谷紅對大鼠腦出血血腫周圍NGB和IL-6表達的影響

趙春莉 董志揚 何 洋 劉舒婷 柳 穎 李 純

（大連市友誼醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，遼寧 大連 116001）

谷紅對大鼠腦出血血腫周圍NGB和IL-6表達的影響

趙春莉 董志揚 何 洋 劉舒婷 柳 穎 李 純

（大連市友誼醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，遼寧 大連 116001）

目的研究谷紅對腦出血大鼠的腦保護作用。方法建立大鼠腦出血模型，檢測NGB和IL-6在腦出血后血腫周圍不同時間的表達。結(jié)果藥物干預(yù)組較出血組神經(jīng)功能缺損評分明顯降低。干預(yù)組NGB表達較腦出血組明顯增多。腦出血組IL-6陽性表達比干預(yù)組明顯增加。結(jié)論谷紅對腦出血所致的神經(jīng)元損傷有明顯的保護作用。

腦出血；腦紅蛋白；IL-6；谷紅

通過動物實驗觀察谷紅對腦出血（ICH）大鼠血腫周圍腦組織腦紅蛋白（NGB）和IL-6的表達影響，探討谷紅腦保護的作用機制。

1 材料與方法

1.1 實驗材料：雄性SD大鼠72只，兔抗鼠腦紅蛋白多克隆抗體，SABC試劑盒，DAB濃縮顯色劑，谷紅。

1.2 實驗方法

1.2.1 SD大鼠隨機分為3組（n=24）：對照組，腦出血組，藥物干預(yù)組。模型建立后12、24、48、72 h各隨機分為4個亞組。術(shù)后半小時腹腔注射（0.8 mL/kg）。

1.2.2 參照李春巖等的方法[1]建立大鼠自體動脈血腦出血動物模型。動物蘇醒后迅速出現(xiàn)行為和神經(jīng)功能的異常，異常程度與病變嚴重程度一致。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理：實驗結(jié)果應(yīng)用SPSS13.0分析軟件分析，實驗組組間數(shù)據(jù)采用秩和檢驗，指標(biāo)間與組內(nèi)比較采用t檢驗，P＜0.05為差異有顯著性。

2 結(jié) 果

2.1 神經(jīng)功能評分：出血24 h后按Berderson法行神經(jīng)功能評價。藥物干預(yù)組較出血組神經(jīng)功能缺損評分明顯降低（1.792，2.375），差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

2.2 免疫組化檢測：常規(guī)石蠟包埋，切片，分別記錄NGB、IL-6在血腫周圍皮質(zhì)區(qū)陽性細胞數(shù)。

2.2.1 NGB的表達：NGB在腦出血12 h后即有表達，24 h達高峰，72 h后逐漸下降，實驗組較對照組NGB表達明顯增多，P＜0.01；干預(yù)組較出血組明顯增多，P＜0.01，見表1。

表1 各時間點NGB在血腫周圍的表達

2.2.2 IL-6的表達：腦出血12 h后血腫周圍皮質(zhì)區(qū)即出現(xiàn)大量IL-6陽性表達，48 h達高峰，后逐漸減少，組內(nèi)各時間點比較差異顯著，P＜0.01。見表2。

表2 各時間點IL-6B在血腫周圍表達

3 結(jié) 論

腦出血后，NGB在腦出血組較對照組血腫周圍皮質(zhì)表達上調(diào)。谷紅對腦出血后所致的神經(jīng)元損傷的保護作用明顯，有效減輕神經(jīng)功能缺損癥狀，IL-6的表達減少。

4 討 論

4.1 腦紅蛋白對神經(jīng)元的保護作用：NGB由Burmester等在2000年報道，在缺氧、缺血時以五配體形式存在，與氧的親和性較高，VEGF等可促進其生成增加[2]。主要通過促進氧擴散入線粒體增加ATP的產(chǎn)生保護中樞神經(jīng)細胞。NGB通過清除氧自由基、參與信號傳導(dǎo)通路的調(diào)節(jié)、影響凋亡調(diào)節(jié)蛋白Bcl22、Bax的表達[3]，參與神經(jīng)細胞缺氧缺血的應(yīng)激反應(yīng)[4]，促進腦部正常發(fā)育和成熟[5]。本動物實驗顯示：NGB在腦出血12 h后血腫周圍皮質(zhì)區(qū)迅速增高，24 h達高峰，持續(xù)至48 h，72 h后開始減少。NGB變化可能為腦組織的保護反應(yīng)。在出血后的相同時間點，NGB在藥物干預(yù)組較出血組表達增多，表明谷紅通過增加NGB表達，改善腦組織局部缺血缺氧，達到到神經(jīng)保護作用。

4.2 IL-6對腦出血血腫周圍組織的影響：顱內(nèi)IL-6在生理狀態(tài)下低表達，具有重要的神經(jīng)內(nèi)分泌功能。研究發(fā)現(xiàn)，大鼠腦出血后血腫周圍很快有IL-6大量產(chǎn)生。高濃度的IL-6可導(dǎo)致腦神經(jīng)損傷：通過增加內(nèi)皮細胞與細胞間黏附分子黏附，導(dǎo)致微循環(huán)障礙；通過激活補體系統(tǒng)，引起神經(jīng)組織的二次損傷[6]。本實驗顯示IL-6在出血組表達明顯高于對照組，表明IL-6水平與腦出血病程有關(guān)。

本研究通過大鼠腦出血后谷紅干預(yù)治療后神經(jīng)功能缺損、NGB、IL-6表達比較，發(fā)現(xiàn)谷紅在腦出血急性期有明顯的神經(jīng)保護作用。

[1]李春巖,劉瑞春,胡書超,等.大鼠自體動脈血腦出血動物模型的建立[J].腦與神經(jīng)疾病雜志,2003,11(6):341-344.

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Effect of Kingtag on Expression of NGB and IL-6 in Tissue Around Intracerebral Hemorrhage（ICH） Area in Rats

ZHAO Chun-li, DONG Zhi-yang, HE Yang, LIU Shu-ting, LIU Ying, LI Chun
(Department of Critical Care Medicine, Dalian Friendship Hospital, Dalian 116001, China)

ObjectiveTo study protective effect of Guhong on cerebral hemorrhage of rats.MethodICH model was established in SD rats, NGB and IL-6 around haematoma were compared respectively.ResultNeurological deficit score in the drug intervention group was significantly lower than the ICH group. NGB In intervention group increased obviously than ICH group. The positive expression of IL-6 was significantly higher in ICH group than intervention group.ConclusionGuhong had a clear protective effect on neurons damage caused by cerebral hemorrhage.

Cerebral hemorrhage; Neuroglobin; IL-6; Guhong

R743.34

B

1671-8194（2015）07-0044-02