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    大足黑山羊宰后成熟過(guò)程中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的變化

    2015-12-20 08:54:04王亞娜王曉香王振華張聰聰尚永彪
    食品科學(xué) 2015年22期
    關(guān)鍵詞:宰后酮類烴類

    王亞娜,王曉香,王振華,張聰聰,尚永彪,2,3,*

    大足黑山羊宰后成熟過(guò)程中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的變化

    王亞娜1,王曉香1,王振華1,張聰聰1,尚永彪1,2,3,*

    羊肉作為我國(guó)城鄉(xiāng)居民重要的肉類食品,其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值得到了越來(lái)越廣泛的認(rèn)可,其獨(dú)特的風(fēng)味和健康安全的特質(zhì)已深入人心,消費(fèi)呈現(xiàn)逐年上漲態(tài)勢(shì)[1]。羊肉是一種含有高蛋白、低脂肪、低膽固醇[2]、豐富礦物質(zhì)的畜禽肉,具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,但由于其獨(dú)特的風(fēng)味和氣味,很多人避食羊肉。宰后成熟是肉類生產(chǎn)的重要工藝,肉品本身含有一定的風(fēng)味物質(zhì)前體化合物,在成熟過(guò)程中發(fā)生一系列的化學(xué)變化,從而對(duì)肉的風(fēng)味產(chǎn)生影響[3]。揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)直接反應(yīng)了肉的風(fēng)味特色,目前已有宰后成熟過(guò)程中牛肉[4]、豬肉[5]等揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的相關(guān)報(bào)道,但羊肉涉及較少,本研究以大足黑山羊?yàn)檠芯繉?duì)象,采用頂空固相微萃?。╤eadspace solid phasemicro-extraction,HS-SPME)結(jié)合氣相色譜-質(zhì)譜(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)聯(lián)用技術(shù)測(cè)定其后腿肉在成熟過(guò)程中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的變化,為工業(yè)化生產(chǎn)過(guò)程中提高羊肉風(fēng)味品質(zhì)提供依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    隨機(jī)抽取12 只大足黑山羊(16月齡,40~50 kg),宰前禁食12 h,宰后取新鮮后腿肉,購(gòu)于重慶北碚。氯化鈉(分析純) 天津市福晨化學(xué)試劑廠。

    1.2 儀器與設(shè)備

    2010型GC-MS聯(lián)用儀 日本島津公司;DB-5ms色譜柱(30.0 m×0.25 mm,0.25 μm) 美國(guó)Agilent公司;萃取瓶 美國(guó)Perkinelmer公司;手動(dòng)SPME進(jìn)樣器、75 μm碳分子篩/聚二甲基硅氧烷涂層萃取頭 美國(guó)Supelco公司。

    1.3 方法

    1.3.1 原料處理

    將現(xiàn)宰的黑山羊后腿肉用保鮮膜包裹,放入事先準(zhǔn)備好的保溫冰盒中,10 min內(nèi)運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室,立即將其放在-18 ℃冰箱中快速冷卻至中心溫度低于4 ℃后,用已消過(guò)毒的砧板和手術(shù)刀將腿肉分割成30 g左右的小塊,裝入自封袋,控制在3~5 min內(nèi)完成。自封袋材料:聚乙烯,自封袋規(guī)格:120 mm×80 mm。包裝結(jié)束后立即將肉樣放置在0~4 ℃環(huán)境中進(jìn)行成熟。

    1.3.2 揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的頂空捕集

    1.3.2.1 樣品預(yù)處理

    分別在成熟的第0、24、72、120、168小時(shí)5 個(gè)時(shí)間點(diǎn)(0 h樣品為取樣開始時(shí)的肉樣),取去除結(jié)締組織的肉樣在4 ℃左右條件下經(jīng)絞肉機(jī)迅速絞碎成0.3~0.5 mm的肉糜。

    1.3.2.2 SPME

    在15 mL頂空萃取瓶中加入4.0 g肉糜,再加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)20%氯化鈉溶液,混勻,放入90 ℃水浴鍋中恒溫加熱15 min。將老化后的SPME針頭插入頂空萃取瓶中,緩慢推動(dòng)手柄使石英纖維頭推出并暴露于樣品上部空間,在90 ℃恒溫水浴鍋中萃取風(fēng)味物質(zhì)30 min。等萃取結(jié)束后,推動(dòng)手柄使纖維頭縮回針頭內(nèi),并拔出針頭。取出SPME針管后將其插入GC-MS進(jìn)樣口,緩慢推動(dòng)手柄,伸出纖維頭,熱脫附5 min,然后縮回萃取頭,并將SPME針管退出進(jìn)樣口,同時(shí)啟動(dòng)儀器開始采集數(shù)據(jù)。

