封閉負(fù)壓引流技術(shù)對海水浸泡爆炸傷創(chuàng)面TNF-α表達(dá)和細(xì)菌指數(shù)的影響

馬永奇，梁獻(xiàn)平，石冰，張晨

（1.解放軍第三0九醫(yī)院整形外科北京100091；2.北京伊美爾醫(yī)療美容醫(yī)院北京100026；3.大連大學(xué)附屬新華醫(yī)院整形外科遼寧大連116021）

封閉負(fù)壓引流技術(shù)對海水浸泡爆炸傷創(chuàng)面TNF-α表達(dá)和細(xì)菌指數(shù)的影響

馬永奇1，梁獻(xiàn)平2，石冰1，張晨3

（1.解放軍第三0九醫(yī)院整形外科北京100091；2.北京伊美爾醫(yī)療美容醫(yī)院北京100026；3.大連大學(xué)附屬新華醫(yī)院整形外科遼寧大連116021）

目的：通過動態(tài)對比觀察封閉負(fù)壓引流技術(shù)（vacuum sealing drainage，VSD）對豬皮膚軟組織海水浸泡爆炸創(chuàng)傷面TNF-α表達(dá)和細(xì)菌指數(shù)的影響，尋找最適治療壓力范圍。方法：以5頭小型豬為實驗動物，于每頭豬的雙側(cè)臀部和肩胛部制造4個損傷程度相當(dāng)?shù)暮Ｋ荼▌?chuàng)面，清創(chuàng)后隨機(jī)分為對照組和實驗組（VSD-120mmHg負(fù)壓組、VSD-180mmHg負(fù)壓組、VSD-240mmHg負(fù)壓組），每組5個創(chuàng)面。對照組每天常規(guī)換藥，實驗組隔1天換1次VSD敷料，共治療9d，并動態(tài)觀察至所有創(chuàng)面愈合（即第58d），分別于治療前、治療后1d、3d、5d、7d、9d，取各組創(chuàng)面肉芽組織檢測TNF-α水平和細(xì)菌指數(shù)。結(jié)果：①治療后的前3d，實驗組與對照組間細(xì)菌指數(shù)差異不明顯，3d后，實驗組與對照組相比細(xì)菌指數(shù)明顯降低（P＜0.01），但相鄰不同壓力組間差異不明顯（P＞0.05）；②實驗組各組創(chuàng)面經(jīng)治療后細(xì)菌均由海水細(xì)菌向豬皮膚寄生菌過渡、由G-菌向G+菌過渡，而對照組細(xì)菌變化較實驗組相對緩慢；③各組創(chuàng)面在治療過程中肉芽組織的TNF-α水平均表現(xiàn)為先升高后逐漸下降。與對照組相比，實驗組上升、下降速度較快，峰值出現(xiàn)早且高，于第5天到峰值，之后快速下降（P＜0.01），以VSD-120mmHg組變化最快，其次是VSD-180mmHg組，但相鄰壓力組間差異不顯著（P＞0.05）。結(jié)論：在治療海水浸泡爆炸創(chuàng)面時，VSD技術(shù)可通過減少創(chuàng)面細(xì)菌指數(shù)、改變細(xì)菌構(gòu)成、調(diào)節(jié)TNF-α表達(dá)等減輕創(chuàng)面炎癥，促進(jìn)創(chuàng)面愈合。

封閉負(fù)壓引流；腫瘤壞死因子-α；海水浸泡；爆炸傷；細(xì)菌指數(shù)

對皮膚軟組織缺損較大、創(chuàng)緣不整、污染嚴(yán)重或伴有感染的創(chuàng)面，不能立即手術(shù)關(guān)閉，早期換藥顯得尤為重要。VSD技術(shù)作為一種特殊的創(chuàng)面處理方式，在治療各類復(fù)雜創(chuàng)面時，較常規(guī)療法具有明顯的優(yōu)勢，該技術(shù)被成功應(yīng)用于爆炸創(chuàng)面［1-4］，且療效顯著，但其在海水浸泡爆炸創(chuàng)面的應(yīng)用尚未見報道。本實驗?zāi)M海戰(zhàn)中爆炸所致的皮膚軟組織缺損合并海水浸泡，建立豬皮膚軟組織海水浸泡爆炸傷模型，探討VSD技術(shù)和常規(guī)療法對此類創(chuàng)面肉芽中TNF-α和細(xì)菌的影響，并觀察各組間是否存在差異。

