產前篩查梅毒螺旋體的三種方法在梅毒診斷中的研究

梁服泉　李秀姿　呂慶良

[摘要] 目的 探討三種不同檢測方法在梅毒診斷中的應用價值。 方法 選取本院2014年7～12月收治的500例孕婦作為研究對象，分別通過TPPA法、膠體金法和TRUST進行篩查，比較其檢測結果。 結果 在500例妊娠期孕婦中，梅毒陽性52例，陰性448例。三種檢測方法的敏感度、特異度、陰性預測值和陽性預測值比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。56例TPPA陽性標本中，53例TRUST滴度陽性，3例血清原倍為陰性，通過血清64倍稀釋后為假陰性。 結論 三種檢測方法在產前篩查梅毒螺旋體檢測中各有優(yōu)勢。

[關鍵詞] 產前篩查；梅毒螺旋體；梅毒；診斷

[中圖分類號] R759.1 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2015）05（c）-0119-03

[Abstract] Objective To explore the application value of three different detection methods in the diagnosis of syphilis. Methods 500 pregnant women from July 2014 to December in our hospital were selected as the research objects.The detection methods of TPPA，colloidal gold and TRUST for screening was used respectively.The result was compared. Results Among 500 cases of pregnant women during pregnancy，52 cases were in syphilis positive，and the rest were in negative.There was no significant difference in sensitivity，specificity，negative predictive value or positive predictive value by these three detection methods （P>0.05）.Among 56 TPPA positive specimens，53 casess were in positive titer by TRUST，and the rest three specimens were negative by the original serum，which were false negative when diluted by 64 times. Conclusion Three detection methods have the advantages in the detection of the prenatal screening for syphilis in the diagnosis of syphilis.

[Key words] Prenatal screening；Treponema pallidum；Syphilis；Diagnosis

妊娠合并梅毒的臨床分期以潛伏期為主，臨床癥狀、體征不明顯，很容易出現誤診和漏診，因此對于高危梅毒孕婦的常規(guī)篩查顯得尤其重要，如果能夠及早篩查和診斷妊娠期合并梅毒感染，并給予科學有效的治療，那么就能夠有效預防因妊娠梅毒導致的早產和死胎。本研究通過產前篩查梅毒螺旋體的三種檢測方法在梅毒診斷中的情況進行分析，探討不同檢測方法在梅毒診斷中的應用效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取珠海市香洲區(qū)人民醫(yī)院和斗門僑立中醫(yī)院2014年7～12月收治的500例孕婦作為研究對象，通過篩查，52例為妊娠期梅毒孕婦，年齡為20～40歲，平均（25.0±10.1）歲；病程1～4周，平均（2.2±1.5）周；初產婦32例，經產婦20例；早孕19例，中孕20例，晚孕13例。所有研究對象均通過TPPA、膠體金法和TRUST進行梅毒螺旋體的產前篩查。

1.2 方法

抽取空腹靜脈血5 ml，分別采用不同的方法進行檢測。

1.2.1 TPPA組 通過微量滴管將血清稀釋液滴入微量反應板第1孔中，每次滴入25 μl，共計100 μl，從第2孔至第4孔各滴入25 μl，通過移液管將25 μl樣品轉移到第1孔，然后再以2 n的方式從第1孔稀釋至第4孔。在第3孔內滴入未致敏粒子，在第4孔滴入致敏粒子，通過平板振蕩器對微量反應板內容物混合30 s，加蓋后在室溫下靜置2 h，觀察記錄結果。（-）：粒子呈現紐扣狀凝集，外周邊緣均勻平滑；（±）：粒子形成小環(huán)狀，邊緣平滑均勻；（+）：粒子環(huán)變大，外周邊緣雜亂不均勻；（++）：形成均一的凝集，在粒子底部呈現膜狀延伸形狀。

1.2.2 膠體金法組 將待測樣品、試紙和檢測材料放至室溫，測試條有剪頭的一端插入樣本容器內，反應10 s，平放15 min，觀察顯示結果。（+）：檢測線的位置和對照線的位置各有一條反應線出現；（-）：只是在對照線的位置有一條反應線出現。

1.2.3 TRUST組 在室溫下，將0.05 ml待測血清放置到試驗卡圈之中，涂勻，向內滴加1滴TRUST試劑，100 r/min輕輕搖動8 min，觀察實驗結果。根據鑒定標準進行鑒定和記錄結果。TRUST滴度測定：吸取TPPA陽性標本，通過生理鹽水進行倍比系列的稀釋，主要包括1：2、1：4、1：8、1：16、1：32、1：64、1：128，在相應的孔內加入待測樣品和稀釋血清，陰性對照、陽性對照各50 μl，均勻涂開，通過塑料吸管吸取TRUST抗原，每孔內垂直滴加20 μl，按照100 r/min均勻搖動8 min，然后觀察結果。陽性判定為粉紅色凝集物，陰性判定為只有粉紅色的均勻沉淀物但沒有凝集物。

