中草藥和生物防控在對(duì)蝦白斑綜合癥中的應(yīng)用

黃永春，陳輝輝，涂晨凌，于慧娟

(1.集美大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院 361021;2.福建省海洋漁業(yè)資源與生態(tài)環(huán)境重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室)

對(duì)蝦是全球性水產(chǎn)養(yǎng)殖種類，也是全球交易量最大的水產(chǎn)品。2012年我國(guó)對(duì)蝦養(yǎng)殖產(chǎn)量達(dá)165萬t，占全球養(yǎng)殖產(chǎn)量的40%，成為全球?qū)ξr養(yǎng)殖產(chǎn)量第一大國(guó)。隨著蝦養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴(kuò)大、集約化程度的提高以及蝦生存環(huán)境的惡化，疾病對(duì)對(duì)蝦的危害程度越來越大。特別是對(duì)蝦白斑綜合癥病毒，是迄今為止危害最為嚴(yán)重的一種對(duì)蝦病毒，感染蝦7～10 d內(nèi)死亡率可達(dá)80% ～100%［1］。采用抗生素和其他化學(xué)類藥物防治，容易打破生物間相互依賴、相互制約的生態(tài)平衡關(guān)系，抑制了有益藻類的繁殖，給對(duì)蝦健康養(yǎng)殖帶來嚴(yán)重后果。而中草藥具有天然、高效、毒副作用小、不易產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)點(diǎn)，其某些成分既有抗菌作用，又有免疫作用，能改善機(jī)體的免疫狀態(tài)，提高自身抗病能力，因此在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用越來越受到關(guān)注［2－3］。為此，探討了中草藥與生物防控技術(shù)在對(duì)蝦白斑綜合癥中的應(yīng)用，以促進(jìn)我國(guó)對(duì)蝦健康生態(tài)養(yǎng)殖的發(fā)展。

1 對(duì)蝦白斑綜合癥病毒的結(jié)構(gòu)與危害

對(duì)蝦白斑綜合癥病毒 (white spot syndrome virus，WSSV)是一種雙鏈 DNA病毒，病毒粒子呈橢圓形，具有雙層囊膜但不形成包涵體［4］。目前國(guó)際上已測(cè)定了3株對(duì)蝦白斑綜合癥病毒全基因組序列，分別為泰國(guó)株 (AF369029)［5］、中國(guó)大陸株(AF332093)［6］及臺(tái)灣株 (AF440570)［7］。

對(duì)蝦白斑綜合癥病毒是全球?qū)ξr養(yǎng)殖業(yè)最主要的病原體之一，其致病宿主范圍廣、致病力高、傳播迅速，該病典型癥狀為對(duì)蝦甲殼內(nèi)側(cè)出現(xiàn)直徑0.5～2.0 mm大小的白色斑點(diǎn)，甲殼易剝離;蝦體色微紅，攝食減少或停止攝食，靜臥池底，體質(zhì)虛弱，空胃空腸等癥狀;感染蝦7～10 d內(nèi)死亡率可達(dá)80%～100%，是迄今為止危害最為嚴(yán)重的一種對(duì)蝦病毒，在全球范圍內(nèi)造成重大經(jīng)濟(jì)損失，嚴(yán)重阻遏了對(duì)蝦養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，成為目前對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)可持續(xù)發(fā)展的主要障礙之一［1］。

2 中草藥的功效與分類

中草藥作為一種天然物質(zhì)，具有來源廣泛、價(jià)格低廉、不宜導(dǎo)致病原菌產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點(diǎn)。目前已有200余種中草藥被報(bào)道具有多種免疫活性，能夠影響和調(diào)節(jié)動(dòng)物機(jī)體的免疫功能［2］。中草藥按其功效可分為以下幾類:一是抗病毒類中草藥，如板藍(lán)根、野菊花、紫胡、射干 、虎杖、苦地丁等;二是抗菌抑菌類中草藥，如烏梅、百部、大黃、魚腥草、大青葉、白頭翁等;三是促進(jìn)生長(zhǎng)類中草藥，如大蒜、山楂、金櫻子、露水草、龍膽草等;四是驅(qū)蟲、殺蟲類中草藥，如檳榔、苦參、苦楝、草果、仙鶴草、常山、五倍子等［3］。中草藥除含有藥用功效的成分外，還含有蛋白質(zhì)、多糖、脂類、微量元素、維生素等營(yíng)養(yǎng)成分，因而中草藥具有增強(qiáng)機(jī)體免疫力、調(diào)整機(jī)體新陳代謝、增強(qiáng)抗應(yīng)激能力、抗菌抑菌、促消化吸收、促生長(zhǎng)、殺蟲驅(qū)蟲等多種功能，適合作為免疫增強(qiáng)劑應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)［8－10］。

