阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征患者血清IL-6、IL-17水平變化及臨床意義*

包薩日娜高麗于韜馬國(guó)強(qiáng)

阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征患者血清IL-6、IL-17水平變化及臨床意義*

包薩日娜①高麗①于韜①馬國(guó)強(qiáng)①

目的：探討阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征（Obstructive sleep apnea-hypopnea syndromes，OSAHS）患者血清炎性因子白細(xì)胞介素-6（Interleukin，IL-6）、白細(xì)胞介素-17（Interleukin，IL-17）水平變化及臨床意義。方法：回顧性分析2013年5月-2014年10月間本院呼吸科門診及住院部經(jīng)多導(dǎo)睡眠圖（Polysomnagraphy，PSG）監(jiān)測(cè)確診的102例OSAHS患者，及同期本院體檢中心98例健康體檢者的一般臨床資料、睡眠呼吸暫停低通氣指數(shù)（Apnea-hypopnea index，AHI）、最低血氧飽和度（Lowest arterial oxygen saturation，LSaO2）。采集靜脈血，分離血清，酶聯(lián)免疫吸附法（Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）檢測(cè)患者血清IL-6、IL-17水平并分析其與OSAHS的相關(guān)性。結(jié)果：與健康對(duì)照組比較，OSAHS組的血清IL-6、IL-17水平均升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），且血清IL-6、IL-17水平隨OSAHS分布嚴(yán)重程度的升高而升高。OSAHS組的血清IL-6、IL-17水平與AHI呈正相關(guān)（r=0.868，P＜0.05；r=0.896，P＜0.05），而與LSaO2呈負(fù)相關(guān)（r=-0.769，P＜0.05；r=-0.703，P＜0.05）。結(jié)論：血清炎性因子IL-6、IL-17水平在OSAHS組患者中升高，提示其參與OSAHS疾病進(jìn)程，可以作為OSAHS嚴(yán)重程度的生物學(xué)指標(biāo)。

阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征； IL-6； IL-17； 酶聯(lián)免疫吸附法

阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征（Obstructive sleep apnea-hypopnea syndromes，OSAHS）是由于睡眠過程中部分或完全的上呼吸道阻塞，從而引起呼吸暫停或低通氣到覺醒反復(fù)發(fā)生的常見疾病[1-2]?；颊叱０榇蝼?、睡眠呼吸暫停，白天嗜睡等癥狀，嚴(yán)重危害人類健康，現(xiàn)已成為呼吸疾病臨床研究的熱點(diǎn)領(lǐng)域之一。既往研究表明，OSAHS是一種炎癥性、免疫性疾病，一些炎癥因子如IL-1、8、10等都參與OSAHS的疾病進(jìn)程[3-4]。先前關(guān)于IL-17的研究?jī)H局限于其與兒童OSAHS患者發(fā)病的相關(guān)性，而鮮有報(bào)道IL-6與IL-17與成人OSAHS患者發(fā)病的相關(guān)性。為此，本研究采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）測(cè)定OSAHS組患者血清IL-6與IL-17水平并探討其與OSAHS發(fā)病的相關(guān)性，為OSAHS的早期診治提供試驗(yàn)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機(jī)選取2013年5月-2014年10月

間內(nèi)蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院呼吸科門診及住院經(jīng)多導(dǎo)睡眠圖（Polysomnagraphy，PSG）監(jiān)測(cè)確診的OSAHS患者102例，其中男57例，女45例，年齡37～64歲，平均（50.41±10.25）歲，BMI（27.75±2.61）kg/m2。參照中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)睡眠學(xué)組制定的《阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征診治指南》（2011年修訂版）病情分度標(biāo)準(zhǔn)[5]，將OSAHS組按病情嚴(yán)重程度分為：輕度組20例，中度組28例，重度組54例。另選取PSG監(jiān)測(cè)正常者98例作為對(duì)照組，其中男56例，女42例，年齡36～62歲。各組的一般資料比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性，見表1。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)睡眠學(xué)組制定的《阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征診治指南》（2011年修訂版）診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：排除單純鼾癥、上氣道阻力綜合征、肥胖低通氣、發(fā)作性睡病、不寧腿綜合征和睡眠中周期性腿動(dòng)、慢性呼吸系統(tǒng)疾病、心腦血管疾病、甲狀腺功能亢進(jìn)或減低、急慢性肝炎、腫瘤、免疫系統(tǒng)等疾病。

1.3 試驗(yàn)試劑及儀器 人白細(xì)胞介素-6、17 ELISA試劑盒（美國(guó)R&D公司），SM-SW2000C多導(dǎo)睡眠采集分析系統(tǒng)（中美合資北京東方萬泰技術(shù)開發(fā)有限公司），X-15R低溫高速離心機(jī)（美國(guó)Beckman Coulter公司），RT-2100C酶標(biāo)儀（深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司）。

