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    抗雛鴨病毒性肝炎卵黃抗體粉飼料添加劑的研制

    2015-08-11 14:03:02張桂榮劉玉梅武桂梅王振輝
    獸醫(yī)導(dǎo)刊 2015年16期
    關(guān)鍵詞:雛鴨效價(jià)吉林

    張桂榮劉玉梅武桂梅王振輝*劉 軍

    (1.吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院,吉林吉林 132101; 2.吉林省白山市松樹(shù)鎮(zhèn)畜牧站,吉林白山 234704; 3.吉林正業(yè)生物制品股份有限公司,吉林吉林 132101)

    抗雛鴨病毒性肝炎卵黃抗體粉飼料添加劑的研制

    張桂榮1劉玉梅2武桂梅1王振輝1*劉 軍3

    (1.吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院,吉林吉林 132101; 2.吉林省白山市松樹(shù)鎮(zhèn)畜牧站,吉林白山 234704; 3.吉林正業(yè)生物制品股份有限公司,吉林吉林 132101)

    當(dāng)雛鴨病毒性肝炎卵黃抗體效價(jià)達(dá)到1∶320倍時(shí),收集免疫雞蛋分離卵黃,減壓低溫干燥制成卵黃抗體細(xì)粉并進(jìn)行抗體效價(jià)測(cè)定和安全檢驗(yàn)。最后將合格的卵黃抗體細(xì)粉以不同比例加入雛鴨飼料,對(duì)雛鴨進(jìn)行預(yù)防量飼喂后強(qiáng)毒攻毒試驗(yàn)及強(qiáng)毒攻毒后治療量的飼喂試驗(yàn)、小區(qū)域雛鴨飼喂試驗(yàn)。結(jié)果:預(yù)防試驗(yàn)為每kg飼料添加30g卵黃抗體粉末時(shí),攻毒保護(hù)率為85.0%;治療試驗(yàn)為每kg飼料添加50g卵黃抗體粉末時(shí),發(fā)病治愈率達(dá)到65.0%以上;小區(qū)域試驗(yàn)表明:卵黃抗體粉末預(yù)防量添加組比同期常規(guī)飼養(yǎng)組總發(fā)病率降低11%,抗生素用量降低12.3%,增重率提高9%。有效的防治了雛鴨病毒性肝炎病。

    雛鴨肝炎病毒;卵黃抗體;飼料添加劑;免疫效果

    雛鴨肝炎病毒[1]感染是危害養(yǎng)鴨業(yè)極其嚴(yán)重的傳染病。按獸醫(yī)法規(guī)的要求,控制雛鴨肝炎病的措施是嚴(yán)格的檢疫、凈化和飼養(yǎng)管理工作,然而由于檢疫上的諸多困難。在當(dāng)前發(fā)病率增高的情況下,本研究采用分離到的雛鴨肝炎病毒制備的滅活抗原,免疫健康的產(chǎn)蛋雞,制備卵黃抗體粉添加到飼料中,取得較好的免疫效果。

    1 材料

    菌株從吉林雙遼鴨場(chǎng)等數(shù)家鴨場(chǎng)分離鑒定的雛鴨肝炎病毒。各種試劑和儀器由吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院生物制藥實(shí)驗(yàn)室制備和保存。

    2 方法

    2.1 抗雛鴨病毒性肝炎卵黃抗體干燥粉末制備與檢驗(yàn)[2]

    2.1.1 卵黃抗體粉末制備 將雞蛋用自來(lái)水沖洗污物后,用0.05%百毒殺浸泡3~5min,再用75%酒精浸泡擦一遍,晾干,在無(wú)菌條件下將高免蛋打破,倒入蛋清分離器中分離蛋清,把留下的蛋黃倒入滅菌的組織搗碎機(jī)中高速攪拌2~3min制成勻漿,用雙層滅菌紗布過(guò)濾,進(jìn)行50℃減壓真空干燥,將干燥的卵黃無(wú)菌粉碎分裝于250ml中性瓶中密封,于4℃保存。

    2.1.2 卵黃抗體粉末檢驗(yàn) 按無(wú)菌檢驗(yàn)操作規(guī)程進(jìn)行。蛋雞的免疫與卵黃抗體效價(jià)已經(jīng)做完并發(fā)表核心期刊上

