胃癌組織中Akt2、HER2蛋白表達(dá)與臨床病理學(xué)特征的關(guān)系

阿娜爾古麗·阿布都熱合曼 迪麗努爾·阿西木

胃癌是較為多見的惡性腫瘤，在基因領(lǐng)域中尋找新的治療靶點(diǎn)及預(yù)后指標(biāo)是當(dāng)前研究的重點(diǎn)內(nèi)容。人表皮生長(zhǎng)因子受體2(human epidermal growth factor receptor，HER2)作為在細(xì)胞中信號(hào)傳導(dǎo)通路的一個(gè)重要啟動(dòng)因子，它對(duì)癌細(xì)胞增殖、分化以及凋亡的過程有著十分重要的作用［1］;而絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶2(serine-threonine kinase，Akt2)的基因表達(dá)已被證實(shí)與腫瘤的生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移有著密切關(guān)聯(lián)［2］。因此，Akt2、HER2逐漸成為腫瘤靶向治療的研究熱點(diǎn)?，F(xiàn)為探究胃癌患者胃組織Akt2、HER2蛋白表達(dá)情況及HER2蛋白與胃癌臨床病理學(xué)特征的關(guān)系，本文對(duì)其進(jìn)行臨床研究并報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

將2013年5月-2014年11月在我院收治的90例原發(fā)性胃癌患者作為研究對(duì)象，同時(shí)選取同期在我院行胃鏡檢查的90例健康體檢者作為對(duì)照。所有胃癌患者均經(jīng)過病理檢查確診，其中男性57例，女性33例;年齡36～78歲，平均(54.3±12.7)歲。90例健康體檢者的病理活檢均顯示為正常胃粘膜，其中男性56例，女性34例;年齡35～69歲，平均(51.2 ±11.7)歲。所有患者在參與研究前均得到本人或其家屬的知情同意，并報(bào)請(qǐng)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

胃癌組與健康組的胃黏膜組織均用10%甲酸固定，常規(guī)行石蠟包埋，再在含有多聚賴氨酸的溶液中處理以后制備成厚度為4 mm的連續(xù)切片。兩組切片均采用免疫組織化學(xué)SP法來檢測(cè)其胃粘膜組織中的Akt2、HER2蛋白表達(dá)情況，同時(shí)也在顯微鏡下觀察細(xì)胞的染色狀況及形態(tài)特點(diǎn)。陽(yáng)性對(duì)照為經(jīng)過特異性染色的乳腺癌切片，陰性對(duì)照則為磷酸鹽緩沖液。比較兩組Akt2、HER2蛋白的陽(yáng)性表達(dá)情況，并分析胃癌患者的分化程度、浸潤(rùn)深度、腫瘤直徑、腫瘤位置、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期等病理學(xué)指標(biāo)與HER2表達(dá)的關(guān)系。

1.3 評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)

細(xì)胞在染色后，Akt2的陽(yáng)性染色表現(xiàn)于細(xì)胞質(zhì)，釆用半定量法對(duì)染色結(jié)果進(jìn)行判定［3］，根據(jù)染色的程度以及鏡下陽(yáng)性細(xì)胞占據(jù)的比例來評(píng)定，具體為:①染色強(qiáng)度評(píng)分:不著色為0分，淡棕黃色為1分，棕黃色為2分，深棕紅色為3分。②陽(yáng)性細(xì)胞所占比例評(píng)分:染色陽(yáng)性細(xì)胞占腫瘤細(xì)胞的比例＜5%為0分，占5%～25%為1分，26%～50%為2分，51%～75%為3分，＞75%為4分。將上述兩個(gè)指標(biāo)評(píng)分相加，總分≤2分表示陰性，總分＞2分則為陽(yáng)性。

HER2的陽(yáng)性染色則表現(xiàn)于細(xì)胞膜上，其結(jié)果評(píng)定則是用修訂后的Hercep Test評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)來進(jìn)行［4］，具體為:①“-”表示腫瘤細(xì)胞無染色或僅有＜10%的細(xì)胞膜染色;②“+”表示＞10%腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞膜存在輕微染色;③“++”表示＞10%的腫瘤細(xì)胞有著弱的基底外側(cè)膜或者整個(gè)細(xì)胞膜的染色;④“+++”表示＞10%的腫瘤細(xì)胞存在中度到高度的基底外側(cè)膜或者整個(gè)細(xì)胞膜染色?！?”和“+”表示陰性，“++”和“+++”表示陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 17.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料釆用卡方檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者的Akt2與HER2表達(dá)情況比較

