10例喉頭水腫患者酶聯(lián)免疫法過(guò)敏原實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析

陳 艷

（遼寧省阜新市中心醫(yī)院，遼寧 阜新 123000）

變應(yīng)原導(dǎo)致的喉頭水腫屬于I型變態(tài)反應(yīng)，介導(dǎo)此型反應(yīng)的抗體為IgE。測(cè)定總IgE水平可提供有關(guān)總過(guò)敏反應(yīng)負(fù)荷水平的信息及患者特應(yīng)性狀態(tài)的大體情況。特異行IgE抗體的產(chǎn)生是特應(yīng)性個(gè)體受過(guò)敏性反復(fù)刺激的結(jié)果。測(cè)定過(guò)敏原特異性的循環(huán)IgE抗體能幫助確定致過(guò)敏性原，預(yù)測(cè)未來(lái)發(fā)生過(guò)敏反應(yīng)的危險(xiǎn)并指導(dǎo)臨床。過(guò)敏反應(yīng)的檢測(cè)是進(jìn)行過(guò)敏反應(yīng)治療的一個(gè)非常重要的先決條件。其優(yōu)點(diǎn)為安全性及靈敏度均高，患者無(wú)痛楚，易被患者接受、為探究過(guò)敏性疾病的致敏原，分析了10例喉頭水腫患者酶聯(lián)免疫法過(guò)敏原檢測(cè)試驗(yàn)報(bào)告，報(bào)道如下

1 資料與方法

1.1 病例選擇：選擇喉頭水腫的患者10例，年齡2～75歲。10例患者3 d內(nèi)均沒有服抗過(guò)敏類藥物。

1.2 方法

1.2.1 采樣要求：采用血清標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)。應(yīng)使用真空管或無(wú)菌注射器與患者靜脈處取血。注意避免發(fā)生溶血。收集患者全血標(biāo)本后，將其置于室溫下凝固20～30 min以上，不加抗凝劑，將其放置于2～8 ℃環(huán)境下自然凝固。血凝塊開始收縮時(shí)，立即從全血標(biāo)本中分離血清，然后將血清轉(zhuǎn)移至適當(dāng)?shù)膬?chǔ)存管中。

1.2.2 操作步驟：使用樣本稀釋液2倍稀釋100單位陰性質(zhì)控血清，陰性質(zhì)控孔加入100單位陰性質(zhì)控血清，其他檢測(cè)孔均加入100單位稀釋后的血清樣本。輕輕搖動(dòng)微孔板，注意不要使內(nèi)容物流出反應(yīng)孔。使用不干膠紙密封已加樣的微孔板，并將其置于37 ℃水浴箱孵育1 h。甩掉微孔板微孔中的液體，用稀釋好的洗滌沖洗液洗滌微孔板板條。清洗完畢后，往所有放應(yīng)空中加入100單位生物素記抗人IgE抗體，置37 ℃ 1 h。至少洗滌3次。往反應(yīng)孔中加入100單位辣根過(guò)氧化物酶-鏈親和素結(jié)合物，置37 ℃孵育30 min，至少洗滌3次。往反應(yīng)空中加入顯色劑A和顯色B各50單位，置于37 ℃孵育10 min。每孔加入50單位終止液終止反應(yīng)。用酶標(biāo)儀選雙波長(zhǎng)450 nm和630 nm讀取吸光度值

1.2.3 過(guò)敏原通過(guò)吸入、食入和接觸途徑進(jìn)入體內(nèi)，引發(fā)各種各樣的過(guò)敏性疾病。變應(yīng)原為總IgE2，陽(yáng)性質(zhì)控對(duì)照，陰性質(zhì)控對(duì)照，粉塵螨，屋塵螨，蒿屬植物、艾蒿，雜草，花粉，點(diǎn)青霉、交鏈孢霉、黑根霉，真菌（鏈格孢、煙曲霉、多主芽孢）、肉類（豬肉、牛肉、羊肉），蝦、蟹，貓毛，牛奶，雞蛋，花生、大豆，水果（芒果、荔枝、菠蘿、檸檬），玉米、小麥。

1.2.4 陽(yáng)性結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)OD＞0.15為陰性；DO＞0.15為陽(yáng)性。

2 結(jié) 果

10例喉頭水腫患者酶聯(lián)免疫過(guò)敏原實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性結(jié)果（表1）。

