毒死蜱和阿特拉津?qū)︴幐闻K的影響

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毒死蜱和阿特拉津?qū)︴幐闻K的影響

韓英1，郝其睿1, 2，魏菁3，趙榮偉1，牟振波2，徐革鋒2，劉洋2

（1.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，哈爾濱150030；2.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院黑龍江水產(chǎn)研究所，哈爾濱150070；3.大連出入境檢驗(yàn)檢疫局，遼寧大連116600）

摘要：探討阿特拉津（Atrazine，ATR）、毒死蜱（Chlorpyrifos，CPF）及其混合物對(duì)鯉（Cyprinus carpio L.）肝臟和血液相關(guān)指標(biāo)的影響。將實(shí)驗(yàn)鯉分別暴露于不同濃度的阿特拉津、毒死蜱及其混合物中，并分別于175、350和525 d采集其肝組織、血液等樣品。結(jié)果表明，阿特拉津和毒死蜱在鯉肝組織中均有殘留，殘留量隨暴露時(shí)間及濃度的增加而降低；與對(duì)照組比較，各染毒組堿性磷酸酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶及血糖水平顯著升高，總蛋白、白蛋白水平下降，抗氧化能力下降，且毒死蜱與阿特拉津混合后毒性作用更強(qiáng)，說明兩者的毒性有疊加作用；染毒后，肝臟ER-α和VTG-II基因表達(dá)水平升高。結(jié)果顯示，鯉肝臟對(duì)阿特拉津和毒死蜱有較強(qiáng)的代謝能力，阿特拉津和毒死蜱在鯉肝臟無富集作用；阿特拉津和毒死蜱使鯉肝功能受損，抗氧化能力降低；ER-α和VTG-II基因的高調(diào)表達(dá)顯示出阿特拉津和毒死蜱對(duì)鯉亦有環(huán)境雌激素作用。

關(guān)鍵詞：阿特拉津；毒死蜱；鯉；肝臟

網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間2015-3-13 15:21:00

[URL]http://www.cnki.net/kcms/detail/23.1391.S.20150313.1521.006.html

韓英,郝其睿,魏菁,等.毒死蜱和阿特拉津?qū)︴幐闻K的影響[J].東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào), 2015, 46(3): 67-73.

三氮嗪類除草劑阿特拉津（莠去津）和有機(jī)磷類殺蟲劑毒死蜱（樂斯本）是現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中廣泛應(yīng)用的農(nóng)藥，通過淋溶、徑流等方式進(jìn)入水域影響水生生物生活及生存，尤其是魚類。阿特拉津影響動(dòng)物生殖功能，被世界野生動(dòng)物基金會(huì)（WWF）列為環(huán)境激素物質(zhì)[1]。毒死蜱普遍使用，是目前應(yīng)用最廣泛的5種殺蟲劑之一[2]。雌激素受體ER能與雌激素特異性結(jié)合，多種環(huán)境激素對(duì)雌激素受體具有內(nèi)分泌干擾效應(yīng)，可誘發(fā)動(dòng)物和人體出現(xiàn)發(fā)育異常、生殖障礙、代謝紊亂等癥狀[3]。卵黃蛋白原VTG是卵生脊椎動(dòng)物特有蛋白，VTG在魚體內(nèi)異常誘導(dǎo)，反映生物體受到內(nèi)分泌干擾物時(shí)的綜合壓力，導(dǎo)致生物體正常發(fā)育受影響[4]。

阿特拉津和毒死蜱對(duì)鯉毒性研究已有報(bào)道[5-6]，但有關(guān)這兩種農(nóng)藥在肝臟中殘留及其對(duì)相關(guān)基因表達(dá)研究未見報(bào)道。試驗(yàn)以鯉為供試動(dòng)物，旨在探討ATR和CPF單一及聯(lián)合暴露對(duì)鯉肝功能及抗氧化性的影響、在肝臟殘留情況，及與性腺發(fā)育有關(guān)的雌激素受體基因ER-α和卵黃蛋白原基因VTG-II mRNA表達(dá)等，為水環(huán)境保護(hù)奠定基礎(chǔ)。

1　材料與方法

1.1試劑及儀器

1.1.1主要試劑

毒死蜱和阿特拉津均購(gòu)于Sigma公司，純度分別為98.0%和99.5%。堿性磷酸酶測(cè)定試劑盒、谷丙轉(zhuǎn)氨酶測(cè)定試劑盒、考馬斯亮蘭蛋白測(cè)定試劑盒、白蛋白測(cè)定試劑盒、血糖濃度測(cè)定試劑盒、溶菌酶測(cè)定試劑盒、谷胱甘肽還原酶測(cè)定試劑盒和總抗氧化能力測(cè)定試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

