化學(xué)發(fā)光免疫測定在梅毒螺旋體抗體檢測中的臨床應(yīng)用

范紅松眉山市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川眉山 620010

化學(xué)發(fā)光免疫測定在梅毒螺旋體抗體檢測中的臨床應(yīng)用

范紅松
眉山市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川眉山 620010

目的 探討化學(xué)發(fā)光免疫法（CLIA法）應(yīng)用于檢測梅毒螺旋體抗體（TPA）的臨床價(jià)值。方法 隨機(jī)選取2014年12月—2015年1月間的100例健康人為對照，將300例TPA陽性患者作為研究對象，分別進(jìn)行TPPA和TRUST檢測和CLIA法檢測，以CV、靈敏度等為指標(biāo)，評價(jià)CLIA法的臨床應(yīng)用價(jià)值。 結(jié)果 ①組內(nèi)、組間在不同TPA濃度下的CV均＜10%。且CLIA分析儀的靈敏度（1/16）高于TPPA（1/80），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)義（P＜0.05）。②CLIA、TPPA檢測的陽性率分別為87.7%（264/300）、86.3%（250/300），差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），但均高于TRUST法42.3%（127/300）（P＜0.05）。其中陰性組患者血清檢測的陰性率均為100%。 結(jié)論 CLIA法檢測TPA的結(jié)果準(zhǔn)確率高，CLIA分析儀靈敏度高、不易受諸多外在干擾和限制、攜帶污染率低，值得推廣應(yīng)用。

化學(xué)發(fā)光免疫測定法；梅毒螺旋體抗體；臨床應(yīng)用

梅毒螺旋體（TP）是梅毒病的常見致病因素之一，其臨床表現(xiàn)復(fù)雜、具有傳播性和全身性，很容易誤診、漏診，嚴(yán)重者可致全身的病變、損害等[1]。據(jù)相關(guān)的調(diào)查結(jié)果顯示[2]，從2006年至今，梅毒發(fā)病率呈現(xiàn)明顯的上升趨勢，檢測患者血清中的TPA是其目前診斷方法的主要根據(jù)之一。因此，怎樣才能對患者進(jìn)行有效的、準(zhǔn)確的、迅速的檢測有著十分重要的臨床意義，CLIA的研究能夠?yàn)樵\斷梅毒病提供可靠的檢測依據(jù)，以保證盡早治療，具有靈敏度高、特異性強(qiáng)的特點(diǎn)。該研究選取2014年12月—2015年1月間該院收治的400例患者為研究對象，對比分析了使用CLIA檢測和其他方法檢測的結(jié)果，得到較滿意結(jié)果，現(xiàn)將其總結(jié)果匯報(bào)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該研究中研究對象共400例：陽性患者共300例，均是于2014 年12月—2015年1月來該院就診的，且符合梅毒診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]，另外陰性對照患者共100例。其中，年齡8～20歲37例，21～30歲96例，31～40歲245例，41～50歲22例，平均年齡（38±1.8）歲。陽性患者組男、女患者分別有219例、181例。陰性患者組男、女患者分別有67例、33例。

入選標(biāo)準(zhǔn)：年齡在8～50歲之間；自愿作為試驗(yàn)對象者。臨床診斷明確者。

[作者簡介]范紅松（1970.9-），男，四川眉山人，大專，檢驗(yàn)技師，研究方向：醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)免疫。

