中樞神經(jīng)系統(tǒng)病毒及弓形蟲感染血清學特征分析

柏景喬，張國軍，康熙雄

中樞神經(jīng)系統(tǒng)病毒及弓形蟲感染血清學特征分析

柏景喬，張國軍，康熙雄

目的通過分析疑似中樞神經(jīng)系統(tǒng)病毒及弓形蟲感染患者血清學特點，為臨床監(jiān)測病原體和治療提供依據(jù)。方法選取2013年8月—2015年3月于首都醫(yī)科大學附屬北京天壇醫(yī)院治療的疑似中樞神經(jīng)系統(tǒng)病毒及弓形蟲感染患者233例為疑似感染組。另于同期選取癲癇、腦出血、周圍神經(jīng)病及不明原因的抽搐、眼肌震顫和意識障礙為主要臨床表現(xiàn)的其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者778例(其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病組)和體格檢查健康、無疫區(qū)生活史的適齡孕婦91例作為對照。檢測單純皰疹病毒(HSV)、巨細胞病毒(CMV)、EB病毒(EBV)、風疹病毒(RUB)、弓形蟲(TOX)的IgM和IgG抗體及柯薩奇病毒(COX)IgM抗體，比較各組別抗體檢出率的差異。結果健康孕婦組血清檢出RUB IgM抗體3例(3.3%)及CMV IgM抗體1例(1.1%);其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病組血清IgM抗體檢出率以HSV－1/ HSV－2(41例，5.3%)和EBV(32例，4.1%)較高;疑似感染組血清IgM抗體檢出率以HSV－1/HSV－2(15例，6.4%)、EBV(13例，5.6%)和RUB(12例，5.2%)較高。各組RUB IgM抗體檢出率比較，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，其中疑似病例組RUB IgM抗體檢出率高于其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病組(χ2=8.034，P=0.005)。健康孕婦組血清IgG抗體檢出率以CMV(82例，90.1%)、RUB(76例，83.5%)、HSV－1(75例，82.4%)較高;其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病組血清IgG抗體檢出率以CMV(753例，96.8%)、RUB(662例，85.1%)、EBV(653例，83.9%)及HSV－1 (632例，81.2%)較高;疑似感染組血清IgG抗體以CMV(221例，94.8%)、EBV(211例，90.6%)、RUB(196例，84.1%)、HSV－1(182例，78.1%)較高。各組CMV IgG抗體檢出率比較，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);其中其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病組CMV IgG抗體檢出率高于健康孕婦組(P=0.006)。疑似感染組EBV IgG抗體檢出率高于其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。結論HSV、RUB、CMV以及EBV在人群中普遍易感，RUB可能更易引起臨床急性感染癥狀。

中樞神經(jīng)系統(tǒng)病毒感染;單純皰疹病毒屬;柯薩奇病毒感染;EB病毒;弓形蟲;巨細胞病毒;風疹病毒;抗體

柏景喬，張國軍，康熙雄．中樞神經(jīng)系統(tǒng)病毒及弓形蟲感染血清學特征分析［J］．中國全科醫(yī)學，2015，18 (29):3566－3569．［www.chinagp.net］

Bai JQ，Zhang GJ，Kang XX．Analysis of the serological features of virus and toxoplasma infection in central nervous system［J］．Chinese General Practice，2015，18(29):3566－3569．

