車前草中幾種活性物質(zhì)含量的測定

趙春 （長江大學(xué)化學(xué)與環(huán)境工程學(xué)院，湖北 荊州434023）

車前草 （Plantago asiatica L.）又名車輪菜，為車前科 （Plantaginaceae）多年生草本植物，含有黃酮類、胡蘿卜苷、桃葉珊瑚苷、車前苷、多酚、生物堿、三萜、甾醇類化合物等化合物［1～6］。車前草在我國分布廣泛，具有悠久的藥用歷史，以種子和全草入藥，中醫(yī)認(rèn)為其具有抗菌、殺蟲、清熱利尿、祛痰、涼血、解毒的功效，主治水腫尿少、熱淋澀痛、暑濕瀉痢、痰熱咳嗽和痛腫瘡毒等［7～10］。本研究通過測定車前草中類黃酮、草酸、單寧和亞硝酸鹽的含量，旨在為車前草的綜合開發(fā)利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料、儀器與試劑

車前草采自長江大學(xué)東校區(qū)校園內(nèi)，洗去泥土，風(fēng)干，粉碎，過80目篩，密封保存?zhèn)溆谩?/p>

試劑：蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品、無水乙醇、硝酸鋁、氫氧化鈉、草酸、重鉻酸鉀、次甲基藍、碳酸鈉、硫酸、單寧、三氯化鐵、硫酸鋅、N－1－萘基乙二胺鹽酸鹽、對氨基苯磺酸、亞硝酸鈉、氨水等，均為市售分析純試劑。

主要儀器：722型分光光度計為上海精密科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品；植物粉碎機為上海精密科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品；EB－330H分析天平為上海精科電子天平廠產(chǎn)品；數(shù)顯恒溫水浴鍋、電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱為常州國華電器有限公司產(chǎn)品。

1.2 活性物質(zhì)含量的測定方法

類黃酮的測定采用超聲波乙醇浸提法［11］，草酸的測定采用次甲基藍－重鉻酸鉀法［12］，單寧的測定采用比色法［13］，亞硝酸鹽含量測定采用分光光度法［14］。每種處理重復(fù)4次。

1.3 加樣回收率試驗

準(zhǔn)確稱取一定量樣品2份，一份不加入標(biāo)樣，另一份加入等量標(biāo)準(zhǔn)品，按1.2所述方法測定類黃酮、草酸、單寧和亞硝酸鹽含量，計算回收率，重復(fù)4次。

2 結(jié)果與分析

2.1 車前草不同部位的類黃酮含量

以蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)、光密度為縱坐標(biāo)進行線性回歸，得到光密度 （y）與濃度 （x）的線性方程為y＝－0.0149＋0.0114 x，相關(guān)系數(shù)R＝0.9998?？梢娞J丁標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度與光密度之間存在極顯著的線性關(guān)系。

車前草中類黃酮的含量測定結(jié)果見圖1。從圖1可知，根中類黃酮含量最高，葉中類黃酮含量次之，花中類黃酮含量最低，三者間含量差異顯著。

2.2 車前草不同部位的草酸含量

草酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的光密度 （y）與濃度 （x）的線性方程為y＝0.0373＋0.0101x，相關(guān)系數(shù)R＝0.9998，車前草各部分草酸含量測定結(jié)果見圖2。可見，車前草葉的草酸含量最高，而花的草酸含量最低。

2.3 車前草不同部位的單寧含量

以單寧酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)、光密度為縱坐標(biāo)進行線性回歸，得到光密度 （y）與單寧酸標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度 （x）的線性方程為y＝0.0443＋0.005 x，相關(guān)系數(shù)R＝0.9922。可見，濃度與光密度之間存在極顯著的線性關(guān)系。

車前草各部位單寧的含量測定結(jié)果見圖3。測定結(jié)果說明，車前草葉、花中單寧含量較高，二者間無明顯差異，根中單寧含量最小。

圖1 車前草不同部位的類黃酮含量

圖2 車前草不同部位的草酸含量

2.4 車前草不同部位的亞硝酸鹽含量

以光密度為縱坐標(biāo)，亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，光密度 （y）與亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度 （x）的線性方程為y＝－0.0029＋0.7034x，相關(guān)系數(shù)R＝0.9997。

車前草根、葉、花中亞硝酸鹽含量見圖4。由圖4可知，車前草葉中亞硝酸鹽含量最高，根中亞硝酸鹽含量最低。

圖3 車前草不同部位的單寧含量

圖4 車前草不同部位的亞硝酸鹽含量

2.5 回收率

類黃酮、草酸、單寧和亞硝酸鹽回收率測定結(jié)果見表1。由表1可知，各活性物質(zhì)測定回收率均達到94%以上，說明測定方法是可靠的。

表1 回收率測定結(jié)果

3 討論與小結(jié)

類黃酮、草酸、單寧和亞硝酸鹽都是植物次生代謝產(chǎn)物，植物中的類黃酮和單寧具有較強的生理活性，在醫(yī)藥和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中有著廣泛用途。類黃酮具有降血壓、降血脂的作用，而單寧有利于心臟血管疾病的預(yù)防；草酸攝入過多會影響人體對鈣的吸收，引起低血鈣，造成骨質(zhì)疏松癥；亞硝酸鹽具有很強的毒性，還會生成有強致癌性的亞硝胺。

在農(nóng)業(yè)有害生物的防治中，一般認(rèn)為黃酮類化合物對昆蟲具有防御作用，其防御機制或在于影響昆蟲的行為和代謝，使之發(fā)生忌避和拒食；或是破壞昆蟲正常的代謝過程，引起中毒甚至死亡。單寧一般被認(rèn)為是有效的化學(xué)防御物質(zhì)，對昆蟲的不利作用主要是干擾昆蟲對食物的利用，尤其是干擾腸道的消化。單寧分子能與蛋白質(zhì)分子結(jié)合形成穩(wěn)定的交叉鏈，能抑制酶的活性，使昆蟲不能利用鞣化的蛋白質(zhì)，單寧還能與淀粉形成絡(luò)合物而影響昆蟲對淀粉的消化。植物中草酸和亞硝酸鹽含量也會影響昆蟲的取食行為。

本研究測定了車前草根、葉、花中類黃酮、草酸、單寧和亞硝酸鹽的含量，可為車前草的綜合開發(fā)利用提供參考。

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