西門子ADVIA2400檢測(cè)總膽固醇、甘油三酯異常結(jié)果原因分析及采取措施

吉增軍 徐士榮

西門子ADVIA2400檢測(cè)總膽固醇、甘油三酯異常結(jié)果原因分析及采取措施

吉增軍 徐士榮

目的 了解西門子ADVIA2400檢測(cè)總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）出現(xiàn)異常結(jié)果的原因并尋找應(yīng)對(duì)措施。方法 使用ADVIA2400單獨(dú)進(jìn)行TC、TG的測(cè)定作為對(duì)照組，反應(yīng)杯在檢測(cè)完無(wú)機(jī)磷（IP）后緊接著進(jìn)行TC、TG的測(cè)定作為實(shí)驗(yàn)1組，反應(yīng)杯在檢測(cè)完IP后增加一套清洗程序緊接著再進(jìn)行TC、TG的測(cè)定作為實(shí)驗(yàn)2組。將實(shí)驗(yàn)1組、實(shí)驗(yàn)2組分別與對(duì)照組進(jìn)行比較，觀察反應(yīng)杯之間的交叉污染情況以及反應(yīng)杯清洗前后對(duì)TC、TG測(cè)定結(jié)果的影響。結(jié)果 對(duì)照組TC值(4.80±0.059)、TG值(1.63±0.014)，實(shí)驗(yàn)1組TC值(2.91±1.15)、TG值（0.96±0.228），實(shí)驗(yàn)2組TC值（4.79±0.062）、TG值（1.63±0.015），對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)1組差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)2組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 西門子ADVIA2400全自動(dòng)生化分析儀存在反應(yīng)杯交叉污染現(xiàn)象，應(yīng)采用合適的清洗方法消除污染，以保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，為臨床提供更加可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

ADVIA2400；反應(yīng)杯；交叉污染；無(wú)機(jī)磷

泰州市第二人民醫(yī)院于2015年初剛剛投入使用了一套西門子生化免疫流水線，生化部分包括兩臺(tái)ADVIA2400全自動(dòng)生化分析儀，該儀器具有檢測(cè)速度快，節(jié)省試劑及標(biāo)本量等優(yōu)點(diǎn)，但在近幾個(gè)月使用過(guò)程中經(jīng)常發(fā)現(xiàn)有TC、TG等檢測(cè)項(xiàng)目結(jié)果明顯偏低的現(xiàn)象，復(fù)查后結(jié)果正常，每天室內(nèi)質(zhì)控均在控。后來(lái)在西門子應(yīng)用工程師的幫助下，本研究發(fā)現(xiàn)所有異常結(jié)果在檢測(cè)時(shí)使用的反應(yīng)杯上次檢測(cè)項(xiàng)目均為IP，于是高度懷疑為IP檢測(cè)之后造成的反應(yīng)杯交叉污染，為進(jìn)一步探尋其原因，本文采用

ADVIA2400生化分析儀進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 2015年5月26日在本院體檢健康者血清標(biāo)本20份，混勻制備成混合血清標(biāo)本。采用的儀器為西門子ADVIA2400全自動(dòng)生化分析儀。試劑包括：（1）IP檢測(cè)試劑盒（鉬藍(lán)比色法）。主要成分：試劑①：硫酸p-甲基氨基酚(10mmol/L)；試劑②：鉬酸銨(2.7mmol/L)、硫酸(0.6mmol/ L)。（2）TC檢測(cè)試劑盒（膽固醇氧化酶法）。（3）TG檢測(cè)試劑盒（去游離甘油法）均采用日本第一化學(xué)試劑及相關(guān)配套校準(zhǔn)品對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)，質(zhì)量控制使用上海昆淶生物有限公司提供的質(zhì)控品每天進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控。

1.2 方法 （1）取混合血清標(biāo)本5mL于試管內(nèi)，使用ADVIA2400單獨(dú)測(cè)定TC、TG各20次，作為對(duì)照組。（2）ADVIA2400共有反應(yīng)杯340個(gè)，為使絕大多數(shù)反應(yīng)杯都在進(jìn)行IP的檢測(cè)，選取足量的混合血清標(biāo)本先在ADVIA2400上連續(xù)檢測(cè)IP340次（樣本編號(hào)1-340），緊接著再分別做TC(樣本編號(hào)341-400)和TG（樣本編號(hào)401-460）的檢測(cè)，通過(guò)儀器查詢功能（reaction monitor），逐個(gè)調(diào)取每次TC和TG檢測(cè)所用反應(yīng)杯的情況，若此反應(yīng)杯上次進(jìn)行過(guò)IP的檢測(cè)，則保留此結(jié)果，所有結(jié)果中隨機(jī)抽取TC、TG各20個(gè)數(shù)據(jù)，作為實(shí)驗(yàn)1組。（3）在儀器反應(yīng)杯交叉污染選項(xiàng)中設(shè)定：在檢測(cè)完IP后，檢測(cè)TC、TG之前，增加一套清洗程序（堿性pw1），然后重復(fù)步驟(2)，得出另一組數(shù)據(jù)作為實(shí)驗(yàn)2組。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料采用“x±s”表示，采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