中樞神經(jīng)系統(tǒng)病毒及弓形蟲感染是嚴重威脅人類健康的傳染性疾病，其發(fā)病急、進展快、病情危重復雜，在短期內(nèi)缺乏特異性，診斷困難，以至延誤治療，病死率較高［1］。在我國，引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染和功能異常的病原體有風疹病毒(RUB)、單純皰疹病毒(HSV)、柯薩奇病毒(COX)、EB病毒(EBV)、巨細胞病毒(CMV)以及弓形蟲(TOX)等［2－4］。我國人群對上述病原體普遍易感，其診斷主要依據(jù)流行病學史、典型臨床表現(xiàn)和實驗室檢查。因此掌握中樞神經(jīng)系統(tǒng)病毒及弓形蟲感染的血清學特點有利于其監(jiān)測和早期診斷，并為臨床及時治療提供依據(jù)。本研究回顧性分析疑似中樞神經(jīng)系統(tǒng)病毒及弓形蟲感染患者血清學檢查結果，現(xiàn)報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象選取2013年8月—2015年3月于首都醫(yī)科大學附屬北京天壇醫(yī)院治療的疑似中樞神經(jīng)系統(tǒng)病毒及弓形蟲感染患者233例為疑似感染組。納入標準: (1)急性起病，臨床表現(xiàn)為發(fā)熱、頭痛、嘔吐、嗜睡，并伴有不同程度的意識障礙或腦膜刺激征等中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染癥狀;(2)腦脊液檢查提示非化膿性炎癥改變，顱內(nèi)壓增高，細菌培養(yǎng)陰性。另于同期選取癲癇、腦出血、周圍神經(jīng)病及不明原因的抽搐、眼肌震顫和意識障礙為主要臨床表現(xiàn)的其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者778例(其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病組)和體格檢查健康、無疫區(qū)生活史的適齡孕婦91例作為對照。

1.2 方法空腹抽取受試者血液標本2～5 m l，采用水平離心機以3 000 r/min離心10 min，離心半徑5 cm，分離血清。HSV－1和HSV－2 IgG抗體、TOX IgM和IgG抗體、CMV IgM和IgG抗體、RUB IgM和IgG抗體采用電化學發(fā)光法檢測，儀器為羅氏MODULAR E170全自動電化學發(fā)光免疫分析儀，各批標本同時進行低值和高值定標和質(zhì)量控制。結果判讀:待測標本吸光度(OD)值與臨界值的比值＜0.8為陰性，0.8～1.0為不確定，＞1.0為陽性。結果不確定時需使用相同試劑盒或不同廠家試劑盒重新檢測。

HSV－1和HSV－2 IgM抗體、COX IgM抗體、EBV IgM和IgG抗體采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測，試劑盒購于深圳亞輝龍生物科技有限公司。于96孔板設定空白孔、陰性對照孔、弱陽性對照孔及強陽性對照孔，重復2孔。檢測孔滴加終止液50μl，采用酶標儀于10～15 min內(nèi)在450 nm波長處測定OD值。待測標本OD值與臨界值比值＞1.1為陽性，＜0.9為陰性，0.9～1.1為可疑陽性;可疑陽性時應再次檢測，再次檢測結果＜0.9為陰性，≥1.0為陽性。

1.3 統(tǒng)計學方法采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料以相對數(shù)表示，組間比較采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 IgM抗體檢出率健康孕婦組血清檢出RUB IgM抗體3例(3.3%)及CMV IgM抗體1例(1.1%);其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病組血清IgM抗體檢出率以HSV－1/HSV－2(41例，5.3%)和EBV(32例，4.1%)較高;疑似感染組血清IgM抗體檢出率以HSV－1/HSV－2 (15例，6.4%)、EBV(13例，5.6%)和RUB(12例，5.2%)較高。各組RUB IgM抗體檢出率比較，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，其中疑似感染組RUB IgM抗體檢出率高于其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病組(χ2=8.034，P=0.005)。各組TOX、CMV IgM抗體檢出率比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病組與疑似感染組HSV－1/HSV－2、EBV及COX IgM抗體檢出率比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05，見表1)。

2.2 IgG抗體檢出率健康孕婦組血清IgG抗體檢出率以CMV(82例，90.1%)、RUB(76例，83.5%)、HSV－1(75例，82.4%)較高;其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病組血清IgG抗體檢出率以CMV(753例，96.8%)、RUB (662例，85.1%)、EBV(653例，83.9%)及HSV－1 (632例，81.2%)較高;疑似感染組血清IgG抗體檢出率以CMV(221例，94.8%)、EBV(211例，90.6%)、RUB(196例，84.1%)、HSV－1(182例，78.1%)較高。各組HSV－1、HSV－2、RUB及TOX IgG抗體檢出率比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。各組CMV IgG抗體檢出率比較，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);其中其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病組CMV IgG抗體檢出率高于健康孕婦組(P=0.006)。疑似感染組EBV IgG抗體檢出率高于其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05，見表2)。