    1.3.3 GC-MS聯(lián)用儀測(cè)定條件

    GC條件[6-7]:DB-5ms毛細(xì)管柱(30.0 m×0.25 mm,0.25 μm);載氣:He;柱箱溫度40.0 ℃;進(jìn)樣口溫度250.0 ℃;進(jìn)樣方式:分流模式;進(jìn)樣時(shí)間1.00 min;流量控制方式:線速度;壓力33.4 kPa;總流量15.7 mL/min;柱流量0.80 mL/min;線速率32.2 cm/s;吹掃流量3.0 mL/min;分流比14.9∶1;升溫程序:40.0 ℃保持1.00 min,以10.00 ℃/min升至230 ℃,保持1.00 min。

    MS條件:離子源溫度230 ℃;接口溫度250 ℃;溶劑延遲時(shí)間1 min;閥值1 000。

    1.4 定性定量分析

    揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)經(jīng)色譜柱分離后,通過(guò)計(jì)算機(jī)標(biāo)準(zhǔn)譜圖庫(kù)NIST中的數(shù)據(jù)對(duì)GC-MS結(jié)果進(jìn)行分析,并結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行人工譜圖解析,以確定其化學(xué)成分,再利用峰面積歸一法計(jì)算出各化合物在黑山羊肉揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)中的相對(duì)含量。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 宰后成熟過(guò)程中黑山羊腿肉揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的變化

    圖1 宰后成熟過(guò)程中黑山羊腿肉揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)色譜圖Fig.1 GC-MS chromatograms of the volatile compounds of hindquarter meat of Dazu black goat during postmortem aging

    宰后成熟過(guò)程中黑山羊腿肉揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)總離子流色譜圖如圖1所示。通過(guò)GC-MS聯(lián)用技術(shù)分析,山羊肉成熟過(guò)程中共檢測(cè)出77 種揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì),主要包括烴類(39 種)、醛類(11 種)、醇類(9 種)、酮類(1 種)、芳香族化合物(15 種)和雜環(huán)類化合物(2 種),這6 大類77 種揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的種類及相對(duì)含量如表1所示。

    表1 宰后成熟過(guò)程中黑山羊腿肉揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)組成及相對(duì)含量Table1 Volatile compounds and relative contents in hindquarter meat of Dazu black goat during postmortem aging

    續(xù)表1

    成熟時(shí)間為0 h時(shí),檢測(cè)出烴類12 種、醛類5 種、醇類1 種,而酮類、芳香族和雜環(huán)化合物均未檢出,其中烴類和醛類為主要成分,且主要成分中2,3,5,8-四甲基-1,5,9-十三烯占5.96%,己醛占5.38%,壬醛占4.77%。

    在成熟時(shí)間為24 h時(shí),檢測(cè)出烴類22 種、醛類9 種、醇類3 種、酮類1 種、雜環(huán)類1 種,而芳香族化合物仍未檢出,其中烴類、醛類和醇類為主要成分,且主要成分中十六烷占7.09%,壬醛占9.56%,癸醛占4.02%,雪松醇占1.03%。檢出的唯一的酮類為2-甲基-1-庚烯-6-酮,相對(duì)含量為1.15%。雜環(huán)類為吡啶,相對(duì)含量為2.41%。

    在成熟時(shí)間為72 h時(shí),檢測(cè)出芳香族13 種、烴類9 種、醛類8 種、醇類4 種,雜環(huán)類1 種,而酮類化合物未檢出,其中芳香族、烴類和醛類為主要成分,且主要成分中(1-丁基辛基)苯占1.36%,(1-戊基庚基)苯占1.15%,十三烷占3.19%,2-甲基十一烷占2.11%,壬醛占23.49%,十六醛占9.06%。檢測(cè)出的唯一的雜環(huán)類化合物為2-正戊基呋喃,其相對(duì)含量為0.80%。

    在成熟時(shí)間為120 h時(shí),檢測(cè)出烴類9 種、醛類6 種、芳香族2 種、雜環(huán)類1 種,而醇類和酮類化合物未檢出,其中烴類、醛類和芳香族為主要成分,且主要成分中2,3,5,8-四甲基-1,5,9-十三烯占4.85%,十三烷占2.75%,十八醛占14.4%,壬醛占9.64%。2 種芳香族化合物為2,6-二叔丁基對(duì)甲酚和7-苯基十三烷,其相對(duì)含量分別為0.50%和0.20%。吡啶是唯一的雜環(huán)類化合物,其相對(duì)含量為9.34%。

