吲哚乙酸（IAA）對(duì)黑脈羊肚菌胞外SOD活性的影響*

李飛翔，張 麗，吳素蕊，趙天瑞，張 鑫

（1.昆明理工大學(xué)云南省食品安全研究院，云南 昆明 650500；2.中華全國(guó)供銷合作總社昆明食用菌研究所，云南 昆明 650221）

吲哚乙酸（IAA）對(duì)黑脈羊肚菌胞外SOD活性的影響*

李飛翔1，張 麗1，吳素蕊2**，趙天瑞1，張 鑫2

（1.昆明理工大學(xué)云南省食品安全研究院，云南 昆明 650500；2.中華全國(guó)供銷合作總社昆明食用菌研究所，云南 昆明 650221）

為了優(yōu)化液體發(fā)酵環(huán)境條件，通過向培養(yǎng)基中添加吲哚乙酸（IAA），改變培養(yǎng)基成分組成的方法，研究吲哚乙酸對(duì)黑脈羊肚菌發(fā)酵培養(yǎng)產(chǎn)胞外SOD酶以及菌絲體生長(zhǎng)的影響。結(jié)果表明，黑脈羊肚菌發(fā)酵培養(yǎng)過程中，最適菌絲體生長(zhǎng)的培養(yǎng)條件為溫度28℃，初始pH7，培養(yǎng)時(shí)間9 d；最適產(chǎn)酶的培養(yǎng)條件為溫度20℃，初始pH5.5，培養(yǎng)時(shí)間5 d；IAA添加濃度為1.0 μg·mL－1時(shí)，菌絲體重量最大為14.03 g·L－1，濃度為2.5 μg·mL－1時(shí)，相對(duì)酶活性達(dá)到最高。

IAA；黑脈羊肚菌；胞外SOD；酶活

羊肚菌（Morchella）又名為羊肚菜，因其菌蓋呈褶皺網(wǎng)狀，極似羊肚而得名，是珍貴的野生食、藥兼用真菌，其營(yíng)養(yǎng)豐富、味道鮮美，具有重要的開發(fā)利用價(jià)值。在生物學(xué)分類上，羊肚菌屬于子囊菌亞門（Ascomycotina）、盤菌目（Pezizales）、羊肚菌科（Gorchellaceae）、羊肚菌屬（Morchella） 八類食用菌的總稱，主要包括羊肚菌（M.esculenta）、高羊肚菌（M.elata）、小羊肚菌（M.deliciosa）和黑脈羊肚菌（M.angusticeps）[1]。

羊肚菌富含營(yíng)養(yǎng)成分，同時(shí)又具有大量的生物活性物質(zhì)。據(jù)張廣倫等[2-3]對(duì)新疆野生粗柄羊肚菌的研究結(jié)果得知，粗柄羊肚菌子實(shí)體含水分12.86%、灰分5.21%、粗脂肪3.82%；粗柄羊肚菌中的粗脂肪由4種脂肪酸組成，其中亞油酸占56.0%，油酸占28.41%，硬脂酸占2.02%，軟脂酸占13.54%。研究表明，油酸和亞油酸具有升高高密度脂蛋白（HDL），降低低密度脂蛋白（LDL）和人體膽固醇濃度的生物學(xué)功能，能夠幫助機(jī)體預(yù)防動(dòng)脈硬化[4]，是重要的藥用成分。因此，高含量的亞油酸和油酸是羊肚菌具有藥用價(jià)值的重要原因之一[5]。吳素蕊等[6]對(duì)云南滇西北地區(qū)的4種黑脈羊肚菌營(yíng)養(yǎng)成分進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，黑脈羊肚菌富含多種營(yíng)養(yǎng)成分，其粗蛋白含量約為7.87 g/100g～9.79 g/100g，粗纖維含量約17.93 g/100g～24.81 g/100g，粗脂肪含量約5.44 g/100g～6.30 g/100g，灰分含量約8.18 g/100g～10.17 g/100g；黑脈羊肚菌中總氨基酸含量在16.19 g/100g～19.50 g/100g之間，其中含人體必需的氨基酸7種，必需氨基酸含量占總氨基酸的比值約為34.97%～37.99%，每種必需氨基酸與非必需氨基酸比值（E/N）達(dá)到0.54～0.61，基本接近FAO/WHO推薦的模式，是優(yōu)質(zhì)的蛋白源。

