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    分子排阻色譜法測定馬羅匹坦注射液中磺丁倍他環(huán)糊精鈉的含量

    2015-10-21 19:11:20于曉輝等
    安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 2015年21期

    于曉輝等

    摘要[目的] 建立馬羅匹坦注射液中磺丁倍他環(huán)糊精鈉的含量測定方法。[方法] 采用分子排阻色譜法,以0.1 mol/L硝酸鉀溶液-甲醇(65∶35)為流動相,采用分子排阻色譜法檢測馬羅匹注射液中磺丁倍他環(huán)糊精鈉的含量。[結(jié)果] 磺丁倍他環(huán)糊精鈉與相鄰峰的分離度均大于3.0;在6~180 μg范圍內(nèi)峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系(r=0.999 9,n=8);在80%、100%、120% 3種添加水平下的平均回收率分別為95.96%(RSD=0.5%,n=3)、98.41% (RSD=0.4%,n=3)、97.77%(RSD=0.5%,n=3)。[結(jié)論] 該方法專屬性強、準(zhǔn)確度好、適應(yīng)范圍寬,可作為馬羅匹坦注射液中磺丁倍他環(huán)糊精鈉的含量測定方法。

    關(guān)鍵詞磺丁倍他環(huán)糊精鈉;馬羅匹坦注射液;分子排阻色譜法

    中圖分類號S859.79文獻(xiàn)標(biāo)識碼

    A文章編號0517-6611(2015)21-154-03

    馬羅匹坦是1型神經(jīng)激肽(NK1)的受體拮抗劑,可通過抑制P物質(zhì)(引起嘔吐的關(guān)鍵性神經(jīng)遞質(zhì))而作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)。馬羅匹坦注射液可以用于預(yù)防和治療犬的急性嘔吐。

    磺丁倍他環(huán)糊精鈉(SBECD)作為賦形劑添加于馬羅匹坦注射液中,由于其對含氮類藥物具有特殊的親和力和包合性,因此主要用于提高藥物的溶解性和生物利用度。但是,有研究發(fā)現(xiàn)重復(fù)給藥時容易出現(xiàn)腎臟蓄積,因此需要對制劑中SBECD的含量進(jìn)行準(zhǔn)確控制。筆者采用分子排阻色譜法測定了馬羅匹坦注射液中SBECD的含量,并對其進(jìn)行了方法學(xué)考察。

    1材料與方法

    1.1材料

    1.1.1主要試劑。磺丁倍他環(huán)糊精鈉對照品,純度95.8%,購自美國輝瑞公司;馬羅匹坦注射液購自美國輝瑞公司;甲醇,色譜純;水為超純水;其他試劑均為分析純。

    1.1.2主要儀器。高效液相色譜儀, 2695型,配有410示差折光檢測器和EmpowerⅡ工作站,為美國Waters公司產(chǎn)品;電子分析天平,AE240型,為瑞士METTLERTOLEDO公司產(chǎn)品。

    1.2方法

    1.2.1色譜條件。色譜柱為YMCDiol60(8.0 mm×300 mm,5 μm),柱溫為35 ℃;流動相為0.1 mol/L硝酸鉀溶液-甲醇(65∶35),流速2.0 ml/min;示差折光檢測器,檢測器溫度為35 ℃;進(jìn)樣量為10 μl。

    1.2.2溶液制備。

    1.2.2.1SBECD對照品儲備液。取SBECD對照品約600 mg,精密稱量,置于10 ml量瓶中,加入流動相使溶解并稀釋至刻度,搖勻,即得濃度約為60 mg/ml的對照品儲備液。

    1.2.2.2樣品溶液。精密量取馬羅匹坦注射液1 ml,置于10 ml量瓶中,用流動相稀釋至刻度,搖勻,即得樣品溶液。

    1.2.2.3陰性樣品溶液。按照馬羅匹坦注射液的處方,配制不含有SBECD的陰性樣品;按照“1.2.2.2”中樣品溶液的制備方法,配制陰性樣品溶液。

    1.2.3方法學(xué)考察。

    1.2.3.1專屬性考察。精密量取對照品儲備液1 ml,置于10 ml量瓶中,用流動相稀釋至刻度,即得對照品溶液。精密量取對照品溶液和陰性樣品溶液各10 μl,按照“1.2.1”中的色譜條件進(jìn)行測定,記錄色譜圖。

    1.2.3.2線性關(guān)系考察。精密量取對照品儲備液0.1、0.2、0.3、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0 ml,分別置于10 ml量瓶中,用流動相稀釋至刻度,搖勻,即得到濃度分別為0.6、1.2、1.8、3.0、6.0、9.0、12.0、18.0 mg/ml的對照品溶液。按照“1.2.1”中的色譜條件,進(jìn)樣測定,記錄色譜圖,以濃度X(mg/ml)對峰面積Y作圖,并進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。

    1.2.3.3精密度試驗。精密量取對照品儲備液1 ml置于10 ml量瓶中,用流動相稀釋至刻度,搖勻,即得到濃度約為6 mg/ml的對照品溶液,按照“1.2.1”中的色譜條件進(jìn)樣測定,連續(xù)進(jìn)樣6次,計算SBECD峰面積的RSD。

    1.2.3.4穩(wěn)定性試驗。 取制備的樣品溶液,分別于0、8、16、24、32、48 h按照“1.2.1”中的色譜條件進(jìn)樣測定,計算SBECD峰面積的RSD。

    1.2.3.5加樣回收率試驗。按照“1.2.1”中的色譜條件,對馬羅匹坦注射液中SBECD的含量進(jìn)行測定,結(jié)果其含量為62.13 mg/ml。

    精密量取馬羅匹坦注射液0.5 ml,共量取9份,分別置于10 ml量瓶中;每3份為1組,將上述9份樣品分為3組,每組分別精密加入SBECD對照品儲備液0.4、0.5、0.6 ml,用流動相稀釋至刻度,搖勻,即得到添加水平約為80%、100%和120%的3組樣品,按照“1.2.1”中的色譜條件分別進(jìn)樣測定,計算加樣回收率。

    1.2.3.6檢出限和定量限。按照“1.2.2”中對照品儲備液的配制方法制備不同濃度的SBECD對照品溶液,按照“1.2.1”中的色譜條件進(jìn)樣測定,計算信噪比。信噪比為3和10時的濃度即分別為SBECD的檢出限和定量限。

    1.2.4樣品含量的測定。 按照“1.2.2”中對照品儲備液的配制方法,制備濃度約為6 mg/ml的SBECD對照品溶液,精密吸取樣品溶液和對照品溶液各10 μl,按照“1.2.1”中的色譜條件進(jìn)行測定,記錄色譜圖,按照外標(biāo)法以峰面積計算馬羅匹坦注射液中SBECD的含量。

    2結(jié)果與分析

    2.1方法學(xué)考察

    2.1.1專屬性考察。從圖1可以看出,陰性樣品在SBECD色譜峰位置處無吸收峰,表明樣品中的其他成分對SBECD的測定結(jié)果無干擾。

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