國產(chǎn)注射用阿莫西林鈉中主要雜質(zhì)分析

張志威

【摘要】目的：對國產(chǎn)注射用阿莫西林鈉中的主要雜質(zhì)進(jìn)行分析。方法：采用高效液相色譜法，以Waters Nova-pakC18（250mmx4.6mm，5um）為色譜柱，檢測波長為254nm，梯度洗脫檢查105批樣品的有關(guān)物質(zhì)。結(jié)果：在國產(chǎn)注射用阿莫西林鈉中共檢出19個雜質(zhì)，其中主要雜質(zhì)為阿莫西林青霉氧酸、二酮哌嗪阿莫西林、阿莫西林二聚體和阿莫西林三聚體，單個雜質(zhì)含量均小于3%，總雜質(zhì)含量均小于6%。結(jié)論：本研究結(jié)果對進(jìn)一步指導(dǎo)該品種生產(chǎn)有重要意義。

【關(guān)鍵詞】注射用阿莫西林鈉；雜質(zhì)；分析

【中圖分類號】R942 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B【文章編號】1004-4949（2015）02-0662-02

注射用阿莫西林鈉，一般這種藥品的主要性狀為白色或者是類白色粉末或結(jié)晶。注射用阿莫西林鈉，按照無水物進(jìn)行計(jì)算，其中阿莫西林的含量為85%以上，如果按照平均裝量計(jì)算，則其中阿莫西林的含量應(yīng)為標(biāo)示量的90%—110.0%。

一般而言，阿莫西林屬于青霉素類抗生素，這種藥劑對于肺炎鏈球菌、溶血性鏈球菌等鏈球菌屬、不產(chǎn)青霉素酶葡萄球菌、糞腸球菌等需氧革蘭陽性球菌，大腸埃希菌、奇異變形桿菌、沙門菌屬、流感嗜血桿菌、淋病奈瑟菌等需氧革蘭陰性菌的不產(chǎn)β內(nèi)酰胺酶菌株及幽門螺桿菌具有良好的抗菌活性，可以有效的進(jìn)行殺菌。阿莫西林發(fā)揮抗菌性的主要原理在于對細(xì)菌細(xì)胞壁合成的抑制，從而起到殺菌消毒的作用，這種注射用阿莫西林鈉中的阿莫西林可以快速的將細(xì)胞中的細(xì)菌集合成一個球狀，然后對其進(jìn)行溶解，使得細(xì)菌球產(chǎn)生破裂，從而徹底的對其進(jìn)行消除。

現(xiàn)在在我國市場中普遍使用的是無菌粉針劑，這種注射用阿莫西林鈉藥物的制作主要是利用無菌阿莫西林鈉原料進(jìn)行加工，直接進(jìn)行無菌分裝從而得到的。這種注射用無菌粉針劑在我國目前的國產(chǎn)化臨床醫(yī)療中被廣泛應(yīng)用，屬于抗菌類基礎(chǔ)性藥物。其能夠有效治療細(xì)菌性感染疾病，對于感染性細(xì)菌具有良好的殺毒效用。本文主要是針對注射用阿莫西林鈉中存在的雜質(zhì)進(jìn)行研究，清楚掌握注射用阿莫西林鈉中的各種雜質(zhì)，有助于加強(qiáng)對其的了解，從而控制阿莫西林鈉質(zhì)量，對于臨床醫(yī)學(xué)有著重要的意義。

本文所使用的實(shí)驗(yàn)方式是依照中國藥典2010版中收載的方法來進(jìn)行的，并且對色譜的條件進(jìn)行了一系列的優(yōu)化改進(jìn)，針對全國范圍內(nèi)的生產(chǎn)企業(yè)進(jìn)行抽樣分析，隨機(jī)在市場中抽取11家生產(chǎn)廠家，對這些廠家所生產(chǎn)的105批注射用阿莫西林鈉中的有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行分析。

1.方法和準(zhǔn)備

1.1儀器與試藥

色譜儀：德國戴安公司SummitP680A液相色譜儀，包括P680泵，ASI一100自動進(jìn)樣器，PDA一100二極管陣列檢測器，Chromelon色譜工作站。

阿莫西林雜質(zhì)對照品：6一氨基青霉烷酸；阿莫西林系統(tǒng)適用性對照品；二酮哌嗪阿莫西林、阿莫西林青霉氧酸、阿莫西林青霉噻唑酸等。

1.2溶液的制備

1.2.1供試品溶液取105批樣品適量，精密稱定，臨用前用流動相A溶解并定量稀釋成每1mL中含2mg的溶液，即得。

1.2.2對照溶液精密量取供試品溶液1mL，置100mL量瓶中，用流動相A稀釋至刻度，搖勻，即得。

1.2.3對照品混合溶液取各阿莫西林雜質(zhì)對照品各約5mg，置5mL量瓶中，用流動相A定容，搖勻，即得。

3色譜條件

色譜柱1：Chromarex ODS（250mmx4.6mm，5um），色譜柱2：Diamonsil C18（250mmx4.6mm，5um）；色譜柱3：WatersNova一pakC18（300mmx3.9mm，4um）；色譜柱4：Shim一pack VP一ODS（150mmx4.6mm，5um）；色譜柱5：Synergi 4u Fusion-RP80A（250mmx4.6mm，5um）等。

使用色譜柱1，取上述溶液20uL注入液相色譜儀，圖譜見圖1。試驗(yàn)結(jié)果顯示阿莫西林鈉對酸、堿、氧化、光、熱均不穩(wěn)定，主要生成的雜質(zhì)有：二酮哌嗪阿莫西林，阿莫西林二聚體和阿莫西林三聚體。各降解產(chǎn)物峰對阿莫西林峰均無干擾，分離效果良好。