1.3 觀察指標

觀察三種檢測方法的陰性、陽性結果，比較其敏感度、特異度、陰性預測值和陽性預測值情況，觀察TRUST滴度檢測情況。

1.4 統(tǒng)計學處理

采用SPSS 15.0統(tǒng)計學軟件對數據進行分析，計量資料以x±s表示，采用t檢驗，計數資料采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 三種檢測方法陰性、陽性結果的比較

三種檢測方法的陰性、陽性結果比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）（表1）。

2.2 三種檢測方法敏感度、特異度、陽性預測值和陰性預測值的比較

三種檢測方法的敏感度、特異度、陽性預測值和陰性預測值比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）（表2）。

2.3 TRUST滴度檢測情況

56例TPPA陽性標本中，53例TRUST滴度陽性，3例血清原倍為陰性，通過血清64倍稀釋后為假陰性。

3 討論

梅毒是人體感染梅毒螺旋體后引起的一種性傳播疾病，以生殖器潰瘍?yōu)橹饕R床表現[5-6]。依據其傳播途徑不同可分為獲得性梅毒、先天性梅毒和妊娠梅毒[7-8]。隨著人們生活方式和婚育觀念的變化，妊娠梅毒的發(fā)生率明顯增高，且多表現為潛伏性梅毒，如果不能進行有效的治療，可能對胎兒造成嚴重影響。有效地治療妊娠梅毒對于妊娠結局具有重要意義。

研究顯示，妊娠合并梅毒的臨床癥狀不明顯，易發(fā)生誤診。通過準確的檢測方式進行篩查是及早發(fā)現和及早治療妊娠梅毒、提高妊娠結局質量的關鍵所在。孕婦在妊娠期首次檢查一定要進行梅毒螺旋體檢測，以便保證母嬰安全[9-10]。梅毒螺旋體很容易在胎兒的肝、肺、脾、腎上腺和機體組織中大量繁殖，從而造成妊娠6周之后出現流產、死胎及死產等。一期、二期梅毒的傳染性最強，如果不能及時治療，很容易感染胎兒，感染率達到30%。感染超過2年的晚期梅毒，雖然沒有明顯的梅毒性損害臨床表現，其性接觸也已經沒有傳染性，但是其感染胎兒的概率仍然達到10%，即便是胎兒可以幸存，也可能轉為胎傳梅毒兒，其病情較復雜。早期臨床表現可能有皮膚大皰、皮疹、肝腺腫大、淋巴結腫大等，晚期容易發(fā)生楔齒狀、間質性角膜炎、骨膜炎、神經性耳聾，致殘率和致死率均較高，因此孕前和孕期一定要排除梅毒感染，各級醫(yī)師在孕前和早孕期指導時，必須宣傳和告知，以確保病例的早期發(fā)現和規(guī)范治療。探尋快速、有效、科學的梅毒診斷方法在孕前和早孕期進行篩查有很重要的臨床意義。

梅毒血清學檢查非梅毒螺旋體抗原血清試驗是梅毒的常規(guī)篩查方法，包括性病研究實驗室玻片試驗（VDRL）、血清不加熱反應素玻片試驗（USR）、快速血漿反應素環(huán)狀卡片試驗（RPR）。每種梅毒檢測方法的檢測對象各不相同，診斷效果也存在差異。TRUST試劑采用VDRL抗原重懸于含有甲苯胺紅的特制溶液中制成，檢測人血清或血漿中的反應素，其操作簡便快捷，但是易受到一些自身免疫性疾病的影響，進而出現假陽性。TPPA法通過把梅毒的精致菌體成分包被于人工載體明膠顆粒上，致敏粒子和檢測樣品中的梅毒螺旋體抗體進行凝集反應，從而將血清和血漿中的梅毒螺旋體抗體檢測出來，從而對抗體的效價進行測定，其操作簡單，適用于大量樣品的篩查，測定過程反應時間短，2 h之后基本都可以進行結果的判定[11-12]。

本研究選取珠海市香洲區(qū)人民醫(yī)院和斗門僑立中醫(yī)院符合條件的病例作為研究對象，采用TPPA、膠體金法和TRUST分別檢測妊娠期婦女梅毒，結果顯示，在500例妊娠期孕婦中，梅毒陽性52例，陰性448例；三種方法的敏感度、特異度、陽性預測值和陰性預測值比較，差異無統(tǒng)計學意義。另外，在56例TPPA陽性標本中，53例TRUST滴度陽性，3例血清原倍為陰性，3例中通過血清64倍稀釋為假陰性，提示TRUST滴度檢測過程中不能只做原倍血清檢測，同時還要做倍比稀釋后的血清滴度檢測，從而避免了TRUST滴度假陰性的出現，進一步提高了產前篩查梅毒螺旋體的準確率。

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（收稿日期：2015-01-09 本文編輯：祁海文）