HIV快速檢測(cè)在替代策略中的應(yīng)用研究

吳學(xué)美 王禹鑫 雷壽熊 白子匡 王興金

【摘 要】目的 通過對(duì)昭通市2015年1-6月445份艾滋病病毒（HIV）抗體檢測(cè)結(jié)果、2006年-2014年的123例確證陰性標(biāo)本和110例不確定標(biāo)本用2種快速試劑復(fù)核及WB帶型的分析，探討HIV抗體快速檢測(cè)替代策略應(yīng)用的可行性。方法 對(duì)所有篩查陽性標(biāo)本同時(shí)用2種免疫層析試驗(yàn)（RT）、1種酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）及免疫印跡法（WB）檢測(cè)，并對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果 445份初篩陽性的標(biāo)本中：434份兩種快速檢測(cè)結(jié)果均為陽性的，426份WB結(jié)果為陽性，8份WB結(jié)果為不確定；11份2種快速檢測(cè)結(jié)果為1陰1陽的，5份WB結(jié)果為不確定，6份WB結(jié)果為陰性；110份WB不確定樣本中，41份兩種快速檢測(cè)結(jié)果為陽性，69份兩種快速檢測(cè)結(jié)果為1陰1陽；123份WB結(jié)果為陰性的樣本，快速檢測(cè)結(jié)果均為1陰1陽。結(jié)論 兩種快速試劑檢測(cè)結(jié)果均為陽性與WB結(jié)果符合率為98.16%，兩種快速試劑檢測(cè)結(jié)果為1陰1陽的WB結(jié)果無1例為陽性。

【關(guān)鍵詞】HIV；快速檢測(cè)；替代策略

經(jīng)典的HIV確證檢測(cè)免疫印跡試驗(yàn)（WB）成本比較高，檢測(cè)要求高，確證實(shí)驗(yàn)室集中檢測(cè)，開展的頻率有限，時(shí)效性并不高。作為控制傳染源的重要措施之一，早發(fā)現(xiàn)早治療感染者已成為防治艾滋病的一個(gè)非常重要的環(huán)節(jié)。探討尋求一種成本低、檢測(cè)方便、時(shí)效高的檢測(cè)方法是控制好傳染源方法之一。

一.材料及方法

1.樣本來源

選取2015年1-6月昭通市各檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室篩查陽性送確證樣本445份：其中男性290例，女性155例，年齡2-84歲；2006年-2014年確證檢測(cè)不確定樣本110例和陰性樣本123例。

2.試劑

1）篩查試劑 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA），采用英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司生產(chǎn)的HIV1+2抗體診斷試劑盒；高敏感性快速檢測(cè)試劑為美國(guó)雅培HIV1+2型膠體硒法試劑，高特異性快速試劑為韓國(guó)SD膠體金法試劑。

2）確證試劑 新加坡MP生物醫(yī)學(xué)亞太私人有限公司生產(chǎn)的Gene lab HIV Blot2.2人類免疫缺陷病毒（HIV1+2）抗體免疫印跡試驗(yàn)。

所有試劑批檢合格，在有效期內(nèi)使用。

3.儀器

1）洗板機(jī)美國(guó)寶特（Bio-Tek）ELx50，酶標(biāo)儀美國(guó)BioTek ELx808。

2）全自動(dòng)免疫印跡儀TECAN ProfiBlt 48。

3）快速法用目測(cè)。

4.方法

對(duì)所有HIV初篩陽性送檢樣本均進(jìn)行復(fù)檢，用兩種快速檢測(cè)和酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）進(jìn)行檢測(cè)，三種結(jié)果均陰性，則報(bào)告陰性，有一種、兩種或三種陽性者則進(jìn)行免疫印跡試驗(yàn)（WB）。對(duì)于既往確證不確定及陰性的樣本用兩種快速試劑復(fù)核。

5.判定標(biāo)準(zhǔn)

快速試驗(yàn)依據(jù)雅培、韓國(guó)SD試劑說明書、《艾滋病病毒抗體快速檢測(cè)技術(shù)手冊(cè)》2011年版【2】的要求進(jìn)行判讀。免疫印跡試驗(yàn)（WB）依據(jù)《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》2009年版【3】和MP生物醫(yī)學(xué)亞太私人有限公司Gene lab HIV Blot2.2試劑使用說明書的結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)，HIV抗體陽性為特異性條帶出現(xiàn)滿足陽性標(biāo)準(zhǔn)的既判為陽性。