1.1.2主要儀器

TU-1900雙光束紫外可見分光光度計(jì)，安捷倫氣象色譜7890a，RT-PCR儀等。

1.2試驗(yàn)用魚的馴養(yǎng)及暴露環(huán)境

1.2.1試驗(yàn)用魚的馴養(yǎng)

試驗(yàn)動(dòng)物為健康普通鯉，2011年3月購(gòu)自于黑龍江省某漁場(chǎng)，體重（36±3.73）g·尾-1。在經(jīng)過曝氣的自來水中暫養(yǎng)15 d后攻毒。試驗(yàn)用水pH為（7.4±0.2），總硬度為225 mg·L-1，溶解氧>7 mg·L-1，水溫為（20±1）℃，每日光照周期保持為12 h。

1.2.2試驗(yàn)分組與暴露環(huán)境

根據(jù)邢厚娟所測(cè)定的阿特拉津、毒死蜱單一以及二者混合液（阿特拉津和毒死蜱質(zhì)量比為1?1混合）對(duì)鯉的96h-LC50值（2.142、0.582和0.565 mg·L-1）[1]，取每種毒物L(fēng)C50值的1/5 LC50、1/50 LC50依次分為高、低兩個(gè)濃度組，即阿特拉津低濃度組AD（4.28 μg·L-1）和阿特拉津高濃度組AG （42.8 μg·L-1），毒死蜱低濃度組DD（1.16 μg·L-1）、高濃度組DG（11.6 μg·L-1），毒死蜱和阿特拉津混合液低濃度組HD（1.13 μg·L-1）、高濃度組HG （11.3 μg·L-1）共6個(gè)處理組，另設(shè)空白對(duì)照組KB和丙酮溶劑對(duì)照組BT（在配制時(shí)，以濃度<0.05%的丙酮為助溶劑），每個(gè)處理組設(shè)一平行，每組放魚30尾。

為保證毒物濃度，每隔1 d更換毒液，試驗(yàn)期間定時(shí)定量喂食。暴露期為525 d，每175 d采樣一次，每次采樣分別從各處理組隨機(jī)抽取10尾試驗(yàn)魚用于試驗(yàn)指標(biāo)檢測(cè)。

1.3常規(guī)指標(biāo)測(cè)定

1.3.1肝臟農(nóng)藥殘留檢測(cè)

肝組織農(nóng)藥殘留含量測(cè)定，由哈爾濱市農(nóng)業(yè)科學(xué)院水產(chǎn)分院協(xié)助完成。檢測(cè)使用安捷倫氣象色譜7890a，具有操作簡(jiǎn)單、分析速度快、分離效能高、靈敏度高、應(yīng)用范圍廣特點(diǎn)。氣相色譜法普遍用于環(huán)境殘留的三氮苯類農(nóng)藥的檢測(cè)，該檢測(cè)限為0.001 μg·mL-1。

1.3.2血液指標(biāo)檢測(cè)

1.3.2.1血清的制備

尾靜脈采血，采集量為4~5 mL·尾-1，置于高壓滅菌后離心管中，靜置待其凝固后，4℃3 000 r·min-1離心10 min，得到上清液即為血清，將其吸出分裝備用。

1.3.2.2指標(biāo)測(cè)定

血清堿性磷酸酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、總蛋白、白蛋白、血糖、谷胱甘肽還原酶和總抗氧化能力測(cè)定按試劑盒使用說明的要求標(biāo)準(zhǔn)操作，測(cè)定吸光度并計(jì)算含量。

1.4 ER-α和Vtg-IImRNA在肝臟的表達(dá)

1.4.1引物的設(shè)計(jì)、合成與實(shí)時(shí)PCR擴(kuò)增

采用Trizol法抽提鯉肝臟組織中的總RNA，以20 μL反應(yīng)體系反轉(zhuǎn)錄成cDNA，應(yīng)用引物設(shè)計(jì)軟件（Oligo 6.22）設(shè)計(jì)實(shí)時(shí)熒光定量PCR引物（見表1）。熒光定量PCR反應(yīng)采用TransStartTMGreen qPCR SuperMix熒光染料，反應(yīng)體系為20 μL。每個(gè)樣品做3個(gè)平行。