    2.1.3 安全檢驗(yàn) 隨機(jī)選取2日齡健康雛鴨40只,隨機(jī)分成4組,第一組每只飼喂卵黃抗體粉末0.5g,第二組每只飼喂卵黃抗體粉末1g,第三組每只飼喂卵黃抗體粉末1.5g,連續(xù)服用3d,第四組作為空白對(duì)照,相同條件隔離飼養(yǎng)10d記錄結(jié)果。

    2.2 抗雛鴨病毒性肝炎卵黃抗體飼料添加劑免疫試驗(yàn)[3]

    2.2.1 預(yù)防添加量試驗(yàn) 選1日齡健康、體重相當(dāng)?shù)娜怆r雞100只,隨機(jī)分成5組,1~4組為試驗(yàn)組,第5組為對(duì)照組。對(duì)4個(gè)試驗(yàn)組每1kg基礎(chǔ)日糧中依次分別添加10g、20g、30g、40g的抗雛鴨病毒性肝炎卵黃抗體粉,對(duì)照組不添加。各組分開(kāi)隔離喂養(yǎng),連續(xù)飼喂3d。然后每只試驗(yàn)雛鴨連同對(duì)照雛鴨各肌肉注射DVH標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒,隔離飼養(yǎng)在吉林正業(yè)股份責(zé)任公司提供的負(fù)壓過(guò)濾消毒免疫室內(nèi),飼養(yǎng)觀察20d,記錄結(jié)果。

    2.2.2 治療添加量試驗(yàn) 選1日齡健康、體重相當(dāng)?shù)娜怆r鴨100只,隨機(jī)分成5組,1~4組為試驗(yàn)組。每組試驗(yàn)雛鴨各肌肉注射DVH標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒株,隔離飼養(yǎng)在吉林正業(yè)股份責(zé)任公司提供負(fù)壓過(guò)濾消毒免疫室內(nèi)3d,待100%左右雛雞發(fā)病時(shí),4個(gè)試驗(yàn)組每kg基礎(chǔ)日糧中分別飼喂添加40g、50g、60g、70g的抗雛鴨病毒性肝炎卵黃抗體粉飼料飼喂3d之后,繼續(xù)用無(wú)抗體飼料飼喂10d。第5組為強(qiáng)毒攻毒對(duì)照組。觀察記錄各組試驗(yàn)雛鴨的變化。

    2.2.3 小區(qū)域試驗(yàn) 對(duì)雙遼鴨場(chǎng)不同飼養(yǎng)批次共計(jì)1 000雛鴨從3日齡開(kāi)始,在基礎(chǔ)日糧飼料里添加30g/kg的抗雛鴨肝炎病毒卵黃抗體粉末,飼喂3d,同未添加組同條件飼養(yǎng)50d統(tǒng)計(jì)發(fā)病率、飼養(yǎng)成本。

    3 結(jié)果與分析

    3.1 DVH卵黃抗體干燥粉末檢驗(yàn)結(jié)果

    制備的卵黃抗體粉末雖然污染少量的細(xì)菌,但均沒(méi)有致病性;四種劑量的雛雞飼喂試驗(yàn)均安全;卵黃抗體經(jīng)過(guò)干燥脫水后卵黃抗體效價(jià)高達(dá)到1∶4048倍數(shù)。證明低溫減壓干燥處理沒(méi)有影響卵黃抗體效價(jià),而且達(dá)到較好的濃縮目的,便于卵黃抗體4℃長(zhǎng)期保存與應(yīng)用。

    3.2 卵黃抗體預(yù)防添加量試驗(yàn)結(jié)果

    從表1可知:預(yù)防免疫卵黃抗體添加量為3%、4%時(shí),攻毒保護(hù)率均為85.00%;治療時(shí)卵黃抗體添加量為5%,6%,7%時(shí),治愈率分別為 65%,75%,65%。可知研制的雛鴨肝炎病毒卵黃抗體具有較好的免疫特異性。攻毒后對(duì)照組雛鴨全部死亡,死亡雛鴨都有典型的雛鴨病毒肝炎癥狀[1],故抗雛鴨病毒性肝炎卵黃抗體預(yù)防添加量為3%時(shí)和治療量5%時(shí)比較合適。

