枸櫞酸鈉粉劑抗凝管的制備及其應用評價

華建江，何維娜，杜紀坤，梁巧玲，徐志康，黃江浩，鐘 瑜

枸櫞酸鈉粉劑抗凝管的制備及其應用評價

華建江，何維娜，杜紀坤，梁巧玲，徐志康，黃江浩，鐘 瑜

目的：制備并評價枸櫞酸鈉粉劑抗凝管在糾正乙二胺四乙酸（EDTA）依賴性假性血小板減少癥（EDTA-dependent pseudothrombocytopenia，EDTA-PTCP）中的應用效果。方法：取109 mmol/L枸櫞酸鈉三鈉溶液至玻璃管經(jīng)56℃烘干制成各含量的粉劑抗凝管，用儀器法、光學法、手工法和染色法檢測238例不同抗凝劑標本的血小板（PLT）結(jié)果，分析其與枸櫞酸鈉水劑、肝素標本抗凝效果的異同。結(jié)果：50例正常人12.8 mg含量枸櫞酸鈉粉劑抗凝標本的PLT接近EDTA-K2標本結(jié)果，差異無統(tǒng)計學意義；采血量為200～600 μL時，枸櫞酸鈉粉劑標本的PLT與EDTA-K2標本結(jié)果差異無統(tǒng)計學意義；除白細胞（WBC）外，枸櫞酸鈉粉劑標本的PLT、紅細胞（RBC）、血紅蛋白（HGB）與EDTA-K2標本結(jié)果相一致（P＞0.05）；28例EDTA-PTCP患者枸櫞酸鈉粉劑、枸櫞酸鈉水劑、肝素抗凝標本的PLT分別為（193.89± 50.62）×109/L、（164.86±48.11）×109/L和（108.79±29.33）×109/L，與手工法結(jié)果（199.14±47.99）×109/L相比，前者差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），后兩者差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；枸櫞酸鈉粉劑抗凝標本24 h內(nèi)PLT結(jié)果穩(wěn)定，鏡下未見血小板聚集現(xiàn)象。結(jié)論：自制枸櫞酸鈉粉劑抗凝管的最佳抗凝含量為12.8 mg/管，最佳采血量為200～600 μL，在糾正EDTA-PTCP中效果優(yōu)于枸櫞酸鈉水劑抗凝管和肝素抗凝管。

枸櫞酸鈉；干粉；EDTA依賴性假性血小板減少癥

0 引言

乙二胺四乙酸（EDTA）依賴性假性血小板減少癥（EDTA-dependent pseudothrombocytopenia，EDTA-PTCP）在近幾年屢見報道，其發(fā)生率（0.07%～0.20%）[1-2]雖然不高，但EDTA-PTCP一旦出現(xiàn)，極易導致臨床誤診誤治，存在較大的醫(yī)療風險。用枸櫞酸鈉真空抗凝管采血行血小板計數(shù)是糾正EDTAPTCP的有效方法之一，然而此管所含抗凝劑為0.3 mL的枸櫞酸鈉溶液，占3 mL靜脈血總體積的10%，用其采血計數(shù)血小板必然導致結(jié)果偏低，且無法應用于靜脈采血困難的嬰幼兒EDTA-PTCP的排查。為解決上述問題，本研究將制備出的枸櫞酸鈉粉劑抗凝管應用于臨床，嘗試確定其最佳抗凝濃度，并探討其在糾正EDTA-PTCP中的實際應用效果。

1 材料與方法

1.1 標本資料

所有標本均來自2012年1月至2013年12月深圳市寶安區(qū)沙井人民醫(yī)院住院及門診患者，分為正常對照組、血小板（PLT）增多組、真性PLT減少組和EDTA-PTCP組。

1.1.1 正常對照組

為體檢健康且無血小板相關疾病的志愿者150例，其中男78例，女72例，年齡19～71歲。

1.1.2 PLT增多組

隨機選取PLT＞300×109/L患者30例，其中男16例，女14例，年齡3～68歲。

1.1.3 真性PLT減少組

為疾病原因引起的血小板減少（EDTA鹽抗凝和枸櫞酸鹽抗凝血標本測得的血小板均減少）。隨機選取PLT＜100×109/L患者30例，其中男13例，女17例，年齡4～65歲。

