苦參殺蚊蟲(chóng)活性研究

穆鳳揚(yáng),穆鳳文, 穆鳳鳴,陳志會(huì),馬憲東（亳州市永剛飲片廠(chǎng)有限公司,安徽 亳州 236800）

苦參殺蚊蟲(chóng)活性研究

穆鳳揚(yáng),穆鳳文, 穆鳳鳴,陳志會(huì),馬憲東
（亳州市永剛飲片廠(chǎng)有限公司,安徽 亳州 236800）

摘 要：以苦參、苦楝、曼陀羅和白頭翁為原料，研究了苦參及其組方不同提取物對(duì)按蚊幼蟲(chóng)和成蟲(chóng)的毒殺作用，發(fā)現(xiàn)苦參組方的乙醇提取物對(duì)成蚊的毒殺作用較好，本實(shí)驗(yàn)對(duì)應(yīng)研發(fā)綠色家居殺蟲(chóng)劑具有一定的價(jià)值前景。

關(guān)鍵詞：苦參；蚊蟲(chóng)；孑孓；活性

苦參(Sophora ftavescens Afit.)為豆科槐屬植物。多生在山坡、沙地、草坡、灌木林中及田野附近，全國(guó)各地均有分布?？鄥⒆鳛獒t(yī)藥使用，據(jù)文字記載已有二千多年的歷史。藥理實(shí)驗(yàn)表明，苦參對(duì)痢疾桿菌、大腸桿菌、變形桿菌、金黃色葡萄球菌和乙型鏈球菌有明顯抑制作用[1]；苦參能抑制或殺滅藍(lán)氏賈第鞭毛蟲(chóng)和阿米巴原蟲(chóng),在體外其醇浸膏有抗滴蟲(chóng)作用[2]?？鄥A在治療慢性肝炎和肝纖維化等方面已得到廣泛的應(yīng)用。

為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用苦參植物資源，研制開(kāi)發(fā)新型植物源性殺蚊蟲(chóng)藥品，本研究以蚊蟲(chóng)為試驗(yàn)對(duì)象，對(duì)苦參及其組方的不同溶劑提取物殺蚊蟲(chóng)活性[3,4]進(jìn)行測(cè)定，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)選擇蚊蟲(chóng)幼蟲(chóng)孑孓和成蟲(chóng)為研究對(duì)象，試驗(yàn)材料為苦參根、苦楝、白頭翁和曼陀羅：中藥材采購(gòu)與亳州中藥材交易市場(chǎng)，經(jīng)亳州職業(yè)技術(shù)學(xué)院劉耀武副教授鑒定，60℃烘干，粉碎過(guò)30目篩，低溫條件下保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試驗(yàn)方法

（1）藥材提取。稱(chēng)取上述苦參兩份，每份10 g，分別用100 mL蒸餾水和100 mL乙醇室溫提取24 h，除去藥渣得上清液，備用；苦楝、白頭翁和曼陀羅各10 g，分別用100 mL 蒸餾水和100 mL乙醇室溫提取24 h，除去藥渣得上清液，備用。

（2）供試蚊蟲(chóng)。選取按蚊幼蟲(chóng)孑孓（2日齡，體長(zhǎng)2-3 mm）21組，每組10只放置于20 mL培養(yǎng)液中備用；選取按蚊成蟲(chóng)10組，每組10只放置于封閉的三角燒瓶中，備用。

（3）室內(nèi)毒力測(cè)定。每種供試提取物設(shè)4～5 個(gè)劑量,每次處理按蚊成、幼蟲(chóng)各10 只,4 次重復(fù),試驗(yàn)均以對(duì)應(yīng)濃度的乙醇溶液為對(duì)照。以孑孓在施藥后的死亡時(shí)間為參數(shù)，測(cè)定提取物對(duì)按蚊幼蟲(chóng)孑孓的毒力；以按蚊成蟲(chóng)在不同濃度乙醇提取夜中的游泳時(shí)間為參數(shù)，測(cè)定提取物對(duì)按蚊成蟲(chóng)的毒力。

