依非韋倫相關(guān)物質(zhì)B的合成

鐘曉鋒，王 瑞，鄒 慧，田 磊

（安徽貝克聯(lián)合制藥有限公司，安徽太和236604）

依非韋倫化學(xué)名為（4S）-6-氯-4-（環(huán)丙乙炔）-4-（三氟甲基）-苯并-1，4-二氫噁唑-2-酮，是一種抵抗艾滋病毒的非核苷類藥物，由美國(guó)Merck公司研制且通過(guò)美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）審批，于1999年2月在美國(guó)首次上市。本品對(duì)HIV-1病毒有良好的抑制作用，通過(guò)與HIV-1逆轉(zhuǎn)錄酶上的特定位點(diǎn)可逆性結(jié)合，終止RNA和DNA依賴性DNA聚合酶的活性，從而阻止病毒復(fù)制[1-3]。研究顯示，依非韋倫在合成中有副產(chǎn)物產(chǎn)生，影響其產(chǎn)品質(zhì)量，因此各國(guó)藥典中對(duì)藥品雜質(zhì)的控制均有明確規(guī)定?！睹绹?guó)藥典》USP 35版中羅列出依非韋倫原料藥中的幾種雜質(zhì)，其中就有依非韋倫相關(guān)物質(zhì)B即（S，E）-6-氯-4-（環(huán)丙乙烯）-4-（三氟甲基）-苯并-1，4-二氫惡嗪-2-酮。結(jié)構(gòu)式如下：

為了對(duì)依非韋倫原料的質(zhì)量進(jìn)行研究和控制，提供該雜質(zhì)的對(duì)照品，本文采用化學(xué)方法合成了該雜質(zhì)，以期對(duì)依非韋倫原料藥的質(zhì)量控制提供指導(dǎo)和幫助。

1 合成路線

參考相關(guān)文獻(xiàn)[4-6]設(shè)計(jì)依非韋倫相關(guān)物質(zhì)B的合成路線如圖1。

2 合成實(shí)驗(yàn)

2.1 儀器與試劑

1HNMR譜采用Bruker AM-400型核磁共振波譜儀測(cè)定；高分辨質(zhì)譜采用Agilent6224 TOF-LC/MS測(cè)定;高效液相采用Agilent1200測(cè)定。所用試劑均為市售分析純或化學(xué)純。

2.2 N-（4-甲氧基芐基）-4-氯-2-（三氟乙?；┍桨罚?）的合成

往化合物 1（50g，0.22mol）的乙腈（200mL）的溶液中加入對(duì)甲苯磺酸（0.58g，3.35mmol）。反應(yīng)液在氮?dú)獗Ｗo(hù)下加熱至 70℃，4-甲氧基芐醇（34g，0.24mmol）的乙腈（60mL）溶液滴加到上述反應(yīng)液中，約1h滴加完畢，后保溫反應(yīng)2h，TLC檢測(cè)反應(yīng)完全。降溫析出黃色固體，室溫?cái)嚢?2h，緩慢加水（200mL），室溫?cái)嚢?2h，過(guò)濾，濾餅用乙腈 /水（1∶1）洗滌，干燥得化合物（2）65g，收率84%。1H NMR（400MHz，CDCl3）δ9.04（s，1H），7.74（d，J=2Hz，1H），7.35（dd，J=2，9Hz，1H），7.24（d，J=8Hz，2H），6.91（d，J=8 Hz，2H），6.75（d，J=9 Hz，1H），4.43（d，J=6Hz，2H），3.79（s，3H）。

2.3 （S）-5-氯-α-（環(huán)丙基乙炔基）-2-[（4-甲氧基苯基）甲基]氨基- α-（三氟甲基）苯甲醇（3）的合成

在（1R，2S）-N-吡咯烷基麻黃堿（165g，0.3mol）的四氫呋喃（220mL）溶液中加入三苯基甲烷（50mg，用于引發(fā)），體系降溫至-10℃，n-BuLi（1.6M正己烷溶液）直至體系變紅，控溫＜5℃，再加入相同量的n-BuLi，后慢慢加入環(huán)丙基乙炔（20g，0.3mol），加完后，體系在0℃～5℃下攪拌0.5h，然后降溫至-55℃，加入化合物2（52g，0.15mol），得到的紅色溶液在 -55℃在攪拌 1h，后用1M檸檬酸淬滅，恢復(fù)到室溫后分層，有機(jī)相用1M檸檬酸洗，濃縮至剩余約150mL四氫呋喃后加入400mL甲苯，變成泥漿狀，再加入120mL正己烷，攪拌1h，抽濾，濾餅依次用正己烷/甲苯（4∶1）、正己烷洗，氮?dú)獗Ｗo(hù)，干燥得到化合物（3）45g，收率 72%。1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ7.55（brs，1H），7.23（d，J=8 Hz，2H），7.13（dd，J=3，9 Hz，1H），6.86（d，J=8 Hz，2H），6.59（d，J=8 Hz，1H），4.95（bs，1H），4.23（s，2H），3.79（s，3H），2.39（m，1H），1.34（m，1H），0.84（m，2H），0.76（m，2H）。