1.1.4 EDTA-PTCP組

定義為EDTA鹽抗凝血中EDTA誘導血小板中的特殊蛋白使血小板發(fā)生凝集，且在全自動血細胞計數(shù)儀上檢測時，其血小板計數(shù)發(fā)生假性減少（涂片鏡檢可見血小板聚集、經(jīng)更換不同抗凝劑重測血小板計數(shù)正常、患者無出血傾向）的現(xiàn)象。2 a共檢出28例EDTA-PTCP患者，其中男17例、女11例，年齡4個月～72歲（4個月～1歲6例，其余22例為成人）。疾病分布為惡性腫瘤8例、上呼吸道感染5例、血小板減少3例、晚期妊娠2例、貧血3例、手外傷1例、高血壓1例、電擊傷1例、肺炎1例、體檢3例。

1.2 方法

1.2.1 儀器和試劑

Sysmex XE-2100全自動血細胞分析儀及其原裝試劑、質(zhì)控品和校準品（日本希森美康公司）；血細胞計數(shù)板（江蘇海門市天龍實驗器材廠）；CX31顯微鏡（日本Olympus公司）；101-1型電熱鼓風干燥箱（江蘇通州凌云電器廠）；枸櫞酸鈉三鈉（Na3C6H5O7· 2H2O，分析純，上海試劑一廠）；草酸銨（北京化學試劑公司），草酸銨稀釋液按照第3版《全國臨床檢驗操作規(guī)程》配制；瑞氏-吉姆薩染色液（珠海貝索公司）；EDTA-K2真空抗凝管（深圳美瑞公司）；肝素鋰真空抗凝管（廣州陽普公司）；枸櫞酸鈉真空抗凝管（或稱枸櫞酸鈉水劑抗凝管，美國BD公司）。

1.2.2 枸櫞酸鈉粉劑抗凝管的制備

準確稱取分析純的枸櫞酸鈉三鈉（Na3C6H5O7· 2H2O）16 g完全溶于500 mL的蒸餾水中，配制成109 mmol/L的枸櫞酸鈉溶液，分別取200、300、400、500 μL溶液加于一批干燥、潔凈的玻璃小試管內(nèi)（每管分別含6.4、9.6、12.8、16.0 mg枸櫞酸鈉），置于101-1型電熱鼓風干燥箱56℃、數(shù)小時均勻烘干后備用。

1.2.3 儀器法

在使用Sysmex配套試劑且室內(nèi)質(zhì)控在控的基礎上，將Sysmex XE-2100、XS-1000i分析儀全血細胞的計數(shù)結(jié)果校準到差異無統(tǒng)計學意義，嚴格按儀器操作規(guī)程對靜脈采血標本（血量＜300 μL用XS-1000i，≥300 μL用XE-2100）進行全血細胞計數(shù)。

1.2.4 光學法

光學法是用Sysmex XE-2100全自動血細胞分析儀的網(wǎng)織紅計數(shù)通道進行血小板計數(shù)的方法。其原理是用半導體激光加熒光染料染色血小板后儀器可準確計數(shù)血小板。此法在很大范圍內(nèi)與衛(wèi)生部行業(yè)標準規(guī)定的流式細胞儀計數(shù)血小板的參考方法相關性良好[3]，因此，本研究將光學法的血小板計數(shù)結(jié)果作為確定枸櫞酸鈉粉劑抗凝管最佳抗凝含量及最佳采血量的參考值。

1.2.5 手工法

采集新鮮指血20 μL，加入加有0.38 mL草酸銨稀釋液的試管中，充分混勻，注入血細胞計數(shù)板內(nèi)，靜置15 min后，置于顯微鏡下目視計數(shù)PLT。血小板手工計數(shù)由本室工作經(jīng)驗超過8 a且具有中級以上技術職稱的技術人員嚴格按照操作規(guī)程進行，每份標本計數(shù)2次（誤差控制在5%以內(nèi)），結(jié)果取其均值。將此結(jié)果作為EDTA-PTCP患者PLT計數(shù)的參考值。

