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    蘋果屬Dw矮化基因試材組培苗受植物內(nèi)源激素ABA調(diào)控的研究

    2015-10-21 07:04:35趙國芳
    現(xiàn)代農(nóng)業(yè) 2015年4期
    關(guān)鍵詞:培苗矮化定子

    趙國芳

    遼寧省興城市中等職業(yè)技術(shù)專業(yè)學(xué)校

    蘋果屬Dw矮化基因試材組培苗受植物內(nèi)源激素ABA調(diào)控的研究

    趙國芳

    遼寧省興城市中等職業(yè)技術(shù)專業(yè)學(xué)校

    根據(jù)各國果樹發(fā)展,矮化密植已成為當(dāng)前蘋果集約化栽培的主要方式,我國的蘋果生產(chǎn)也正朝著由稀植到密植,由粗放管理到精細(xì)管理、由低質(zhì)量向高質(zhì)量方向發(fā)展,并逐步實(shí)現(xiàn)蘋果生產(chǎn)的集約化、無病毒化、密植矮化、果品無公害化等。文章以扎矮山定子為材料,應(yīng)用外施植物生長調(diào)節(jié)劑對組培苗進(jìn)行研究,觀察這激素是否對植株有影響。

    扎矮山定子組織培養(yǎng)激素敏感性矮化機(jī)理

    植物矮化突變體是進(jìn)行植物發(fā)育生物學(xué)研究的重要材料,對植物發(fā)育研究與農(nóng)業(yè)生產(chǎn)有極其重要的意義。近年來,植物學(xué)家對植物矮化相關(guān)基因的遺傳學(xué)、矮化突變體的激素調(diào)控以及矮化相關(guān)基因的克隆和利用等方面開展了廣泛而深入的研究。利用基因工程手段控制植物株高來控制農(nóng)作物生長是未來農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上成本更低廉、效益更高的增產(chǎn)措施。利用這些基因控制信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)從而獲得適合的株高,將是未來農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的重要手段。

    “扎矮山定子”基因型為Dwdw雜合體,它可使嫁接在其上的東光蘋果樹體矮化,株僅為對照植株的一半。而且當(dāng)其與普通山定子(dwdw)雜交后,F(xiàn)1代中高株與矮株的比例為1∶1。為了得出“扎矮山定子”是否是ABA內(nèi)源激素的突變體,因此對DW基因突變體及非突變體的組培苗和實(shí)生苗進(jìn)行激素處理。判斷DW基因突變類型與已知的類型是否具有相似性,揭示“扎矮山定子”的矮生機(jī)理。為進(jìn)一步從分子水平上研究提供突破口。由于蘋果屬植物生長周期長、自交親和力差、基因型復(fù)雜、種子繁殖無法保持矮化性狀等自然屬性的存在,因而利用組織培養(yǎng)加快其生長。

    一、材料與方法

    1.試驗(yàn)材料

    首先,將“扎矮山定子”母株自然授粉的種子進(jìn)行層積處理,然后待種子具備萌芽生長能力而又未長出胚根時(shí),將種子用清水沖洗1小時(shí)以上,先用70%酒精消毒35s,倒出多余酒精,直接加入0.1%HgCl2振蕩滅菌10分鐘,殘余酒精可增強(qiáng)HgCl2的殺菌效果,無菌水沖洗4~5遍,最后接入MS培養(yǎng)基當(dāng)中。等到種子萌發(fā)后,選擇生長勢比較一致的普通型苗和矮生型苗進(jìn)行擴(kuò)繁培養(yǎng)。

    2.試驗(yàn)方法

    (1)組培苗對外源ABA的敏感性試驗(yàn)方法。試驗(yàn)選擇4個(gè)ABA的濃度梯度,濃度由低到高分別為:0.05、0.1、0.5、2.5毫克/升,設(shè)1組對照,用無菌水代替ABA水溶液。先配制1毫克/10毫升的ABA母液,稱10毫克ABA原藥,用少量90%乙醇完全溶解,然后加水定容至100毫升。不同濃度ABA培養(yǎng)基配制見表1。每個(gè)濃度處理做培養(yǎng)基0.5L,可以裝16瓶,這樣每種類型的苗可以重復(fù)8次,共需要96瓶。30天后對每瓶苗進(jìn)行形態(tài)指標(biāo)的測定,測定指標(biāo)包括:株高、葉片數(shù)、節(jié)間數(shù)。

    表1 不同濃度ABA溶液配制

    培養(yǎng)基做好后暫時(shí)存放于遮蔭處,一周左右觀察培養(yǎng)基是否污染,選擇未污染的培養(yǎng)基進(jìn)行實(shí)驗(yàn)(我們在試驗(yàn)過程中極少發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基污染)。然后將經(jīng)過MS培養(yǎng)基15天空白培養(yǎng)的兩類組培苗按要求轉(zhuǎn)接在含不同濃度ABA的培養(yǎng)基當(dāng)中,組培苗的大小保證一致,全部剪成近似1厘米長莖段,去掉全部的葉片(使試材保持齊整,葉片數(shù)為0,這樣增加的葉片數(shù)可作為描述生長量的指標(biāo))。在每瓶中轉(zhuǎn)接6個(gè)植株,所需A62苗與DW苗的數(shù)量分別為288株。瓶上注明材料類型及處理編號(hào)。

    圖2 不同濃度ABA培養(yǎng)基對組培苗株高的影響

    二、結(jié)果與分析

    1.不同類型組培苗對外源ABA的敏感性

    (1)不同濃度ABA處理對組培苗株高的影響。從圖2中可以看出,ABA處理對兩種類型苗有一定的抑制作用,4種ABA濃度處理的株高均比對照小??傮w來說,隨著ABA濃度的升高,組培苗的株高逐漸減少。只有3號(hào)處理D類苗有些異常,可能是測量誤差造成的。從圖中植株變化趨勢看D類苗對ABA不敏感。

    (2)不同濃度ABA處理對組培苗葉片數(shù)的影響。從圖3中可以看出,ABA處理的兩種類型苗的葉片數(shù)在4~4.6之間,只有對照的葉片數(shù)超過4.7片,說明ABA對組培苗葉片數(shù)也有抑制作用。從圖中葉片數(shù)變化趨勢看D類苗對ABA不敏感。組培苗的節(jié)間數(shù)均為1個(gè)左右,因此數(shù)據(jù)未列出。

    三、結(jié)論

    實(shí)驗(yàn)表明,經(jīng)ABA處理的兩種類型組培苗從植株變化趨勢看,D苗與A苗的變化基本一致,即反應(yīng)不敏感。但是否受其它激素影響,可以在以后的試驗(yàn)中進(jìn)一步觀察鑒定。

    圖3 不同濃度ABA培養(yǎng)基對組培苗葉片數(shù)的影響

    [1]W alther W alder.Apple production in Italy and the South Tyrol:acreage,varieties and prognosis[J].Compact Fruit Tree,1998,31(4):1~5

    [2]楊朝選.種果樹要用矮化苗西北園藝果樹???,2003.4.

    [3]李山玉.植物生長調(diào)節(jié)劑在果樹上的應(yīng)用,2002.

    [4]王宏偉.甜櫻桃矮化砧木矮化機(jī)理研究.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文,2004.

    [5]喬志新.植物生長調(diào)節(jié)劑對蘋果屬DW基因資源生長和內(nèi)源赤霉屬特性的影響研究沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論,2003.

    [6]李宗偉.扎矮山定子矮生機(jī)理的研究沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué),2005.

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