反應(yīng)條件為：95℃預(yù)變性30 s，95℃變性15 s，60℃退火30 s，40個(gè)循環(huán)。反應(yīng)獲得的擴(kuò)增曲線和溶解曲線應(yīng)用軟件進(jìn)行分析。標(biāo)準(zhǔn)梯度的制備：標(biāo)號(hào)5個(gè)1.5 mL的離心管，每個(gè)管中加入滅菌水8 μL，取模板2 μL一號(hào)管混勻，即為5倍稀釋，再取出2 μL加入到二號(hào)管中，依次稀釋至25、125、625和3 125倍備用。

表1　目的基因的引物序列及片段長(zhǎng)度Table 1　Primer sequence and amplification length of destination fragment

1.4.2 ER-α和Vtg-II基因mRNA表達(dá)的相對(duì)差異分析

各試驗(yàn)組均做3個(gè)重復(fù)，樣品5倍梯度稀釋后利用軟件構(gòu)建基因擴(kuò)增的標(biāo)準(zhǔn)曲線。進(jìn)行ER-α和Vtg-ⅡmRNA表達(dá)相對(duì)定量分析，以β-actin為內(nèi)參基因。計(jì)算采用PfaffL法[7]，計(jì)算公式如下：

其中，E=10（-1/slope）

ΔCttarget（Control-Sample）為目的基因在對(duì)照組Ct值與試驗(yàn)組Ct之差；ΔCtβ-actin（Control-Sample）為β-actin在對(duì)照組Ct值與試驗(yàn)組Ct之差。

1.5數(shù)據(jù)處理

應(yīng)用GraphPad Prism 5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，所有數(shù)據(jù)通過單方差分析進(jìn)行評(píng)估，應(yīng)用Tukey法多重比較分析其數(shù)據(jù)的差異性。分析后各處理組結(jié)果均表示為“平均數(shù)（Mean）±標(biāo)準(zhǔn)差（SD）”形式。P<0.05表示為顯著性差異。

2　結(jié)果與分析

2.1阿特拉津和毒死蜱在鯉肝臟中的殘留

對(duì)175、350和525 d阿特拉津單一與毒死蜱聯(lián)合暴露組鯉肝臟中阿特拉津的殘留量進(jìn)行檢測(cè)。

2.1.1肝臟中阿特拉津的殘留

KB組和BT組鯉肝臟均未檢測(cè)到阿特拉津；各處理組肝臟內(nèi)均有阿特拉津殘留，隨處理時(shí)間延長(zhǎng)而下降，各組差異顯著（P<0.05）；單一和聯(lián)合處理高濃度組較低濃度組肝臟中阿特拉津殘留呈顯著升高趨勢(shì)（P<0.05）；聯(lián)合處理組阿特拉津殘留量顯著低于單一處理組（P<0.05）（見表2）。

2.1.2肝臟中毒死蜱的殘留

對(duì)175、350和525 d毒死蜱單一及與阿特拉津聯(lián)合暴露組肝臟中毒死蜱殘留量進(jìn)行檢測(cè)。KB組和BT組鯉肝臟均未檢測(cè)到毒死蜱；各處理組肝臟內(nèi)均有毒死蜱殘留，并隨處理時(shí)間延長(zhǎng)而下降，各組差異顯著（P<0.05）；單一和聯(lián)合處理高濃度組較低濃度組肝臟中毒死蜱殘留呈顯著升高趨勢(shì)（P< 0.05）；聯(lián)合處理組阿特拉津殘留量顯著低于單一處理組（P<0.05）（見表2）。

2.2鯉血清中堿性磷酸酶和轉(zhuǎn)氨酶的活性

2.2.1鯉血清中堿性磷酸酶的活性

與KB組、BT組相比，各處理組堿性磷酸酶濃度均顯著升高（P<0.05）。各處理組間堿性磷酸酶濃度變化不顯著（見表3）。

表2　不同濃度阿特拉津、毒死蜱及其混合物在鯉肝臟中的殘留Table 2　Detection results of the residue of atrazine, chlorpyrifos and the mixture with different concentrations in common carp's liver

表3　不同濃度阿特拉津、毒死蜱及其混合物對(duì)鯉血液指標(biāo)的影響Table 3　Effects of atrazine, chlorpyrifos and their mixture with different concentration on blood indicators in carp's serum