Akt2蛋白表達(dá)，胃癌組共檢測(cè)出51例為陽(yáng)性(56.67%)，明顯高于健康組 10例(11.11%)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。HER2表達(dá)胃癌組中有19例陽(yáng)性(21.11%)，而健康組僅 6例(6.67%)，組間比較差異顯著(P＜0.05)，見表1。

表1 兩組患者Akt2與HER2的表達(dá)情況比較(例，%)

2.2 胃癌組織中Akt2與HER2表達(dá)的相關(guān)性

在所有的胃癌患者中，兩個(gè)指標(biāo)Akt2、HER2均為陽(yáng)性表達(dá)的患者有17例，均為陰性表達(dá)的患者有37例，僅Akt2表達(dá)陽(yáng)性而HER2陰性的患者有34例，僅HER2表達(dá)陽(yáng)性而Akt2陰性的患者有2例。Spearman相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，在胃癌組織中HER2與Akt2這兩個(gè)指標(biāo)的表達(dá)具有相關(guān)性(γ =0.342，P=0.001＜0.05)。

表2 HER2與Akt2表達(dá)的相關(guān)性分析(例，%)

2.3 HER2表達(dá)與胃癌患者臨床病理學(xué)特點(diǎn)的關(guān)系

HER2表達(dá)與胃癌分化程度、浸潤(rùn)深度、腫瘤位置、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期等臨床病理指標(biāo)有顯著相關(guān)性(P＜0.05);而腫瘤直徑則與HER2表達(dá)無相關(guān)性(P ＞0.05)。

3 討論

目前，我國(guó)胃癌的發(fā)病率雖然較高，但其早期診斷率仍較低，絕大部分胃癌患者在行首次確診時(shí)就已經(jīng)處于Ⅲ、Ⅳ期，此時(shí)多已錯(cuò)過最佳的治療時(shí)機(jī)。再加上胃癌根治術(shù)的療效存在一定的局限性，化療已幾乎成為治療晚期胃癌的主要手段［5］。但是在胃癌化療過程中常出現(xiàn)耐藥現(xiàn)象，致使晚期胃癌的中位生存期僅為8～10個(gè)月。分子靶向治療已成為臨床腫瘤研究的治療新方向和新領(lǐng)域，因此探求有效生物學(xué)標(biāo)記以及新分子靶點(diǎn)也逐漸成為胃癌臨床研究的熱點(diǎn)［6］。

表3 HER2表達(dá)與胃癌患者臨床病理學(xué)特點(diǎn)的關(guān)系(例，%)

3.1 胃癌與Akt2、HER2的表達(dá)

我們?cè)谘芯恐邪l(fā)現(xiàn)，胃癌組的Akt2及HER2的陽(yáng)性表達(dá)率分別為56.67%、21.11%，明顯高于健康組且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。腫瘤的形成以及發(fā)展是在多種基因、環(huán)境因素等共同作用下產(chǎn)生的多階段病理過程。多項(xiàng)研究表明Akt2的表達(dá)與腫瘤的形成有著密切的聯(lián)系。據(jù)Vivanco等的研究發(fā)現(xiàn)，Akt2蛋白在結(jié)腸癌中不僅參與腫瘤的早期形成，還與其細(xì)胞分化程度、Dukes分期以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等方面密切相關(guān)［7］。此外，Akt2蛋白在胰腺癌、肺癌等中也均能檢測(cè)到陽(yáng)性表達(dá)［8-9］。

作為表皮生長(zhǎng)因子受體的家族成員，HER2基因是調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)分化的重要因子。HER2存在于人類第17對(duì)染色體長(zhǎng)臂的第21位點(diǎn)(17q21)，由它轉(zhuǎn)錄生成的mRNA長(zhǎng)約為4.8 kb，能編碼產(chǎn)生由1255個(gè)氨基酸結(jié)合而成、長(zhǎng)185 KD的跨膜糖蛋白，被命名為P185HER2，常簡(jiǎn)稱為p185蛋白、HER2受體或HER2蛋白［10］。HER2蛋白一般僅在胎兒期表達(dá)，胎兒在分娩后通常處于休眠狀態(tài);直到成年之后，才能在一部分組織中檢測(cè)出少量的陽(yáng)性表達(dá)。而患有惡性腫瘤時(shí)，如胰腺癌、卵巢癌、肺癌、乳腺癌、宮頸癌以及胃癌等腫瘤組織中，HER2蛋白常可被檢測(cè)到大量表達(dá)［11-12］。由此表明，Akt2及HER2在胃癌組織中的表達(dá)明顯增高，能作為胃癌的檢測(cè)指標(biāo)。