超氧化物歧化酶（SOD）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物等多種生物體內(nèi)，是一類非常重要且應(yīng)用較多的金屬酶。Mann和Keilin[7]于1938年首次從牛紅細(xì)胞中分離得到這種藍(lán)色的含銅蛋白。隨后，McCord及Fridovich[8]發(fā)現(xiàn)該蛋白有催化超氧陰離子自由基（·O2-），發(fā)生歧化反應(yīng)的功能，證實(shí)SOD是一種極其有效的氧自由基清除劑，可平衡機(jī)體的氧自由基。在臨床上，SOD已用于一些炎癥、腫瘤、皮膚病、心血管病等疾病的治療和防護(hù)。在國(guó)外，已有相關(guān)專利用于生產(chǎn)含SOD化妝品制劑、SOD消炎藥、治療局部缺血癥SOD制劑、抗輻射SOD膠囊產(chǎn)品等，美、日以及西歐一些國(guó)家早已有研究人員開發(fā)人SOD藥物，甚至有的已進(jìn)入了Ⅱ期和III期臨床試驗(yàn)，因而SOD是一種很有用途的藥用酶，引起了國(guó)內(nèi)外學(xué)者的廣泛興趣[9]。

由于特殊的生長(zhǎng)環(huán)境，黑脈羊肚菌目前還不能進(jìn)行人工栽培，無法大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化種植[10]，因此資源生物量十分有限。而利用野生黑脈羊肚菌子實(shí)體進(jìn)行SOD的提取和利用，生產(chǎn)成本會(huì)非常巨大。有研究表明，利用現(xiàn)代發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)的羊肚菌菌絲體及其液體發(fā)酵產(chǎn)物，與天然生長(zhǎng)的子實(shí)體中的營(yíng)養(yǎng)成分和生物活性物質(zhì)非常相似[11]，還能大大提高產(chǎn)量，因此利用發(fā)酵法生產(chǎn)SOD是一條經(jīng)濟(jì)可行的途徑。本文對(duì)液體培養(yǎng)黑脈羊肚菌胞外產(chǎn)SOD的培養(yǎng)條件，以及IAA對(duì)液體發(fā)酵培養(yǎng)黑脈羊肚菌胞外產(chǎn)SOD的影響進(jìn)行了研究，期冀為羊肚菌進(jìn)一步研究提供充分的理論基礎(chǔ)，以及為日后生產(chǎn)奠定必要的技術(shù)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1材料、試劑與儀器

黑脈羊肚菌菌種：由中華全國(guó)供銷合作總社昆明食用菌研究所提供。

試劑：石英砂、鄰苯三酚、NaH2PO3、Na2HPO3、KH2PO3、MgSO4·7H2O、EDTA·Na2、三羥甲基氨基甲烷（Tris）、鹽酸、IAA，均為國(guó)產(chǎn)分析純或化學(xué)純。

培養(yǎng)基：麥麩、葡萄糖、蛋白胨、可溶性淀粉、黃豆粉、瓊脂。

儀器：DHP-360型恒溫培養(yǎng)箱，北京光明醫(yī)療儀器廠；ES-315型高壓滅菌鍋，TOMY KOGYO CO. LTD；SW-CJ-ID凈化工作臺(tái)，蘇州凈化廠生產(chǎn)；HZQ-F16可控溫雙層震蕩培養(yǎng)箱，太倉(cāng)市豪成實(shí)驗(yàn)儀器制造有限公司；TU1901型雙光束紫外可見光分光光度計(jì)，北京普析通用儀器有限責(zé)任公司；FE20 pH計(jì)，梅特勒—托利儀器（上海）有限公司；TGL-16G飛鴿牌冷凍離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠；AL204型分析天平，梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1 培養(yǎng)基配制