2.4 （S，E）-5-氯-α-（環(huán)丙基乙烯基）-2-[（4-甲氧基苯基）甲基]氨基- α-（三氟甲基）苯甲醇（4）的合成

在干燥的1L三口瓶中依次加入磁力攪拌子、化合物 3（41g，0.1mol）、無(wú)水四氫呋喃（500mL），降溫至 0℃～3℃，滴加四氫鋁鋰的四氫呋喃溶液（0.3mol），滴畢，TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，25℃～30℃下反應(yīng)48h后原料反應(yīng)完全，降溫至0℃～3℃，慢慢依次滴加12mL水、12mL 15%NaOHaq、36mL水。滴畢，過(guò)濾，濾餅用少量四氫呋喃洗，濾液濃縮蒸盡四氫呋喃，后加水，乙酸乙酯萃取，合并有機(jī)相，濃縮得（4）30g，收率 72%。1HNMR（400MHz，CDCl3）δ7.24（m，1H），7.16（m，1H)，6.88（m，2H），6.69（m，1H），5.94（d，J=16 Hz，1H），5.48（m，1H），4.22（s，2H），3.79（s，3H），1.51（m，1H），0.82（m，2H），0.44（m，2H）。

2.5 （S，E）-5-氯-α-（環(huán)丙基乙烯基）-2-氨基- α-（三氟甲基）苯甲醇（5）的合成

在 500mL三口瓶中加入化合物 4（30g，72.84mmol）、甲苯（130mL），冰浴下滴加 DDQ（16.54g，72.84mmol）的甲苯（90mL）溶液，滴畢，反應(yīng)液室溫?cái)嚢?h，過(guò)濾，濾餅用甲苯洗滌，濾液用5%NaHCO3洗，40℃下蒸盡甲苯，用甲醇帶兩次，直至甲苯幾乎完全蒸盡。再次溶于180mL甲醇，加熱至 40℃，滴加 5NNaOH（66mL），滴畢，保溫?cái)嚢?0.5h。慢慢滴加 NaBH4（772mg，20.4mmol） 的 0.5N NaOH（8mL）溶液，反應(yīng)液繼續(xù)攪拌15min后降至室溫，用冰醋酸調(diào)pH=8，緩慢滴加水（200mL），滴畢，室溫?cái)嚢?h，過(guò)濾，濾餅水洗，干燥得到淡黃色固體氨基醇（5）17g，收率 58%。ESI-HR-MSm/z：292.0736[M+H]+。

2.6 （S，E）-6-氯-4-（環(huán)丙乙烯）-4-（三氟甲基）-苯并-1，4-二氫惡嗪-2-酮（6）的合成

在250mL三口瓶中依次加入8g化合物5、40mL甲苯，室溫下滴加KHCO3（5.5g，54.85mmol）的水（22mL）溶液。三光氣（2.93g，9.87mmol）的甲苯（30mL）溶液滴加到上述體系中，反應(yīng)液室溫?cái)嚢?h，加入甲醇（2mL）淬滅反應(yīng)，分出有機(jī)相，飽和碳酸氫鈉水溶液洗，水洗，干燥，濃縮得黃色油狀物。加入50mL正己烷、10mL甲苯，加熱回流溶解澄清，慢慢降至室溫，析出白色固體，過(guò)濾，濾餅用正己烷洗滌，烘干得（6）6.2g，收率71%。1H NMR（400MHz，CDCl3）δ9.2（s，1H），7.34（m，2H），6.86（m，1H），5.89（m，1H），5.51（m，4H），1.55（m，1H），0.85（m，2H），0.51（m，2H）；ESI-HR-MSm/z：340.0317[M+Na]+。

3 結(jié)論

本研究合成了依非韋倫相關(guān)物質(zhì)B，并通過(guò)高分辨質(zhì)譜、核磁共振氫譜等方法進(jìn)行了結(jié)構(gòu)確證。與購(gòu)買的USP標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行HPLC比對(duì)分析，保留時(shí)間完全吻合，因此合成的依非韋倫相關(guān)物質(zhì)B能夠滿足依非韋倫質(zhì)量研究需要，對(duì)依非韋倫的質(zhì)量控制具有重要意義。（此文得到了岳祥軍博士的精心指導(dǎo)，在此深表感謝?。?/p>

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