1　材料和方法

1.1材料

冬季渤海海水平均指標(biāo)直接計數(shù)法細(xì)菌豐度9.02×108cell/L、生物變化量范圍18.04mg/m3（以C計）、分離培養(yǎng)法計數(shù)細(xì)菌豐度6.56×105CFU/L、水溫-1℃（實驗時放置室溫使水溫升至10℃）、鹽度31.0，表層海水密度26.0、PH8.0，水體中細(xì)菌主要類群為：γ-變形菌（36.5%）、厚壁菌門（12.3%）、藍(lán)菌門（12%）等［5-7］。堿性蛋白胨水（杭州天和微生物試劑有限公司）；營養(yǎng)肉湯（本院實驗室）；VITEK2 Compact全自動微生物分析儀、血瓊脂平板、麥康凱平板、SS平板、中國藍(lán)平板、TCBS瓊脂平板、GN和GP鑒定卡（法國Bio-Merieux公司）；快速革蘭氏染色液（珠海貝索生物技術(shù)有限公司）；Porcine TNF-αElisa kit（美國Abcam）。

1.2方法與分組

選取5頭4～6個月齡實驗小型豬（中國1號），雌雄不限，體重23～25kg，平均體重24kg，實驗前適應(yīng)性馴養(yǎng)1周，術(shù)前禁食水12h，肌注氯胺酮（0.05mg/kg）和鹽酸賽拉嗪注射液（0.2ml/kg）復(fù)合麻醉，麻醉前15min給予阿托品減少呼吸道分泌物。麻醉后洗凈皮膚，于雙側(cè)肩胛部、臀部肌肉發(fā)達(dá)處備皮，用雷管（660929F48841-56）在豬的肩胛部和臀部依次制造4個損傷程度相當(dāng)?shù)暮Ｋ荼▊麆?chuàng)面［8］，清創(chuàng)后隨機(jī)分為對照組和實驗組（VSD-120mmHg負(fù)壓組、VSD-180mmHg負(fù)壓組、VSD-240mmHg負(fù)壓組），每組5個創(chuàng)面，對照組每天常規(guī)換藥，實驗組創(chuàng)面清創(chuàng)后根據(jù)創(chuàng)面大小和形狀修剪VSD敷料，應(yīng)用半透性貼膜封閉創(chuàng)面，引流管鏈接負(fù)壓吸引器，根據(jù)實驗要求設(shè)置負(fù)壓值，VSD組隔1天換1次敷料，所有創(chuàng)面均治療9d，并動態(tài)觀察至所有創(chuàng)面愈合（即第58d），于治療前、治療后1d、3d、5d、7d、9d對各組創(chuàng)面肉芽組織進(jìn)行細(xì)菌指數(shù)和TNF-α濃度水平檢測，并對比觀察。每次取材均在常規(guī)消毒前，取材后各創(chuàng)面用碘伏常規(guī)消毒，盡量去除創(chuàng)面中的壞死組織，直至創(chuàng)面有新鮮的滲血，再用碘伏、生理鹽水沖洗創(chuàng)面。

1.3創(chuàng)面肉芽組織TNF-α酶聯(lián)免疫檢測

應(yīng)用雙抗體夾心法測定其水平。于治療前、治療后1d、3d、5d、7d、9d分別在創(chuàng)面不同位置取0.5cm×0.5cm×0.3cm大小肉芽組織，電子天平稱重約100mg，4℃預(yù)冷的PBS液（pH=7.4）沖洗組織2遍后立即放入液氮中速凍，解凍時先在冰上冰浴30min，融化后標(biāo)本保持在2～8℃的環(huán)境中，加入適量的4℃預(yù)冷的PBS液（pH=7.4），利用手工勻漿器將標(biāo)本充分勻漿，離心20min（3 000轉(zhuǎn)/min），取上清液，用豬TNF-α酶聯(lián)免疫試劑盒檢測上清液中TNF-α水平。1.4海水基礎(chǔ)細(xì)菌培養(yǎng)

