定量病理技術(shù)對(duì)腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌患者預(yù)后的評(píng)估探討

黃銳

【摘要】目的：探討定量病理技術(shù)對(duì)腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌患者治療的療效。方法：隨機(jī)選取2012年1月至2013年12月間到我院接受腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌治療的100例病人，采用定量病理技術(shù)和Feulgen染色技術(shù)，結(jié)合Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型，對(duì)影響腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌的因素進(jìn)行分析。結(jié)果：核面積、核周長(zhǎng)、DNA指數(shù)、核最大直徑、核最小直徑是影響乳腺癌預(yù)后的主要因素。結(jié)論：定量病理技術(shù)結(jié)合有效統(tǒng)計(jì)方法，是判斷腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌治療預(yù)后效果有效手段之一。

【關(guān)鍵詞】定量病理技術(shù)；乳腺癌；預(yù)后

【中圖分類號(hào)】R737.9 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1004-4949（2015）02-0040-01

腋窩淋巴結(jié)狀況是評(píng)價(jià)乳腺癌患者預(yù)后狀況的一個(gè)重要因素，大約有30%的腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌患者在術(shù)后十年內(nèi)面臨著復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)。尋找出淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以外的預(yù)后判斷指標(biāo)，盡早篩選出存在潛在轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)的患者，給予及時(shí)控制，是提高腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌治療療效的關(guān)鍵。隨機(jī)選取2012年1月至2013年12月間到我院接受腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌治療的100例病人，我們采用定量病理技術(shù)和Feulgen染色技術(shù)，結(jié)合Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型，對(duì)影響腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌的因素進(jìn)行分析。探討其對(duì)腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌預(yù)后情況判斷的實(shí)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 基本資料

隨機(jī)選取2012年1月至2013年12月間到我院接受腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌治療的100例病人，手術(shù)之前均符合以下條件：手術(shù)前沒有出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，未經(jīng)化療；臨床、病理和隨訪資料完整；保存有完整腫瘤原發(fā)灶蠟塊。全部病例均為女性，年齡在26到75歲之間。絕經(jīng)前20例，絕經(jīng)后80例。原發(fā)腫瘤≤2cm，62例；2cm<原發(fā)腫瘤≤5cm，35例；原發(fā)腫瘤>5cm，3例。100例病例中，術(shù)后五年內(nèi)轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)的17例，占17%，均以臨床、CT、B超或者全身骨掃描結(jié)果作為依據(jù)。

1.2治療方法

100例的存檔蠟塊，每一例進(jìn)行4um厚的連續(xù)切片兩張，在嚴(yán)格的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)下分別進(jìn)行Feulgen和HE染色，經(jīng)過Feulgen染色后細(xì)胞核DNA呈現(xiàn)出紫紅色。病例醫(yī)師對(duì)HE染色切片進(jìn)行組織學(xué)分級(jí)，一級(jí)15例，二級(jí)41例，三級(jí)44例。對(duì)Feulgen染色切片進(jìn)行腫瘤細(xì)胞核原位定量測(cè)定，把切片放大四百倍，每一例隨機(jī)測(cè)量大于50的淋巴細(xì)胞以及沒有重疊的100到200個(gè)腫瘤細(xì)胞。測(cè)量參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)：（1）形態(tài)結(jié)構(gòu)參數(shù)：核面積、核周長(zhǎng)、核最大直徑、核最小直徑以及核形狀因子；（2）DNA倍體分析：每一例的分析都以同一切片中淋巴細(xì)胞DNA的平均值為兩倍體的對(duì)照值；（3）DNA定量指標(biāo)：DNA指數(shù)=腫瘤細(xì)胞核DNA A值/淋巴細(xì)胞核DNA A值。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

計(jì)量資料采用本次研究中的數(shù)據(jù)處理應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS10.0進(jìn)行處理；計(jì)量資料應(yīng)用單因素方差分析；計(jì)數(shù)資料應(yīng)用秩和檢驗(yàn)；數(shù)據(jù)表示采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（X±s）；若p<0.05，表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

（1）100例乳腺癌病理判斷一致性檢驗(yàn)：p<0.05，診斷一致性程度理想；（2）細(xì)胞核形態(tài)參數(shù)比較：全部手術(shù)后五年內(nèi)沒有出現(xiàn)復(fù)發(fā)或者遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，除了形狀因子外，兩組之間具有顯著差異（見表1）；（3）細(xì)胞核DNA含量以及倍體分布比較：復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組和無(wú)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組倍體分布以及細(xì)胞核DNA含量分布具有顯著差異；（4）Cox模型對(duì)因素分析：最終結(jié)果表明對(duì)腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌患者預(yù)后情況有顯著影響的因素是核面積、核周長(zhǎng)、DNA指數(shù)、核最大直徑、核最小直徑。

3.討論

我們對(duì)到我院接受腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌治療的100例病人預(yù)后情況進(jìn)行了研究，為了對(duì)腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌的預(yù)后判斷提供一個(gè)可靠客觀的指標(biāo)，為術(shù)后患者的康復(fù)提供科學(xué)的依據(jù)。

腫瘤細(xì)胞核的形態(tài)變化代表了細(xì)胞的生物學(xué)行為、分化程度以及預(yù)后。相關(guān)研究表明，決定局部復(fù)發(fā)的重要因素是核異質(zhì)性。對(duì)于形態(tài)的變化，傳統(tǒng)的做法是進(jìn)行定性描述，運(yùn)用圖像分析將其量化，并且可以代表核異質(zhì)性這一特點(diǎn)。通過對(duì)本組病例的分析，可以發(fā)現(xiàn)無(wú)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組相對(duì)于復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組的細(xì)胞核面積、核周長(zhǎng)、核最大直徑、核最小直徑乳腺癌小；核形狀因子兩組之間的差異不顯著，表明了單純用形狀因子不能反映出腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌細(xì)胞核形態(tài)的變化特點(diǎn)，而需要結(jié)合其他的核參數(shù)進(jìn)行綜合分析。

對(duì)于腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌倍體分析和細(xì)胞核的DNA含量，相關(guān)科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn)，二倍體患者的五年生存率要明顯高于非整倍體乳腺癌患者；細(xì)胞核DNA的含量過高是部分患者預(yù)后較差的原因之一。通過本次研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組乳腺癌的DNA指數(shù)要明顯高于無(wú)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組。

定量病理學(xué)是利用多種方法和手段，獲得描述生物微觀形態(tài)或者宏觀組織的數(shù)據(jù)圖像，從量化的角度描述發(fā)病原因、病變特征以及發(fā)病機(jī)理。包括了形態(tài)結(jié)構(gòu)定量、DNA含量以及倍體分析。圖像分析可以獲得核面積、核周長(zhǎng)等形態(tài)參數(shù)，保留完整的細(xì)胞組織形態(tài)，并且操作簡(jiǎn)單，可以使形態(tài)觀察和定量測(cè)定同步進(jìn)行，更加適合臨床中腫瘤病理的研究。我們采取DNA特染技術(shù)，能夠真實(shí)反映細(xì)胞核的DNA含量，提高了待測(cè)DNA成分的可測(cè)性和表達(dá)性。同時(shí)，還可以利用石蠟切片，對(duì)臨床回顧性資料進(jìn)行研究，簡(jiǎn)單快速穩(wěn)定。

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