排除標(biāo)準(zhǔn)：需要維持服用精神類安定藥、鎮(zhèn)靜藥的患者以及心臟、肝、腎功能有損害者；患有其他重癥疾病者。

1.2 方法

①采集本試驗(yàn)中所有研究對象的血清（空腹?fàn)顟B(tài)下）、留樣。②將留取的血清標(biāo)本置于備好的真空促凝管內(nèi)，分離血清，低溫冷藏（4～8℃）。③檢測：用CLIA（試劑盒，I2000型，雅培，美國）、TPPA（試劑盒，日本）、TRUST（試劑盒，中國）方法參照其各自說明書進(jìn)行檢測。④重復(fù)性實(shí)驗(yàn)：取S/CO（吸光度/臨界值）24（高）、3（中）、0.05（低）的三個(gè)水平，對組內(nèi)及組間分別在連續(xù)的2 h和20d內(nèi)進(jìn)行TPA標(biāo)準(zhǔn)品的CLIA檢測5次、2次。計(jì)算其靈敏度。⑤檢測攜帶污染率：參照國際標(biāo)準(zhǔn)[4]，使用富士G1200CLIA分析儀對TPA的高、低值標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行檢測，各連續(xù)、平行三次得h1、h2、h3、l1、l2、l3值。⑥干擾試驗(yàn)：將干擾物（膽紅素、三酰甘油、血紅蛋白）加入到不同TPA濃度的患者血清中，以富士G1200CLIA分析儀進(jìn)行檢測，記錄、計(jì)算。⑦在CLIA檢測后，對陽性組、陰性組患者分別進(jìn)行TPPA、TRUST檢測，對比3種方法的結(jié)果，進(jìn)行分析。

1.3 觀察指標(biāo)

①以變異系數(shù)（CV）為觀察指標(biāo)評價(jià)儀器重復(fù)性。②以攜帶污染率為指標(biāo)評價(jià)其儀器攜帶污染情況。攜帶污染率=（l1-l3）/ （h3-l3）×100%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，對計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，分析數(shù)據(jù)結(jié)果，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

2 結(jié)果

2.1 組內(nèi)、組間重復(fù)性和靈敏度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

經(jīng)重復(fù)性實(shí)驗(yàn)，組內(nèi)、組間在不同TPA濃度下的CV分別為6.72、8.31、8.51和6.69、8.44、8.49，均＜10%。且CLIA分析儀的靈敏度（1/16）高于TPPA（1/80），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=6.442,P＜0.05）。2.2 干擾實(shí)驗(yàn)、攜帶污染率結(jié)果

經(jīng)CLIA分析儀檢測的TPA攜帶污染率為0.14%，且干擾物加入前后測得的結(jié)果差異為3.21%（S/CO）。

2.3 3 種方法檢測結(jié)果對比

CLIA、TPPA、TRUST法的陽性率分別為 87.7%（264/300）、86.3%（250/300）、42.3%（127/300），前兩者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.768,P＞0.05），但均高于TRUST法（χ2=45.300,χ2=42.169,P＜0.05）。其陰性組患者血清檢測的陰性率均為100%。

3 討論

目前，在世界范圍內(nèi)梅毒發(fā)病率已經(jīng)逐年上升，其嚴(yán)重危害著人類的健康生活。因此，各種診斷方法也不斷發(fā)展、應(yīng)用，但早期的、有效的診斷方法尚不完善，有待于進(jìn)一步研究，它們各有各的優(yōu)勢和缺點(diǎn)，隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)、科研與科技的不斷發(fā)展和進(jìn)步，人們更加傾向于特異性強(qiáng)、準(zhǔn)確、有效的TPA檢驗(yàn)方法[5-7]。TPA是一種特異性的TP感染患者體內(nèi)誘導(dǎo)產(chǎn)生的抗體，其往往最早出現(xiàn)，卻遲遲不消失，甚至在治愈后、乃至終生的患者仍然可以檢出TPA[8]。梅毒患者經(jīng)感染后還可以產(chǎn)生一種nTsAb，這種抗體無特異性，容易受到多種因素、多種疾病的影響，所以經(jīng)常使患者血清檢測結(jié)果呈現(xiàn)假陽性。同時(shí)，在使用TPPA法對患者進(jìn)行檢測的時(shí)候也會(huì)得出假陰性結(jié)果，故這種檢測方法在梅毒患者不同期中都存在一定的盲區(qū)，都不如CLIA法準(zhǔn)確、特異性強(qiáng)[9-10]。

該研究經(jīng)對正常人和TP患者血清的檢測，從靈敏度、重復(fù)性、特異性、準(zhǔn)確度等方面探討了CLIA法的應(yīng)用特點(diǎn)和優(yōu)勢，結(jié)果為：CLIA分析儀的靈敏度為1/16；且該法的TPA攜帶污染率、陽性率、陰性率分別為0.14%、87.7%（264/300）、100%。表明CLIA法重復(fù)性良好、精密度優(yōu)良，檢測結(jié)果準(zhǔn)確，且優(yōu)于TPPA和TRUST。林炳柱[11]等研究者通過應(yīng)用3種不同的方法（RPR法、CLIA法、TPPA法）檢測研究對象的血清TPA，進(jìn)而探討了其各自臨床價(jià)值，研究發(fā)現(xiàn)：CLIA法準(zhǔn)確、方便、特異性強(qiáng)，與該研究結(jié)果相似。