1.2.6 染色法

用EDTA-K2、枸櫞酸水劑和枸櫞酸粉劑抗凝標本制成血涂片，待其自然干燥后，進行瑞氏-吉姆薩染色，在顯微鏡下觀察抗凝5 min、2 h、24 h后血小板形態(tài)和聚集情況。

1.3 統(tǒng)計學處理

采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析，計量資料數(shù)值用±s表示，組間比較采用配對樣本t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 枸櫞酸鈉粉劑抗凝管最佳抗凝濃度的確定

早上空腹采集50例正常人靜脈血，加入4種含量（6.4、9.6、12.8、16.0 mg）的枸櫞酸鈉粉劑抗凝管（0.4 mL/管）和EDTA-K2真空抗凝管（2 mL/管），充分混勻，用儀器法檢測枸櫞酸鈉粉劑抗凝管標本的PLT，用光學法檢測EDTA-K2抗凝標本的PLT。以光學法結(jié)果為PLT的參考值，找到與光學法結(jié)果差異無統(tǒng)計學意義的那組枸櫞酸鈉粉劑抗凝管相應濃度為其最佳抗凝濃度，結(jié)果見表1。

表1 不同濃度枸櫞酸鈉粉劑抗凝管與EDTA-K2抗凝管PLT計數(shù)結(jié)果比較（±s）

表1 不同濃度枸櫞酸鈉粉劑抗凝管與EDTA-K2抗凝管PLT計數(shù)結(jié)果比較（±s）

抗凝管種類 n PLT（×109/L） t P EDTA-K2真空抗凝管 50 271.89±85.55 6.4 mg枸櫞酸鈉粉劑抗凝管 50 235.82±89.95 -3.031 9.6 mg枸櫞酸鈉粉劑抗凝管 50 246.67±94.53 -2.624 12.8 mg枸櫞酸鈉粉劑抗凝管 50 274.64±88.62 -0.794 16.0 mg枸櫞酸鈉粉劑抗凝管 50 252.47±93.57 -2.406 0.013（＜0.05）0.026（＜0.05）0.450（＞0.05）0.038（＜0.05）

由表1可見，枸櫞酸鈉粉劑抗凝管的最佳抗凝濃度為12.8 mg/管。

2.2 枸櫞酸鈉粉劑抗凝管標本最佳采血量范圍的確定

早上空腹采集50例正常人靜脈血，分別加100、150、200、300、400、500、600、700、800 μL至12.8 mg/管的枸櫞酸鈉粉劑抗凝管，另加2 mL至EDTA-K2真空抗凝管，充分混勻，用儀器法在Sysmex XS-1000上檢測枸櫞酸鈉粉劑抗凝血標本PLT，用光學法檢測EDTA-K2抗凝標本的PLT。找到與光學法PLT結(jié)果差異無統(tǒng)計學意義的那組采血量為粉劑抗凝管的最佳采血量，結(jié)果見表2。由表2可見，枸櫞酸鈉粉劑抗凝管標本的最佳采血量為200～600 μL。