3 中草藥及生物防控在對(duì)蝦白斑綜合癥上的應(yīng)用

3.1 中草藥防控技術(shù)

國(guó)外學(xué)者 Kumaran［11］、Balasubramanian［12］和Yogeeswaran［13］采用不同的試劑和方法獲得的中草藥提取物組分均能使對(duì)蝦抗 WSSV侵染能力增強(qiáng)，存活率大幅提高。Balasubramanian［14－15］選取 20 種印度傳統(tǒng)藥用植物用于抗病毒藥物篩選，發(fā)現(xiàn)從木橘、苦瓜、狗牙根、馬纓丹、真珠草等植物中獲得的有機(jī)性或水溶性提取物具有較強(qiáng)的抗病毒活性，其中以狗牙根效果最為顯著。用狗牙根的醇溶性粗提取物投喂斑節(jié)對(duì)蝦后，對(duì)蝦對(duì)WSSV侵染的抵抗力顯著增強(qiáng)。天冬和角果木水溶性提取物被對(duì)蝦攝入后，對(duì)蝦的非特異性免疫力增強(qiáng)，WSSV侵染后的死亡率降低［16］。

吳俊文［17］在每千克飼料內(nèi)添加中草藥復(fù)合制劑凈10 g，連續(xù)投喂南美白對(duì)蝦5～7 d，其對(duì)WSSV的控制率達(dá)80%以上，并在一定程度上控制了WSSV的傳播;楊清華等［18］研究表明在飼料中添加復(fù)方中草藥投喂凡納濱對(duì)蝦可以影響對(duì)蝦對(duì)WSSV的抗病能力，當(dāng)添加復(fù)方中草藥濃度為0.1%時(shí)，連續(xù)飼喂26 d，對(duì)蝦抗病力的提高最為明顯。若飼喂時(shí)間過短或過長(zhǎng)，對(duì)蝦抗病力的提高均不明顯。連續(xù)飼喂比間斷飼喂效果要好，短期間斷給藥，高劑量組的對(duì)蝦抗病力提高，而低劑量組的對(duì)蝦抗病力下降。在治療試驗(yàn)中，當(dāng)復(fù)方中草藥添加濃度為0.2%，連續(xù)飼喂30 d，對(duì)蝦治療效果最為明顯。郭志勛等［19］發(fā)現(xiàn)番石榴葉水提取物對(duì)WSSV有一定的殺滅作用，并指出其殺毒效果與藥物、病毒的相對(duì)濃度及處理時(shí)間相關(guān)，當(dāng)水體中番石榴葉提取物濃度達(dá)到1×10－2mg/mL時(shí)，可以有效殺滅水體中足以使對(duì)蝦死亡的WSSV。陰曉麗等［20］指出番石榴葉中極性較強(qiáng)的乙酸乙酯相、正丁醇相是影響WSSV病性的有效成分。在基礎(chǔ)飼料中添加0.8%的黃芪多糖，可明顯提高對(duì)蝦存活率，對(duì)克氏原螯蝦抗WSSV感染有明顯的效果［21］。

3.2 生物防控技術(shù)

對(duì)蝦白斑綜合癥生物防控技術(shù)是基于病毒流行病學(xué)原理、對(duì)蝦養(yǎng)殖生態(tài)系統(tǒng)群體結(jié)構(gòu)和種群間相互作用及食物鏈原理，研究了對(duì)蝦養(yǎng)殖系統(tǒng)中魚類的攝食習(xí)性和與對(duì)蝦的攝食競(jìng)爭(zhēng)力，通過混養(yǎng)適當(dāng)規(guī)格和數(shù)量的吞食性魚類，在健康對(duì)蝦還未攝食帶病毒對(duì)蝦之前，先攝食清除病死對(duì)蝦，從而達(dá)到切斷對(duì)蝦間病毒經(jīng)口傳播的途徑，切斷WSSV的感染等，建立了養(yǎng)殖對(duì)蝦WSS生物防控技術(shù)體系，減少藥物使用，生產(chǎn)健康安全水產(chǎn)品。