2.2.2鯉血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活性

與KB組、BT組相比，除AD組外，其他各處理組谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量顯著升高（P<0.05）。各組內(nèi)比較顯示，各高濃度組與低濃度組差異顯著（P<0.05）（見表3）。

2.3鯉血清中總蛋白、白蛋白和血糖的含量

2.3.1鯉血清中總蛋白的含量

與KB組、BT組相比，除AD組外，其他各處理組總蛋白含量顯著降低（P<0.05）；各處理組間總蛋白含量變化不顯著（見表3）。

2.3.2鯉血清中白蛋白的含量

與KB組、BT組相比，除AD組外，其他各處理組白蛋白含量顯著下降（P<0.05）；AD組與AG組無顯著差異，其他各高濃度組與低濃度組差異顯著（P<0.05）（見表3）。

2.3.3鯉血清中血糖的濃度

與KB組、BT組相比，AD組、AG組和DD組血糖濃度無顯著差異，其他各處理組顯著升高（P< 0.05）；HD組與HG組差異顯著（P<0.05），其他各高濃度組與低濃度組無顯著差異（見表3）。

2.4鯉血清中各抗氧化指標(biāo)測(cè)量

2.4.1鯉血清中谷胱甘肽還原酶的含量

與KB組、BT組相比，各處理組谷胱甘肽還原酶含量顯著下降（P<0.05）；HD組與HG組差異顯著（P<0.05），其他各高濃度組與低濃度組無顯著差異。

2.4.2鯉血清中總抗氧化能力的測(cè)量

與KB組、BT組相比，各處理組抗氧化能力顯著下降（P<0.05）；AD組與AG組無顯著差異，其他各高濃度組與低濃度組差異顯著（P<0.05）（見表3）。

2.5 ER-α mRNA和VTG-II mRNA在不同染毒組肝組織中的表達(dá)比較

ER-α mRNA在肝組織平均表達(dá)水平為阿特拉津處理組（A）、阿特拉津與毒死蜱混合處理組（H）、毒死蜱處理組（D）依次遞減，各組均高于空白對(duì)照組（C），差異顯著（P<0.05）。

VTG-II mRNA在肝組織平均表達(dá)水平A、H、D依次遞減，各組均高于C，差異顯著（P<0.05）（見圖1、2）。

圖1　ER-α mRNA在肝組織中的表達(dá)情況Fig. 1　Expression of ER-α mRNA in liver tissue

圖2　VTG-II mRNA在肝組織中的表達(dá)情況Fig. 2　Expression of VTG-II in liver tissue

3　討論與結(jié)論

3.1阿特拉津和毒死蜱在鯉肝組織的殘留

水體中殘留農(nóng)藥可通過魚類體表、呼吸道和攝食等方式在體內(nèi)蓄積，出現(xiàn)生物富集現(xiàn)象[8]。不同農(nóng)藥在體內(nèi)代謝機(jī)制和降解能力不同，殘留情況也不同。試驗(yàn)結(jié)果顯示，在阿特拉津、毒死蜱及混合暴露后，鯉肝臟組織中阿特拉津、毒死蜱殘留量隨著時(shí)間逐漸降低。原因可能與阿特拉津、毒死蜱結(jié)構(gòu)特性導(dǎo)致其與組織的親和性較差有關(guān)，魚體通過細(xì)胞色素P450酶系等途徑可將其轉(zhuǎn)化、降解，并隨著時(shí)間的推移，肝臟應(yīng)激適應(yīng)能力逐步增強(qiáng)。結(jié)果說明，鯉肝臟對(duì)阿特拉津和毒死蜱有較強(qiáng)代謝能力，阿特拉津和毒死蜱在鯉肝臟無富集作用。

3.2阿特拉津和毒死蜱單一及其混合液對(duì)鯉血清相關(guān)指標(biāo)的影響

3.2.1對(duì)堿性磷酸酶和轉(zhuǎn)氨酶的影響

堿性磷酸酶作為血清酶的一種與機(jī)體生長(zhǎng)相關(guān)的調(diào)控酶，催化磷酸單酯水解，促使磷酸集團(tuán)發(fā)生轉(zhuǎn)移和代謝[9]。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，阿特拉津和毒死蜱單一及混合使用均能使鯉堿性磷酸酶活性升高。堿性磷酸酶升高，在魚類臨床表現(xiàn)為肝損傷。結(jié)果與以往有關(guān)阿特拉津會(huì)抑制斑馬魚堿性磷酸酶的活性不同[10]，其原因是否與魚類種類屬性有關(guān)有待于進(jìn)一步研究。