表2 不同采血量枸櫞酸鈉粉劑抗凝管與EDTA-K2抗凝管PLT計數(shù)結(jié)果比較（±s）

表2 不同采血量枸櫞酸鈉粉劑抗凝管與EDTA-K2抗凝管PLT計數(shù)結(jié)果比較（±s）

采血量/μL n PLT（×109/L） t P 2000（EDTA-K2真空抗凝管） 50 229.65±46.35 100（枸櫞酸鈉粉劑抗凝管） 50 201.45±44.47 -9.437 0.000（＜0.01）150（枸櫞酸鈉粉劑抗凝管） 50 214.37±44.95 -6.224 0.000（＜0.01）200（枸櫞酸鈉粉劑抗凝管） 50 225.00±43.64 -2.003 0.058（＞0.05）300（枸櫞酸鈉粉劑抗凝管） 50 231.47±46.66 -0.922 0.368（＞0.05）400（枸櫞酸鈉粉劑抗凝管） 50 228.00±45.34 -0.903 0.378（＞0.05）500（枸櫞酸鈉粉劑抗凝管） 50 227.95±46.76 -0.732 0.473（＞0.05）600（枸櫞酸鈉粉劑抗凝管） 50 227.05±44.32 -1.525 0.144（＞0.05）700（枸櫞酸鈉粉劑抗凝管） 50 216.23±46.51 -5.586 0.008（＜0.01）800（枸櫞酸鈉粉劑抗凝管） 50 206.61±47.38 -6.786 0.000（＜0.01）

2.3 枸櫞酸鈉粉劑抗凝管標本全血細胞計數(shù)的結(jié)果評價

分別用枸櫞酸鈉粉劑抗凝管（12.8 mg/管）、枸櫞酸鈉水劑抗凝管和EDTA-K2真空抗凝管采集110例（30例真性血小板減少患者、50例正常人和30例血小板增多患者）靜脈血標本，用儀器法檢測枸櫞酸鈉抗凝標本的白細胞（WBC）、紅細胞（RBC）、血紅蛋白（HGB）和PLT結(jié)果，用光學法檢測EDTA-K2抗凝標本結(jié)果，以光學法結(jié)果為參考值，結(jié)果見表3。結(jié)果顯示，枸櫞酸鈉粉劑抗凝標本除WBC結(jié)果稍高外（P＜0.05），PLT、RBC、HGB結(jié)果均與于EDTA-K2抗凝標本的結(jié)果相一致，差異無統(tǒng)計學意義；而枸櫞酸鈉水劑抗凝標本由于受抗凝劑溶液體積的影響，其全血細胞結(jié)果均明顯低于參考值，差異有統(tǒng)計學意義。

2.4 EDTA-PTCP患者不同抗凝劑標本PLT計數(shù)的結(jié)果比較

表3 3種抗凝劑標本全血細胞計數(shù)結(jié)果的比較（±s）

表3 3種抗凝劑標本全血細胞計數(shù)結(jié)果的比較（±s）

注：與EDTA-K2標本結(jié)果相比，*P＜0.05，**P＜0.01；與枸櫞酸鈉粉劑標本結(jié)果相比，△P＜0.01

檢測項目 WBC（×109/L）RBC（×1012/L）枸櫞酸鈉粉劑抗凝管8.39±2.19* 4.34±0.41 HGB/（g·L-1）127.33±15.20 PLT（×109/L）251.53±68.35枸櫞酸鈉水劑抗凝管6.93±1.67**△ 3.96±0.37**△115.47±14.47**△218.53±56.61**△EDTA-K2真空抗凝管7.63±1.96 4.34±0.41126.53±15.20257.02±72.28

用4種抗凝管采集28例EDTA-PTCP患者靜脈血，用儀器法檢測其PLT數(shù)量，以新鮮末梢血標本的手工法結(jié)果為參考值，結(jié)果見表4。結(jié)果顯示，枸櫞酸鈉粉劑抗凝標本的PLT結(jié)果最接近手工法的參考值，差異無統(tǒng)計學意義，其抗凝效果優(yōu)于枸櫞酸鈉真空抗凝管和肝素抗凝管。

表4 28例EDTA-PTCP患者不同抗凝劑采血標本的PLT計數(shù)結(jié)果比較（±s）

表4 28例EDTA-PTCP患者不同抗凝劑采血標本的PLT計數(shù)結(jié)果比較（±s）

標本類型 方法 PLT（×109/L） t P新鮮末梢血標本 手工法 199.14±47.99 EDTA-K2真空抗凝管標本 儀器法 054.07±23.55 -15.001 0.000（＜0.01）肝素鋰真空抗凝管標本 儀器法 108.79±29.33 -15.862 0.000（＜0.01）枸櫞酸鈉水劑抗凝管標本 儀器法 164.86±48.11 -11.163 0.000（＜0.01）枸櫞酸鈉粉劑抗凝管標本 儀器法 193.89±50.62 0-1.761 0.090（＞0.05）