2.方法與結(jié)果

2.1線性關(guān)系及檢出限、定量限的考察

稱取購得的7個雜質(zhì)對照品適量，配制成100，50，10，5，0.5ug/L-'的溶液，依次注入液相色譜儀，以進(jìn)樣濃度（X，ug/mL-'）為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的雜質(zhì)峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性分析。6一氨基青霉烷酸、二酮哌嗪阿莫西林、阿莫西林青霉氧酸、阿莫西林青霉噻唑酸峰1、阿莫西林青霉噻唑酸峰2、3一（4一羥基苯基）吡嗪一2一醇、（2R）一2一[（2，2一二甲基異丙醇）氨基]一2一（4一羥基苯基）乙酸、（2R）一2一氨基一2一（4一氰基苯基）乙酸回

歸方程分別為：

Y=14.OX+2.31 r=0.9999

Y=6.1X+5.10 r=1.000

Y=8.2X+5.17 r=1.000

Y=10.1X+2.74 r=0.9998

Y=8.6X+3.03 r=0.9999

Y=11.OX+1.08 r=1.000

Y=4.8X+5.51 r=1.000

Y=5.9X+4.79 r=0.9998

2.3測定結(jié)果

取105批樣品適量，精密稱定，臨用前用流動相A溶解并定量稀釋成每1mL中含2mg的溶液，立即進(jìn)樣，共檢出19個雜質(zhì)，歸納其雜質(zhì)譜并統(tǒng)計(jì)分析各雜質(zhì)的含量變化。6一氨基青霉烷酸、二酮哌嗪阿莫西林、阿莫西林青霉氧酸、阿莫西林青霉噻唑酸，3一（4一羥基苯基）吡嗪一2一醇、（2R）-2一[（2，2一二甲基異丙醇）氨基]-2一（4一羥基苯基）乙酸、（2R）一2一氨基一2一（4一羥基苯基）乙酸這7個雜質(zhì)的量用雜質(zhì)對照品按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，其他雜質(zhì)均采用主成分自身對照法計(jì)算，結(jié)果見圖2，其中，柱狀圖表示105批各雜質(zhì)的平均含量；偏差線表示105批次中該雜質(zhì)的2倍標(biāo)準(zhǔn)偏差（2SD）。

105批樣品中含量較大的主要雜質(zhì)為阿莫西林青霉氧酸、二酮哌嗪阿莫西林、阿莫西林二聚體和阿莫西林三聚體，單個雜質(zhì)含量均小于3%，總雜質(zhì)含量均小于6%。

3.討論

.一般而言，正式的雜志對照品在成本的投入上比較高，而且很不容易獲得，因此，可以將5根長度以及品牌不同的色譜柱作為實(shí)驗(yàn)對象，并且按照“3”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，這種試驗(yàn)對于結(jié)果的影響不大，最大限度的貼近真實(shí)的阿莫西林鈉實(shí)物的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。根據(jù)實(shí)驗(yàn)的總結(jié)數(shù)據(jù)可知，注射用阿莫西林鈉中主要包括阿莫西林青霉氧酸、阿莫西林、二酮哌嗪阿莫西林、阿莫西林二聚體、阿莫西林三聚體，而這些物質(zhì)的相對保留時(shí)間依次為0.7、1.0、3.5、4.1、4.6，根據(jù)這些物質(zhì)的相對保留時(shí)間可以將這些物質(zhì)劃分為雜質(zhì)峰定位的主要依據(jù)。

就阿莫西林鈉物質(zhì)本身的屬性來說，其具有不耐熱性，如果在實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)高溫狀況，那么就會很容易使得阿莫西林鈉出現(xiàn)不穩(wěn)定現(xiàn)象，對于實(shí)驗(yàn)的結(jié)果有著明顯的影響。在我國的藥典中沒有對注射用阿莫西林鈉的溫度控制進(jìn)行強(qiáng)調(diào)和標(biāo)注，這就導(dǎo)致了不同地域的生產(chǎn)單位在進(jìn)行藥物的運(yùn)輸或者是存儲時(shí)，沒有過多的考慮到環(huán)境溫度的因素，從而使得注射類阿莫西林鈉在運(yùn)輸或者是存儲的過程中出現(xiàn)質(zhì)變，其中的雜質(zhì)的種類和含量會發(fā)生轉(zhuǎn)變，這樣很容易導(dǎo)致注射用阿莫西林鈉的藥性無法正常發(fā)揮，甚至還會產(chǎn)生一定的危害。本文所進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)注重考慮到溫度因素對注射用阿莫西林鈉的影響，實(shí)驗(yàn)的結(jié)果具有客觀公正性，在對各方面的影響因素，尤其是溫度因素進(jìn)行全方位的分析后，對國產(chǎn)注射用阿莫西林鈉中的雜質(zhì)進(jìn)行了具體的研究。在充分考慮到各種影響因素的前提下，隨機(jī)在全國范圍內(nèi)抽取了11個生產(chǎn)廠家，從這些生產(chǎn)廠家中抽取了105批注射用阿莫西林鈉，將這些注射用阿莫西林鈉作為研究的對象。

抽樣工作的進(jìn)行涉及到了全國23個省（區(qū)，直轄市），儲存時(shí)間為0-18個月。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明不同生產(chǎn)廠家、不同地點(diǎn)抽取的樣品雜質(zhì)種類和含量均存在一定的差異，這可能是不同生產(chǎn)廠家原料生產(chǎn)工藝、包裝、運(yùn)輸、儲存條件有差異等原因引起的。

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