取水樣3ml加入1ml增菌培養(yǎng)基，37.0℃恒溫箱中孵育24h，取表面培養(yǎng)物接種于分離培養(yǎng)基中，再放入37.0℃恒溫箱中孵育24h，觀察菌落特征，將優(yōu)勢菌落接種至分離平板，行VITEK2 Compact全自動微生物分析儀鑒定。

1.5創(chuàng)面細(xì)菌指數(shù)與革蘭氏染色

實驗組和對照組于治療前、治療后1d、3d、5d、7d、9d分別在創(chuàng)面表面不同點切去約0.5cm× 0.5cm×0.3cm的組織，電子天平稱重后剪碎，加入99倍的生理鹽水，用勻漿器勻漿，勻漿液按10倍比例稀釋（10×、100×、1 000×……），取100μl稀釋液分別接種到90mm的血瓊脂平板上，放入37℃孵育箱24h，計數(shù)血平板上的菌落數(shù)，并觀察菌落特征，將菌落做革蘭氏染色。每克組織內(nèi)的細(xì)菌數(shù)=1g/組織克數(shù)×菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)，再換算成對數(shù)指數(shù)。

1.6創(chuàng)面細(xì)菌分離培養(yǎng)與鑒定

實驗組和對照組于治療前、治療后1d、3d、5d、7d、9d用無菌咽拭子在創(chuàng)面表面取2次分泌物，分置于堿性蛋白胨水和營養(yǎng)肉湯中，37℃恒溫箱中增菌24h。取堿性蛋白胨水表面培養(yǎng)物接種于TCBS瓊脂平板上；取營養(yǎng)肉湯表面分泌物接種于分離平板上，37℃增菌24h，觀察菌落特征，并分別接種到分離平板上，行VITEK2 Compact全自動微生物分析儀鑒定。

1.7統(tǒng)計方法

數(shù)據(jù)統(tǒng)計采用SPSS 11.5統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析，測定結(jié)果均以（x±s）表示，采取多因變量方差分析方法，若P＜0.05為差異顯著，若P＜0.01為差異非常顯著，有統(tǒng)計學(xué)意義。

圖1　各組治療前后對比

2　結(jié)果

2.1創(chuàng)面觀察

治療前，各組創(chuàng)面基底蒼白，創(chuàng)周可見紅暈，紅暈內(nèi)皮膚腫脹蒼白，壞死范圍界線不清，堅韌無彈性。治療后，實驗組創(chuàng)面較清潔，表面滲出較少，顏色較紅潤，肉芽增生較活躍，創(chuàng)緣收縮較明顯，上皮爬行較快，以VSD-120mmHg組創(chuàng)面愈合最快，愈合時間最短；而對照組創(chuàng)面較污濁，表面滲出較多，顏色晦暗，肉芽增生、創(chuàng)緣收縮、上皮爬行均不明顯，早期創(chuàng)面有擴(kuò)大加深趨勢，少數(shù)創(chuàng)面出現(xiàn)化膿，創(chuàng)面愈合較差，愈合時間最長（圖1）。

2.2各組創(chuàng)面肉芽組織中不同時間TNF-α水平變化

治療后期間，各組創(chuàng)面肉芽組織中TNF-α水平變化呈單峰狀。與對照組相比，實驗組TNF-α水平上升、下降速度較快，峰值不僅出現(xiàn)早而且較高，于治療第5d達(dá)到峰值，以VSD-120mmHg組TNF-α水平變化最快，其次是VSD-180mmHg組；而對照組峰值出現(xiàn)晚且低，于治療第7d達(dá)峰值，之后緩慢下降。經(jīng)多因變量方差分析：治療5d后，實驗組與對照組間有明顯統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），VSD-120mmHg組與VSD-240mmHg組間有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），但相鄰不同壓力組間無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表1、圖2。

