聚丙烯酰胺水凝膠注射隆胸術(shù)后局部組織中VEGF的變化

高 翔 蔣文杰 孫一凡 路 瑋

（1 內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院整形外科，內(nèi)蒙 包頭 014010；2 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院整形外科醫(yī)院，北京 010033）

聚丙烯酰胺水凝膠（polyacrylamide hydrogel，PAHG）曾一度被視為良好的組織填充物，由于其操作簡單、不開刀、無手術(shù)瘢痕、痛苦少，被廣泛地應(yīng)用于整形美容外科領(lǐng)域，特別在隆乳術(shù)中得到了大量的應(yīng)用。但是隨著時間的推移，出現(xiàn)了大量并發(fā)癥[1]。2006年國家食品藥品監(jiān)督管理局停止了其生產(chǎn)和使用。現(xiàn)雖已全面禁止使用，但對于注射物不能取凈仍有少量遺留體內(nèi)的患者及目前無任何不良反應(yīng)的人群，其長期滯留體內(nèi)對人體有無傷害尚不清楚。我們采用實時定量PCR方法通過對聚丙烯酰胺水凝膠注射隆胸術(shù)后乳腺組織和巨乳、外傷后等乳腺組織VEGF的含量檢測對比觀察，旨在了解其分布及相互關(guān)系，為其預(yù)后及臨床治療提供基礎(chǔ)理論依據(jù)。

1.材料與方法

1.1 取材：來自我院就診的聚丙烯酰胺水凝膠隆胸術(shù)后行聚丙烯酰胺水凝膠取出術(shù)的患者采集乳腺組織9例，并作為研究組；對巨乳、乳房外傷等患者乳腺組織采集9例作為對照組：其中2例為巨乳乳腺組織；2例為外傷后予以清創(chuàng)術(shù)提取的乳腺組織；1例為自體脂肪組織隆乳術(shù)后提取的乳腺組織；1例為乳房纖維瘤患者，術(shù)中取腫物邊緣1 cm外的乳腺組織；2例從乳房燒傷后瘢痕患者提取的乳腺組織；1例為硅凝膠假體隆乳術(shù)后包膜攣縮患者提取的乳腺組織。年齡為26～42歲，平均年齡34.3歲。將取出的組織標(biāo)本在-80 ℃低溫冰箱凍存。

1.2 方法：采用實時定量PCR方法對血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）mRNA含量進(jìn)行檢測，最后用SPSS13.0統(tǒng)計分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析和統(tǒng)計學(xué)處理。應(yīng)用t檢驗進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理分析。

2 結(jié) 果

根據(jù)繪制的梯度稀釋DNA標(biāo)準(zhǔn)曲線，獲得各樣品VEGF基因和GAPDH管家基因的濃度結(jié)果，并計算出VEGF mRNA在組織中的含量。見圖1。

圖1

實驗組與對照組經(jīng)t檢驗，P＞0.05，無統(tǒng)計學(xué)差異。研究組中有1例患者乳房皮膚顏色發(fā)紅，但是體溫正常，血常規(guī)檢查正常，雖然細(xì)菌培養(yǎng)未能明確結(jié)果，但是仍然考慮為局部炎性反應(yīng)所致。其組織標(biāo)本中VEGF mRNA的含量為7.82?10-3，高于其他樣品。由于研究組的9例中僅有1例出現(xiàn)這種現(xiàn)象，而且該患者乳房皮膚顏色發(fā)紅，因此，不能單純考慮為PAHG注射所致。

