1 例J亞群禽白血病的診斷

李良鑒 吳曉嬋 （江西省贛州市畜牧獸醫(yī)局 江西贛州 341000）

禽白血病是由禽白血病病毒引起的禽類的多種類型腫瘤性疾病的總稱，該病在臨床上表現(xiàn)形式多種多樣，包括淋巴細(xì)胞性白血病、成紅細(xì)胞性白血病、成髓細(xì)胞性白血病和髓細(xì)胞性白血病等。禽白血病/肉瘤病毒群中A、B、C、D、E 和J6 個(gè)亞群來(lái)源于雞，其中E亞群為內(nèi)源性病毒，其他的5 個(gè)亞群為外源性病毒。在20 世紀(jì)80 年代之前，禽白血病病毒亞群的變異都較小。但隨后，在美國(guó)、以色列和法國(guó)等國(guó)家的肉雞中陸續(xù)發(fā)生J亞群禽白血病的廣泛流行，并迅速擴(kuò)散至世界各國(guó)，造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失，成為全世界家禽業(yè)所面臨的一個(gè)主要問(wèn)題。

A、B、C 和D 等亞群禽白血病病毒主要引起雞的淋巴細(xì)胞性白血病，而J亞群禽白血病病毒則主要引起22～55 周齡肉雞的髓細(xì)胞性白血病，致死率達(dá)6% 。然而，后來(lái)從臨床和實(shí)驗(yàn)性的A LV-J 病例中分離到的一些急性轉(zhuǎn)化型毒株可迅速轉(zhuǎn)化骨髓細(xì)胞，其誘發(fā)肉用型雞骨髓瘤型白血病死亡周齡提早至9周齡，且表現(xiàn)出較高的傳染性和發(fā)病率，由此可見(jiàn)，在A LV-J發(fā)現(xiàn)后的近20 多年內(nèi)，其致病性發(fā)生了重大的演化。

辛朝安等2006 年首次報(bào)道我國(guó)北方地區(qū)的一些蛋雞群出現(xiàn)一種以趾、翼、胸部皮膚及肝臟等器官出現(xiàn)血皰，破損后出血不止直至死亡為特征的禽白血病病例，該病的臨床特征明顯不同于以前國(guó)內(nèi)常見(jiàn)的禽髓細(xì)胞性白血病等，經(jīng)診斷為A LV-J引起的血管瘤型禽白血病，此后該病在國(guó)內(nèi)出現(xiàn)蔓延的趨勢(shì)。

1 病原學(xué)

禽白血病病毒(A vian leukosis virus,A LV)屬于正逆轉(zhuǎn)錄病毒亞科、α 逆轉(zhuǎn)錄病毒屬。A LV 的基因組R N A 全長(zhǎng)7～8kb，可直接作為m R N A。在電子顯微鏡下，超薄切片中病毒具有位于中心的電子致密區(qū)，由直徑約35～45 nm 的核芯、中膜層和外膜層構(gòu)成，病毒粒子近似球形，整個(gè)病毒粒子的直徑平均為90 nm (80～120 nm)，外膜層上有放射狀突起囊膜糖蛋白，直徑約為8 nm。基因組結(jié)構(gòu)為5′U TR-gag-pol-env-U TR 3′，兩側(cè)的非編碼區(qū)U TR 含有病毒表達(dá)所需要的轉(zhuǎn)錄控制等成分，與病毒致病性密切相關(guān)；5′gag-pol-env 3′為編碼區(qū)，編碼病毒的結(jié)構(gòu)蛋白和有關(guān)的酶。外源性A LV 主要通過(guò)前病毒D N A 的插入性激活機(jī)制與癌基因轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制導(dǎo)致機(jī)體腫瘤的產(chǎn)生。不同亞群A LV 引起的腫瘤類型各不相同，這與其囊膜蛋白基因env 及長(zhǎng)末端重復(fù)序列LTR 中獨(dú)特的序列有關(guān)。

2 流行特點(diǎn)

A LV-J 既可通過(guò)垂直傳播也可通過(guò)接觸水平傳播。垂直傳播在該病流行方面起著重要作用，水平傳播對(duì)促進(jìn)垂直傳播以及持續(xù)感染起到一定的作用。垂直傳播即母雞卵巢受到感染時(shí)，能夠把A LV-J帶給種蛋，能引起孵出小雞的免疫耐受性，并可終生帶毒，這些雞可能成為子代雞的A LV-J傳播者。而水平傳播主要是通過(guò)直接接觸，雞只可以通過(guò)含有A LV-J的體液、分泌物、糞便和羽毛碎屑等途徑而感染。通過(guò)這種方式感染的雞能表現(xiàn)出短暫的病毒血癥，可產(chǎn)生抗體也可能不產(chǎn)生抗體。這些雞可通過(guò)其排出的糞便不斷向周圍環(huán)境中擴(kuò)散病毒。野外調(diào)查和實(shí)驗(yàn)室研究表明：A LV-J 比其他外源性亞群有更迅速的水平傳播能力。隨著我國(guó)集約化、規(guī)?；B(yǎng)禽業(yè)的快速發(fā)展，雞群生存條件如氣候、數(shù)量、免疫性、藥物和飼料等不斷變化，在一定程度上打破了A LV-J 與宿主的原有平衡，A LV-J 在選擇壓力的作用下不斷發(fā)生著變異，使雞群的發(fā)病率與死亡率不斷升高，A LV-J的流行也表現(xiàn)出新的特點(diǎn)。