圖2　各組創(chuàng)面不同時間TNF-α水平動態(tài)變化

2.3海水基礎(chǔ)細(xì)菌分離培養(yǎng)

海水基礎(chǔ)細(xì)菌分離培養(yǎng)結(jié)果如下：普通變形桿菌、大腸埃希菌、熒光假單胞菌、產(chǎn)酸克雷伯菌、副溶血弧菌、布氏枸櫞酸桿菌、粘質(zhì)沙雷菌、海藻希瓦菌、美人魚發(fā)光桿菌、殺鮭氣單胞菌等，絕大部分屬于γ-變形菌。

2.4各組創(chuàng)面細(xì)菌指數(shù)動態(tài)變化

治療后，實驗組創(chuàng)面細(xì)菌指數(shù)均呈快速減小趨勢，以VSD-120mmHg組創(chuàng)面細(xì)菌指數(shù)減小最快，在治療第5天細(xì)菌指數(shù)已小于5，其次是VSD-180mmHg組；而對照組創(chuàng)面在治療前3d細(xì)菌指數(shù)呈上升趨勢，細(xì)菌指數(shù)由7.4升至8.9，3d后才開始緩慢減小，至第9d時創(chuàng)面細(xì)菌指數(shù)仍高達(dá)6.4。經(jīng)多因變量方差分析：治療3d后，實驗組與對照組間有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），VSD-120mmHg組與VSD-240mmHg組間有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），相鄰壓力組間無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表2、圖3。

圖3　各組不同時間細(xì)菌指數(shù)折線圖

表1　各組創(chuàng)面不同時間TNF-α水平動態(tài)變化（ng/L，±s）

表1　各組創(chuàng)面不同時間TNF-α水平動態(tài)變化（ng/L，±s）

注：治療5d后，實驗組與對照組間有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），實驗組間比較：VSD-120mmHg組與VSD-240mmHg組間有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.032），相鄰壓力組間無統(tǒng)計學(xué)意義（即VSD-120mmHg組與VSD-180mmHg組間比較，P=0.131；VSD-180mmHg組與VSD-240mmHg組間比較，P=0.461）

組別VSD-120mmHg組VSD-180mmHg組VSD-240mmHg組對照組0d 192.76±5.46 201.19±3.70 200.92±3.77 201.76±3.21 1d 235.86±6.48 221.49±3.19 218.25±3.77 208.92±3.13 3d 257.47±12.6 241.69±3.10 230.05±3.26 215.51±2.89 5d*344.15±2.14 323.63±7.25 305.39±8.90 250.58±2.72 7d 263.36±5.91 273.40±2.30 280.45±7.08 290.24±4.54 9d 245.05±9.66 250.43±9.21 269.94±8.54 286.82±3.45

表2　各組創(chuàng)面不同時間細(xì)菌指數(shù)動態(tài)變化（±s）

表2　各組創(chuàng)面不同時間細(xì)菌指數(shù)動態(tài)變化（±s）

注：治療前3天，實驗組與對照組間細(xì)菌指數(shù)差異不明顯；治療3d后，實驗組與對照組間有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），VSD-120mmHg組與VSD-240mmHg組間有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.047），但相鄰壓力組間無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）

組別VSD-120mmHg組VSD-180mmHg組VSD-240mmHg組對照組0d 7.49±0.21 7.44±0.19 7.44±0.27 7.41±0.24 1d 7.01±0.07 7.40±0.09 7.45±0.12 8.19±1.04 3d 6.13±0.12 6.64±0.05 6.81±0.11 8.93±0.17 5d*4.15±1.09 4.72±0.13 5.29±0.17 7.57±0.29 7d 3.02±0.19 3.32±0.15 4.03±0.31 7.13±1.06 9d 2.23±0.09 3.12±0.24 3.79±0.12 6.41±0.11