（1）PDA培養(yǎng)基

馬鈴薯煮汁20%、葡萄糖2%、蛋白胨0.3%、MgSO4·7H2O 0.05%、KH2PO40.1%、瓊脂2%，pH為自然。

（2）液體發(fā)酵培養(yǎng)基

麥麩4%（將干麥麩以蒸餾水煮沸30 min，過濾并取其汁液）、葡萄糖1%、黃豆粉1%、可溶性淀粉2%。

1.2.2 接種與培養(yǎng)

（1）菌種活化

無菌環(huán)境下，在超凈臺(tái)內(nèi)將供試菌種接種于PDA培養(yǎng)基上，再將接入菌種的平板放入25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3 d，菌絲可長(zhǎng)滿平板。

（2）發(fā)酵培養(yǎng)

無菌操作，在凈化工作臺(tái)內(nèi)將活化后的菌種用內(nèi)徑為0.5 cm打孔器打孔，接種6塊（0.1 cm2·塊-1）液體培養(yǎng)基中，250 mL三角瓶裝液量為100 mL，后將其置于可控溫雙層搖床中進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)，轉(zhuǎn)速160 r·min－1，每組3個(gè)平行。

1.2.3 菌絲體濕重測(cè)定

待發(fā)酵結(jié)束后，將發(fā)酵液過濾，取菌絲體，將其用蒸餾水反復(fù)沖洗3遍，擠干水分并稱量菌絲體濕重。

1.2.4 胞外SOD提取測(cè)定

提取胞外SOD：無菌操作，在超凈臺(tái)內(nèi)將菌懸液過濾并均勻地取適量發(fā)酵液，4℃下8 000 r·min－1冷凍離心15 min，取上清液即為粗酶液。

測(cè)定胞外SOD活性：SOD酶活性測(cè)定采用改進(jìn)的鄰苯三酚自氧化法測(cè)定[12]。

（1）鄰苯三酚自氧化速率測(cè)定

室溫25℃左右，將pH8.0的0.1 mol·L－1Tris－HCl緩沖液（含有1 mmol·L－1EDTA·Na2） 2.25 mL，蒸餾水2.0 mL，4.5 mmol·L－1鄰苯三酚鹽酸溶液0.15 mL依次加入10 mL的離心管中。當(dāng)將鄰苯三酚鹽酸溶液加入離心管中之后，立即將其混合并倒入比色皿中，測(cè)定混合液在325 nm條件下的吸光值，記錄每30秒OD值隨時(shí)間的變化，共記錄330 s。計(jì)算在線性范圍內(nèi)每分鐘吸光度值的增加量（△A325），即為鄰苯三酚自氧化速率ΔA325（min）。

（2）SOD酶液抑制鄰苯三酚自氧化速率測(cè)定

步驟同（1），加入0.05 mL粗酶液與鄰苯三酚反應(yīng)，抑制其自氧化，測(cè)定在325 nm下的吸光值，記錄每30秒OD值隨時(shí)間的變化，共記錄330 s。每分鐘吸光值的變化率ΔA’325（min），即為粗酶液對(duì)鄰苯三酚自氧化速率的抑制。以緩沖液替代粗酶液作為空白對(duì)照。每組3個(gè)平行。酶活定義為25℃時(shí)鄰苯三酚自氧化速率被抑制50%時(shí)所需要SOD的量為一個(gè)活力單位。SOD活力（S，U·mL－1)公式為：

式中：△A325為鄰苯三酚自氧化速率；△A’325為加入SOD粗酶液時(shí)鄰苯三酚自氧化速率；V為加入粗酶液的體積（mL）；D為對(duì)粗酶液的稀釋倍數(shù)；4.5為反應(yīng)液的總體積（mL）。