3.2 胃癌中HER2與Akt2的聯(lián)系

在研究HER2與Akt2表達(dá)的相關(guān)性分析中發(fā)現(xiàn)，HER2的表達(dá)與Akt2存在著一定的關(guān)聯(lián)。研究表明，HER2蛋白能通過兩條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路起作用:第一條是Ras-Raf-MAPK途徑，能參與調(diào)控有絲分裂;另一條則為PI3K/Akt2通路［13］，它能加快腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、侵襲與轉(zhuǎn)移速度，同時(shí)還抑制瘤細(xì)胞的調(diào)亡。這兩條通路中，HER2主要通過第二條通路的激活來發(fā)揮其促進(jìn)腫瘤以及抵抗化療藥物的作用。HER2與Akt2的分子學(xué)機(jī)制［14］主要為:①PI3K-Akt2通路在激活后，能上調(diào)MMP-2、MMP-9的蛋白表達(dá)，進(jìn)而加快細(xì)胞外基質(zhì)的降解、突破基底膜，增加癌細(xì)胞的侵襲浸潤(rùn)能力。②Akt2在激活后能夠使HER2的磷酸化增加，并激活下游底物GSK3β，使得β-CAT的降解受拮抗后濃度增高，進(jìn)而使E-鈣黏素的表達(dá)下調(diào)。③HER2在激活后，能與促進(jìn)血管生成的相關(guān)位點(diǎn)結(jié)合，由VEGF/PI3K/AKT/NO/ICAM-1通路使得腫瘤血管的形成與生長(zhǎng)增加。因此，在胃癌腫瘤的形成、發(fā)展過程中，HER2能與Akt2協(xié)同作用來促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)。

3.3 胃癌HER2的表達(dá)與病理學(xué)特征分析

在臨床病例資料與HER的表達(dá)情況進(jìn)行比較時(shí)發(fā)現(xiàn)，HER陽(yáng)性表達(dá)的胃癌患者其分化程度、浸潤(rùn)深度、腫瘤位置、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期明顯高于HER陰性表達(dá)的胃癌患者(P＜0.05);而腫瘤直徑則在HER不同表達(dá)情況的患者間差異不顯著(P＞0.05)。中高分化的胃癌中HER2蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率較高，說明了胃癌的細(xì)胞類型中HER2基因擴(kuò)增和表達(dá)有著一定的選擇性。胃癌的浸潤(rùn)深度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，分別提示了胃癌細(xì)胞的局部浸潤(rùn)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移能力。結(jié)合TNM分期指標(biāo)，Ⅲ期、Ⅳ期胃癌患者的腫瘤細(xì)胞耐藥性較強(qiáng)，生存期較短，臨床預(yù)后較差;這與Ⅲ、Ⅳ期等中晚期胃癌患者的區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)較深有關(guān)［15］。而HER2在此時(shí)的表達(dá)程度增加，這也說明HER2蛋白的表達(dá)能在一定層程度上反映患者的生存預(yù)后。國(guó)內(nèi)外研究也顯示，胃癌HER2蛋白過表達(dá)的患者，其生存期較HER2蛋白陰性表達(dá)的胃癌患者短［16-17］。胃部腫瘤的直徑大小常與腫瘤生長(zhǎng)位置和條件有著密切關(guān)系，在胃體等位置時(shí)，因生長(zhǎng)空間較大，腫瘤直徑較大;而對(duì)于胃底等部位時(shí)，因空間狹窄而致腫瘤直徑較小。此外，直徑較大的腫瘤生長(zhǎng)速度較緩慢，故而良性程度較大;而惡性種瘤的生長(zhǎng)速度較快，但其體積可大可小。

綜上所述，胃癌組織中Akt2、HER2蛋白的表達(dá)增高，且HER2的表達(dá)與病理學(xué)表現(xiàn)有關(guān)聯(lián)，能在一定程度上反映胃癌患者的預(yù)后情況。

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