谷丙轉(zhuǎn)氨酶是一種在動(dòng)物線粒體中廣泛存在氨基轉(zhuǎn)移酶，在體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝過程中發(fā)揮重要作用。當(dāng)機(jī)體處于正常生理狀態(tài)下，血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量很低，當(dāng)受到外源因素或者其他致病因素作用發(fā)生損傷時(shí)，血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性會(huì)出現(xiàn)一次性或持續(xù)性升高[11-12]。阿特拉津和毒死蜱對(duì)魚類毒性極強(qiáng)，對(duì)肝臟組織也具有很嚴(yán)重的毒害和損傷作用[13]。

3.2.2對(duì)血清蛋白水平和血糖含量的影響

試驗(yàn)結(jié)果顯示，阿特拉津、毒死蜱及其混合液對(duì)鯉血清中總蛋白和白蛋白水平具有抑制作用，這與王希英研究結(jié)果一致[14]。鯉血清中總蛋白和白蛋白水平降低主要原因是：阿特拉津與毒死蜱使鯉肝臟作為毒物代謝的靶器官受損傷，抑制總蛋白和白蛋白合成；試驗(yàn)藥物導(dǎo)致機(jī)體發(fā)生一系列應(yīng)激反應(yīng)，對(duì)蛋白質(zhì)合成具有抑制作用；阿特拉津和毒死蜱造成腎臟損傷，使腎臟濾過作用受損和減弱，導(dǎo)致部分蛋白隨尿液流失；慢性中毒使鯉的消化吸收能力下降，影響血液中總蛋白和白蛋白水平。

阿特拉津和毒死蜱對(duì)鯉血糖濃度具有升高作用，這與潘春記等研究結(jié)果一致[15]。染毒后鯉血糖升高，是機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)結(jié)果。3.2.3對(duì)抗氧化能力的影響

谷胱甘肽還原酶作為體內(nèi)一種具有抗氧化能力酶，能夠維持生物膜完整和功能的穩(wěn)定，達(dá)到清除體內(nèi)超氧化物自由基的目的，有延緩機(jī)體衰老和預(yù)防疾病發(fā)生等諸多能力。谷胱甘肽還原酶對(duì)于鯉機(jī)體自身抗氧化能力方面具有重要作用[16-17]。

超氧陰離子自由基使神經(jīng)細(xì)胞不能正常生長(zhǎng)，降低ATP酶活性和膜脂流動(dòng)性，導(dǎo)致細(xì)胞總羰基、過氧化脂質(zhì)含量和核DNA單鏈斷裂現(xiàn)象增加，說明機(jī)體對(duì)自由基清除能力能夠反映抗氧化能力的強(qiáng)弱[18]。試驗(yàn)結(jié)果顯示，阿特拉津、毒死蜱單一及混合使用后降低鯉抗氧化能力，主要是由于農(nóng)藥導(dǎo)致肝損傷，體內(nèi)產(chǎn)生過多自由基，導(dǎo)致氧化損傷。

3.2.4阿特拉津和毒死蜱單一及混合用藥毒性的比較

試驗(yàn)結(jié)果顯示，毒死蜱對(duì)鯉的毒性強(qiáng)于阿特拉津，而阿特拉津與毒死蜱混合用藥較兩者單一使用毒性更強(qiáng)，使鯉肝損傷加重，抗氧化能力進(jìn)一步下降，即阿特拉津與毒死蜱對(duì)鯉的毒性有疊加作用。

3.3阿特拉津和毒死蜱單一及聯(lián)合慢性暴露后對(duì)鯉肝臟ER-α和VTG-II表達(dá)的影響

α型雌激素受體（ER-α）通路是雌激素作用的主要途徑。ER-α屬于核內(nèi)受體超家族，通常情況下，受體以二聚體的形式與雌激素結(jié)合，啟動(dòng)雌激素應(yīng)答元件（Estrogen responsive elements，EREs）轉(zhuǎn)錄，實(shí)現(xiàn)雌激素作用[19]。雌激素應(yīng)答元件包括卵黃蛋白原（VTG）基因、ER基因、絨毛膜促性腺激素基因（Choriogenin gene）等基因[20]。研究發(fā)現(xiàn)，阿特拉津具有環(huán)境雌激素效應(yīng)，研究主要集中在兩棲動(dòng)物的蛙類和哺乳動(dòng)物的鼠類[21-22]。試驗(yàn)結(jié)果顯示，鯉肝臟中ER-α和VtgII這兩個(gè)與卵巢發(fā)育有關(guān)的基因表達(dá)均在一定程度上被誘導(dǎo)。本試驗(yàn)前期組織學(xué)研究表明，阿特拉津和毒死蜱能夠促進(jìn)鯉卵巢的發(fā)育而抑制精巢發(fā)育，說明與其他動(dòng)物一樣，阿特拉津和毒死蜱對(duì)鯉亦具有雌激素作用[23]，作用機(jī)制有待于進(jìn)一步研究。

