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    兔大腸桿菌耐藥性觀察

    2015-11-29 00:58:38陳升平四川省自貢市大安區(qū)三多寨鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站643000
    中國畜禽種業(yè) 2015年11期
    關(guān)鍵詞:兔場鳥氨酸肉湯

    陳升平(四川省自貢市大安區(qū)三多寨鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站 643000)

    兔大腸桿菌耐藥性觀察

    陳升平(四川省自貢市大安區(qū)三多寨鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站 643000)

    兔大腸桿菌病又叫黏液性腸炎,是由致病性埃希氏大腸桿菌及其毒素引起的一種暴發(fā)性、死亡率很高的仔幼兔腸道傳染病。大腸桿菌是引起斷奶前后家兔腹瀉的主要病原之一,主要侵害20~70日齡的仔兔和幼兔,成年兔很少發(fā)病。其致病機(jī)理是大腸桿菌在腸道內(nèi)容物中大量增殖,并附著在腸黏膜上,導(dǎo)致腸壁滲透性增強(qiáng),患兔腹瀉脫水。當(dāng)大腸桿菌侵入血液時(shí),即可分布于全身各個(gè)器官,出現(xiàn)敗血癥。近年來,隨著抗菌素的廣泛應(yīng)用,耐藥性大腸桿菌菌株日益增多,給預(yù)防和治療大腸桿菌病帶來了諸多困難。目前,在防治大腸桿菌病上主要采取的措施是應(yīng)用大腸桿菌滅活菌苗免疫,通過藥敏試驗(yàn)篩選大腸桿菌敏感的抗菌素進(jìn)行治療。因各個(gè)兔場大腸桿菌的血清型都不一致,用藥情況也千差萬別,筆者僅大安區(qū)的6個(gè)兔場(養(yǎng)殖戶)進(jìn)行了大腸桿菌的耐藥性調(diào)查,以期對(duì)這些兔場更好地控制大腸桿菌病起到一定的指導(dǎo)作用。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 病料來源

    病料采大安區(qū)的6個(gè)兔(養(yǎng)殖戶)場疑似大腸桿菌病的病死兔,無菌采集腸道膠凍樣糞便。

    1.1.2 培養(yǎng)基

    營養(yǎng)瓊脂;麥康凱;普通肉湯。

    1.1.3 微量生化發(fā)酵管

    硫化氫、苯丙氨酸、尿素、側(cè)金盞花醇、山梨醇、丙二酸鹽、賴氨酸、鳥氨酸、靛基質(zhì)(蛋白胨水)、V-P、枸櫞酸鹽、葡萄糖(產(chǎn)氣)、蔗糖、乳糖、甘露醇。

    1.1.4 藥敏紙片

    丁胺卡那霉素、先鋒Ⅴ、先鋒Ⅵ、氟苯尼考、四環(huán)素、卡那霉素均為30ug/片,氨芐青霉素、慶大霉素均為10ug/片,復(fù)方磺胺為300ug/片,阿奇霉素為15ug/片。

    1.2 方法

    1.2.1 細(xì)菌分離培養(yǎng)

    無菌采集死亡兔腸道膠凍樣糞便,接種營養(yǎng)肉湯,37℃培養(yǎng)24h;將培養(yǎng)物接種麥康凱培養(yǎng)基,37℃培養(yǎng)24h;選擇表面光滑、中等大小的單個(gè)紅色菌落,接種營養(yǎng)肉湯,37℃培養(yǎng)24h,備用。

    1.2.2 染色鏡檢

    將純化的肉湯培養(yǎng)物涂片,革蘭氏染色,鏡檢。

    1.2.3 生化試驗(yàn)

    按文獻(xiàn)的方法進(jìn)行,將對(duì)小白鼠有致病性的菌株肉湯純培養(yǎng)物分別接種于微量生化管,37℃培養(yǎng)24h,觀察記錄結(jié)果。