1.4 方法 多導(dǎo)睡眠采集分析系統(tǒng)連續(xù)7 h監(jiān)測(cè)患者睡眠狀態(tài)（患者需在安靜、舒適的狀態(tài)下就寢后進(jìn)行），以獲得AHI、LSaO2數(shù)據(jù)。待多導(dǎo)睡眠監(jiān)測(cè)完成后，于次日凌晨6時(shí)抽取空腹靜脈血，促凝處理，離心（3000 rpm/min，15min），收集血清于-20 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。?yīng)用ELISA法測(cè)定血清IL-6、17的水平，簡(jiǎn)明步驟如下：用純化的人IL-6、17抗體包被微孔板，制成固相抗體，加入血清樣品，再與HRP標(biāo)記的IL-6、17抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的IL-6、17含量呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算血清樣品中IL-6、17的含量。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料采用（±s）表示，比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用 χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用直線相關(guān)分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組的睡眠監(jiān)測(cè)情況比較 各組的睡眠監(jiān)測(cè)結(jié)果（AHI、LSpO2）比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 各組的睡眠監(jiān)測(cè)情況比較（±s）

表2 各組的睡眠監(jiān)測(cè)情況比較（±s）

*與對(duì)照組比較，P＜0.05；△與輕度組比較，P＜0.05；#與中度組比較，P＜0.05

組別AHI（次/h）LSpO2（%）對(duì)照組（n=98） 2.50±1.3091.26±7.10 OSAHS組（n=102）31.34±9.14*77.11±10.26*輕度組（n=20）12.24±5.16*88.32±8.31*中度組（n=28）24.84±6.17*△72.47±6.54*△重度組（n=54）52.14±7.41*△#43.55±8.41*△#

2.2 兩組的血清IL-6、IL-17水平變化情況比較 與對(duì)照組比較，OSAHS組的血清IL-6、IL-17水平均升高，且隨著病情程度的加重，血清IL-6、IL-17水平也升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表3。

表3 兩組的血清IL-6、IL-17水平變化情況比較（±s） pg/mL

表3 兩組的血清IL-6、IL-17水平變化情況比較（±s） pg/mL

*與對(duì)照組比較，P＜0.05；△與輕度組比較，P＜0.05；#與中度組比較，P＜0.05

組別 IL-17 IL-6對(duì)照組（n=98）6.02±0.310.47±0.29輕度組（n=20）6.89±0.21*1.59±0.23*中度組（n=28）7.67±0.27*△3.43±0.76*△重度組（n=54）8.54±0.31*△#7.83±1.42*△#OSAHS組

2.3 各組的血清IL-6、IL-17水平與睡眠呼吸監(jiān)測(cè)指標(biāo)（AHI、LSaO2）的相關(guān)性分析 OSAHS組各組的血清IL-6、IL-17水平分別與睡眠呼吸監(jiān)測(cè)指標(biāo)AHI呈現(xiàn)正相關(guān)（r=0.868、0.896），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。而OSAHS組血清IL-6、IL-17水平分別與LSaO2呈負(fù)相關(guān)（r=-0.769、-0.703），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討論

阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征（Obstructive sleep apnea-hypopnea syndromes，OSAHS）是臨床上常見、多發(fā)的疾病，由睡眠過程中反復(fù)出現(xiàn)的上呼吸道塌陷所致的上氣道部分或者完全阻塞、氣流受限，導(dǎo)

致了反復(fù)的間歇性低氧血癥和高碳酸血癥，進(jìn)而誘發(fā)機(jī)體發(fā)生一系列的病理生理改變的臨床綜合征，最終導(dǎo)致高血壓、冠心病等心血管疾病[6-7]。由于長(zhǎng)期的間歇性缺氧，OSAHS患者的高碳酸血癥使中性粒細(xì)胞等細(xì)胞應(yīng)激性增多，相關(guān)炎癥細(xì)胞因子濃度隨之增加。既往研究表明，OSAHS是多種炎性因子參與繼而導(dǎo)致的一個(gè)慢性炎癥的過程。多種炎性因子及細(xì)胞如腫瘤壞死因子-α、白介素家族、C反應(yīng)蛋白等都參與患者睡眠時(shí)睡眠結(jié)構(gòu)紊亂的發(fā)生及發(fā)展的過程[8-10]。