阿特拉津和毒死蜱單一及聯(lián)合慢性暴露，能引起鯉肝臟損傷及抗氧化系統(tǒng)的異常；兩種農(nóng)藥在鯉肝臟組織中均有殘留，隨時(shí)間變化而降低，表明鯉肝臟對(duì)阿特拉津和毒死蜱有較強(qiáng)降解能力，在肝臟內(nèi)無富集；兩種農(nóng)藥均使鯉肝臟中ER-α和Vtg-II mRNA表達(dá)量增加，有類雌激素作用。

[參考文獻(xiàn)]

[1]邢厚娟.阿特拉津和毒死蜱單一及聯(lián)合暴露對(duì)鯉魚毒理作用的研究[D].哈爾濱:東北農(nóng)業(yè)大學(xué), 2010.

[2]秦正紅,樂衛(wèi)東.自噬—生物學(xué)與疾病[M].北京:科學(xué)出版社, 2011.

[3]志生,張靖,張豐,等. ER-α和ER-β介導(dǎo)的有機(jī)磷農(nóng)藥雌激素效應(yīng)差異分析[J].環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào), 2012, 32(12): 3006-3014．

[4]王琪.環(huán)境激素對(duì)魚類生殖影響生物檢測(cè)方法的建立[D].蘭州:甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué), 2008．

[5]Filipov N M, Stewart M A, Carr R L, et al. Dopaminergic toxicity of the herbicide atrazine in rat striatal slices[J]. Toxicology, 2007,

Han Ying, Hao Qirui, Wei Jing, et al. Effect of atrazine and chlorpyrifos on common carp's liver[J]. Journal of Northeast Agricultural University, 2015, 46(3): 67-73. (in Chinese with English abstract)

Effect of atrazine and chlorpyrifos on common carp's liver

/HAN Ying1, HAO Qirui1,2, WEI Jing3, ZHAO Rongwei1, MOU Zhenbo2, XU Gefeng2, LIU Yang2(1. School of Animal Sciences and Technology, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China; 2. Heilongjiang Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Harbin 150070, China; 3. Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Dalian Liaoning 116600, China)

Abstract:In this study our purpose is to discuss the effects of atrazine and chlorpyrifos and their mixture to related index of common carp's liver and blood. Exposeed experimental carps respectively in atrazine, chlorpyrifos and their mixture of different concentrations, and collected samples of common carp's liver and blood at 175, 350 and 525 d. Results showed that both atrazine and chlorpyrifos had residual in common carp's liver and the residual quantity reduced with the exposure time and the concentration increasing. Compared to the control group, the alkaline phosphatase, glutamic-pyruvic transaminase and blood glucose levels of each infected group had significant rise, while the total protein and albumin levels declined. Moreover, the toxicity of the mixture of atrazine and chlorpyrifos was stronger than that prior to the blending, which illustrated the toxicity of the two have superposition. After infected, the expression level of ER-α and VTG-II in liver went up. The experimental results expressed that thebook=46,ebook=68common carp's liver had strong metabolic capability to atrazine and chlorpyrifos and the two had no concentration in common carp's liver. Atrazine and chlorpyrifos caused the function of commone carp's liver damaged and reduced its antioxidant capacity. The high expression levels of ER-α and VTG-II showed that atrazine and chlorpyrifos had environmental estrogen effects to common carp as well.

Key words:atrazine; chlorpyrifos; common carp; liver

作者簡(jiǎn)介：韓英（1963-），女，教授，博士，博士生導(dǎo)師，研究方向?yàn)轸~類遺傳育種與繁殖。E-mail: hanying_606@163. com

基金項(xiàng)目：黑龍江省自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目（AC200934）；黑龍江博士后資助項(xiàng)目（LRB10-633）

收稿日期：2014-03-31

文章編號(hào)：1005-9369（2015）03-0067-07

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

中圖分類號(hào)：S965.116