2.5各組創(chuàng)面細(xì)菌分離培養(yǎng)與鑒定

治療前各創(chuàng)面細(xì)菌培養(yǎng)均以普通變形桿菌為主，經(jīng)過1～2d的潛伏期，創(chuàng)面細(xì)菌出現(xiàn)多樣性，以海水基礎(chǔ)菌為主，按照創(chuàng)面菌落形成單位多寡依次為普通變形桿菌、大腸埃希菌、熒光假單胞菌、產(chǎn)酸克雷伯菌、副溶血弧菌、布氏枸櫞酸桿菌等，并出現(xiàn)豬皮膚寄生菌（豬葡萄球菌、緩慢葡萄球菌）逐漸增多趨勢，3d后實驗組創(chuàng)面海水基礎(chǔ)菌種類明顯減少，豬皮膚寄生菌明顯增多，于5d后實驗組創(chuàng)面細(xì)菌培養(yǎng)均為豬皮膚寄生菌，而對照組創(chuàng)面細(xì)菌變化趨勢與實驗組大體一致，但變化趨勢較對照組相對緩慢，于治療7d創(chuàng)面細(xì)菌培養(yǎng)以豬皮膚寄生菌為主。

2.6各組創(chuàng)面細(xì)菌革蘭氏染色

治療前各創(chuàng)面均以G-菌為主，治療后各組創(chuàng)面細(xì)菌革蘭氏染色出現(xiàn)相似的變化趨勢：即由G-菌向G+菌過渡，但對照組較實驗組變化相對緩慢。實驗組于治療第5天創(chuàng)面細(xì)菌革蘭氏染色以G+為主，而對照組于治療第7天創(chuàng)面細(xì)菌以G+為主。

3　討論

創(chuàng)傷修復(fù)過程本身是一個有序的局部組織炎癥反應(yīng)［9］，炎癥反應(yīng)在創(chuàng)傷修復(fù)中起重要作用，是機(jī)體最基本的防御性反應(yīng)，包括無菌性炎癥和感染性炎癥，但過度的炎癥反應(yīng)或炎癥持續(xù)存在可加重組織損傷，使創(chuàng)面愈合延遲或不愈合。TNF-α是炎癥反應(yīng)出現(xiàn)最早、最重要的細(xì)胞因子，不僅可反應(yīng)創(chuàng)面無菌性炎癥，也可反應(yīng)創(chuàng)面感染性炎癥，而創(chuàng)面細(xì)菌指數(shù)及細(xì)菌構(gòu)成是反應(yīng)創(chuàng)面感染性炎癥的重要指標(biāo)，本課題就VSD技術(shù)對海水浸泡爆炸創(chuàng)面愈合中TNF-α水平、細(xì)菌學(xué)等方面的影響進(jìn)行了研究。

早期的炎癥反應(yīng)是創(chuàng)傷修復(fù)過程中的關(guān)鍵一步，局部炎性細(xì)胞因子的表達(dá)對創(chuàng)面肉芽組織形成及創(chuàng)緣表皮化具有重要的作用，TNF-α是炎癥反應(yīng)出現(xiàn)最早、最重要的炎性細(xì)胞因子［9］，其在調(diào)節(jié)創(chuàng)面愈合中具有水平依賴性，在一定水平內(nèi)創(chuàng)面肉芽中TNF-α可直接或間接地促進(jìn)創(chuàng)面成纖維細(xì)胞增殖、創(chuàng)緣上皮化、血管化和增強(qiáng)創(chuàng)面抵抗力，而持續(xù)高水平的TNF-α可抑制成纖維細(xì)胞的功能和膠原合成，影響創(chuàng)面愈合［9-16］。Jin-qing Li等人［2］報道VSD技術(shù)可有效調(diào)節(jié)爆炸創(chuàng)面中TNF-α含量，使TNF-α高峰提前并迅速下降，縮短炎癥反應(yīng)時間，促進(jìn)創(chuàng)面愈合。從本次實驗結(jié)果示：治療前各組創(chuàng)面肉芽中的TNF-α水平均較低，治療后實驗組創(chuàng)面肉芽中的TNF-α水平快速升高，于第5天達(dá)高峰且峰值較高，并迅速下降，以VSD-120mmHg組變化最快；而對照組TNF-α水平上升緩慢，于第7天達(dá)高峰且峰值較低，并下降緩慢。經(jīng)統(tǒng)計處理：治療1d后，實驗組與對照組間差異非常顯著（P＜0.01），但相鄰不同壓力組間比較無統(tǒng)計學(xué)意義，一方面考慮與壓力跨度（60mmHg）過小有關(guān)，另一方考慮與本次實驗對象偏少有關(guān)。普通創(chuàng)傷炎癥高峰一般出現(xiàn)在第2～3天，而本次海水浸泡爆炸傷炎癥高峰出現(xiàn)在第5～7天，由此可見：①海水浸泡爆炸傷加重創(chuàng)面炎癥反應(yīng)，使炎癥反應(yīng)時間延長；②VSD技術(shù)可有效減輕創(chuàng)面炎癥反應(yīng)，縮短創(chuàng)面炎癥反應(yīng)時間，促進(jìn)創(chuàng)面愈合。

