Sysmex XN-9000血液分析儀檢測低值血小板的性能評價(jià)

吳 敏 文 艷 劉愛勝

Sysmex XN-9000血液分析儀檢測低值血小板的性能評價(jià)

吳 敏①文 艷②劉愛勝①

目的：評價(jià)Sysmex XN-9000全自動血液分析儀檢測全血中低值血小板(PLT)的性能。方法：隨機(jī)收集XN-9000檢測全血PLT計(jì)數(shù)＜70×109/L的臨床標(biāo)本48份，分別用XN-9000和顯微鏡計(jì)數(shù)，通過對兩種方法所測得的結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析，評價(jià)XN-9000檢測全血中低值PLT的精密度、相關(guān)性、準(zhǔn)確度、攜帶污染率、線性范圍以及臨床可報(bào)告范圍。結(jié)果：XN-9000檢測全血中低值PLT的批內(nèi)和批間CV%分別為1.13%和1.29%；XN-9000與顯微鏡PLT計(jì)數(shù)結(jié)果具有高度相關(guān)性，回歸方程為Y=0.917X+3.217，相關(guān)系數(shù)r=0.964；XN-9000檢測全血中低值PLT的攜帶污染率為0.12%；檢測PLT的正確度(Bias%)為-1.25%～1.80%；線性范圍為(0～1206)×109/L；臨床可報(bào)告范圍為(0～6030)×109/L。結(jié)論：XN-9000血液分析儀檢測全血中低值PLT具有很高的精密度和準(zhǔn)確度，攜帶污染率極低，結(jié)果具有可靠性，可直接應(yīng)用于臨床。

XN-9000血液分析儀；低值血小板；顯微鏡檢查；性能評價(jià)

DOI∶ 10.3969/J.ISSN.1672-8270.2015.08.016

[First-author’s address] Clinical Laboratory, Shenzhen Longhua New District People's Hospital, Guangdong 518109, China.

Sysmex XN-9000全自動血液分析儀是Sysmex公司最新推出的XN系列產(chǎn)品最高端一款血細(xì)胞分析儀，其在檢測通道和試劑方面有所改變，其中增加了低值血小板(blood platelet，PLT)檢測。PLT計(jì)數(shù)專用檢測通道，主要用于低值血小板的檢測。為了解XN-9000檢測全血中低值PLT的性能，本研究對其性能進(jìn)行評價(jià)。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

Sysmex XN-9000全自動血液分析儀及配套試劑、校準(zhǔn)品及質(zhì)控品均購自日本Sysmex公司；CX21顯微鏡、BX50顯微鏡購自日本Olympus公司；血小板稀釋液購于上海江萊生物科技有限公司；德國Brand改良Neubauer計(jì)數(shù)板購于上海正慧工貿(mào)有限公司。

1.2 標(biāo)本來源

隨機(jī)收集2014年1-8月深圳市龍華新區(qū)人民醫(yī)院門診患者標(biāo)本48份，其中男性標(biāo)本21份，女性標(biāo)本27份；患者年齡5月～82歲，平均26.5歲。其血液常規(guī)檢測PLT計(jì)數(shù)＜70×109/L者視為低值PLT-F(按國際血液學(xué)復(fù)查規(guī)則41條定義)，真空采集靜脈血于EDTA-K2抗凝管內(nèi)充分混勻送檢，確保血標(biāo)本無凝集現(xiàn)象。同一份標(biāo)本上機(jī)和顯微鏡檢測均于1 h內(nèi)完成[1]。

1.3 精密度

參照(美國)全國委員會臨床實(shí)驗(yàn)室(NCCLS)/ CLSI EP5-A文件[2]提供的方法，對XN-9000全自動血液分析儀檢測全血中低值PLT的精密度進(jìn)行評價(jià)。待室內(nèi)高、中和低值質(zhì)控物檢測結(jié)果在控后，用XN-9000對低值PLT室內(nèi)質(zhì)控物連續(xù)檢測20次，求出低值PLT的批內(nèi)精密度；同時(shí)連續(xù)測定低值PLT室內(nèi)質(zhì)控物20 d，求出檢測低值PLT批間精密度。

1.4 相關(guān)性分析

分別用XN-9000(X)參照NCCLS/CLSI EP15-P[3]、EP9-A[4]和顯微鏡(Y)參照《臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第3版[5]檢測120例低值PLT新鮮全血標(biāo)本中的PLT，待室內(nèi)高、中和低值質(zhì)控物檢測結(jié)果在控后，操作均由經(jīng)驗(yàn)豐富的工作人員進(jìn)行檢測，各測3次，取均值，求回歸方程及相關(guān)系數(shù)。

1.5 攜帶污染率

根據(jù)NCCLS/CLSI EP10-A文件[6]提供的方法，選取高、低值PLT新鮮全血標(biāo)本，先連續(xù)測定高值標(biāo)本3次(H1、H2、H3)，后連續(xù)測定低值標(biāo)本3次(L1、L2、L3)。攜帶污染率(%)＝[(L1-L3)／(H3-L3)]×100[7-8]。