表1 受試者血清中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關病毒IgM抗體檢出率比較〔n(%)〕Table 1 Comparison of seropositive rate of central nervous system－related virus specific IgM antibodies among the three groups

表2 受試者血清中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關病毒IgG抗體檢出率比較〔n(%)〕Table 2 Comparison of seropositive rate of central nervous system－related vrius specific IgG antibodies among the three groups

3 討論

病毒性腦炎和某些中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病有多種共同的臨床表現(xiàn)，臨床易誤診［5－6］。隨著抗生素的廣泛應用，病毒性腦炎逐漸成為主要的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾?。?］。由于中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病病因較多，早期臨床表現(xiàn)不一，嚴重者可導致死亡，或留有嚴重后遺癥。而經(jīng)過早期積極治療多數(shù)患者預后較好，是改善患者預后的關鍵。

現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，可導致中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的病毒多達130多種［8］，其中，以HSV、帶狀皰疹病毒、腺病毒、EBV、腸道病毒、CMV等常見。另外，由于TOX感染癥狀與病毒感染相似，且隨著城市寵物不斷增多，我國TOX感染率也呈現(xiàn)逐年上升趨勢［9］，因此本研究將TOX感染納入分析。先天性弓形蟲病與TORCH綜合征癥狀相似，如脈絡膜視網(wǎng)膜炎、腦積水、小頭畸形、顱內(nèi)鈣化等復雜表現(xiàn)，診斷較為困難。同時，TOX感染與病毒感染的治療藥物也存在較大不同，因此，臨床已將TOX血清學檢查與病毒同時開展。

疑似中樞神經(jīng)系統(tǒng)病毒及TOX感染患者均以發(fā)熱、頭痛、嘔吐、嗜睡，并伴有不同程度的意識障礙或腦膜刺激征等中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染癥狀為由就診，提示感染累及中樞神經(jīng)系統(tǒng)，早期血清學檢測極為必要。其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者由于中樞神經(jīng)系統(tǒng)受到損傷，導致血－腦脊液屏障的破壞易于合并病毒感染［10］，及時檢測相關病毒及TOX抗體有利于早期治療。孕婦自身保護較為周到，接觸寵物及進入高危環(huán)境較少，本研究將其作為低感染的背景人群。

IgM抗體為早期反應性抗體，人體在接觸病毒后3～5 d即產(chǎn)生，應用ELISA法在發(fā)病后1～5 d即可在血及腦脊液中檢出陽性結果，7～10 d達峰值，4～5周后濃度迅速下降，直至檢測下限，是早期病因?qū)W診斷的理想方法之一［11］。查閱患者病歷顯示，疑似神經(jīng)系統(tǒng)病毒感染患者主要表現(xiàn)為發(fā)熱、頭痛、嘔吐，并伴有上呼吸道感染如咽紅、扁桃體腫大等體征，而其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者也有類似的癥狀，但表現(xiàn)不明顯，而本研究顯示后者中仍有相當部分患者遭受病毒感染。本研究發(fā)現(xiàn)，疑似感染組患者RUB IgM抗體檢出率高于其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病組，提示RUB可能更易引起臨床急性起病的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染癥狀。病毒感染作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的一種，誤診率高［12－13］，臨床需要加以鑒別，及早檢查，防止因為誤診而延遲特效治療，導致病情加重。

IgG與IgM抗體類似，是與臨床癥狀和體征出現(xiàn)相關的抗體。絕大多數(shù)IgG抗體可維持終生成為保護性抗體，因此IgG抗體可反映患者既往感染病毒的指標，并可輔助IgM抗體診斷病毒感染。本研究結果顯示，各組受試者HSV－1、RUB、CMV及EBV(健康孕婦組未查)IgG抗體均有較高的檢出率，顯示其仍為威脅中樞神經(jīng)系統(tǒng)健康的主要病原體，同時EBV IgG抗體檢出率也較高，需要引起足夠的重視。