創(chuàng)面細(xì)菌是反映創(chuàng)面炎癥的另一重要指標(biāo)，主要反映細(xì)菌性炎癥，近年來VSD技術(shù)被應(yīng)用到各類感染創(chuàng)面中且療效顯著。VSD技術(shù)不僅可抑制創(chuàng)面細(xì)菌增殖，延遲創(chuàng)面感染時間，而且可有效減少創(chuàng)面細(xì)菌容量，改變細(xì)菌構(gòu)成，進(jìn)而促進(jìn)創(chuàng)面愈合［1-4］。本次實驗結(jié)果示：①治療前各組創(chuàng)面細(xì)菌指數(shù)均在7.4左右，各組間無統(tǒng)計學(xué)意義；治療3d后實驗組與對照組間出現(xiàn)明顯差異，實驗組在治療期間細(xì)菌指數(shù)均呈快速下降趨勢，治療5d后小于5，而對照組在治療的前3d細(xì)菌指數(shù)呈上升趨勢，3d后才開始緩慢下降，至第9天細(xì)菌平均指數(shù)仍高達(dá)6.4；②在創(chuàng)面細(xì)菌構(gòu)成和革蘭氏染色上各組變化趨勢一致，即由G-菌向G+菌過渡、由海水基礎(chǔ)菌向豬皮膚寄生菌過渡，但對照組較實驗組變化相對緩慢。

綜合分析TNF-α表達(dá)水平和細(xì)菌指數(shù)：7d前TNF-α折線圖中各組曲線排列與細(xì)菌指數(shù)相應(yīng)曲線排列正好相反，7d后兩組曲線排列趨勢轉(zhuǎn)為一致。由此可能說明：①在早期炎癥滲出階段，VSD技術(shù)可提高創(chuàng)面肉芽中TNF-α水平，TNF-α的抗感染功能，減少創(chuàng)面細(xì)菌容量，抑制細(xì)菌增殖；②創(chuàng)面肉芽中TNF-α在創(chuàng)傷后急性炎性滲出階段在一定范圍內(nèi)其抗感染功能隨濃度升高而功能加強(qiáng)，若持續(xù)升高，其抗感染功能明顯下降；③兩折線圖在治療前7d，曲線排列趨勢相反，可能說明海水的所致創(chuàng)面局部的理化損傷程度較生物因素所致的創(chuàng)面損傷程度嚴(yán)重，7d后各組創(chuàng)面炎癥反應(yīng)逐漸減輕，主要反映細(xì)菌所致的感染性炎癥，炎癥反應(yīng)輕重主要與創(chuàng)面細(xì)菌容量和細(xì)菌構(gòu)成有關(guān)；④VSD技術(shù)可有效改變豬皮膚軟組織海水浸泡爆炸創(chuàng)面細(xì)菌構(gòu)成，使創(chuàng)面細(xì)菌由G-菌向G+菌過渡、由海水基礎(chǔ)菌向豬皮膚寄生菌過渡；⑤爆炸傷經(jīng)海水浸泡，創(chuàng)面炎癥反應(yīng)加重，感染時限提前，但海水細(xì)菌大部分具有喜冷、耐堿、耐鹽、耐壓、厭氧或兼性厭氧等特點，且各組創(chuàng)面細(xì)菌構(gòu)成變化趨勢基本一致，海水細(xì)菌致創(chuàng)面感染，細(xì)菌是否可因局部溫度、PH、含氧量高等特點而不利于細(xì)菌繁殖呢，需要在以后的課題中進(jìn)一步驗證；⑥在應(yīng)用VSD技術(shù)治療海水浸泡皮膚軟組織爆炸傷時，-120mmHg的壓力可能是比較理想的壓力。