    在成熟時(shí)間為168 h時(shí),共檢測(cè)出醛類8 種、烴類6 種、芳香族2 種、醇類1 種,而酮類和雜環(huán)類化合物未檢出,其中醛類、烴類和芳香族為主要成分,且主要成分中十八醛占25.61%,壬醛占11.17%,2,6-二叔丁基對(duì)甲酚占0.52%。檢測(cè)出的十九醇為唯一的醇類,其相對(duì)含量為0.60%。

    2.2 宰后成熟過(guò)程中黑山羊肉揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)相對(duì)含量的比較

    如圖2所示,羊肉中的烴類物質(zhì)在成熟24 h時(shí),其相對(duì)含量最高,共檢出22 種,相對(duì)含量為24.32%;醛類物質(zhì)在成熟72 h時(shí),雖然只檢測(cè)出了8 種,但其相對(duì)含量最高,占55.11%;其次為168 h,檢出8 種,相對(duì)含量為48.25%;羊肉中的醇類物質(zhì)在成熟72 h(4 種)時(shí),其相對(duì)含量最高,占3.13%;酮類物質(zhì),僅在24 h檢測(cè)出一種,其相對(duì)含量為1.15%,其他時(shí)間點(diǎn)均未檢出;羊肉中的芳香族化合物,在成熟72 h時(shí),檢出13 種,其相對(duì)含量最高,為8.98%,而在120 h和168 h各檢出2 種,且相對(duì)含量較低。雜環(huán)類物質(zhì)僅檢測(cè)出2 種,2-正戊基呋喃和吡啶,分別在24、72 h和120 h時(shí)檢測(cè)出1 種,其他時(shí)間點(diǎn)未檢出。

    圖2 宰后成熟過(guò)程中黑山羊腿肉揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的相對(duì)含量Fig.2 The relative contents of different chemical classes of volatile compounds in goat rear legs during postmortem aging

    同一成熟時(shí)間點(diǎn),醛類化合物為主要成分,其相對(duì)含量最高,其次為烴類物質(zhì)。不同成熟時(shí)間點(diǎn)處,6 類揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的檢出種類及相對(duì)含量存在顯著差異,其中以24、72 h檢出物質(zhì)種類最多,各揮發(fā)性物質(zhì)總相對(duì)含量最高。

    2.3 宰后成熟過(guò)程中黑山羊肉揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)貢獻(xiàn)分析

    羊肉特殊的風(fēng)味是經(jīng)過(guò)多種化合物共同作用形成的,而羊肉味和膻味是決定羊肉烹飪后可口性的關(guān)鍵指標(biāo),其中膻味是羊肉特有的風(fēng)味。羊肉香味的主要成分是羰基化合物和不飽和脂肪酸(C8~C10)[8-9]。在羊肉脂肪中含有支鏈脂肪酸,即一些帶有甲基取代基的飽和脂肪酸,其中4-甲基壬酸和4-甲基辛酸是羊肉風(fēng)味形成的根本原因,也就是人們所描述的膻味[10]。肉類香味化合物產(chǎn)生的途徑主要有3 個(gè):氨基酸與還原糖間的美拉德反應(yīng);蛋白質(zhì)、游離氨基酸(如天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸及賴氨酸等)、糖類、核苷酸等物質(zhì)的熱降解;脂肪的氧化作用[11-12]。

    羊肉中的風(fēng)味前體物質(zhì)主要是低分子質(zhì)量的水溶性物質(zhì)如還原糖、含硫氨基酸、肽類和肌酸肝等與脂肪組織的氧化產(chǎn)物如烷烴、內(nèi)酯、醇和醛。羊肉中揮發(fā)性香味物質(zhì)包括10 種醛、3 種酮、1 種內(nèi)酯,包括烷烴、醛、酮、醇、內(nèi)酯和雜環(huán)化合物[13]。表1顯示,羊肉在不同成熟時(shí)間點(diǎn)處,烴類、醛類、醇類、酮類、芳香類和雜環(huán)類6 大類揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的相對(duì)含量存在顯著差異,并且除了168 h,其余時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)出的烴類化合物的種類最多,而在同一成熟時(shí)間點(diǎn),醛類化合物為主要成分,其相對(duì)含量最高。