IL-6是重要的免疫調(diào)節(jié)因子，能夠參與到體液免疫調(diào)節(jié)與肺部的炎癥病理過程中，出現(xiàn)在炎癥反應(yīng)急性期。在局部損傷激活炎癥細(xì)胞后，IL-6的分泌會(huì)增加，能促進(jìn)炎癥反應(yīng)的進(jìn)行，其水平能夠反映肺部的感染程度[11-12]。而在OSAHS患者中，由于血清IL-6水平的升高使缺氧所導(dǎo)致的應(yīng)激性升高，并非機(jī)體主動(dòng)的病理反應(yīng)，因而容易導(dǎo)致血管壁損傷、內(nèi)皮細(xì)胞增生等，進(jìn)而刺激機(jī)體產(chǎn)生其他炎癥因子，加重炎癥反應(yīng)，最終引起心血管系統(tǒng)的損害，引發(fā)心血管系統(tǒng)疾病[13-14]。同時(shí)，缺氧引起的低氧血癥和高碳酸血癥能使交感神經(jīng)興奮，導(dǎo)致血中兒茶酚胺類物質(zhì)的濃度升高，又進(jìn)一步促進(jìn)IL-6分泌，導(dǎo)致OSAHS患者血清IL-6水平的上升[15]。

IL-17是近年來發(fā)現(xiàn)一種新型的不同于Th1、Th2的CD4+效應(yīng)T細(xì)胞，稱為Th17細(xì)胞，該細(xì)胞產(chǎn)生IL-17，IL-17作為一種前炎性因子，在炎癥性疾病中也發(fā)揮著重要調(diào)節(jié)作用[16-17]。目前研究表明IL-6、IL-17通過細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)激活核因子NF-κB通路，使炎癥介質(zhì)和細(xì)胞因子的基因轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)[18]。而OSAHS引起的間歇低氧和再氧合，直接損害內(nèi)皮細(xì)胞，可激活炎癥反應(yīng)的關(guān)鍵因子和啟動(dòng)因子NF-κB，因此筆者推測(cè)，IL-6、IL-17在OSAHS疾病的發(fā)展過程中也發(fā)揮了重要的作用。

筆者的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，OSAHS患者IL-6、IL-17血清水平較健康對(duì)照組增高，提示IL-6、IL-17參與OSAHS形成，且IL-6、IL-17水平與OSAHS嚴(yán)重程度呈正比，提示IL-6、IL-17在OSAHS的發(fā)生發(fā)展過程中也發(fā)揮了重要作用，并有利于評(píng)估OSAHS的嚴(yán)重程度。同時(shí)，OSAHS患者IL-6、IL-17血清水平與睡眠呼吸監(jiān)測(cè)指標(biāo)AHI呈現(xiàn)正相關(guān)，與LSaO2呈負(fù)相關(guān)，說明IL-6、IL-17這兩個(gè)指標(biāo)在一定程度上能夠反應(yīng)OSAHS疾病進(jìn)程。

OSAHS可能是一種炎癥相關(guān)性的疾病，OSAHS患者體內(nèi)炎性因子水平顯著升高可能是誘發(fā)和加重OSAHS的重要調(diào)控機(jī)制之一，IL-6、IL-17是否可作為OSAHS發(fā)生其他并發(fā)癥的預(yù)測(cè)因子仍有待進(jìn)一步證實(shí)。

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The Change and Clinical Significance of Serum IL-6 and IL-17 Levels in Patients with Obstructive Sleep Apnea-hypopnea Syndromes/

BAO Sarina，GAO Li，YU Tao，et al.//Medical Innovation of China，2015，12（32）：005-007

Objective：To discuss the change and clinical significance of serum IL-6 and IL-17 levels in patients with obstructive sleep apnea-hypopnea syndromes （OSAHS）.Method：102 patients with OSAHS who were diagnosed by polysomnagraphy （PSG） and 98 cases of healthy as control group were selected from May 2013 to Octomber 2014，the general clinical data， apnea-hypopnea index （AHI） and lowest arterial oxygen saturation （LSaO2） of them were retrospectively analyzed.The serum IL-6 and IL-17 levels were determined by enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）， and its correlation with OSAHS were analyzed. Result： Compared with the control group，the serum IL-6 and IL-17 levels of OSAHS patients increased and increased with the severity of OSAHS，there was statistically significant difference between them（P＜0.05）.The serum IL-6 and IL-17 levels of OSAHS patients presented positively correlated with AHI（r=0.868，P＜0.05；r=0.896，P＜0.05），but negatively correlated with LSaO2（r=-0.769，P＜0.05；r=-0.703，P＜0.05）.Conclusion：The levels of serum inflammatory cytokines IL-6 and IL-17 are higher in OSAHS group，suggests its participation in OSAHS disease process，and it can be used as biological index of the severity of OSAHS.

Obstructive sleep apnea-hypopnea syndromes； IL-6； IL-17； Enzyme-linked immunosorbent assay

10.3969/j.issn.1674-4985.2015.32.002

2015-08-17） （本文編輯：周亞杰）

內(nèi)蒙古自治區(qū)自然科學(xué)基金項(xiàng)目（2011MS1179）

①內(nèi)蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院 內(nèi)蒙古 呼和浩特 010017

馬國(guó)強(qiáng)

First-author’s address：Inner Mongolia Autonomous Region People’s Hospital，Hohhot 010017，China