    表1 卵黃抗體粉飼料添加劑免疫試驗(yàn)結(jié)果

    3.3 小區(qū)域試驗(yàn)結(jié)果

    卵黃抗體飼料添加組較同期普通飼養(yǎng)組總發(fā)病率降低11%,抗生素用量降低12.3%,增重率提高7.7%。證明抗雛鴨病毒性肝炎卵黃抗體粉末的添加,較好的控制了疾病的發(fā)生,而且其他疾病的發(fā)生率也就隨之降低,總體經(jīng)濟(jì)效益顯著提高9%。

    4 討論

    卵黃抗體[3](IgY)是禽類B淋巴細(xì)胞在抗原物質(zhì)刺激下所產(chǎn)生并沉積在卵黃中的能與抗原發(fā)生特異性反應(yīng)的一種免疫球蛋白,是禽類在長(zhǎng)期進(jìn)化過(guò)程中形成的用于提高抵抗力的物質(zhì)。卵黃抗體作為綠色藥物,是較理想的抗生素替代品。由于雛鴨消化系統(tǒng)尚未發(fā)育完全,消化酶對(duì)IgY消化作用較弱,故可將一定量的針對(duì)某些疾病的 IgY 添加到飼料或飲用水中,一部分可經(jīng)小腸吸收,起到被動(dòng)免疫作用。本試驗(yàn)研究證明小劑量的卵黃抗體添加劑可以起到預(yù)防作用,而大劑量的在發(fā)病初期還有治療作用。卵黃抗體無(wú)污染,無(wú)殘留,對(duì)機(jī)體不會(huì)產(chǎn)生危害,是一種良好的飼料添加劑。由于雛鴨病毒性肝炎是一種高度致死性急性傳染病。尤其是3~20日齡的雛鴨以發(fā)病急,死亡快特點(diǎn),而且疫苗接種不能很好控制,使用其卵黃抗體飼料添加劑能夠有效地降低家雛鴨發(fā)病率與死亡率,提高生產(chǎn)性能,增加養(yǎng)鴨戶的經(jīng)濟(jì)效益。但卵黃抗體作為添加劑進(jìn)行大規(guī)模的應(yīng)用還存在一定的問(wèn)題[4],如特異性毒株的選擇問(wèn)題,卵黃抗體的穩(wěn)定性保護(hù)和貯存、污染防治等問(wèn)題,針對(duì)各種疾病的卵黃抗體的開(kāi)發(fā)研制,還需要更多專家努力。但可預(yù)見(jiàn),卵黃抗體在飼料添加劑中的應(yīng)用具有廣闊的前景[4]。

    5 結(jié)論

    抗雛鴨病毒性肝炎病卵黃抗體效價(jià)到達(dá)1:320倍以上時(shí),制成卵黃抗體干燥粉末,預(yù)防添加量為3%時(shí),攻毒保護(hù)率可達(dá)85%,治療添加量為5%時(shí),治愈率可達(dá)65%以上。卵黃抗體添加組比同期普通飼養(yǎng)組總發(fā)病率降低7%,抗生素用量降低 12%,增重率提高9 %。

    [1] 【美】B.W卡爾尼克.禽病學(xué)(第十版)[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,1999:92-152.

    [2] 劉海生,楊增岐,張淑霞等.抗仔豬大腸埃希菌病高免卵黃抗體粉的研制[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2009,30(9):15-19.

    [3] 韓水仲,田澤華,趙津子等.卵黃抗體在飼料添加劑中的應(yīng)用[J].中國(guó)飼料,2010,(15):3-7.

    [4] 武桂梅,王振輝,張桂榮,等.抗雞白痢沙門(mén)氏桿菌病卵黃抗體粉飼料添加劑的研制[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)科技版,2013,(1):66-107.

    吉林省教育廳“十二五”科研項(xiàng)目:吉教科合字[201]

    張桂榮(1962—),女,吉林省公主嶺市人,碩士,副教授,主要從事動(dòng)物藥理學(xué)和動(dòng)物傳染病實(shí)驗(yàn)教學(xué)工作。

    王振輝(1964—),男,吉林省伊通縣人,碩士,教授,主要從事生物藥物教學(xué)、研究工作。

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