選擇多例住院EDTA-PTCP患者，用儀器法檢測4種抗凝標本的PLT結(jié)果，以手工法的檢測結(jié)果作參考，觀察各種抗凝標本PLT結(jié)果在不同檢測時間（24 h內(nèi)）的變化趨勢，結(jié)果大致相近。選擇其中1例患者（男，63歲），采用手工法檢測PLT為232×109/L，結(jié)果如圖1所示。由圖1可知，EDTA-PTCP患者EDTA-K2標本的PLT采血后在短時間內(nèi)應迅速降低（由即時116×109/L降至10 min時的17×109/L），然后隨檢測時間的延長（15 min～24 h），PLT計數(shù)結(jié)果仍維持在極低水平（約9×109/L）；肝素鋰抗凝標本PLT結(jié)果在24 h內(nèi)變化不大，基本維持在100×109/L水平上；枸櫞酸鈉真空抗凝管標本PLT在2 h內(nèi)結(jié)果較穩(wěn)定（約170×109/L），但低于參考值，2 h后開始下降；枸櫞酸鈉粉劑抗凝標本在24 h內(nèi)PLT結(jié)果非常穩(wěn)定，基本維持在220×109/L水平，最接近手工

圖1 不同抗凝劑采血標本PLT計數(shù)結(jié)果隨時間變化趨勢圖

2.5 EDTA-PTCP患者標本在不同檢測時間的PLT結(jié)果比較法的參考值。

2.6 EDTA-PTCP患者3種方法抗凝5 min、2 h、24 h后血小板聚集情況

對上例EDTA-PTCP患者的3種方法抗凝（EDTA-K2、枸櫞酸鈉水劑和枸櫞酸鈉粉劑）標本在抗凝5 min、2 h、24 h后進行瑞氏-吉姆薩染色，用油鏡觀察血小板分布情況，如圖2所示。結(jié)果表明，EDTA-K2誘導血小板產(chǎn)生了快速且不可逆轉(zhuǎn)的強聚集，直接導致了患者EDTA-PTCP的發(fā)生；枸櫞酸鈉真空抗凝（水劑）標本在一定時間內(nèi)（本例為2 h內(nèi)）有良好的抗凝效果，但隨后血小板也產(chǎn)生了較弱的聚集，導致PLT數(shù)量的進一步下降；枸櫞酸鈉粉劑抗凝標本在24 h內(nèi)PLT均呈單個散在分布，幾乎沒有觀察到聚集現(xiàn)象，顯示出很強的抗凝效果。

圖2 油鏡下3種方法抗凝5 min、2 h、24 h后血小板聚集圖（×1 000）

3 討論

近年來，EDTA依賴性假性血小板減少癥（EDTA-PTCP）引起臨床誤診誤治的報道逐漸增多[4-5]，其解決措施主要有更換非EDTA抗凝劑計數(shù)、血小板手工計數(shù)（草酸銨法）、血涂片染色計數(shù)、采用免疫標記的流式細胞儀計數(shù)和血小板聚集體計數(shù)[6]等。實驗室應用較多的非EDTA抗凝劑是枸櫞酸鈉水劑，其采血標本由于已稀釋不適于細胞計數(shù)[7]，雖可糾正EDTA-PTCP，但不能準確計數(shù)PLT。用粉劑枸櫞酸鈉作抗凝劑采血或許能消除其體積對細胞計數(shù)的影響，目前國內(nèi)尚未有相關報道，本研究將就其粉劑抗凝管的制備及抗凝效果作出新的嘗試。