1.2.5 蛋白質(zhì)含量測(cè)定

（1）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

取7支試管并進(jìn)行編號(hào)0～6，按表1所示加入試劑。加入堿性硫酸銅溶液后將溶液混勻，室溫下放置10 min，再加入Folin－酚試劑，立即將溶液混合均勻。從第1管Folin－酚試劑加入時(shí)開始計(jì)時(shí)，共計(jì)30 min，完成后在500 nm處測(cè)光密度值，0號(hào)為空白對(duì)照管，其他每管做3個(gè)平行，取平均值。

表1 測(cè)定蛋白質(zhì)含量標(biāo)準(zhǔn)曲線的試劑用量表Tab.1 Determination of the protein content of the standard curve reagent scale

以蛋白質(zhì)濃度作為橫坐標(biāo)，所測(cè)吸光度值作為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，如圖1所示。

圖1 蛋白質(zhì)濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.1 The standard curve of Protein density

（2）樣品的測(cè)定

按照樣液0.5 mL、蒸餾水0.5 mL、堿性硫酸銅溶液5 mL、Folin－酚試劑0.5 mL加樣，方法同上。

SOD比活力（S0，U·mL－1)的計(jì)算公式為：

式中：S表示SOD酶液活力（U·mL－1）；M表示酶液蛋白質(zhì)含量（mg·mL－1)。

2 結(jié)果與討論

2.1培養(yǎng)溫度對(duì)SOD活性的影響

在影響真菌菌絲生長(zhǎng)發(fā)育及中間代謝產(chǎn)物積累的各項(xiàng)物理因素中，溫度是最為重要的一個(gè)[13]，也是誘發(fā)活性氧產(chǎn)生的一個(gè)重要因素[14]。菌絲體的生長(zhǎng)代謝及次生產(chǎn)物的合成都是在各種酶的催化下進(jìn)行的，而適宜的溫度有助于酶發(fā)揮最大的催化活性，故探尋菌絲體的最適生長(zhǎng)溫度，對(duì)于優(yōu)化工藝條件有重要意義。

將接種好的液體發(fā)酵培養(yǎng)基分別置于10℃、15℃、20℃、25℃、28℃、30℃溫度下，初始pH值為自然pH，160 r·min－1搖瓶培養(yǎng)，按1.2.4對(duì)胞外SOD進(jìn)行提取測(cè)定并計(jì)算SOD比活力，按1.2.3稱量菌絲體濕重。結(jié)果見圖2。

圖2 發(fā)酵培養(yǎng)溫度對(duì)產(chǎn)胞外SOD的影響Fig.2 Effect of temperature on extracellular SOD produced

在15℃～35℃下對(duì)黑脈羊肚菌進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)，不同溫度下菌絲體的生長(zhǎng)情況以及產(chǎn)胞外SOD的情況如圖2所示，從圖2（a）可以看出在20℃下發(fā)酵培養(yǎng)，胞外SOD活性顯示最高。圖2（b）可以看出菌絲體在發(fā)酵溫度為20℃～30℃的條件下生長(zhǎng)較好，低于20℃和高于30℃時(shí)，所得菌絲體重量都較小，低溫使得菌絲體生長(zhǎng)緩慢，延長(zhǎng)了發(fā)酵周期，高溫會(huì)使部分蛋白質(zhì)、核酸等活性物質(zhì)發(fā)生變性，導(dǎo)致菌絲體的代謝功能衰退，發(fā)酵產(chǎn)量下降。在20℃下發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)，胞外SOD酶的比活力顯示最高，和菌絲體的最適生長(zhǎng)溫度（28℃）不一致，造成這種現(xiàn)象的原因是當(dāng)培養(yǎng)溫度適宜菌絲體生長(zhǎng)時(shí)，菌絲體生長(zhǎng)代謝速度加快，菌絲體的生長(zhǎng)優(yōu)于代謝產(chǎn)物的分泌。因此，選擇20℃作為黑脈羊肚菌發(fā)酵產(chǎn)胞外SOD的培養(yǎng)溫度。