中樞神經(jīng)系統(tǒng)病毒感染是嚴重威脅人類健康的疾病，若治療不及時甚至危及患者生命。中樞神經(jīng)系統(tǒng)病毒及弓形蟲感染癥狀與其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病有相似性和疊加性，且與細菌感染較難辨別，甚至有隱秘感染等情況的發(fā)生，因此對可疑病例的鑒別診斷尤為必要。本研究結果提示，RUB可能更易引起臨床急性感染癥狀，疑似中樞神經(jīng)系統(tǒng)病毒感染患者應著重考慮RUB感染可能。由于本研究未收集各組受試者臨床資料以比較基線情況，且健康孕婦生活條件、免疫力與人群存在較大差別，將其作為對照反映人群背景感染率存在一定的局限性。

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Analysis of the Serological Features of Virus and Toxoplasma Infection in Central Nervous System

BAI Jing－qiao，ZHANGGuo－jun，KANG Xi－xiong.Department of Laboratory，Beijing Tiantan Hospital，Capital Medical University，Beijing 100050，China

Objective To explore the serological features of patients suspected with virus and toxoplasm infection in central nervous system，in order to provide references for the clinicalmonitoring of pathogens and treatment．M ethods We enrolled 233 patients suspected with virus and toxoplasm infection in central nervous system who received treatment in Beijing Tiantan Hospital，CapitalMedical University from August2013 to March 2015 as suspected infection group.And 778 patientswho had epilepsy，cerebral hemorrhage，peripheral neuropathy and other neurological diseases with convulsion with unknown cause，tremble ofmusculi oculi and disturbance of consciousness asmain clinicalmanifestations and 91 healthy pregnantwomen of right age and without living experience in epidemic areas as control.The IgM and IgG antibody of HSV，CMV，EBV，RUB andTOX，IgM anti body of COX，were examined，and comparison wasmade among each group in the detection rate of antibody．Results In the group of healthy pregnantwomen，RUB IgM was detected in 3(3.3%)patients and CMV IgM was detected in 1(1.1%)patient;in the group of other neurological diseases，IgM antibody had a higher detection rate of HSV－1/HSV－2 (41，5.3%)and EBV(32，4.1%);in suspected infection group，IgM antibody had a higher detection rate of HSV－1/HSV－2(15，6.4%)，EBV(13，5.6%)and RUB(12，5.2%)．The three groups were significantly different in the detection rate of RUB IgM antibody(P＜0.05)，with suspected infection group higher than the group of other neurological diseases in the detection rate of RUB IgM antibody(χ2=8.034，P=0.005)．In the group of healthy pregnantwomen，the IgG antibody had a higher detection rate of CMV(82，90.1%)，RUB(76，83.5%)and HSV－1(75，82.4%);in the group of other neurological diseases，IgG antibody had a higher detection rate of CMV(753，96.8%)，RUB(662，85.1%)，EBV(653，83.9%)and HSV－1(632，81.2%);in the suspected infection group，IgG antibody had a higher detection rate of CMV (221，94.8%)，EBV(211，90.6%)，RUB(196，84.1%)，HSV－1(182，78.1%)．The three groups were significantly different in the detection rate of CMV IgG antibody(P＜0.05)，with the group ofother neurological diseases higher than the group of healthy pregnantwomen in the detection rate of CMV IgG(P=0.006)．Suspected infection group was higher than the group with other neurological diseases in the detection rate of EBV IgG antibody(P＜0.05)．Conclusion HSV，RUB，CMV and EBV are susceptible virus for people，and RUBmay bemore likely to cause acute infection．

Central nervous system viral diseases;Simplexvirus;Coxsackievirus infections;Epstein－Barr virus; Toxoplasmosis;Cytomegalovirus;Rubella virus;Antibodies

R 511 R 741

A

10.3969/j.issn.1007－9572.2015.29.015

2015－03－05;

2015－09－12)

(本文編輯:吳立波)

北京市科技專項(Z121102009212061)——北京市標記免疫分析試劑研發(fā)與臨床評價工程技術研究中心2012年度階梯計劃項目

100050北京市，首都醫(yī)科大學附屬北京天壇醫(yī)院檢驗科，北京市免疫試劑臨床工程技術研究中心

康熙雄，100050北京市，首都醫(yī)科大學附屬北京天壇醫(yī)院檢驗科，北京市免疫試劑臨床工程技術研究中心;

E－mail:kangxx@vip.sina.com