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    微生物學(xué)

    2015-11-01 03:41:32
    關(guān)鍵詞:耶爾森微生物學(xué)細(xì)胞膜

    微生物學(xué)

    FM4-64和Hoechst染料在活細(xì)菌胞膜和擬核標(biāo)記定位中的條件優(yōu)化與應(yīng)用

    王凈,韓延平,楊瑞馥,等

    目的:為了觀察細(xì)菌細(xì)胞膜和擬核的形態(tài)結(jié)構(gòu),準(zhǔn)確對(duì)亞細(xì)胞進(jìn)行定位。方法:本文利用FM4-64和Hoechst兩種染料,分別采用不同濃度和不同時(shí)間對(duì)大腸桿菌活細(xì)胞進(jìn)行染色和熒光共聚焦顯微成像,并對(duì)7種細(xì)菌的活細(xì)胞(金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌、鼠疫耶爾森菌、軍團(tuán)菌、霍亂弧菌和炭疽芽孢桿菌)進(jìn)行染色觀察。結(jié)果:相同觀察條件下,不同染料濃度和不同的染色時(shí)間影響了細(xì)胞膜、擬核的熒光強(qiáng)度;確定了FM4-64染色通用條件(濃度20 μg/mL染色1 min)和Hoechst的最佳條件(濃度20 μg/mL染色20 min)。上述條件下,Hoechst對(duì)8種細(xì)菌染色效果均較理想,然而FM4-64對(duì)細(xì)菌染色效果不同,革蘭氏陰性菌(大腸桿菌、肺炎克雷伯菌、鼠疫耶爾森菌、霍亂弧菌、銅綠假單胞菌和軍團(tuán)菌)表現(xiàn)較好的細(xì)胞膜輪廓,革蘭氏陽性菌(炭疽芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌)效果較差。結(jié)論:FM4-64和Hoechst兩種染料共染8種細(xì)菌,對(duì)細(xì)胞膜和擬核的染色觀察,可為原核細(xì)胞結(jié)構(gòu)染色提供借鑒,并為大分子的亞細(xì)胞定位研究奠定基礎(chǔ)。

    兩種染料FM4-64和Hoechst;活細(xì)菌;細(xì)胞膜;擬核;標(biāo)記定位

    來源出版物:微生物學(xué)報(bào),2015,55(8): 1068-1073聯(lián)系郵箱:韓延平,yanpinghan@gmail.com

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