枸櫞酸鈉粉劑抗凝管的制備較為簡單，關鍵在于其最佳抗凝比例的確定。本研究結(jié)果顯示，自制枸櫞酸鈉粉劑抗凝管的最佳抗凝含量為12.8 mg/管，最佳采血量為200～600 μL，當用此抗凝比例（1 mg枸櫞酸鈉抗凝15.6～46.9 μL血）采血進行全細胞計數(shù)時，正常人、真性血小板減少患者和血小板增多患者標本的PLT、RBC、HGB均可獲得準確的計數(shù)結(jié)果，僅WBC計數(shù)高于光學法結(jié)果，差異有統(tǒng)計學意義，而鏡檢未見血小板聚集對WBC計數(shù)造成的干擾，原因有待進一步研究。枸櫞酸鈉水劑標本由于受抗凝劑溶液體積的影響，其全血細胞結(jié)果均明顯低于參考值，證實了許洪鈞[7]的研究結(jié)果。近2 a沙井人民醫(yī)院血常規(guī)的日均檢測量700～1 000人，其中PLT＜100×109/L的有 5～15人。根據(jù)血細胞分析儀復檢規(guī)則[8-9]，對PLT減少的所有患者結(jié)果進行了復核確認，共檢出28例EDTA-PTCP患者，包括6例4個月～1歲的患兒。通過對28例EDTA-PTCP患者PLT的檢測發(fā)現(xiàn)，其肝素抗凝標本PLT遠遠低于手工法結(jié)果，說明肝素抗凝標本不適用于PLT計數(shù)；枸櫞酸鈉水劑抗凝標本可糾正EDTA-PTCP，但其PLT結(jié)果亦明顯低于枸櫞酸鈉粉劑抗凝標本及手工法結(jié)果，差異有統(tǒng)計學意義，其原因可能是抗凝比例不同引起：經(jīng)換算，枸櫞酸鈉水劑抗凝比例為1 mg枸櫞酸鈉抗凝312.5 μL血，遠遠高于枸櫞酸鈉粉劑的1∶15.6～1∶46.9，其抗凝標本僅適合做凝血功能檢測而不適于做PLT計數(shù)。本研究在24 h內(nèi)對EDTA-PTCP患者不同抗凝劑標本PLT結(jié)果隨檢測時間的變化作了持續(xù)觀察，同時選擇抗凝5 min、2 h、24 h后的血涂片染色鏡檢加以觀察血小板分布、聚集情況。結(jié)果顯示，EDTA-K2標本的PLT在采血后幾分鐘內(nèi)就迅速降低，隨后長時間內(nèi)PLT仍維持在極低水平，鏡檢結(jié)果顯示EDTA-K2誘導血小板產(chǎn)生了快速且不可逆轉(zhuǎn)的強聚集；枸櫞酸鈉水劑抗凝標本PLT在2 h內(nèi)結(jié)果較穩(wěn)定，PLT沒有發(fā)生聚集，但在2 h后PLT開始下降，鏡檢發(fā)現(xiàn)了小簇狀聚集的PLT，與鄺妙歡[10]的研究結(jié)果一致。進一步的研究表明[11]，離體2 h后血小板表面糖蛋白PAC-1、CD62P、CD63及凝血酶敏感蛋白（TSP）表達量明顯增加，血小板活化后導致了其聚集性的增加；枸櫞酸鈉粉劑抗凝標本在24h內(nèi)PLT結(jié)果非常穩(wěn)定，與手工法的結(jié)果基本一致，涂片血小板均呈單個散在分布，幾乎沒有觀察到聚集現(xiàn)象，顯示出很強的抗凝效果。