本實驗未設(shè)置更多的壓力作為對照，主要原因是：①實驗動物為小型乳豬，體表皮膚有限，創(chuàng)面損傷大等，致動物不能耐受更多創(chuàng)面；②結(jié)合國內(nèi)外文獻(xiàn)報道VSD在治療其它類型皮膚軟組織損傷時，多設(shè)置-120mmHg或-180mmHg的壓力，且療效顯著。

總之，VSD技術(shù)可調(diào)節(jié)創(chuàng)面TNF-α水平、減少細(xì)菌指數(shù)、減輕創(chuàng)面炎癥，促進(jìn)創(chuàng)面愈合，在本次實驗設(shè)計中，VSD-120mmHg組創(chuàng)面愈合最好，對照組創(chuàng)面愈合較差，由此得出在治療皮膚軟組織海水浸泡爆炸傷時，VSD-120mmHg可能是比較理想的壓力。

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Effect of Vacuum sealing drainage on tumor necrosis factor alpha expression and bacteriological index in swine seawater-immersed blast-injury wounds

MA Yong-qi1，LIANG Xian-ping2，SHI Bing1，ZHANG Chen3
（1.Department of Plastics，No 309thHospital of PLA，Beijing 100091，China；2.Evercare Beijing Medical& Beauty Hospitals，Beijing 100026，China；3.Department of Plastic Surgery，Xinhua Hospital Affiliated to Dalian University，Dalian 116021，Liaoning，China）

Objective To dynamically observe the effect of tumor necrosis factor alpha and bacteriological index at different negative pressures of Vacuum sealing drainage（VSD）on seawaterimmersed blast-injury wounds so as to grope the optimal therapeutic negative pressure range. MethodsThe seawater-immersed blast-injury wounds were established on 5 experimental miniature swine at two sides of shoulders and hips.Each swine has 4 wounds and divided into 4 groups randomly：control group，VSD-120mmHg group，VSD-180mmHg group and VSD-240 mmHg group.All the wounds were removal of necrotic tissue and foreign bodies before treatment.The experimental groups were treated with VSD，and the control group was treated by regular method.The treatment on each wound continued for 9 days，and the observation continued until the 58thday.Tumor necrosis factor alpha expression and bacteriological index of wounds granulation tissue wererespectively observed at 0，1，3，5，7，9 day and comparison were made among them.Results①The bacteriological index of the experimental groups were decreased after treatment，but the control group's was increased in the first 3 days of treatment.The bacteriological index of the experimental groups was significantly lower than that of the control group after 3 days'treatment（P＜0.01）.②The bacterial composition took an obvious tendency of transition from seawater bacterium to skin fungus and from G-bacterium to G+bacterium.Compared with the experimental groups，the control group was slower in the rate of transition.③In all groups，the TNF-α expression on wounds granulation tissue increased after trauma.Compared with the control group，the rate of increase and decrease were faster，and the summit peek value came earlier and higher significantly（P＜0.01）.The comparison among the adjacent pressure groups showed no statistical significance（P＞0.05）.Conclusions Compared with conventional therapy，VSD shows clear benefits during the treatment of seawater-immersed blastinjury wounds.The wounds inflammation was reduced by decreasing bacteriological index，changing bacterial composition，adjusting TNF-α expression and so on in experimental groups，and-120mmHg pressure may be relatively ideal pressure.

Vacuum sealing drainage（VSD）；Tumor necrosis factor alpha（TNF-α）；seawater immersion；blast-injury；bacterial index

R622

A

1008-6455（2015）24-0030-06

2015-10-18

2015-12-15

編輯/張惠娟

石冰，男，解放軍第三O九醫(yī)院整形外科，郵編：100091

馬永奇，男，河北邯鄲人，大連大學(xué)碩士研究生