膿毒癥患者機體免疫變化與病情嚴重性的相關(guān)性分析

張福帥

（慶云縣人民醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，山東 德州 253700）

膿毒癥患者機體免疫變化與病情嚴重性的相關(guān)性分析

張福帥

（慶云縣人民醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，山東 德州 253700）

目的 分析不同程度膿毒癥患者機體細胞免疫水平的變化。方法 選擇2013年12月至2014年12月山東省慶云縣重癥醫(yī)學(xué)科診斷膿毒癥患者120例，依據(jù)入院24 h內(nèi)病情程度將患者分為膿毒癥組、嚴重膿毒癥組與膿毒癥性休克組各40例，取門診健康查體者30例作為對照組。入組患者分別于發(fā)病后24 h內(nèi)晨空腹抽取肘靜脈血，利用流式細胞儀檢測患者外周血T細胞亞群免疫指標：CD4+T細胞、CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞（Treg）、輔助T細胞17（Th17）亞群水平及Treg/Th17比值變化。相關(guān)性分析Treg/Th17比值與APACHE-Ⅱ評分關(guān)系。結(jié)果 發(fā)病后，3組膿毒癥患者CD4+T細胞、Treg、Th17細胞水平與對照組比較明顯升高，隨病情程度加重，4組患者水平差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。但Treg/Th17比值隨病情加重，比值逐漸降低，4組比較，水平差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。Treg/Th17比值與APACHE-Ⅱ評分呈直線負相關(guān)（r=-0.503，P＜0.05）。結(jié)論 膿毒癥患者發(fā)病后，機體細胞免疫水平呈現(xiàn)不同程度反應(yīng)性增加。隨著病情發(fā)展變化不同，機體呈現(xiàn)不同程度的免疫反應(yīng)。膿毒癥患者病情越重，機體表現(xiàn)免疫抑制增加。輔助性T細胞17與調(diào)節(jié)性T細胞比例失衡，CD4+T淋巴細胞調(diào)節(jié)功能紊亂。Treg/Th17比值與反應(yīng)膿毒癥患者病情程度評分APACHE-Ⅱ評分呈直線負相關(guān)。

膿毒癥；免疫失衡；相關(guān)性

膿毒癥是臨床重癥醫(yī)學(xué)研究重點，具有發(fā)病率高，病情重，病死率高特點。膿毒癥以體內(nèi)嚴重炎性反應(yīng)失衡為主要病理特點。促炎反應(yīng)/抑炎反應(yīng)失衡是臨床發(fā)病的主要基礎(chǔ)。現(xiàn)代免疫學(xué)研究［1-2］證實，膿毒癥患者繼發(fā)性臟器損傷與免疫應(yīng)答反應(yīng)失衡關(guān)系密切。抑制性T細胞與輔助性T細胞比例失衡可能是嚴重膿毒癥病情發(fā)展的主要原因之一。課題分析不同程度膿毒癥患者機體細胞免疫水平的變化，探討其與膿毒癥病情嚴重程度之間相關(guān)性。

1　資料與方法

1.1研究對象：選擇2013年12月至2014年12月山東省慶云縣重癥醫(yī)學(xué)科診斷膿毒癥患者120例，依據(jù)入院24 h內(nèi)病情程度將患者分為膿毒癥組、嚴重膿毒癥組與膿毒癥性休克組各40例，取門診健康查體者30例作為對照組。對照組男18例，女12例，年齡（58.85±5.05）歲。膿毒癥組40例，男21例，女19例，年齡（58.94±5.27）歲。嚴重膿毒癥組40例，男20例，女20例，年齡（58.59±5.92）歲。膿毒癥性休克組40例，男21例，女19例，年齡（60.04±7.28）歲。膿毒癥診斷標準：①診斷符合2012年國際嚴重膿毒癥及膿毒癥性休克診治指南。②膿毒癥、嚴重膿毒癥、膿毒癥性休克分型參照指南進行。剔除標準為：①免疫結(jié)締組織疾?。虎?個月內(nèi)服用激素類及免疫調(diào)節(jié)劑者。本研究已獲醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準，所有治療方案獲得患者或者家屬的知情同意，并與患者家屬簽署知情同意書。

表1　4組患者細胞免疫水平變化（）

表1　4組患者細胞免疫水平變化（）

注：APACHE-Ⅱ：急性生理學(xué)及慢性健康狀況評分。*：與對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）

組別　　例數(shù)　APACHE-Ⅱ（分）　Treg（%） 　Th17（%）　Treg/Th17對照組　30　-　4.89±0.81　2.15±0.46　2.05±0.67膿毒癥組　40　17.95±3.71*　8.93±1.43*　4.94±0.86*　1.87±0.76*嚴重膿毒癥組　40　25.84±3.80*　11.76±2.31**　6.94±1.31*　1.53±0.81*膿毒癥性休克組　40　34.72±4.16*　15.90±2.87*　8.61±1.85*　1.04±0.83* F -2.904　2.891　3.075　3.189 P -0.005　0.005　0.003　0.003

