在線衍生—液相微萃取法測定水發(fā)產品中的甲醛

閻雪　高明　楊群　單紀平　徐剛

摘要 ：建立了在線衍生-液相微萃取技術測定水發(fā)產品中的甲醛的方法。對影響萃取效率的實驗條件進行了優(yōu)化。采用Rtx-5MS毛細管柱進行檢測，以混有衍生化試劑的十二烷為萃取溶劑，在40℃、攪拌速度為200r/min條件下對1mL水發(fā)產品樣品萃取30min。該方法對甲醛的富集倍數為102；線性關系良好。相關系數為0.9898；甲醛的檢出限為0.1mg/kg（S/N=3）。實際樣品的加標回收率為97.3%～102.3%。

關鍵詞 ：液相微萃取 在線衍生 甲醛 水發(fā)產品

近些年來，一些不法商販和生產廠家在食品中添加國家嚴令禁止使用的化工原料——甲醛，以達到延長保鮮時間和改善感官的目的[1]。食品中甲醛的殘留已成為人們關注的熱點。甲醛毒性是甲醇的30倍，對人的神經系統、肺、肝臟都有損害，還會引起人體內分泌功能紊亂，引發(fā)過敏性皮炎、過敏性哮喘等[2-4]。有關甲醛的檢測方法有比色法、電化學法、氣相色譜法及高效液相色譜法[5-12]。國內檢測水產品中甲醛普遍使用的快速定性法、分光光度法。氣相色譜法操作簡便，測定線性范圍寬，分離度好，干擾小。但是，由于甲醛分子太小，直接進行GC分析時，出峰太快，因此食品中甲醛的測定一般先將甲醛衍生再用GC-MS進行測定[13]。有文獻提出了2，4 -二硝基苯肼衍生-氣相色譜測定紡織品中甲醛的方法，有文獻描述了水產品中甲醛的衍生-液相色譜測定方法。但是在線衍生技術還未見報道。

液相微萃取是隨著近代環(huán)境分析技術的發(fā)展而發(fā)展起來的一種快速、精確、靈敏度高、環(huán)境友好的新型樣品前處理技術。是在液-液萃取的基礎上提出來的，該技術集萃取、純化、濃縮于一體。在萃取過程僅需要極少量的有機溶劑（幾到幾十微升），其靈敏度與液-液萃取相當，而對微量或痕量目標物的富集作用是液-液萃取所不能比擬的。液相微萃取還可通過調節(jié)萃取溶劑的極性和酸堿性來達到對某一類目標物的選擇性萃取，從而減少基質中雜質成分的干擾[14-20]。

因此，在水發(fā)產品中甲醛的檢測中發(fā)展一種快速、省時、在線的萃取技術，意義十分巨大。

1.實驗部分

1.1 儀器與試劑樣品

氣相色譜-質譜聯用儀（島津GCMS-QP2010，日本島津公司），微量進樣器（10μL，美國hamilton公司）。甲醛（色標，天津市津科精細化工研究所），鄰-（2，3，4，5，6-五氟芐基）羥胺鹽酸鹽（PFBHA·HCl，Sigma公司），十二烷（99%，德國產）水發(fā)產品樣品（通化市售）。

1.2 GC-MS分析條件

島津氣相色譜-質譜聯用儀（GCMS-QP2010）；30 m×0.25 mm×0.25？m Rtx-5MS毛細管柱；進樣口溫度為260℃；載氣（He）流速1.05 mL/min；柱箱起始溫度為70℃，保持3min，然后以5℃/min的速度升溫到120℃然后以20℃/min的速度升溫到240℃。分流進樣，分流比為1：30；進樣2？L。分析時間為19 min。離子源溫度250℃；接口溫度280℃；電離方式EI；選擇離子模式SIM；電離能量70 Ev；切割溶劑時間5.0 min。甲醛的衍生物定量離子m/z 161。

1.3 頂空液相微萃取

頂空液相微萃取包括以下幾個步驟： （1） 按照圖1所示組裝液相微萃取裝置 （2） 取一支干凈的10 ？l 色譜進樣針用萃取溶劑清洗至少20次，以確保針筒和針尖內沒有氣泡殘留 （3） 用進樣針吸2.2 ？L 萃取溶劑，針尖穿透樣品瓶的隔墊，小心按下進樣器的活塞，使溶劑懸于針尖，在樣品上空1 cm 處形成一個小液滴 （4） 接通電源，攪拌樣品溶液，萃取30 min，確保水浴的溫度始終控制在40℃ （5） 收回萃取溶劑液滴到進樣針內，并將針移出樣品瓶，直接進GC-MS進行分析。

2.結果與討論

2.1 LPME條件的優(yōu)化

2.1.1 萃取溶劑的選擇

萃取溶劑在液相微萃取中對萃取效率的影響最大。本實驗中考察了烷烴類、苯類、醇類對甲醛的萃取效率。選用正己烷、石油醚、乙酸乙酯、十二烷為萃取溶劑，分別在室溫，攪拌速度為200r/min的條件下萃取30min。從實驗結果上看，十二烷的萃取效果最好。故確定十二烷為萃取溶劑。

2.1.2 萃取溫度的影響

升高萃取溫度有助于分析物從基體中脫離出來，也有利于提高分析物的擴散速度，從而提高分析速度。本實驗研究溫度從30到80℃范圍內對萃取效率的影響。結果表明，溫度在40℃以后萃取效率的變化不大，而且40℃比較容易控制，重復性好。因此本實驗采用40℃作為萃取溫度。

2.1.3 萃取時間的選擇

本實驗考察了萃取時間分別為10到60min時對甲醛萃取效率的影響。實驗結果表明，60min時的萃取效率最高。但是考慮到實驗操作的實際情況，最終選擇了30min作為萃取時間。

2.1.4 攪拌速度的影響

在液相微萃取過程中，攪拌樣品，有利于被分析物的揮出，可縮短達到平衡的時間，從而提高萃取效率。但是如果攪拌速度過快，2mL樣品瓶內的樣品會產生很大的渦旋，影響萃取過程中懸掛液滴的穩(wěn)定性。因此，考察了攪拌速度從0～500r/min時對萃取效率的影響。最后確定攪拌速度為200r/min。

2.2 線性范圍、檢出限和富集倍數

分別配置甲醛的濃度為0.5、5、10、40、80 mg/L的標準溶液；用“1.3”節(jié)的實驗條件進行萃取、測定。得到如表1的標準曲線。從表1可以看出，在所測定的濃度范圍內甲醛的線性關系良好，符合檢測的要求。

2.3 加標回收率及實際水發(fā)產品樣品的測定

選擇S/N=3時的濃度為最低檢測限。本方法對甲醛的檢測限均為0.1mg/kg。選取同一干魷魚片加標后，分析測定其回收率，重復7次，得到的回收率為98.9%。

按照實驗方法對未經處理的10個水發(fā)產品樣品進行液相微萃取、測定。測得甲醛的含量在4.1～83.3 mg/kg之間。

3. 結論

應用在線衍生-液相微萃取法檢測水發(fā)產品中的甲醛，即快捷、省時，又需要樣品量少，在未來的檢測上有望普遍推廣。本研究建立了在線衍生-液相微萃取法檢測水發(fā)產品中的甲醛的方法?？煽焖?、靈敏地分析水發(fā)產品中甲醛的含量。

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基金項目：

吉林省質量技術監(jiān)督局科技計劃項目（2012ZJK11）。

作者簡介：

閻雪（1979～），女，吉林省通化人，研究生，主要從事色譜分析、質譜分析。