聯(lián)合檢測GADA、ZnT8A和IA-2A對1型糖尿病的診斷價值

喬獻偉

（河南省南陽市第一人民醫(yī)院檢驗科，河南 南陽 473000）

聯(lián)合檢測GADA、ZnT8A和IA-2A對1型糖尿病的診斷價值

喬獻偉

（河南省南陽市第一人民醫(yī)院檢驗科，河南 南陽 473000）

目的 評價胰島細胞GADA、ZnT8A、IA-2A三種自身抗體在1型糖尿病患者中的診斷價值。方法 1型糖尿病患者78例，其中男性50例，女性28例，發(fā)病年齡20～41歲；2型糖尿病患者80例，其中男性51例，女性29例，平均年齡40～70歲；105例健康者血清，采用免疫印跡法檢測血清GADA、ZnT8A、IA-2A三種自身抗體。結果 1型糖尿病患者中，GADA、ZnT8A、IA-2A三種自身抗體陽性率分別為53.1%、24.1%、23.7%。1型糖尿病患者中，三種抗體陽性率均高于2型糖尿病患者和健康對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05）。三種抗體之間在1型糖尿病患者中陽性率有差異，提示1型糖尿病患者不同自身抗體出現(xiàn)在病程的不同階段。結論 GADA、ZnT8A、IA-2A的檢測對1型糖尿病的診斷具有一定價值，聯(lián)合檢測三種抗體具有互補性，可提高1型糖尿病診斷的靈敏度。

GADA；ZnT8A；IA-2A；1型糖尿病

近年的流行病學顯示[1]，我國患糖尿病的人數(shù)約1億，且發(fā)病率不斷上升。目前糖尿病已嚴重危害人類健康，依其病因學可分為1型和2型。1型糖尿病發(fā)病原因是由于胰島素的合成和分泌減少；2型糖尿病以胰島素抵抗為主，同時伴有胰島素分泌不足。明確地分型有利于疾病的治療和預防。1型糖尿病是由于自身免疫介導的β細胞破壞，1型糖尿病患者體內在出現(xiàn)臨床癥狀前，存在多種自身抗體，如：如谷氨酸脫羧酶自身抗體（GADA）、鋅轉運體8抗體（ZnT8A）、蛋白酪氨酸磷酸酶抗體（IA-2A）等。現(xiàn)雖有文章報道胰島相關抗體檢測的臨床意義，但由于研究樣本含量多少不一，且在不同人群中檢出率有差異。因此，本研究檢測1型和2型糖尿病患者血清中GADA、ZnT8A、IA-2A的檢出率與正常人群中檢出率之間的差異，同時，比較1型和2型糖尿病患者血清中GADA、ZnT8A、IA-2A的檢出率的差異，進一步揭示與胰島相關的自身抗體檢測對鑒別診斷1型糖尿病的意義。

1　材料與方法

1.1研究對象：研究對象為我院2011年3月至2013年8月收住我院的78例1型糖尿病。入選病例中，男性50例，女性28例；發(fā)病年齡20～41歲，平均年齡28.4歲，均符合1999年WHO糖尿病診斷標準，有酮癥傾向者，并且依賴胰島素治療。2型糖尿病患者為同期我院門診與住院患者80例，該組患者平均年齡51.4歲（40～70歲），其中男性51例，女性29例。入選病例均符合1999年WHO糖尿病診斷標準；初次確診糖尿病距今3年內；排除繼發(fā)性糖尿病半年內無酮癥或酮癥酸中毒發(fā)生。正常人群即健康組為同期在我院進行體檢的健康者105例，男性69例，女性36例；平均年齡37.8歲（20～65歲）。

1.2標本留取：空腹抽取靜脈血2 mL，排除樣本中的可能含有溶血和高脂血，最遲2 h血清可分離完畢。

1.3檢測方法：用免疫印跡法檢測。使用免疫印跡試劑盒（深圳伯勞特生物制品有限公司）進行檢測，其原理是抗原抗體反應，將GADA、ZnT8A、IA-2A特異性抗原包被硝酸纖維膜上，與被檢樣品中特異性的IgG抗體反應，形成抗原抗體復合物，之后與有抗人IgG的免疫酶試劑反應，依據(jù)顯色條帶進行判斷結果。