1.2研究方法：入組患者分別于發(fā)病后24 h內(nèi)晨空腹抽取肘靜脈血，完善相關(guān)化驗檢查，利用APACHE-Ⅱ評分反應(yīng)膿毒癥患者病情嚴重性。檢測患者外周血T細胞亞群免疫指標： CD4+T細胞、CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞（Treg）、輔助T細胞17（Th17）亞群水平及Treg/Th17比值變化。相關(guān)性分析Treg/Th17比值與APACHE-Ⅱ評分關(guān)系。檢測方法測定淋巴細胞表面各種熒光素的熒光強度，以二維散點圖儲存，Cellques軟件分析數(shù)據(jù)，記錄陽性細胞百分率。流式細胞儀及Cellques軟件均購自美國BD公司，F(xiàn)icoll 淋巴細胞分離液（美國Sigma公司產(chǎn)品）。

1.3統(tǒng)計學(xué)分析：采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料用（）表示，采用F檢驗分析；相關(guān)性分析采用Spearson相關(guān)性分析，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié) 果

細胞免疫水平變化：發(fā)病后，3組膿毒癥患者CD4+T細胞、Treg、Th17細胞水平與對照組比較明顯升高，隨病情程度加重，4組患者水平差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。但Treg/Th17比值隨病情加重，比值逐漸降低，4組比較，水平差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。Treg/Th17比值與APACHE-Ⅱ評分呈直線負相關(guān)（r=-0.503，P＜0.05）。見表1、圖1。

圖1　Treg/Th17與APACHE-Ⅱ評分相關(guān)性

3　討 論

嚴重膿毒癥患者是以細菌等病源微生物及其釋放分泌毒素損傷機體組織細胞功能為主要發(fā)病機制。嚴重膿毒癥發(fā)病機制較為復(fù)雜。既往認為［3-4］，細菌、病毒等刺激釋放的細胞因子介導(dǎo)的炎性爆發(fā)性反應(yīng)是組織細胞損傷的主要原因?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究［5］顯示，機體的免疫功能可能也參與嚴重膿毒癥的發(fā)生、發(fā)展。免疫應(yīng)答通過主要組織相容性復(fù)合體遞呈T淋巴細胞，繼而激活細胞免疫系統(tǒng)，誘發(fā)CD4+T細胞增殖。CD4+T細胞分為兩個亞群：輔助性T細胞（Th17為代表）與調(diào)節(jié)性T（ Treg）細胞。Th17細胞主要分泌白細胞介素-6、腫瘤壞死因子-a等促炎因子。Treg細胞分泌白細胞介素-10、TGF-β1等抑炎因子。Treg/Th17比值的平衡是膿毒癥病情好轉(zhuǎn)的關(guān)鍵。急性生理學(xué)及慢性健康狀況評分（APACHE-Ⅱ）是臨床評價嚴重膿毒癥患者病情嚴重程度的主要評價指標。其臨床評分高低與預(yù)后關(guān)系密切。為進一步探討不同程度的膿毒癥患者外周血中CD4+T細胞、CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞（Treg）、輔助T細胞17（Th17）亞群水平及Treg/Th17比值變化。進一步分析Treg/Th17比值與APACHE-Ⅱ評分關(guān)系性，課題試展開分析。

課題研究發(fā)現(xiàn)發(fā)病后，3組膿毒癥患者CD4+T細胞、Treg、Th17細胞水平與對照組比較明顯升高，隨病情程度加重，4組患者水平差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。研究結(jié)果表明膿毒癥患者隨著病情發(fā)展變化，其免疫炎性反應(yīng)呈增加趨勢，機體處于一種復(fù)雜的動態(tài)免疫平衡狀態(tài)。隨著病情進一步加重，至膿毒癥性休克階段，Treg/ Th17比值隨病情加重，比值逐漸降低，4組比較，水平差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。相關(guān)性分析顯示Treg/Th17比值與APACHE-Ⅱ評分呈直線負相關(guān)（r=-0.503，P＜0.05）。Th17是近年來研究較多的一種CD4+T細胞亞群。Th17是主要的促炎細胞，Treg細胞具有廣泛的抑制功能，可以同時抑制Th17細胞的產(chǎn)生。輔助性T細胞亞群和調(diào)節(jié)性T細胞亞群之間的動態(tài)平衡對于維持機體自身免疫平衡穩(wěn)定具有重要作用。任何炎性反應(yīng)的產(chǎn)生及恢復(fù)均伴隨著免疫平衡系統(tǒng)關(guān)系的破壞。臨床研究表明［6］，Th17與Treg之間存在一種漂移關(guān)系。即Th17與Treg細胞間的比例平衡關(guān)系破壞可能在膿毒癥患者發(fā)病中占有重要地位。

課題研究結(jié)果表明膿毒癥患者發(fā)病后，機體細胞免疫水平呈現(xiàn)不同程度反應(yīng)性增加。隨著病情發(fā)展變化不同，機體呈現(xiàn)不同程度的免疫反應(yīng)。膿毒癥患者病情越重，機體表現(xiàn)免疫抑制增加。輔助性T細胞17與調(diào)節(jié)性T 細胞比例失衡，CD4+T淋巴細胞調(diào)節(jié)功能紊亂。Treg/Th17比值與反應(yīng)膿毒癥患者病情程度評分APACHE-Ⅱ評分呈直線負相關(guān)。

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1671-8194（2015）27-0184-02