（4）結(jié)果計(jì)算?？偹劳鰰r(shí)間表示在試驗(yàn)過(guò)程中實(shí)驗(yàn)組試按蚊的死亡情況，它反映了含苦參樣品對(duì)按蚊總的毒殺情況，但它不能排除試驗(yàn)過(guò)程中的誤差，即在試驗(yàn)過(guò)程中由于其他因素引起按蚊的死亡情況，采用校正死亡時(shí)間表示的試驗(yàn)結(jié)果可以排除由于其它因素造成的試驗(yàn)誤差,校正死亡時(shí)間按下公式計(jì)算。

校正死亡時(shí)間 ＝ 實(shí)驗(yàn)組死亡時(shí)間/(1-1/對(duì)照組死亡時(shí)間)

2 結(jié)果與分析

2.1 苦參毒殺孑孓效果測(cè)定結(jié)果

取4組含10只孑孓的20 mL培養(yǎng)液，分別加入苦參水提物2 mL、4 mL、10 mL和20 mL，第五組用濾網(wǎng)取10只孑孓放置于20 mL水提物中。觀(guān)察孑孓在含苦參提取物中的游泳時(shí)間，以每組孑孓死亡5只（死亡率＝50%）的時(shí)間為參數(shù)記為死亡時(shí)間，時(shí)間單位為分鐘，以孑孓在水中的生存時(shí)間為空白組，空白組死亡時(shí)間為無(wú)限大。由此看出，苦參水提物對(duì)孑孓具有較強(qiáng)的毒殺活性，且水提物濃度越大，其對(duì)孑孓的毒殺作用越強(qiáng)，在未經(jīng)稀釋的水提物中孑孓死亡時(shí)間為5.0 min，苦參水提物對(duì)孑孓的毒力如下。

第一組：體積比濃度10:1 10只 死亡時(shí)間41分鐘 校正死亡時(shí)間41分鐘

第二組：體積比濃度5:1 10只 死亡時(shí)間34分鐘 校正死亡時(shí)間34分鐘

第三組：體積比濃度2:1 10只 死亡時(shí)間28分鐘 校正死亡時(shí)間28分鐘

第四組：體積比濃度1:1 10只 死亡時(shí)間9分鐘 校正死亡時(shí)間9分鐘

第五組：體積比濃度0:1 10只 死亡時(shí)間5分鐘 校正死亡時(shí)間5分鐘

試驗(yàn)組取4組含10只孑孓的20mL培養(yǎng)液，分別加入苦參乙醇提物2mL、4mL、10mL和20mL，第五組用濾網(wǎng)取10只孑孓放置于20mL水提物中。觀(guān)察孑孓在含苦參提取物中的游泳時(shí)間，以孑孓死亡50%的時(shí)間為參數(shù)記為死亡時(shí)間，時(shí)間單位為分鐘；對(duì)照組分別以對(duì)應(yīng)濃度的乙醇溶液做空白試驗(yàn)，觀(guān)察孑孓的死亡時(shí)間。不同濃度的乙醇對(duì)孑孓有一定的毒殺作用，不同濃度苦參乙醇提取物對(duì)孑孓的毒殺作用強(qiáng)于相應(yīng)的苦參水提物對(duì)孑孓的毒殺作用，在未經(jīng)稀釋的乙醇提取物中孑孓死亡時(shí)間為3.0 min。

2.2 苦參組方毒殺孑孓效果測(cè)定結(jié)果

試驗(yàn)組取4組含10只孑孓的20 mL培養(yǎng)液，分別加入苦楝乙醇提物2mL、4mL、10mL和20mL，第五組用濾網(wǎng)取10只孑孓放置于20mL水提物中。觀(guān)察孑孓在含苦楝提取物中的游泳時(shí)間，以孑孓死亡50%的時(shí)間為參數(shù)記為死亡時(shí)間，時(shí)間單位為分鐘；對(duì)照組分別以對(duì)應(yīng)濃度的乙醇做空白試驗(yàn)，觀(guān)察孑孓的死亡時(shí)間。

取苦參、苦楝、曼陀羅和白頭翁乙醇提取液各25 mL，混合均勻，備用；試驗(yàn)組取4組含10只孑孓的20mL培養(yǎng)液，分別加入上述提取液化合物2mL、4 mL、10 mL和20 mL，第五組用濾網(wǎng)取10只孑孓放置于20 mL提取液化合物中。觀(guān)察孑孓在含提取物中的游泳時(shí)間，以孑孓死亡50%的時(shí)間為參數(shù)記為死亡時(shí)間，時(shí)間單位為分鐘；對(duì)照組分別以對(duì)應(yīng)濃度的乙醇做空白試驗(yàn)，觀(guān)察孑孓的死亡時(shí)間。

