B細胞分化成IgA分泌B細胞，而IL-2能夠增強IL-5的作用，促進sIgA的生成[34]。朱于敏等[35]給小鼠灌服酸奶，然后測定其血清中的IL-2的含量，發(fā)現(xiàn)IL-2含量顯著升高，表明乳酸菌對IL-2具有正調(diào)節(jié)作用。實驗結(jié)果表明，發(fā)酵胡蘿卜漿組和滅活發(fā)酵胡蘿卜漿組小鼠的IL-2、sIgA含量和IgA分泌B細胞數(shù)均顯著高于模型組，說明植物乳桿菌NCU116發(fā)酵胡蘿卜漿對IL-2具有正調(diào)節(jié)作用，進而可能促進sIgA的分泌。TNF-α和IL-10是兩種重要的細胞因子，實驗結(jié)果表明，植物乳桿菌NCU116發(fā)酵胡蘿卜漿對TNF-α和IL-10含量沒有顯著影響，這有可能跟植物乳桿菌NCU116本身的免疫調(diào)節(jié)機制有關，有報道稱不同乳酸菌介導TNF-α和IL-10分泌的能力不同[2]，甚至有下調(diào)的作用[28]。

小腸的正常組織結(jié)構(gòu)是營養(yǎng)物質(zhì)被充分消化吸收的保障，小腸絨毛的長度和數(shù)量與腸道生理功能密切相關[36]。小腸絨毛變長、數(shù)量增加，進而增加小腸黏膜面積，有利于微生物的定殖和對營養(yǎng)物質(zhì)的利用，從而促進小腸消化和吸收。微生物及其代謝產(chǎn)物能夠引起腸壁的厚度增加，使更多的固有膜延伸到腸絨毛中央。Maldonado等[37]研究表明益生菌發(fā)酵乳能改善腸道組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)；易陽等[38]研究報道肉鴨攝入合生素（益生菌與益生元結(jié)合使用的生物制劑）可顯著增加十二指腸絨毛長度（P＜0.05）。本實驗結(jié)果表明，免疫抑制小鼠在給予植物乳桿菌NCU116發(fā)酵胡蘿卜漿后小腸絨毛和隱窩深度顯著增加，腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)也得到明顯改善。

綜上所述，植物乳桿菌NCU116發(fā)酵胡蘿卜漿和滅活發(fā)酵胡蘿卜漿不僅能改善環(huán)磷酰胺對腸道結(jié)構(gòu)的損傷，還能通過增加免疫器官指數(shù)，增加免疫細胞的增殖和分化，促進細胞因子分泌，從而發(fā)揮對免疫抑制小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用。上述結(jié)果及分析推斷發(fā)酵胡蘿卜漿的免疫調(diào)節(jié)作用優(yōu)于滅活發(fā)酵胡蘿卜漿。本實驗結(jié)果可為更充分利用乳酸菌、開發(fā)出更多功能的乳酸菌制品提供理論依據(jù)與實踐指導。

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Effect of Carrot Slurry Fermented with Lactobacillus plantarum NCU116 on Intestinal Mucosal Immunity in Immunosuppressed Mice

XIE Junhua, NIE Shaoping*, DING Qiao, YU Qiang, HU Jielun, XIONG Tao, XIE Mingyong
(State Key Laboratory of Food Science and Technology, Nanchang University, Nanchang 330047, China)

Objective: To study the effect of carrot slurry fermented with Lactobacillus plantarum NCU116 on intestinal mucosal immunity in immunosuppressed mice. Methods: Immunosuppressed mouse model was established by intraperitoneal injection of cyclophosphamid. Forty mice were randomly divided into 5 groups: blank control group, model control group, carrot slurry group, fermented carrot slurry group and sterilized fermented carrot slurry group. The mice were administered with slurry fermented with Lactobacillus plantarum NCU116 and sterilized fermented carrot slurry at a dose of 10 mL/(kg·d) for 21 consecutive days. At 24 h after the last administration, the mice in each group were sacrificed. Thymus and spleen indices were determined, the contents of IL-2, TNF-α, IL-10 and sIgA in small intestine were determined by using quantitative sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kits, small intestine morphology was observed by hematoxylin-eosin (HE) stained section and immunofluorescence was used to assay IgA-secreting B cells. Results: Compared to the model control, carrot slurry fermented with Lactobacillus plantarum NCU116 could significantly increase thymus and spleen indices and the number of IgA-secreting B cells, enhance IL-2 and sIgA levels and improve the intestinal morphological structure. But the concentrations of TNF-α and IL-10 were not significantly increased. Conclusion: Carrot slurry fermented with Lactobacillus plantarum NCU116 can effectively antagonize cyclophosphamide-induced immune suppression and ameliorate intestinal morphological damage in mice, enhance immune function and improve intestinal morphology in immunosuppressed mice.

Lactobacillus plantarum NCU116; fermented carrot slurry; intestinal mucosal immunity

TS201.3

A

1002-6630（2015）21-0201-06

10.7506/spkx1002-6630-201521038

2015-05-09

國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃（863計劃）項目（2011AA100904）

謝俊華（1991—），男，碩士研究生，研究方向為食品營養(yǎng)與安全。E-mail：jhxie6@163.com

*通信作者：聶少平（1978—），男，教授，博士，研究方向為食品化學與分析、食品營養(yǎng)與安全、食品復雜碳水化合物。

E-mail：spnie@ncu.edu.cn