1.6 正確度

用XN-9000分析儀連續(xù)檢測2014年衛(wèi)生部第一批室間血液質(zhì)控物3次，取平均值，與衛(wèi)生部回報(bào)的結(jié)果靶值比較，并計(jì)算出相對偏倚(Bias)，其計(jì)算公式1：

以評價(jià)XN-9000分析儀檢測低值PLT結(jié)果的準(zhǔn)確性。

1.7 線性范圍

參考EP6-A2文件選取1份接近儀器檢測上限的高值PLT(1256×109/L)標(biāo)本和接近儀器檢測下限的低值PLT(15×109/L)，按等比例稀釋成100%、50%、25%、6.25%、3.125%和0%?；靹蚝笥肵N-9000分析儀從低濃度到高濃度測定不同稀釋度標(biāo)本，各重復(fù)測定3次，取均值與理論值比較，并進(jìn)行相關(guān)性分析，評價(jià)XN-9000分析儀檢測PLT的線性范圍[9]。

1.8 臨床可報(bào)告范圍

選取PLT濃度高于檢測范圍高限的臨床標(biāo)本2份(1317×109/L和1536×109/L)，用9 g/L生理鹽水對所選取樣本按1∶2，1∶3，1∶4，1∶5及1∶9的5個(gè)比例稀釋，分別為批號201411，201412，201413，201414，201415，混勻后各樣本分別測定3次，取均值計(jì)算稀釋回收率，其計(jì)算公式2：

以重復(fù)性CV值＜5.0%，回收率在90%～l10%以內(nèi)為可接受，確定最大稀釋倍數(shù)，結(jié)合最大稀釋倍數(shù)確定臨床可報(bào)告范圍。

1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x-±s)表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 精密度

XN-9000分析儀檢測新鮮低值PLT全血標(biāo)本批內(nèi)精密度為1.17%，檢測低值PLT室內(nèi)質(zhì)控物批內(nèi)和批間精密度(CV%)分別為1.13%和1.29%，均低于儀器設(shè)定的要求(＜5.00%)。

2.2 相關(guān)性

XN-9000分析儀檢測全血中、低值PLT與顯微鏡檢測結(jié)果具有良好的相關(guān)性(r=0.964)，回歸方程為Y=0.917X+3.217，經(jīng)t檢驗(yàn)，XN-9000分析儀與鏡檢檢測低值PLT結(jié)果之間差異無統(tǒng)計(jì)意義(t=1.07，P＞0.05)。

2.3 攜帶污染率

XN-9000分析儀檢測低值PLT的攜帶污染率為0.12%(＜1.00%)，小于儀器設(shè)定的要求。

2.4 正確度

XN-9000分析儀連續(xù)檢測衛(wèi)生部血液室間質(zhì)評PLT標(biāo)本3次，取平均值與衛(wèi)生部回報(bào)的靶值作比較，并計(jì)算Bias(%)值，Bias值均＜5.0%，見表1。

表1 XN-9000分析儀檢測PLT正確度(×109/L)

2.5 線性范圍

XN-9000分析儀對高、低值PLT標(biāo)本的不同稀釋度樣品分別進(jìn)行測定，各稀釋度的實(shí)測值和理論值之間相關(guān)性良好，相關(guān)系數(shù)r=0.9993，回歸方程為Y=0.9996+2.4573，檢測線性范圍為(0.00～1206)×109/L。

2.6 臨床可報(bào)告范圍

XN-9000分析儀檢測不同稀釋倍數(shù)的標(biāo)本中的PLT，在1∶5時(shí)，CV均在5%以內(nèi)，當(dāng)稀釋倍數(shù)延伸至1∶9時(shí)，回收率超出實(shí)驗(yàn)設(shè)定范圍，所以其最大稀釋倍數(shù)為9倍。因此，本實(shí)驗(yàn)室XN-9000分析儀檢測PLT臨床可報(bào)告范圍為(0～6030)×109/L，見表2。

表2 PLT回收率(%)

3 討論

XN-9000分析儀是Sysmex公司最新推出最高端一款血細(xì)胞分析儀，其在檢測通道和試劑方面有所改變，增加了低值PLT計(jì)數(shù)專用檢測通道，主要用于低值血小板的檢測。

良好的精密度是驗(yàn)證其他各項(xiàng)指標(biāo)的基礎(chǔ)，其大小應(yīng)小于儀器規(guī)定的要求才能保證臨床標(biāo)本檢測的重現(xiàn)性[10]。本研究結(jié)果顯示，XN-9000分析儀檢測低值PLT批內(nèi)和批間精密度分別為1.13%和1.29%，均低于儀器設(shè)定的要求(5%)，并且XN-9000分析儀檢測低值PLT與顯微鏡人工PLT計(jì)數(shù)具有很高的相關(guān)性(r=0.981)，兩者結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其原因?yàn)镾ysmex XN-9000全自動血液分析儀采用液壓聚焦法(DC檢測法)和半導(dǎo)體激光器的流式細(xì)胞計(jì)數(shù)法對細(xì)胞計(jì)數(shù)，可以防止區(qū)域的血細(xì)胞回流，并可防止產(chǎn)生假性血小板脈沖，且計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)量是其他系列的3～5倍之多，改善了血細(xì)胞計(jì)數(shù)的精確度和重現(xiàn)性。