2.2初始pH對(duì)SOD活性的影響

液體培養(yǎng)基作為菌絲體生活的外部環(huán)境，pH值的高低直接影響菌絲體的生長(zhǎng)和產(chǎn)物的合成，引起各種酶活力的改變，從而影響菌絲體對(duì)培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用速率，菌絲體的生長(zhǎng)代謝和所需產(chǎn)物的合成積累因此受到影響或抑制[15]。

用10%的鹽酸和5%的氫氧化鈉調(diào)解液體培養(yǎng)基的初始pH值分別為5.0、5.5、6.0、6.5、7.0，在不同初始pH值的液體培養(yǎng)基中20℃、160 r·min－1搖瓶培養(yǎng)，按1.2.4對(duì)胞外SOD進(jìn)行提取測(cè)定并計(jì)算SOD比活力，按1.2.3稱量菌絲體濕重。結(jié)果見圖3。

圖3 發(fā)酵液初始pH對(duì)產(chǎn)胞外SOD的影響Fig.3 Effect of pH on extracellular SOD produced

圖3（a）表明，pH5.5時(shí)，胞外SOD活力顯示最高，隨著pH值增大，胞外SOD活力呈下降趨勢(shì)，說明偏酸的環(huán)境更能刺激胞外SOD的分泌。圖3（b）表明，隨著pH值增大，胞外SOD的比活力呈下降趨勢(shì)。隨著pH值的增大，菌絲體重量逐漸增大，在pH7時(shí)，菌絲體生長(zhǎng)情況最好，此時(shí)菌絲體生長(zhǎng)的最適初始pH值與產(chǎn)酶最適初始pH值不一致，因?yàn)閷?shí)驗(yàn)考察的是發(fā)酵產(chǎn)酶情況，所以選擇pH5.5作為初始pH值。

2.3培養(yǎng)時(shí)間對(duì)SOD活性的影響

將接種好的發(fā)酵培養(yǎng)基，初始pH值調(diào)至5.5，于20℃、160 r·min－1搖瓶培養(yǎng)不同時(shí)間，每隔1 d取樣，按1.2.4對(duì)胞外SOD進(jìn)行提取測(cè)定并計(jì)算SOD比活力，按1.2.3稱量菌絲體濕重。結(jié)果見圖4。

圖4 發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)間對(duì)產(chǎn)胞外SOD的影響Fig.4 Effect of time on extracellular SOD produced

由圖4（a）可知，隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)，黑脈羊肚菌發(fā)酵培養(yǎng)產(chǎn)胞外SOD的酶活性逐漸升高，至發(fā)酵第5天時(shí)，所得酶活性最高，繼續(xù)延長(zhǎng)發(fā)酵時(shí)間，酶活性反而降低了。圖4（b）發(fā)現(xiàn)發(fā)酵第2天起菌絲開始緩慢生長(zhǎng)，2 d～4 d為延滯期，此階段菌絲生長(zhǎng)較緩慢，表明此階段細(xì)胞還處于對(duì)培養(yǎng)環(huán)境條件改變的適應(yīng)階段，4 d～8 d為指數(shù)期，屬于菌絲體快速增長(zhǎng)階段，以后進(jìn)入穩(wěn)定期和衰亡期，菌絲體重量在第9天達(dá)到最大值，到第10天開始出現(xiàn)自溶現(xiàn)象，菌絲體重量有所下降。胞外SOD比活力也在發(fā)酵第5天時(shí)呈現(xiàn)最高，達(dá)到11.4 U·mg－1。因此雖然隨著發(fā)酵的繼續(xù)進(jìn)行，菌絲體重量仍然繼續(xù)增加，但從試驗(yàn)的目標(biāo)性來考慮，主要是考察黑脈羊肚菌發(fā)酵培養(yǎng)產(chǎn)胞外SOD的情況，所以將發(fā)酵產(chǎn)酶的最適周期定為5 d。