單獨(dú)檢測(cè)TC、TG（對(duì)照組），反應(yīng)杯先測(cè)IP再測(cè)TC、TG（實(shí)驗(yàn)1組）與先測(cè)IP增加一套清洗程序再測(cè)TC、TG（實(shí)驗(yàn)2組）結(jié)果的比較見(jiàn)表1。

表1 不同方式檢測(cè)TC、TG結(jié)果的比較(mmol/L)

3 討論

全自動(dòng)生化分析儀為檢驗(yàn)科日常工作提供了很大的幫助，在提高檢驗(yàn)質(zhì)量方面做出了巨大的貢獻(xiàn)。然而，無(wú)論多么精密的儀器設(shè)備，總有其不足之處，交叉污染就是生化儀使用過(guò)程中的一項(xiàng)永恒的話題，交叉污染包括樣品針、試劑針、攪拌棒和反應(yīng)杯之間的污染。目前研究較多的是試劑之間的交叉污染[1-6]，由于反應(yīng)杯之間的交叉污染發(fā)生更為隱蔽，一些受污染的結(jié)果不易及時(shí)發(fā)現(xiàn)，影響到檢驗(yàn)質(zhì)量，應(yīng)引起實(shí)驗(yàn)室工作人員的足夠重視[7]。

在本實(shí)驗(yàn)中，反應(yīng)杯在檢測(cè)完IP后緊接著進(jìn)行TC、TG的測(cè)定，其中TC結(jié)果比單獨(dú)檢測(cè)平均低1.89mmol/L，偏差達(dá)-39.4%，TG結(jié)果比單獨(dú)檢測(cè)平均低0.67mmol/L，偏差達(dá)-41.1%。IP的檢測(cè)對(duì)TC、TG的測(cè)定結(jié)果均有明顯的負(fù)干擾。測(cè)完IP后，通過(guò)增加一套清洗程序（堿性PW1）再測(cè)TC、TG，結(jié)果顯示，其與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，由此可見(jiàn)，清洗在消除交叉污染方面起了很大的作用。為了進(jìn)一步探討引起反應(yīng)杯發(fā)生交叉污染的原因，本研究在日本積水會(huì)社技術(shù)人員的幫助下，對(duì)IP試劑的主要成分進(jìn)行了具體的分析，并且做了相關(guān)的實(shí)驗(yàn)，本研究推斷：IP試劑①中的硫酸p-甲基氨基酚(10mmol/ L)具有很強(qiáng)的還原性，殘留在反應(yīng)杯中能夠競(jìng)爭(zhēng)性的與Trinder反應(yīng)中的H2O2發(fā)生反應(yīng)，使生成的紅色醌亞胺化合物減少，結(jié)果呈明顯的負(fù)干擾。這與我們平時(shí)工作中遇到的實(shí)際情況相一致，除TC、TG之外，尿酸(UA)、肌酐（Cr）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）的檢測(cè)原理也是Trinder反應(yīng)，平時(shí)也經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)檢測(cè)結(jié)果異常偏低復(fù)查后又正常的現(xiàn)象。于是本研究在這幾項(xiàng)的檢測(cè)過(guò)程中都增加了這套堿性清洗程序?，F(xiàn)在生化結(jié)果出現(xiàn)異常偏低的現(xiàn)象明顯減少、甚至消失，大大降低了標(biāo)本復(fù)查率，減輕了生化室工作人員的壓力。

西門子ADVIA2400自帶一套不斷更新的軟件系統(tǒng)，針對(duì)其配套試劑在防止交叉污染方面做了很多設(shè)置：在生化儀上配備有堿性PW1探針清洗液，酸性PW2及含有次氯酸鈉的PW3探針清洗液及探針沖洗程序[8]，通過(guò)選擇適當(dāng)?shù)那逑匆簩?duì)樣品針、試劑針、攪拌棒和反應(yīng)杯進(jìn)行清洗，能夠有效減少可能發(fā)生的交叉污染。但本室一直使用的是開(kāi)放試劑，這就要求我們要詳細(xì)了解每個(gè)項(xiàng)目的檢測(cè)原理及試劑組成，合理安排檢測(cè)順序，合理利用分析儀清洗程序，遇到異常結(jié)果及時(shí)查找原因，同時(shí)做好儀器的日常維護(hù)保養(yǎng)，只有這樣才能盡量避免發(fā)生交叉污染，保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

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10.3969/j.issn.1009-4393.2015.35.101

江蘇 225599 泰州市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科（吉增軍 徐士榮）