苦參、苦楝、曼陀羅和白頭翁乙醇提取液組方對(duì)孑孓的毒殺作用明顯強(qiáng)于苦參或苦楝乙醇提取液對(duì)孑孓的毒殺作用，在較低的乙醇濃度和提取物濃度下，孑孓的死亡時(shí)間明顯縮短，組方提取物稀釋一倍，孑孓的死亡時(shí)間為5.0 min，在未經(jīng)稀釋的乙醇提取物中孑孓死亡時(shí)間為2.0 min，苦楝水提物對(duì)孑孓的毒力見(jiàn)表1。

表1 苦參、苦楝、曼陀羅和白頭翁乙醇提取.液對(duì)幼蟲(chóng)的毒殺

對(duì)于蟲(chóng)齡（體長(zhǎng)）不同的孑孓個(gè)體來(lái)說(shuō)，其個(gè)體間的抗藥性和耐藥性具有一定的差異，蟲(chóng)齡較大的孑孓死亡時(shí)間偏長(zhǎng)，蟲(chóng)齡較小的孑孓死亡時(shí)間偏短（沒(méi)有考慮孑孓性別的影響）。

2.3 苦參組方毒殺按蚊成蟲(chóng)效果測(cè)定結(jié)果

試驗(yàn)組取4組含10只按蚊成蟲(chóng)，分別加入苦參乙醇提取物2 mL、4 mL、10 mL和20 mL，第五組按蚊成蟲(chóng)放置于20 mL乙醇提取物中。觀(guān)察按蚊成蟲(chóng)在含苦參提取物中的游泳時(shí)間，以按蚊成蟲(chóng)死亡50%的時(shí)間為參數(shù)記為死亡時(shí)間，時(shí)間單位為分鐘；對(duì)照組分別以對(duì)應(yīng)濃度的乙醇做空白試驗(yàn)，觀(guān)察孑孓的死亡時(shí)間（表2）。

表2 苦參乙醇提取液對(duì)按蚊成蟲(chóng)的毒殺

苦參、苦楝、曼陀羅和白頭翁提取液各一份混合均勻后，通過(guò)該混合液對(duì)按蚊成蟲(chóng)的毒殺作用研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)苦參組方乙醇提取液稀釋到含乙醇25%時(shí)（提取物的濃度同時(shí)降低）對(duì)按蚊成蟲(chóng)起到速殺作用。

3 討論

植物中含有對(duì)有害生物具有很高活性的物質(zhì)，其作用方式和作用機(jī)制亦不同于一般的化學(xué)合成農(nóng)藥，而且對(duì)環(huán)境安全。本研究表明，苦參組方具有較強(qiáng)的毒殺按蚊幼蟲(chóng)和成蟲(chóng)，可以克服化學(xué)殺蟲(chóng)劑氣味濃重和不適的缺陷；對(duì)進(jìn)一步開(kāi)發(fā)無(wú)公害，家居型殺蟲(chóng)劑具有較強(qiáng)的指導(dǎo)價(jià)值。

參考文獻(xiàn)：

[1]趙玉英,張如意.苦參化學(xué)成分研究概況[J].天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā),1991,3(03):93.

[2]牛奎之.苦參的藥理和臨床應(yīng)用[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志,1995,15(11):698.

[3]李貴明,周琳.苦參?印楝素微乳劑最佳配比與殺蟲(chóng)效果研究[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2011,6,203.

[4]鄭方強(qiáng),劉忠德,裴翠花.苦參總生物堿提取工藝優(yōu)化及殺蚜蟲(chóng)活性研究[J].2008,1,43.

項(xiàng)目基金：2013安徽省質(zhì)量工程項(xiàng)目—省級(jí)藥學(xué)特色專(zhuān)業(yè)（2013jxtd067）；2014安徽省質(zhì)量工程項(xiàng)目-藥品質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)省級(jí)特色專(zhuān)業(yè)（2014tszy055）。

作者簡(jiǎn)介：穆鳳揚(yáng)（1986-）,男,回族,安徽亳州人，工程師，研究方向:中藥質(zhì)量管理與控制。