2.4IAA對(duì)SOD酶活的影響

配制1 mg·mL－1的IAA標(biāo)準(zhǔn)溶液，添加到上述液體培養(yǎng)基中，使IAA濃度分別為0 μg·mL－1、1.0 μg·mL－1、1.5 μg·mL－1、2.0 μg·mL－1、2.5 μg·mL－1、3.0 μg·mL－1、5.0 μg·mL－1。實(shí)驗(yàn)考察了不同濃度的激素IAA對(duì)黑脈羊肚菌液體發(fā)酵培養(yǎng)產(chǎn)胞外SOD的影響，同時(shí)檢測(cè)不同濃度的IAA對(duì)黑脈羊肚菌菌絲體生長(zhǎng)情況的影響。結(jié)果見圖5。

圖5 激素對(duì)產(chǎn)胞外SOD的影響Fig.5 Effect of hormone on extracellular SOD produced

由圖5可知，以不添加IAA作為對(duì)照，在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加激素IAA后，對(duì)菌絲體的生長(zhǎng)以及胞外SOD活性均有影響，當(dāng)添加濃度為1.0 μg·mL－1時(shí)，菌絲體重量達(dá)到最大，為14.03 g·L－1，與對(duì)照相比增加了30.2%，增大IAA的添加濃度，菌絲體重量仍然比對(duì)照大，但卻相比低濃度（1.0 μg·mL－1）添加時(shí)的菌絲體重量減小了，當(dāng)添加的濃度為5.0 μg·mL－1時(shí)，菌絲體重量減小為7.57 g·L－1，比對(duì)照組減少了29.77%，說明此時(shí)IAA的添加濃度抑制了菌絲體的生長(zhǎng)。從原理上分析，IAA是生長(zhǎng)素類激素，生長(zhǎng)素的基因活化理論概述了生長(zhǎng)素與受體結(jié)合后誘導(dǎo)受體構(gòu)象改變，“IAA－受體”可轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核內(nèi)（信號(hào)傳遞），使某些特定基因轉(zhuǎn)錄、表達(dá)，產(chǎn)生原初反應(yīng)蛋白質(zhì)（IAA信號(hào)放大），原初反應(yīng)蛋白繼而激活細(xì)胞壁水解酶基因，使其表達(dá)產(chǎn)生纖維素酶、果膠酶等，導(dǎo)致細(xì)胞壁中連接木葡聚糖與纖維素微纖絲之間的鍵斷裂，使細(xì)胞壁面積擴(kuò)張而松弛，增強(qiáng)了細(xì)胞壁的伸展性以及可塑性,細(xì)胞體積及其重量增加，最終發(fā)生不可逆增長(zhǎng)[16]。但對(duì)于生長(zhǎng)素類激素，濃度不同促進(jìn)作用也會(huì)不同，適用濃度的范圍隨不同的生物而有所變化。若濃度過高，不僅不能促進(jìn)其生長(zhǎng)，反而會(huì)刺激細(xì)胞產(chǎn)生乙烯，引起細(xì)胞老化死亡[17]。隨著IAA添加濃度的增大，胞外SOD的相對(duì)活性先升高后減小，在添加濃度為2.5 μg·mL-1，相對(duì)酶活性達(dá)到最高，比對(duì)照組增大了109.26%。