    1.2.4 藥敏試驗(yàn)

    將分離到的致病菌株肉湯純培養(yǎng)物分別接種營養(yǎng)瓊脂平板,貼上所選擇的藥敏紙片,37℃培養(yǎng)24h,測量抑菌圈直徑。

    2 結(jié)果

    2.1 分離培養(yǎng)

    病料編號(hào)為:DC1、 DC2、 DC3、 DC4、 DC5、 DC6。在肉湯培養(yǎng)基中培養(yǎng)24h后,肉湯呈均勻渾濁;在麥康凱瓊脂平板上形成紅色、中等大小、表面光滑、濕潤的單個(gè)菌落。

    2.2 染色鏡檢

    分離菌均為革蘭氏陰性、兩端鈍圓的短小桿菌,呈單個(gè)或多個(gè)、散在排列。

    2.3 生化試驗(yàn)

    結(jié)果見表1。從表1可以看出,6株菌均能發(fā)酵葡萄糖、乳糖、甘露醇并產(chǎn)酸產(chǎn)氣,不能產(chǎn)生硫化氫,不分解尿素和苯丙氨酸,能利用賴氨酸;VP和枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)均為陰性。DC5菌株能利用側(cè)金盞花醇,其它菌株不能;DC2和DC5菌株不能利用山梨醇,其它菌株都能;DC1菌株丙二酸鹽試驗(yàn)為陽性,其它菌株試驗(yàn)為陰性;DC4和DC5菌株均能利用鳥氨酸,靛基質(zhì)試驗(yàn)為陰性,其它菌株不能利用鳥氨酸,靛基質(zhì)試驗(yàn)為陽性;DC1和DC6菌株能分解蔗糖,其它菌株不能。

    表1 生化試驗(yàn)結(jié)果

    2.4 藥敏試驗(yàn)

    由表2可見,多數(shù)菌株對(duì)丁胺卡那霉素、阿奇霉素敏感,對(duì)先鋒Ⅳ、先鋒Ⅴ、慶大霉素、氟苯尼考部分敏感,對(duì)氨芐青霉素、四環(huán)素、復(fù)方磺胺、卡那霉素低敏或不敏感。

    表2 分離菌株藥敏試驗(yàn)結(jié)果(抑菌圈直徑mm)

    3 討論與分析

    (1)本試驗(yàn)確診6個(gè)兔場的發(fā)病兔均為致病性大腸桿菌引起。分離的6株菌均能發(fā)酵葡萄糖、乳糖、甘露醇并產(chǎn)酸產(chǎn)氣,不能產(chǎn)生硫化氫,不分解尿素和苯丙氨酸,能利用賴氨酸,VP和枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)均為陰性,符合大腸桿菌的特征。但這些菌株對(duì)蔗糖、側(cè)金盞花醇、山梨醇、丙二酸鹽、鳥氨酸和靛基質(zhì)試驗(yàn)結(jié)果不完全一致,這可能是不同血清型菌株的生化特性不完全相同。由于我們沒有預(yù)購大腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)血清,因此本試驗(yàn)尚未對(duì)分離的6株大腸桿菌進(jìn)行血清型鑒定,將在后續(xù)試驗(yàn)中進(jìn)行。

    (2)從藥敏試驗(yàn)結(jié)果可以看出,分離菌株均對(duì)丁胺卡那霉素、阿奇霉素高度敏感,對(duì)氨芐青霉素、先鋒Ⅳ、先鋒Ⅴ、氟苯尼考、慶大霉素、復(fù)方磺胺、四環(huán)素、卡那霉素都有不同程度的耐藥性。可見,不同兔場的分離菌株對(duì)各種藥物的敏感性不同,耐藥性極強(qiáng),極難治療。我們建議對(duì)兔大腸桿菌病選用藥物治療時(shí),最好先進(jìn)行藥敏試驗(yàn),選取敏感的藥物及時(shí)治療,快速控制病情,減少損失。

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