3 發(fā)病情況

2014 年3 月，江西省寧都縣某養(yǎng)雞場(chǎng)飼養(yǎng)190日齡左右的蛋雞6 000 只，在雞群130 日齡時(shí)進(jìn)行了新城疫I系苗的防疫注射。175 日齡左右雞群開(kāi)始出現(xiàn)死亡，死前無(wú)明顯癥狀。雞場(chǎng)場(chǎng)長(zhǎng)根據(jù)以往經(jīng)驗(yàn)，先后使用土霉素等治療，并未見(jiàn)效果，又使用抗病毒藥、磺胺類藥物進(jìn)行治療，仍不見(jiàn)起色。雞群持續(xù)死亡，死亡率在4% ～6% 。

4 臨床癥狀及現(xiàn)場(chǎng)剖檢

雞群表現(xiàn)為精神萎靡不振，人走入雞舍后，雞只反應(yīng)遲鈍，肉髯、頭面部蒼白，消瘦，產(chǎn)蛋量下降，個(gè)別雞腹部出現(xiàn)膨大。剖檢可見(jiàn)病死雞內(nèi)臟組織有白色或灰色腫瘤，肝臟腫大，表面分布較多大小不一的血泡；腎臟腫大，脾腫大，脾臟表面散布許多白色腫瘤。

5 實(shí)驗(yàn)室診斷

根據(jù)臨床癥狀、病理解剖結(jié)果，初步懷疑為禽白血病。為進(jìn)一步確診，從發(fā)病雞群中采肛拭子，并用A LV 抗原ELISA 檢測(cè)試劑盒（ID EX X）測(cè)定P27 抗原。在無(wú)菌環(huán)境下，從血液樣品中取出血漿并接種D F-1 細(xì)胞，利用抗A LV-J gp85 特異性單克隆抗體JE9 對(duì)感染過(guò)病毒的細(xì)胞進(jìn)行間接免疫熒光（IFA）檢測(cè)。并取肝臟、脾臟和法氏囊的腫瘤病灶，剛開(kāi)產(chǎn)的雞的雞蛋蛋清和糞便，病料經(jīng)過(guò)適當(dāng)處理后，抽取病毒核酸，進(jìn)行PCR 檢測(cè)。

ELISA 檢測(cè)試劑盒（ID EX X）P27 抗原，于650nm波長(zhǎng)下的吸光度值（O D 650），S/P 值為2.12（S/P＞0.2），檢測(cè)結(jié)果為禽白血病P27 抗原陽(yáng)性。

IFA 檢測(cè)結(jié)果顯示接種血漿的D F-1 細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)含有抗A LV-J gp85 特異性單克隆抗體識(shí)別的綠色熒光，檢測(cè)結(jié)果A LV-J為陽(yáng)性。

病毒核酸經(jīng)PCR 檢測(cè)，電泳結(jié)果顯示，擴(kuò)增出A LV-J 型特異性片段，片段大小均為545bp，與預(yù)期相符，而不能擴(kuò)增出A LV-A、A LV-B、R EV（雞網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病毒）及M D V（馬立克氏病毒）特異性片段。

綜合臨床表現(xiàn)、病理解剖及實(shí)驗(yàn)室診斷，最終診斷為蛋雞J亞群禽白血病。

6 防治

目前對(duì)于禽白血病無(wú)有效的治療藥物，也無(wú)有效的商品疫苗進(jìn)行預(yù)防，故此，預(yù)防禽白血病較好的方法就是淘汰雞群中的陽(yáng)性雞，逐步凈化雞群。對(duì)原種群進(jìn)行徹底的禽白血病凈化，盡早淘汰陽(yáng)性的雞，并引進(jìn)經(jīng)凈化過(guò)的種雞和雞苗。每批雞出殼后，孵化器、出雛器和育雛室進(jìn)行徹底清掃消毒，嚴(yán)格選用雞場(chǎng)的弱毒活疫苗，避免疫苗污染和其他橫向因素的感染。