3 結(jié)論

激素利用在食用菌上的研究很多，激素可以促進(jìn)菌絲體的生長(zhǎng)，縮短其生長(zhǎng)周期，同時(shí)也會(huì)對(duì)代謝產(chǎn)物的合成產(chǎn)生特殊的調(diào)節(jié)作用，本文考察了不同濃度的IAA對(duì)黑脈羊肚菌發(fā)酵培養(yǎng)產(chǎn)胞外SOD以及菌絲體生長(zhǎng)的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，當(dāng)在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加濃度為1.0 μg·mL-1IAA時(shí)，菌絲體重量增大為14.03 g·L-1，與對(duì)照相比增加了30.2%，當(dāng)添加濃度為5.0 μg·mL-1時(shí)，菌絲體重量減小為7.57 g·L-1，比對(duì)照組減少了29.77%，說明適當(dāng)濃度的激素能夠促進(jìn)菌絲體的生長(zhǎng)，而當(dāng)激素濃度過大時(shí)，會(huì)反過來抑制菌絲體的生長(zhǎng)。隨著IAA添加濃度的增大，胞外SOD的相對(duì)活性呈現(xiàn)先升高后減小的趨勢(shì)，在添加濃度為2.5 μg·mL-1，相對(duì)酶活性達(dá)到最高，比對(duì)照組增大了109.26%。所以適當(dāng)添加IAA可獲得更多SOD酶量。

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天麻平息肝風(fēng)

1平肝息風(fēng)。天麻質(zhì)潤(rùn)多液，能夠養(yǎng)血息風(fēng)，可以治療血虛肝風(fēng)內(nèi)動(dòng)的頭痛、眩暈，亦可用于小兒驚風(fēng)、癲癇、破傷風(fēng)。

2祛風(fēng)止痛。用于風(fēng)痰引起的眩暈、偏正頭痛、肢體麻木、半身不遂。

天麻適合用于內(nèi)風(fēng)所致的頭暈。內(nèi)風(fēng)引起頭痛的三種類型：一是肝陽(yáng)上亢型，表現(xiàn)癥狀為頭痛頭暈同時(shí)出現(xiàn)；二是、痰濁中阻，表現(xiàn)癥狀為經(jīng)常感覺頭偏沉；三是腎虛病人，表現(xiàn)癥狀為頭痛頭暈同時(shí)伴有記憶力減退的癥狀。天麻對(duì)感冒引起的頭痛、頭暈不合適。

天麻有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、抗驚厥作用；能增加腦血流量，降低腦血管阻力，輕度收縮腦血管，增加冠狀血管流量；能降低血壓，減慢心率，對(duì)心肌缺血有保護(hù)作用；天麻多糖有免疫活性。

中國(guó)食用菌商務(wù)網(wǎng) 2015.04.30

Effect of Indole Acetic Acid(IAA)on Extracellular SOD Activity of M.angusticeps

LI Fei-xiang1,ZHANG Li1,WU Su-rui2,ZHAO Tian-rui1,ZHANG Xin2
(1.Yunnan Institute of Food Safety,Kunming University of Science and Technology,Kunming 650500,China; 2.Kunming Edible Fungi Institute of All China Federation of Supply and Marketing Cooperatives,Kunming 650221,China)

By optimizing the liquid fermentation medium of environmental conditions,and indole acetic acid (IAA) were added in the medium to study the effects of IAA in fermentation production on the extracellular SOD and the growth of mycelial of M.angusticeps.The results showed that in the process of fermentation,the optimal culture conditions for mycelial growth was that:temperature 28℃,initial pH7,culture time 9 d.The optimal culture conditions for enzyme production was that:temperature 20℃,initial pH5.5,culture time 5 d.When the concentration of IAA added was 1.0 μg·mL－1,the maximum weight of mycelium was 14.03 g·L－1,and when it was 2.5 μg·mL－1,the relative enzymatic activity was the highest.

IAA;M.angusticeps;extracellular SOD;enzymatic activity

S646.9

A

1003-8310（2015）03-0051-06

10.13629/j.cnki.53－1054.2015.03.013

“十二五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃課題（2013BAD16B01）；云南省科技廳對(duì)外科技合作計(jì)劃省院省校科技合作專項(xiàng)資助項(xiàng)目（2012IB008）。

李飛翔（1988－），男，在讀碩士研究生，研究方向：輕工技術(shù)與工程。E－mail:lifeixiang888@126.com

**通信作者：吳素蕊（1978－），女，碩士，副研究員，主要從事食用菌精深加工與開發(fā)利用方面研究。E－mail:wusurui@163.com

2015－03－10