3 討 論

聚丙烯酰胺水凝膠是一種水溶性聚合物，由丙烯酰胺單體聚合而成。其單體丙烯酰胺具有細(xì)胞毒性和神經(jīng)毒性及可能的生殖毒性、致癌性，聚丙烯酰胺水凝膠置入體后與體液及各種酶相接觸，可能會在體內(nèi)發(fā)生降解反應(yīng)，使部分小分子單體從聚合物中溶出，另外其在聚合、交聯(lián)等生產(chǎn)過程中也不可避免地存在丙烯酰胺單體的殘留物[2-3]。目前對PAHG植入人或動物體內(nèi)是否具有毒性的認(rèn)識尚不充分，國內(nèi)外的學(xué)者針對其毒性進(jìn)行了一些基礎(chǔ)研究，魯開化等[4]的研究發(fā)現(xiàn)，在人體內(nèi)環(huán)境中，4 年以內(nèi)無丙稀酰胺單體含量的增加。Wan[5]等在對聚丙烯酰胺水凝膠的穩(wěn)定性以及單體含量研究中指出，PAHG在H2O2作用下可以完全降解為丙烯酰胺單體，氧化降解可能是PAHG的主要反應(yīng)。麥慧等[6]在PASH對SD大鼠的肝腎及背闊肌組織實驗中均能產(chǎn)生細(xì)胞變性。而Lise等[7]隨訪了27例行PAHG注射隆胸8年以上的患者，認(rèn)為PAHG在乳房內(nèi)性質(zhì)穩(wěn)定。但是，在喬群等[8]的研究中發(fā)現(xiàn)，PHAG在體內(nèi)會引起多核巨細(xì)胞及淋巴細(xì)胞增生，并在其周圍形成肉芽腫樣組織。余敏等[10]也認(rèn)為PAHG在人體內(nèi)會導(dǎo)致局部產(chǎn)生不同程度的免疫應(yīng)答反應(yīng)。

由于其在人體內(nèi)將長期存在幾年甚至數(shù)十年，故若存在長期安全性問題，后果非常嚴(yán)重，不僅給使用者（大多為健康女性）帶來身體上的痛苦，還可因為其使用部位的特殊性而造成巨大的心理創(chuàng)傷。另外，值得注意的是目前尚有一部分沒有出現(xiàn)并發(fā)癥的人群，因為心理恐懼、負(fù)擔(dān)重等原因強(qiáng)烈要求取出注射物，在本研究組中就有2例患者屬于該情況。因此有必要對聚丙烯酰胺水凝膠引入我國以來在臨床使用的并發(fā)癥發(fā)生情況進(jìn)行完整、系統(tǒng)和深入的研究，以便更好地了解其安全性。

血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）是一種肝素親和外分泌二聚體糖蛋白，其在血管形成和腫瘤生長、浸潤、轉(zhuǎn)移中起關(guān)鍵作用，它受到一系列促進(jìn)和抑制因子的調(diào)節(jié)，其中最重要的促進(jìn)因子之一是腫瘤細(xì)胞在生長過程中分泌的VEGF。大量的實驗研究證實，幾乎所有的惡性腫瘤都表達(dá)較高水平的VEGF。而在正常組織中無或僅有極低水平的表達(dá)[10]。

PAHG注射是否會導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生是廣大患者和研究人員都想了解的一個問題。為此，我們于2006年至2014年在內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院選擇聚丙烯酰胺水凝膠注射隆乳的患者9例，作為研究組，研究組患者平均注射時間為7.4年；同期根據(jù)年齡等基線特征配比選擇巨乳、乳房外傷、隆乳術(shù)后等患者9例，作為對照組。由于在臨床中，正常的乳腺組織標(biāo)本采集困難，而且存在倫理學(xué)問題，故而采用與對乳腺組織影響較小的乳房疾病患者手術(shù)治療時需要祛除的組織作為研究標(biāo)本。由于樣本量較小，為了減少誤差和干擾，增加檢測的靈敏度、特異性和精確性，我們采用熒光定量PCR方法對組織中的血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）進(jìn)行定量檢測。兩組比較，未發(fā)現(xiàn)具有統(tǒng)計學(xué)意義的差異。研究組中有1例患者其組織標(biāo)本中VEGF mRNA的含量為7.82?10-3，高于其他樣品。由于研究組的9例中僅有1例出現(xiàn)這種現(xiàn)象，而且該患者乳房皮膚顏色發(fā)紅，因此，不能單純考慮為PAHG注射所致。

我們的結(jié)果是長時間注射PAHG并沒有引起乳房組織標(biāo)本中VEGF mRNA含量的改變，但這也不能說明PAHG就一定不會導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生，是安全可用的。目前雖然多項研究均沒有找到PAHG致癌的確切證據(jù)，但是由于我國使用 PAHG注射的人群數(shù)量很大，而且一但發(fā)生并發(fā)癥又不能完全取凈，為此關(guān)于注射PAHG是否會導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生還需要進(jìn)一步大量的相關(guān)研究去證實。

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