1.4統(tǒng)計學處理：使用SPSS15.0軟件進行統(tǒng)計分析，組間進行t檢驗，當P<0.05時，為差異具有統(tǒng)計學意義。

2　結 果

1型糖尿病組、2型糖尿病組和健康組GADA、ZnT8A、IA-2A檢測陽性率比較顯示：1型糖尿病組，三種抗體的陽性率依次為GADA＞ZnT8A＞IA-2A。1型糖尿病組中GADA、ZnT8A、IA-2A抗體檢出率明顯高于2型糖尿病組，P＜0.05。1型糖尿病組、2型糖尿病組GADA、ZnT8A、IA-2A檢測均顯著高于健康組（P＜0.05），見表1。

表1　1型糖尿病組、2型糖尿病組和健康組GADA、ZnT8A、IA-2A檢測陽性率比較[n（%）]

3　討 論

糖尿病是一種常見的慢性病，研究發(fā)現(xiàn)胰島β細胞與糖尿病的發(fā)生關系密切，胰島自身抗體作為胰島β細胞免疫損傷，能夠區(qū)別1型和2型糖尿病[2]。胰島素自身抗體主要有GAD-Ab、ICA等。GAD65-Ab在糖尿病患者的病程發(fā)展穩(wěn)定性較好，對于糖尿病的免疫治療具有重要意義[3]。

Xiang等[4]研究發(fā)現(xiàn)ZnT8是1型糖尿病的又一主要自身抗原，其抗體在診斷和預防1型糖尿病方面，具有重要意義。ZnT8含369個氨基酸，屬于CDF（陽離子擴散易化）家族，編碼基因SLC30A8（染色體8q24.11）[5]。ZnT8 mRNA主要表達在胰島細胞上，由激光共聚焦顯微分析，提示ZnT8定位于胰島β細胞分泌囊膜上。當前國際研究一致認為ZnT8通過影響鋅離子濃度，從而在胰島素合成與分泌中發(fā)揮重要作用[6]。

IA-2是又一個重要的胰島細胞自身抗原，它的抗原決定簇局限于胞內結構域中，是以前發(fā)現(xiàn)的胰島細胞40×103胰蛋白消化片段抗原的前體。IA-2自身抗體（IA-2A）不但是1型糖尿病診斷分型的一個依據(jù)，還在高危個體的預測篩查方面起積極作用[7]。

關于1型糖尿病GADA、ZnT8A、IA-2A的陽性率文獻報道不一，本研究結果顯示GADA、ZnT8A、IA-2A、聯(lián)合檢測的陽性率為分別為52.6%、24.4%、23.1%、65.4%，與國內外多數(shù)同類研究基本一致。

胰島細胞抗體陽性的1型糖尿病患者需要盡早注射胰島素治療。多種抗體陽性的患者則更需要盡早注射胰島素治療。因此，選擇適當?shù)囊葝u細胞自身抗體的聯(lián)合檢測，可以提高1型糖尿病的診斷率。對胰島細胞抗體陽性的1型糖尿病患者，盡早采用胰島素治療保護胰島功能，同時預防一些并發(fā)癥是非常重要的。

總之，由于研究樣本的不同差異，從而引起抗體陽性率發(fā)生變化，其統(tǒng)計學結果也不同，若要明確各型糖尿病與抗體之間的具體關系，還需要更大的樣本進行實驗，同時需要更加深入的基礎研究。

[1] Yang W,Lu J,Weng J,et al.Prevalence of diabetes among men and women in China[J].N Engl J Med,2010,362(12):1090-1101.

[2] 董喜環(huán).自身抗體在成人隱匿性自身免疫性糖尿病中的診斷價值[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生,2009,47(15):49-50.

[3] 姜海紅,劉海彤,習迎斌,等.初發(fā)2型糖尿病檢測胰島自身抗體的臨床意義[J].中國醫(yī)療前沿,2009,4(19):28-29.

[4] Xiang J,Li XY,Xu M,et al.Zinc transporter-8 gene (SLC30A8) is associated with type 2 diabetes in Chinese[J].J Clin Endocrinol & Metab,2008,93(10): 4107-4112.

[5] Gohlke H,Fen'aft U,Koczwara K,et a1.SLC30A8(ZnT8)Polymorp hism is Associated with Young Age at Type l Diabetes Onset[J]. Rev Diabet Stud,2008,5(1):25-27.

[6] Janet MW,Ong M.Identification ofa Major Humoral Epitope in.S1c30A8(ZnT8)[J].Ann N Y Acad Sci,2008,1150:252-256.

[7] 周薇,杜靜,陸紅,等.胰島細胞自身抗體對1型糖尿病診斷價值的研究[J].國際檢驗醫(yī)學雜志,2012,33(14):1690-1691.

R587.1

B

1671-8194（2015）35-0062-02