    烷烴類化合物的來(lái)源主要是脂肪酸烷氧自由基的均裂,羊肉中檢出的支鏈烷烴可能來(lái)源于支鏈脂肪酸的氧化。一般認(rèn)為烷烴類化合物由于具有較高的香味閾值,其本身不具有明顯的風(fēng)味特征[14-15],對(duì)羊肉風(fēng)味形成的直接貢獻(xiàn)不大,但因其種類豐富,可能有助于提高羊肉的整體風(fēng)味。

    醛類化合物的來(lái)源主要是脂肪的氧化和降解,另外,斯特雷克爾氨基酸反應(yīng)也是醛類化合物的重要來(lái)源之一[16-17]。醛類化合物具有脂肪的香味,且閾值一般很低,是羊肉特征風(fēng)味物質(zhì)的來(lái)源。醛類在脂肪氧化中生成速率較快,C3、C4的醛具有強(qiáng)烈的刺激性風(fēng)味;C5~C9的醛具有清香、油香、脂香味,分子質(zhì)量較大的醛具有橘子皮似的風(fēng)味,而支鏈醛帶有愉快的甜味或水果特征風(fēng)味[18]。黑山羊肉樣品中已檢出的直鏈飽和醛(如己醛、庚醛、辛醛、壬醛、癸醛)和不飽和醛(如2-壬烯醛)使羊肉具有水果清香和脂香味,其中己醛是肉中脂肪酸自動(dòng)氧化最重要的產(chǎn)物之一,己醛含量多少直接會(huì)影響到肉類的“過(guò)熱”味[19],羊肉宰后成熟過(guò)程中己醛含量的增加可能會(huì)引起黑山羊肉風(fēng)味劣變;辛醛和壬醛都是油脂氧化的產(chǎn)物,帶有水果清香味;癸醛帶有甜香、柑橘香、蠟香和花香;(Z)-2-壬烯醛是亞油酸主要揮發(fā)物的氧化產(chǎn)物,具有甜香味。十六醛具有脂肪香味等。因此,醛類物質(zhì)在羊肉風(fēng)味中占非常重要的位置。

    醇類化合物由肉中的醛類和酮類化合物經(jīng)醇還原酶還原或不飽和脂肪酸氧化而形成的,在成熟后期中通過(guò)酯化反應(yīng)或氧化反應(yīng)而消失[20]。醇類化合物一般帶有芳香、植物香和酸敗味。羊肉中檢出的醇類物質(zhì)中,直鏈飽和醇(如十二醇、十九醇等)閾值較高,一般對(duì)于食品風(fēng)味的影響不大;不飽和醇(如2-癸烯-1-醇、2-壬烯-3-醇等)閾值較低,具有蘑菇味和金屬味,一般認(rèn)為對(duì)風(fēng)味的形成有貢獻(xiàn)[21-22]。已有研究[18]結(jié)果,直鏈的低級(jí)醇雖然總體是無(wú)風(fēng)味的,但隨著碳原子數(shù)的增加,風(fēng)味逐漸增強(qiáng),從而表現(xiàn)出清香、木香、脂肪香的特征。

    在羊肉揮發(fā)性成分中含有多種芳香烴,由脂質(zhì)高溫反應(yīng)生成,這種化合物的閾值較高[23],其在羊肉中相對(duì)含量較少,且集中出現(xiàn)在72 h,故對(duì)羊肉風(fēng)味沒(méi)有太大貢獻(xiàn)。有研究提出存在于脂肪中、具有揮發(fā)性的烷基苯酚對(duì)于羊肉氣味和風(fēng)味有很大的影響,其中烷基苯酚包括甲基苯酚、異丙基苯酚和其他化合物[24]。

    酮類化合物是脂肪氧化和降解的另一主要產(chǎn)物。在羊肉中酮類化合物的種類少,其相對(duì)含量也較低。大多數(shù)酮類物質(zhì)的閾值較高,因此其對(duì)羊肉風(fēng)味特征的貢獻(xiàn)不大,但有些酮類是形成雜環(huán)化合物的重要中間體,雜環(huán)化合物的閾值較低,對(duì)肉香味的形成起著不可忽視的作用[25]。