綜上所述，使用CLIA法作為檢驗(yàn)TPA的手段，其結(jié)果準(zhǔn)確率高；并且CLIA分析儀靈敏度高、不易受諸多外在干擾和限制、攜帶污染率低，值得推廣應(yīng)用。

[1]何惠，周迎春，劉基鐸，等.化學(xué)發(fā)光免疫測定在梅毒螺旋體抗體檢測中的臨床應(yīng)用[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2011,32（13）:1469-1470，1473.

[2]房華，吳燕芬，汪瑞忠，等.全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀在梅毒螺旋體抗體檢測中的臨床應(yīng)用[J].中國皮膚性病學(xué)雜志,2010，24（7）:671-672，682.

[3]馬艷潔.化學(xué)發(fā)光免疫測定在梅毒螺旋體抗體檢測中的應(yīng)用[J].中國民康醫(yī)學(xué),2014,26（24）:78-79.

[4]鄭炘，劉紋，劉曉敏.ARCHITECT-i2000SR全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測梅毒螺旋體特異性抗體臨床應(yīng)用評價(jià)[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2012,33（18）:2246-2247.

[5]Juárez-Figueroa L,Uribe-Salas F,García-Cisneros S.Evaluation of a rapid strip and a particle agglutination tests for syphilis diagnosis[J].Diagnostic Microbiology and Infectious Disease,2007(2):123-126.

[6]Ozbek O A,Dogan Y.Evaluation of a syphilis testing algorithm using a treponemal test for screening[J].Mikrobiyoloji Bulteni,2011(1):93-103.

[7]柳麗娟，戴振賢，卓傳尚,等.梅毒螺旋體抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測方法的建立及其臨床應(yīng)用[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2013，10（5）:569-570.

[8]陳忠城，胡波，李瑪，等.全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測梅毒抗體與TPPA的相關(guān)性[J].臨床醫(yī)學(xué)工程,2013,20（10）:1222-1223.

[9]Wang LN,Deng W,Li JM.Clinical evaluation of different serological diagnosis of syphilis[J].Clinics in Laboratory Medicine,2002(6):352-353.doi: 10.3760/j:issn:1009-9158.2002.06.010.

[10]Ismail AA.A radical approach is needed to eliminate interference from endogenous antibodies in immunoassays[J].Clinical Chemistry,2005（1）: 25-26.

[11]林炳柱，劉小燕.應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫測定法在梅毒螺旋體抗體檢測中的作用[J].中外醫(yī)療,2014，33（5）:10-11，13.

Clinical Application of Chemiluminescence Immunoassay in Detection of Treponema Pallidum Antibody

FAN Hong-song
Department of Clinical Laboratory,Meishan People's Hospital,Meishan,Sichuan Province,620010 China

Objective To explore the clinical value of chemiluminescence immunoassay(CLIA)in the detection of treponema pallidum antibody (TPA).Methods 100 healthy people and 300 patients treated in our hospital during December 2014 and January 2015 were selected as the research object,all of whom underwent detection of TPA by TPPA,TRUST and CLIA.The clinical value of CLIA was evaluated based on its coefficient of variation (CV)and sensitivity.Results①Inner-group CV and across-group CV under varying concentration of TPA were lower than 10%,and the sensitivity of CLIA was higher than that of TPPA,1/16 vs 1/ 80,and the difference was statistically significant,P＜0.05.② the positive rates by CLIA and by TPPA were 87.7%（264/300）and 86.3%（250/300）,and the difference was not statistically significant P＞0.05,but both of them were higher than that by TRUST, 42.3%（127/300）with statistically significant differences,P＜0.05.Conclusion CLTA is worthy of promotion in the detection of TPA due to its higher accuracy and sensitivity,strong anti-interference capability,and low carry-over rate.

Chemiluminescence immunoassay;Treponema pallidum antibody;Clinical application

R446.6

A

1674-0742（2015）08（a）－0072-02

2015-05-05）