分子排阻色譜法測定馬羅匹坦注射液中磺丁倍他環(huán)糊精鈉的含量

于曉輝等

摘要[目的] 建立馬羅匹坦注射液中磺丁倍他環(huán)糊精鈉的含量測定方法。[方法] 采用分子排阻色譜法，以0.1 mol/L硝酸鉀溶液-甲醇（65∶35）為流動相，采用分子排阻色譜法檢測馬羅匹注射液中磺丁倍他環(huán)糊精鈉的含量。[結(jié)果] 磺丁倍他環(huán)糊精鈉與相鄰峰的分離度均大于3.0；在6～180 μg范圍內(nèi)峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系（r=0.999 9，n=8）；在80%、100%、120% 3種添加水平下的平均回收率分別為95.96%（RSD=0.5%，n=3）、98.41% （RSD=0.4%，n=3）、97.77%（RSD=0.5%，n=3）。[結(jié)論] 該方法專屬性強、準(zhǔn)確度好、適應(yīng)范圍寬，可作為馬羅匹坦注射液中磺丁倍他環(huán)糊精鈉的含量測定方法。

關(guān)鍵詞磺丁倍他環(huán)糊精鈉；馬羅匹坦注射液；分子排阻色譜法

中圖分類號S859.79文獻(xiàn)標(biāo)識碼

A文章編號0517-6611（2015）21-154-03

馬羅匹坦是1型神經(jīng)激肽（NK1）的受體拮抗劑，可通過抑制P物質(zhì)（引起嘔吐的關(guān)鍵性神經(jīng)遞質(zhì)）而作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)。馬羅匹坦注射液可以用于預(yù)防和治療犬的急性嘔吐。

磺丁倍他環(huán)糊精鈉（SBECD）作為賦形劑添加于馬羅匹坦注射液中，由于其對含氮類藥物具有特殊的親和力和包合性，因此主要用于提高藥物的溶解性和生物利用度。但是，有研究發(fā)現(xiàn)重復(fù)給藥時容易出現(xiàn)腎臟蓄積，因此需要對制劑中SBECD的含量進(jìn)行準(zhǔn)確控制。筆者采用分子排阻色譜法測定了馬羅匹坦注射液中SBECD的含量，并對其進(jìn)行了方法學(xué)考察。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1主要試劑。磺丁倍他環(huán)糊精鈉對照品，純度95.8%，購自美國輝瑞公司；馬羅匹坦注射液購自美國輝瑞公司；甲醇，色譜純；水為超純水；其他試劑均為分析純。

1.1.2主要儀器。高效液相色譜儀， 2695型，配有410示差折光檢測器和EmpowerⅡ工作站，為美國Waters公司產(chǎn)品；電子分析天平，AE240型，為瑞士METTLERTOLEDO公司產(chǎn)品。

1.2方法

1.2.1色譜條件。色譜柱為YMCDiol60（8.0 mm×300 mm，5 μm），柱溫為35 ℃；流動相為0.1 mol/L硝酸鉀溶液-甲醇（65∶35），流速2.0 ml/min；示差折光檢測器，檢測器溫度為35 ℃；進(jìn)樣量為10 μl。

1.2.2溶液制備。

1.2.2.1SBECD對照品儲備液。取SBECD對照品約600 mg，精密稱量，置于10 ml量瓶中，加入流動相使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得濃度約為60 mg/ml的對照品儲備液。

1.2.2.2樣品溶液。精密量取馬羅匹坦注射液1 ml，置于10 ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即得樣品溶液。

1.2.2.3陰性樣品溶液。按照馬羅匹坦注射液的處方，配制不含有SBECD的陰性樣品；按照“1.2.2.2”中樣品溶液的制備方法，配制陰性樣品溶液。

1.2.3方法學(xué)考察。

1.2.3.1專屬性考察。精密量取對照品儲備液1 ml，置于10 ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，即得對照品溶液。精密量取對照品溶液和陰性樣品溶液各10 μl，按照“1.2.1”中的色譜條件進(jìn)行測定，記錄色譜圖。

1.2.3.2線性關(guān)系考察。精密量取對照品儲備液0.1、0.2、0.3、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0 ml，分別置于10 ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即得到濃度分別為0.6、1.2、1.8、3.0、6.0、9.0、12.0、18.0 mg/ml的對照品溶液。按照“1.2.1”中的色譜條件，進(jìn)樣測定，記錄色譜圖，以濃度X（mg/ml）對峰面積Y作圖，并進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。

1.2.3.3精密度試驗。精密量取對照品儲備液1 ml置于10 ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即得到濃度約為6 mg/ml的對照品溶液，按照“1.2.1”中的色譜條件進(jìn)樣測定，連續(xù)進(jìn)樣6次，計算SBECD峰面積的RSD。

1.2.3.4穩(wěn)定性試驗。 取制備的樣品溶液，分別于0、8、16、24、32、48 h按照“1.2.1”中的色譜條件進(jìn)樣測定，計算SBECD峰面積的RSD。

1.2.3.5加樣回收率試驗。按照“1.2.1”中的色譜條件，對馬羅匹坦注射液中SBECD的含量進(jìn)行測定，結(jié)果其含量為62.13 mg/ml。

精密量取馬羅匹坦注射液0.5 ml，共量取9份，分別置于10 ml量瓶中；每3份為1組，將上述9份樣品分為3組，每組分別精密加入SBECD對照品儲備液0.4、0.5、0.6 ml，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即得到添加水平約為80%、100%和120%的3組樣品，按照“1.2.1”中的色譜條件分別進(jìn)樣測定，計算加樣回收率。

1.2.3.6檢出限和定量限。按照“1.2.2”中對照品儲備液的配制方法制備不同濃度的SBECD對照品溶液，按照“1.2.1”中的色譜條件進(jìn)樣測定，計算信噪比。信噪比為3和10時的濃度即分別為SBECD的檢出限和定量限。

1.2.4樣品含量的測定。 按照“1.2.2”中對照品儲備液的配制方法，制備濃度約為6 mg/ml的SBECD對照品溶液，精密吸取樣品溶液和對照品溶液各10 μl，按照“1.2.1”中的色譜條件進(jìn)行測定，記錄色譜圖，按照外標(biāo)法以峰面積計算馬羅匹坦注射液中SBECD的含量。

2結(jié)果與分析

2.1方法學(xué)考察

2.1.1專屬性考察。從圖1可以看出，陰性樣品在SBECD色譜峰位置處無吸收峰，表明樣品中的其他成分對SBECD的測定結(jié)果無干擾。