二.結(jié)果

1.445份標(biāo)本快速檢測(cè)結(jié)果與WB結(jié)果見表1

表1.快速檢測(cè)結(jié)果與WB結(jié)果

快速法 數(shù)量 WB結(jié)果 陽性符合率（%）

陽性 不確定 陰性

雙陽

1陰1陽 434

11 426

0 8

5 0

6 98.16

0

合計(jì) 445 426 13 6 95.73

445份篩查陽性的樣本中，WB結(jié)果為陽性的僅占95.73%，不確定的占2.92%，陰性的占1.35%；兩種快速檢測(cè)結(jié)果均為陽性的434份樣本中，WB結(jié)果為陽性的率高達(dá)98.16%，1.84%為不確定，沒有陰性樣本；兩種快速檢測(cè)結(jié)果為1陰1陽的11份樣本中，WB結(jié)果沒有陽性，只有45.45%的為不確定，54.55%的為陰性。

2.110份不確定樣本和123份陰性樣本復(fù)核結(jié)果見表2

表2.不確定及陰性樣本復(fù)核結(jié)果

樣本 數(shù)量 快速檢測(cè)

雙陽 單陽 陰性

WB不確定 110 41 69 0

WB陰性 123 0 123 0

合計(jì) 233 41 192 0

110份WB不確定樣本中，兩種快速試劑檢測(cè)結(jié)果均為陽性的樣本有41份（37.3%），結(jié)果為1陰1陽的樣本有69份（62.7%）；而在123份WB陰性的樣本中，兩種快速試劑檢測(cè)結(jié)果均為陽性的樣本為0，結(jié)果為1陰1陽的樣本有123份（100%）。

三、討論

目前，全國(guó)艾滋?。ˋIDS）疫情流行快速增長(zhǎng)的趨勢(shì)已經(jīng)得到控制，但昭通市的疫情卻處于不斷上升趨勢(shì)?，F(xiàn)行的HIV抗體篩查和確證實(shí)驗(yàn)[酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）和免疫印跡試驗(yàn)（WB）]策略成本高、檢測(cè)要求高、篩查到確證的時(shí)效性不高，導(dǎo)致HIV檢測(cè)的可及性受到一定的影響，成為艾滋病檢測(cè)的不利因素【4】。使艾滋病的預(yù)防和控制工作受到影響。因此，研究HIV抗體檢測(cè)經(jīng)典確證方法的替代策略，應(yīng)用現(xiàn)有的用于HIV抗體檢測(cè)的幾種快速試劑聯(lián)合檢測(cè)，代替經(jīng)典的ELISA和WB的確證組合，以期在檢測(cè)結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性不降低的情況下，使檢測(cè)時(shí)間、檢測(cè)成本降低，從而提高檢測(cè)的可及性。

本次研究的445例樣本中，兩種快速試劑檢測(cè)結(jié)果均為陽性的434例樣本，免疫印跡試驗(yàn)陽性率為98.16%，不確定的8例樣本（1.84%）；而兩種快速試劑檢測(cè)1陰1陽的11例樣本，免疫印跡試驗(yàn)無1例陽性結(jié)果，只有5例不確定和6例陰性結(jié)果。進(jìn)一步對(duì)2006年-2014年的110例不確定樣本和123例免疫印跡試驗(yàn)陰性樣本用兩種快速試劑復(fù)核，發(fā)現(xiàn)110例樣本中有41例復(fù)核結(jié)果為雙陽，69例為1陰1陽；123例陰性樣本復(fù)核結(jié)果全為1陰1陽，無雙陽結(jié)果。

鑒于兩種快速試劑檢測(cè)均為陽性的樣本，免疫印跡試驗(yàn)（WB）陽性率僅為98.16%，所以單純快速檢測(cè)陽性不能替代確證試驗(yàn)；兩種快速試劑檢測(cè)結(jié)果為1陰1陽的樣本，免疫印跡試驗(yàn)（WB）無陽性，只有一半不到的樣本為不確定結(jié)果，其余均為陰性，所以兩種快速試劑檢測(cè)結(jié)果為1陰1陽的樣本建議隨訪觀察。

參考文獻(xiàn)：

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