    3 結(jié) 論

    采用HS-SPME-GC-MS技術(shù)檢測(cè)到黑山羊宰后成熟過(guò)程中的揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)共6 大類77 種,分別為烴類(39 種)、醛類(11 種)、醇類(9 種)、酮類(1 種)、芳香族化合物(15 種)和雜環(huán)類化合物(2 種)。其中醛類物質(zhì)所占的比重最高,其次為烴類、醇類、芳香族化合物,而酮類、雜環(huán)類化合物所占的種類較少且相對(duì)含量也較低。在不同成熟時(shí)間點(diǎn)處,6 類揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的檢出種類及相對(duì)含量存在顯著差異,其中以24、72 h檢出物質(zhì)種類最多,各揮發(fā)性物質(zhì)總相對(duì)含量最高,在72 h時(shí)醛類物質(zhì)檢出相對(duì)含量最高,在24 h時(shí)烴類物質(zhì)檢出相對(duì)含量最高,但醛類物質(zhì)相對(duì)含量較少。醛類化合物是羊肉特征風(fēng)味物質(zhì)的主要來(lái)源,對(duì)羊肉風(fēng)味形成有重大貢獻(xiàn),而烴類化合物對(duì)羊肉風(fēng)味形成的直接貢獻(xiàn)不大,只是有助于提高羊肉的整體風(fēng)味,所以72 h時(shí)羊肉風(fēng)味最佳。綜合實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以得出:宰后成熟工藝有利于羊肉風(fēng)味的改善,且72 h為羊肉的最佳成熟時(shí)間點(diǎn)。

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    (1.西南大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院,重慶 400716;2.農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品貯藏保鮮質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估實(shí)驗(yàn)室(重慶),重慶 400716;3.重慶市特色食品工程技術(shù)研究中心,重慶 400716)

    采用頂空固相微萃取結(jié)合氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù),研究黑山羊后腿肉在成熟過(guò)程中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的變化。結(jié)果顯示:在黑山羊宰后成熟過(guò)程中,共檢測(cè)出6 類共77 種揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì),分別為烴類、醛類、醇類、酮類、芳香族和雜環(huán)類化合物。其中醛類物質(zhì)所占的比重最高,其次為烴類、醇類、芳香族化合物,而酮類、雜環(huán)類化合物所占的種類較少且含量也較低。在不同成熟時(shí)間點(diǎn)處,6 類揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的檢出種類及相對(duì)含量存在顯著差異,其中以72 h檢出物質(zhì)種類較多,各揮發(fā)性物質(zhì)總相對(duì)含量最高。結(jié)果表明,宰后成熟工藝有利于羊肉風(fēng)味的改善,且72 h為羊肉的最佳成熟時(shí)間點(diǎn)。

    黑山羊后腿肉;頂空固相微萃??;氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用;揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)

    Changes in Volatile Flavor Components in Dazu Black Goat Meat during Postmortem Aging

    WANG Yana1, WANG Xiaoxiang1, WANG Zhenhua1, ZHANG Congcong1, SHANG Yongbiao1,2,3,*
    (1. College of Food Science, Southwest University, Chongqing 400716, China; 2. Quality and Safety Risk Assessment Laboratory of Products Preservation (Chongqing), Ministry of Agriculture, Chongqing 400716, China; 3. Chongqing Engineering Research Center of Regional Food, Chongqing 400716, China)

    Headspace solid phase microextraction (HS-SPME) combined with gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) was used for measuring changes in volatile flavor compounds in hindquarter meat of Dazu black goat. The results showed that six 77 volatile fl avor compounds, including hydrocarbons, aldehydes, alcohols, ketones, aromatic and heterocyclic compounds, were detected. The highest proportion was aldehydes, followed by those of hydrocarbons, alcohols, aromatic compounds. The numbers and amounts of ketones and heterocyclic compounds were lower. Among different aging times, there were signifi cant differences in the numbers and relative contents of volatile fl avor compounds belonging to six different classes, most of which were detected at 72 h and the content of each volatile compound was the highest simultaneously. Therefore, postmortem aging was benefi cial to the improvement of fl avor components in mutton, and the optimal aging time was 72 h.

    hindquarter meat of Dazu black goat; headspace solid phase micro-extraction (HS-SPME); gas chromatographymass spectrometry (GC-MS); volatile flavor compounds

    TS251

    A

    1002-6630(2015)22-0107-06

    10.7506/spkx1002-6630-201522019

    2015-05-20

    公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(201303144);重慶市特色食品工程技術(shù)研究中心能力提升項(xiàng)目(cstc2014pt-gc8001)

    王亞娜(1990—),女,碩士研究生,研究方向?yàn)槭称焚|(zhì)量與安全控制。E-mail:718339716@qq.com

    *通信作者:尚永彪(1964—),男,教授,博士,研究方向?yàn)檗r(nóng)產(chǎn)品加工。E-mail:shangyb64@sina.com

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