生產(chǎn)上根據(jù)不同地區(qū)的養(yǎng)殖情況，可選擇不同的混養(yǎng)魚類，如草魚、革胡子鯰、羅非魚、卵形鯧鲹、石斑魚、斑點(diǎn)叉尾鮰、美國(guó)紅魚以及軍曹魚聯(lián)合生物防控 (表1)。一般在蝦苗投放10 d或20～30 d，蝦苗達(dá)到2～4 cm后，再混養(yǎng)適當(dāng)規(guī)格和一定數(shù)量的魚類，通過這些魚類在蝦池中攝食殘餌、活動(dòng)弱的患病對(duì)蝦或病死對(duì)蝦以及其他水中生物，可改良對(duì)蝦池生態(tài)，切斷病原體，達(dá)到魚蝦雙豐收。

表1 對(duì)蝦白斑綜合癥混養(yǎng)魚種類、時(shí)間、規(guī)格和數(shù)量

4 展望

隨著對(duì)蝦養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴(kuò)大、集約化程度的提高以及蝦生存環(huán)境的惡化，疾病的危害程度越來越大，給養(yǎng)蝦生產(chǎn)造成了巨大損失。但是，長(zhǎng)期使用抗生素和其他化學(xué)類藥物防治養(yǎng)殖病害，已引發(fā)了一系列環(huán)境問題和社會(huì)問題。盡管各國(guó)學(xué)者自WSSV大規(guī)模暴發(fā)以來，一直在不斷尋找預(yù)防和控制該病的方法，但至今對(duì)WSSV尚無有效的治療方法，因此從切斷可能的病毒來源、投喂免疫增強(qiáng)劑來提高蝦體的抵抗力是預(yù)防WSSV發(fā)生和流行行之有效的方法。為此，利用中草藥這一綠色、環(huán)保藥物和添加劑來提高蝦體自身非特異性免疫能力，并結(jié)合混養(yǎng)吞食魚類攝食弱蝦、病蝦和死蝦的防控技術(shù)，能夠及時(shí)消滅傳播源，有效控制對(duì)蝦白斑綜合癥病毒的蔓延，減少漁藥使用，生產(chǎn)綠色對(duì)蝦產(chǎn)品，促進(jìn)對(duì)蝦產(chǎn)業(yè)可持續(xù)健康發(fā)展。

［1］許雅香，許悻榮，魯興萌.對(duì)蝦白斑綜合癥研究進(jìn)展 ［J］.中國(guó)獸醫(yī)科技，2002，31(1):12－14.

［2］王愛萍，徐今寧.中藥免疫調(diào)節(jié)作用研究進(jìn)展 ［J］.中國(guó)藥業(yè)，2011，20(3):75－77.

［3］呂永輝，王玉堂.魚藥中的中草藥 ［J］.中國(guó)水產(chǎn)，2006(7):91－94.

［4］HAQ MA，VIGNESH R，SRINIVASAN M.Deep insight into white spot syndrome virus vaccines:a review ［J］.Asian Pacific J Tropical Dis，2012，2(1):73－7.

［5］VAN Hulten MC，WITTEVELDT J，PETERS S，et al.The white spot syndrome virus DNA genome sequence ［J］.Virology，2001，286(1):7－22.

［6］YANG F，HEJ，LIN X，et al.Complete genome sequence of the shrimp white spot bacilliform virus ［J］.J Virol，2001，75(23):11811－11820.

［7］TSAI MF，LO CF，VAN HULTEN MC，et al.Transcriptional analysis of the ribonucleotide reductase genes of shrimp white spot syndrome virus［J］.Virology，2000，277(1):92 －99.

［8］孔慶雷，齊志明，孔繁硅，等.619種常用中藥的元素分析(第一報(bào))［J］.中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，1995(2):8－10.