3 討 論

表1 10例喉頭水腫患者酶聯(lián)免疫過(guò)敏原實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性結(jié)果[n（%）]

3.1 過(guò)敏是免疫機(jī)制發(fā)動(dòng)的超過(guò)敏反應(yīng)。過(guò)敏可由抗體或細(xì)胞介導(dǎo)。對(duì)于大多數(shù)具有呼吸道、胃腸道或皮膚癥狀的患者，其過(guò)敏反應(yīng)是由IgE介導(dǎo)的。IgE能與肥大細(xì)胞上的IgE受體結(jié)合，并介導(dǎo)肥大細(xì)胞介質(zhì)和前炎性因子的釋放。臨床上的過(guò)敏性反應(yīng)伴隨著嗜曙紅細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞控制的遲發(fā)相反應(yīng)。在過(guò)敏反應(yīng)中，T細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子調(diào)節(jié)IgE合成和促進(jìn)嗜曙紅細(xì)胞的分化。

3.2 引起過(guò)敏反應(yīng)的抗原稱為過(guò)敏原。過(guò)敏原一般是蛋白質(zhì)（常是糖蛋白）或能結(jié)合到蛋白質(zhì)上的化合物（半抗原）。對(duì)于IgE致敏的患者，暴露于過(guò)敏原會(huì)導(dǎo)致多種疾病，如鼻炎、結(jié)膜炎、哮喘、特應(yīng)性濕疹、蕁麻疹等甚至?xí)?dǎo)致過(guò)敏性休克，其結(jié)果可以幫助診斷，才能制定有效的避免措施，進(jìn)行有效的免疫治療。證明過(guò)敏原特異性IGE抗體的存在對(duì)于明確過(guò)敏性疾病的診斷是至關(guān)重要的。預(yù)測(cè)未來(lái)發(fā)生過(guò)敏反應(yīng)的危險(xiǎn)并指導(dǎo)臨床。體外檢測(cè)過(guò)敏原可提供有關(guān)總過(guò)敏反應(yīng)負(fù)荷水平的信息及患者特應(yīng)性狀態(tài)的大體情況。

3.3 由表1可見，變應(yīng)原陽(yáng)性例數(shù)前幾位的分別是粉塵螨、屋塵螨、真菌酶類、蒿屬植物、艾蒿、蝦蟹、牛奶、大豆、蛋類、豬肉、牛肉、羊肉。其中粉塵螨類例數(shù)最高、其次是屋塵螨，且二者有交叉抗原性。提示兒童過(guò)敏性皮膚病的主要變應(yīng)原是屋塵螨和粉塵螨。由一種或多種變應(yīng)原陽(yáng)性。提示過(guò)敏性患者在高敏狀態(tài)時(shí)，可同時(shí)對(duì)多種變應(yīng)原產(chǎn)生陽(yáng)性反應(yīng)。

3.4 變應(yīng)原陽(yáng)性者，結(jié)合病史可以判斷出過(guò)敏性喉頭水腫的觸發(fā)因素，對(duì)患者在生活中如何避免接觸過(guò)敏原也有指導(dǎo)意義。本組10例患者的吸入性比食入性性病應(yīng)原發(fā)生率高，其中粉塵螨、屋塵螨的陽(yáng)性率最高。避免過(guò)敏原是治療過(guò)敏性疾病有效的、非藥理學(xué)方法，最終可以減少長(zhǎng)時(shí)間藥物治療的支出與潛在的不良反應(yīng)。針對(duì)變應(yīng)原陽(yáng)性結(jié)果指導(dǎo)患兒和治療此類疾病：①螨是最常見的引起患者常年性過(guò)敏癥狀的過(guò)敏原，通常見于床上用品、床墊以及地毯?；颊邞?yīng)盡量避免使用帶有絨毛的羊毛圍巾和羊毛毯。②每周將床單、枕套和毛毯在熱水（水溫高于55 ℃）中浸洗可有效殺死螨。③不使用地毯。找出室內(nèi)容易長(zhǎng)霉的木頭和石膏。④使用除濕器降低室內(nèi)的相對(duì)濕度。⑤避免食入引起過(guò)敏的食物。⑥通過(guò)改變事物的烹飪方法，降低食物的過(guò)敏原性，減輕過(guò)敏反應(yīng)。⑦花粉高峰期避免室外活動(dòng)將對(duì)有益控制病情。