EDTA-PTCP的發(fā)病機制尚未完全闡明，可能與纖維蛋白原受體、糖蛋白（GPⅡb/Ⅲa）、血小板表面的隱匿性抗原有關[12-13]。周小棉等[14]報道了1例非常罕見的包括EDTA鹽、枸鹽酸鈉、肝素鋰、氟化鈉等多種抗凝劑所致的血小板假性減少癥患者，發(fā)現(xiàn)只有高濃度的丁胺卡那霉素才能抑制血小板聚集，足以說明EDTA-PTCP形成原因的復雜性。在糾正EDTA-PTCP的主要方法中，免疫標記的流式細胞儀計數(shù)和血小板聚集體計數(shù)因需要用到特殊儀器而限制了它們的應用，血涂片染色計數(shù)則要求檢驗人員具備血液學的相關知識，手工計數(shù)法作為血小板計數(shù)的參考方法，也存在精密度差、準確度低等缺點，一般用于血小板計數(shù)的校準。而自制枸櫞酸鈉粉劑抗凝管具有制備簡單、計數(shù)準確、所需標本量少等優(yōu)點，在糾正EDTA-PTCP中效果顯著，尤其適用于靜脈采血困難嬰幼兒EDTA-PTCP的排查。然而，本研究尚屬初步研究，列入觀察的EDTA-PTCP患者例數(shù)不多，且血小板聚集受多種因素（如麻醉、抗血栓藥物的使用、手術、血小板功能缺陷等）影響，因而枸櫞酸鈉粉劑抗凝管糾正EDTA-PTCP的效果或許存在個體差異，但仍不失為一種簡單、實用的方法。

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（收稿：2014-03-21 修回：2014-07-20）

Preparation of sodium citrate powder tubes for anticoagulation and evaluation of its clinical application

HUA Jian-jiang,HE Wei-na,DU Ji-kun,LIANG Qiao-ling,XU Zhi-kang,HUANG Jiang-hao,ZHONG Yu
（Department of Clinical Laboratory Medicine,Shenzhen Shajing Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University,Shenzhen 518104,Guangdong Province,China）

ObjectiveTo prepare sodium citrate powder tubes and evaluate its application in EDTA-dependent pseudothrombocytopenia(EDTA-PTCP).MethodsNa3C6H5O7·2H2O(109 mmol/L)of different volumes were added into different glass tubes and dried to powder at 56℃,respectively.The different tubes were used to deal with the blood samples. Four methods including apparatus method,optical method,manual method,and staining method were used to detect the PLT of 238 specimens,and the differences were compared between the anticoagulation effects with sodium citrate powder tubes,sodium citrate solution tubes and heparin lithium anticoagulant tubes.ResultsThe PLT of anticoagulant specimens (with 12.8 mg sodium citrate powder)for control(n=50)was close to the result of EDTA-K2method,and no significant difference was found between the two methods.The result of PLT was similar with that of EDTA-K2method when the blood volume for the anticoagulant specimens was between 200 and 600 μL.In control group,the PLT,RBC,and HGB of the anticoagulant specimens were similar with those by EDTA-K2method(P＞0.05)except the WBC.In the EDTAPTCP group(n=28),the PLT of sodium citrate powder tubes,sodium citrate solution tubes,and heparin lithium anticoagulant tubes were（193.89±50.62）×109/L,（164.86±48.11）×109/L,and（108.79±29.33）×109/L,respectively,and the result of manual method were(199.14±47.99)×109/L;no significant difference was found between the sodium citrate powder tube method and manual method,while significant difference was found between the sodium citrate solution tubes,heparin lithium anticoagulant tubes and manual method (P＜0.01).The result of PLT for the anticoagulant specimens was stable within 24 hours,and no platelet aggregation was observed.ConclusionThe best anticoagulation content of the self-manufactured sodium citrate powder tube is 12.8 mg per tube,and the best amount of blood sampling is between 200 and 600 μL. The self-manufactured sodium citrate powder tube has the accuracy in correcting EDTA-PTCP better than that of sodium citrate solution tubes and heparin lithium anticoagulant tubes.[Chinese Medical Equipment Journal，2015，36（1）：82-86]

sodium citrate;dry powder;EDTA-dependent pseudothrombocytopenia

R318.6；R558.2

A

1003-8868（2015）01-0082-05

10.7687/J.ISSN1003-8868.2015.01.082

深圳市寶安區(qū)科技計劃資助項目（2013143）

華建江（1973—），男，副主任技師，主要從事血液疾病檢驗方面的研究工作，E-mail：hjianjiang13@163.com。

518104廣東深圳，深圳市寶安區(qū)沙井人民醫(yī)院檢驗科（華建江，何維娜，杜紀坤，梁巧玲，徐志康，黃江浩，鐘 瑜）