攜帶污染率是判斷高值標(biāo)本是否影響低值標(biāo)本檢測結(jié)果的指標(biāo)，其大小應(yīng)符合儀器制造商的要求。本研究結(jié)果顯示，XN-9000分析儀檢測PLT標(biāo)本攜帶污染率極低(0.12%)，這主要與XN-9000分析儀血細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)由于血細(xì)胞通過在一條直線上的小孔，可減少對貫流池的污染，降低細(xì)胞計(jì)數(shù)標(biāo)本之間的攜帶污染率等有關(guān)。

XN-9000分析儀檢測衛(wèi)生部室間低值血小板質(zhì)控物(PLT-F)的Bias%值為-1.25～1.80，均＜5.0%，XN-9000分析儀檢測低值PLT的正確度極高，這主要與其采用最新的熒光染色技術(shù)(PLT-O)。熒光染色技術(shù)(PLT-O)使用專用的熒光染液，該染液選擇性染色血小板，網(wǎng)織紅細(xì)胞難以染色，且不易受到紅細(xì)胞碎片的影響及儀器增加了低值WBC及低值PLT專用檢測通道，進(jìn)一步確保了低值PLT檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性等因素有關(guān)。

線性范圍的驗(yàn)證是確定臨床可報(bào)告范圍的基礎(chǔ)，當(dāng)儀器檢測超出線性范圍的結(jié)果時(shí)，應(yīng)視為不準(zhǔn)確的測定值[11-15]。本研究結(jié)果顯示，XN-9000分析儀檢測血小板的線性范圍廣(0.00～1206)×109/L及臨床可報(bào)告范圍寬(0～6030)×109/L，有利于高值PLT檢出的準(zhǔn)確性，這主要與PLT-F通道中的PLT計(jì)數(shù)是XE系列產(chǎn)品的3～5倍之多，極大地提高了PLT檢測的精密度和準(zhǔn)確性等因素有關(guān)。

4 結(jié)語

PLT-F通道在全血模式、低值白細(xì)胞模式及稀釋模式均可檢測，標(biāo)本檢測前只要按照國際血液學(xué)復(fù)檢規(guī)則41條及XN-9000分析儀本身要求，復(fù)檢規(guī)則中設(shè)定好只要違反PLT復(fù)檢規(guī)則就進(jìn)行PLT-F通道檢測PLT，其操作非常簡單，臨床工作中只需根據(jù)臨床需要修改復(fù)檢規(guī)則便可與血常規(guī)一同檢查，并得出準(zhǔn)確可靠的PLT結(jié)果，而且XN-9000分析儀檢測PLT的線性范圍和臨床可報(bào)告范圍很廣，適用各種濃度標(biāo)本的檢測。

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Blood analyzer Sysmex XN-9000 testing in low whole blood platelet performance evaluation

WU Min, WEN Yan, LIU Ai-sheng
China Medical Equipment,2015,12(8)∶51-53.

Objective∶ To evaluate the performance of Sysmex XN-9000 automatic blood analyzer (hereinafter referred to as XN-9000) in whole blood with the low platelet (PLT). Methods∶ A total of 48 whole blood samples with platelet count less than 70×109/L were randomly collected from XN-9000 correlation analysis to evaluate XN-9000 the accuracy and precision of detection in low whole blood PLT and carry pollution rate, use XN-9000 and microscope count, respectively. Results∶ XN-9000 detection in low whole blood PLT between batch and batch of CV% 1.13% and 1.29%, respectively; XN-9000 with microscope PLT count results have high correlation, The regression equation for Y=0.917X+3.217,correlation coefficient r=0.964; XN-9000 detection in low whole blood PLT carry pollution at a rate of 0.12%. Detection accuracy of PLT Bias, %(-1.25%～1.8%); Linear range(0～1206)×109/L; Clinical reportable range (0～6030)×109/L. Conclusion∶ The detection of XN-9000 blood analyzer is in low whole blood PLT has high precision and accuracy, carry pollution rate is extremely low, the result has the reliability, can be directly applied to clinical.

XN-9000 blood analyzer; Low platelet; Microscopic examination; Performance evaluation

1672-8270(2015)08-0051-03

R446.111

A

吳敏,女,(1981- ),本科學(xué)歷,主管技師。深圳市龍華新區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，從事臨床檢驗(yàn)與免疫工作。

2014-12-25

①深圳市龍華新區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 廣東 深圳 518109

②深圳市光明新區(qū)人民醫(yī)院ICU 廣東 深圳 518106