［9］孔慶雷，齊志明，孔繁硅，等.619種常用中藥的元素分析(第二報(bào))［J］.中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，1995，(3):4－7，16.

［10］CITARASU T.Herbal biomedicines:a new opportunity for aquaculture industry ［J］.Aquacult Int International，2009，18(3):403－414.

［11］KUMARAN T， MICHAELBABU M， SELVARAJT， et al.Production of anti WSSV IgY edible antibody using herbal immuno-adjuvant Asparagus racemosus and its immunological influence against WSSV infection in Penaeus monodon［J］.Jaquac Feed Sci Nutr，2010，2(1):1－5.

［12］BALASUBRAMANIAN G，SARATHI M，VENKATESAN C，et al.Studies on the immunomodulatory effect of extract of Cyanodon dactylon in shrimp，Penaeus monodon，and its efficacy to protect the shrimp from white spot syndrome virus(WSSV) ［J］.Fish Shellfish Immunol，2008，25(6):820－828.

［13］YOGEESWARAN A，VELMURUGAN S，PUNITHA SM，et al.Protection of Penaeus monodon against white spot syndrome virus by inactivated vaccine with herbal immunostimulants［J］.Fish Shellfish Immunol，2012，32(6):1058 －1067.

［14］BALASUBRAMANIANG， SARATHIM， KUMARSR， et al.Screening the antiviral activity of Indian medicinal plants against white spot syndrome virus in shrimp ［J］.Aquaculture，2007，263(1－4):15－19.

［15］BALASUBRAMANIAN G，SARATHI M，VENKATESAN C，et al.Oral administration of antiviral plant extract of Cynodon dactylon on a large scale production against white spot syndrome virus(WSSV)in Penaeus monodon ［J］.Aquaculture，2008，279(1－4):2－5.

［16］SUDHEER N，PHILIP R，SINGH I.In vivo screening of mangrove plants for anti WSSV activity in Penaeus monodon，and evaluation of Ceriops tagal as a potential source of antiviral molecules［J］.Aquaculture，2011，311(1－4):36－41.

［17］吳俊文.南美白對(duì)蝦白斑綜合癥防治技術(shù)探討［J］.吉林農(nóng)業(yè)，2011，(3):259.

［18］楊清華，郭志勛，林黑著，等.復(fù)方中草藥添加濃度和投喂策略對(duì)凡納濱對(duì)蝦抗WSSV能力的影響［J］.黑龍江畜牧獸醫(yī)，2011(2):142－148.

［19］郭志勛，李卓佳，管淑玉，等.抗對(duì)蝦白斑綜合癥 (WSSV)中草藥的篩選及番石榴葉提取物對(duì)WSSV致病性的影響［J］.廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，38(21):129－131.

［20］陰曉麗，李卓佳，管淑玉，等.番石榴葉水提取物抗對(duì)蝦白斑綜合征病毒有效成分初探［J］.廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，41(13):87－93.

［21］洪徐鵬，陸宏達(dá)，張慶華，等.黃芪多糖對(duì)克氏原螯蝦抗白斑綜合征病毒 (WSSV)感染的效果研究 ［J］.上海海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，2014，23(3):423－428.

［22］南美白對(duì)蝦白斑綜合癥WSS生物防控技術(shù)［EB/OL］.(2014－06－ 01)http://www．fisherynet．cn/news/detail1599395.html.

［23］何建國(guó).對(duì)蝦養(yǎng)殖技術(shù)——白斑綜合征和肝胰腺壞死征生態(tài)防控技術(shù) ［J］.當(dāng)代水產(chǎn)，2015(6):50－52.

［24］王福新，孟二力，陳曉明，等.套養(yǎng)白鯧魚生物防控南美白對(duì)蝦疾病試驗(yàn)總結(jié)［J］.漁業(yè)致富指南，2009(19):51－52.

［25］王鳳敏，馬云聰.對(duì)蝦養(yǎng)殖套養(yǎng)草魚生態(tài)防病試驗(yàn)報(bào)告［J］.河北漁業(yè)，2015，(7):26－27.

［26］國(guó)家蝦產(chǎn)業(yè)體系.對(duì)蝦肝胰腺壞死癥 (HPNS)防控技術(shù)［J］.海洋與漁業(yè)，2014(5):61－63.