利妥昔單抗對(duì)惡性淋巴瘤患者血清hepcidin、sCD40L、PDGF-BB與LDH水平的影響

葉煌陽，呂曉君，張映紅，姚擁華

(廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院 腫瘤內(nèi)科，福建 廈門 361003)

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利妥昔單抗對(duì)惡性淋巴瘤患者血清hepcidin、sCD40L、PDGF-BB與LDH水平的影響

葉煌陽，呂曉君，張映紅，姚擁華Δ

(廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院 腫瘤內(nèi)科，福建 廈門 361003)

目的 探究利妥昔單抗對(duì)惡性淋巴瘤患者血清鐵調(diào)素(hepcidin，Hepc)、可溶性CD40配體(soluble CD40 ligands，CD40L)、血小板衍生生長因子-BB(platelet derived growth factor-BB，PDGF-BB)與乳酸脫氫酶(lactic dehydrogenase，LDH)水平影響。方法 選取廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院腫瘤科收取的惡性淋巴瘤患者52例，隨機(jī)分為對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組，對(duì)照組予以環(huán)磷酰胺、吡柔比星、長春新堿及潑尼松治療，實(shí)驗(yàn)組在對(duì)照組的基礎(chǔ)上加用利妥昔單抗，治療結(jié)束后比較2組患者的hepcidin、sCD40L、PDGF-BB及LDH水平。結(jié)果 治療后，2組患者血清hepcidin、PDGF-BB及LDH水平降低(P<0.05)，sCD40L水平升高(P<0.05)。與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組患者h(yuǎn)epcidin、PDGF-BB及LDH水平較低(P<0.05)，sCD40L水平較高(P<0.05)。結(jié)論 利妥昔單抗對(duì)惡性淋巴瘤患者，具有降低血清hepcidin、PDGF-BB與LDH水平，增高sCD40L水平的作用。

利妥昔單抗；鐵調(diào)素；可溶性CD40配體；血小板衍生生長因子-BB；乳酸脫氫酶

惡性淋巴瘤(malignant lymphomas，ML)是一組起源于造血淋巴組織的惡性腫瘤，包括霍奇金淋巴瘤以及非霍奇金淋巴瘤2種[1]。最新調(diào)查表明，隨著病毒感染人群增多，引發(fā)惡性淋巴瘤發(fā)病率逐年增高[2]。貧血是淋巴瘤最易出現(xiàn)的并發(fā)癥之一，又稱慢性病性貧血(anemia of chronic disease，ACD)[3]。2003～2007年中國淋巴瘤發(fā)病粗率為6.54/10萬，占全部惡性腫瘤發(fā)病的2.46%，2003～2007年中國淋巴瘤死亡粗率為3.70/10萬，占全部惡性腫瘤死亡的2.15%[4]。本病發(fā)病機(jī)制是由于自身免疫細(xì)胞激活炎性反應(yīng)的細(xì)胞因子，阻礙紅細(xì)胞的合成分泌，紅細(xì)胞生成率降低，成活率以及生存時(shí)間減少，機(jī)體內(nèi)出現(xiàn)鐵穩(wěn)態(tài)失衡，引發(fā)貧血[5]。故本研究從鐵調(diào)素(hepcidin，Hepc)、可溶性CD40配體(soluble CD40 ligands，CD40L)、血小板衍生生長因子-BB(platelet derived growth factor-BB，PDGF-BB)與乳酸脫氫酶(lactic dehydrogenase，LDH)水平層面探討利妥昔單抗治療惡性淋巴瘤機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2013年9月～2015年3月廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院腫瘤科惡性淋巴瘤患者52例，男性27例，女性25例；彌漫大B淋巴瘤患者29例，小細(xì)胞淋巴瘤患者23例。采用隨機(jī)數(shù)字分配法，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組，其中實(shí)驗(yàn)組26例，男性14例，女性12例，年齡18～76歲，平均年齡(49.24±8.24)歲，彌漫大B淋巴細(xì)胞瘤14例，小細(xì)胞淋巴瘤12例；對(duì)照組26例，男性13例，女性13例，年齡20～77歲，平均年齡(48.13±7.97)歲，彌漫大B淋巴細(xì)胞瘤15例，小細(xì)胞淋巴瘤11例。2組患者的一般資料相仿，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均符合以下條件：①診斷符合《NCCN 2009 版非霍奇金淋巴瘤診療指南評(píng)價(jià)》[6]具備以下臨床特點(diǎn)：無痛性的鎖骨或淋巴結(jié)腫大，全身疲乏、消瘦、盜汗、發(fā)熱等癥狀；②年齡大于18歲，有自主意識(shí)，檢查顯示白細(xì)胞以及血小板數(shù)量減少，縱膈淋巴結(jié)腫大，骨髓浸潤。本實(shí)驗(yàn)獲得本院倫理協(xié)會(huì)批準(zhǔn)并全程跟蹤隨訪。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①患者存在藥物過敏史，與治療藥物產(chǎn)生過敏反應(yīng)；②有嚴(yán)重心、肝、腎等多臟器官疾病出現(xiàn)功能障礙或衰竭；③癲癇等神志異常。

1.2 方法

1.2.1 治療方法：患者入院后,均進(jìn)行血常規(guī)、生化常規(guī)、肝腎功能、骨髓穿刺以及病理學(xué)活檢、免疫酶標(biāo)等全面檢查。對(duì)照組患者入院后第1天，注射750 mg/m2環(huán)磷酰胺(山西普德藥業(yè)股份有限公司，國藥準(zhǔn)字H14023686)，第2天，注射40～45 mg/m2注射用鹽酸吡柔比星(深圳萬樂藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字H10930106)；第3天注射2 mg/m2長春新堿(廣州白云山明興制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H44022399)，第4天注射60 mg/m2醋酸潑尼松龍注射液(山東新華制藥股份有限公司，國藥準(zhǔn)字H37022910)，患者于治療前7 d口服 60 mg/d拉米夫定膠囊(北京萬生藥業(yè)有限責(zé)任公司，國藥準(zhǔn)字H20110078)，進(jìn)行抗病毒治療，每3周為1個(gè)療程，共進(jìn)行6個(gè)療程，于治療結(jié)束后持續(xù)口服藥物拉米夫定半年以上。實(shí)驗(yàn)組在對(duì)照組的基礎(chǔ)上于每5天第1天采用靜脈注射5～10 mg的地塞米松磷酸鈉注射液(山西天源制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H14021323)或肌肉注射20 mg復(fù)方氨酚苯海拉明片(吉林省銀河制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H22025258)，注射完成后30 min，實(shí)施375 mg/m2利妥昔單抗注射液(上海羅氏制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字J20080053)?；熃Y(jié)束后，定期進(jìn)行肝腎功能檢查，出現(xiàn)損傷的患者及時(shí)運(yùn)用護(hù)肝類藥物，靜脈點(diǎn)滴60 mg/d復(fù)方甘草酸苷溶液(日本Minophagen Pharmaceutical Co., Ltd，注冊(cè)證號(hào)：H20080264)，配合228 mg多烯磷脂酰膽堿注射液(深圳賽諾菲巴斯德生物制品有限公司，國藥準(zhǔn)字H20113068)，3次/天。

1.2.2 血清 hepcidin、sCD40L、PDGF-BB及LDH水平檢測：患者入院后次日8時(shí)空腹采靜脈血10 mL，3 000 r/min離心3 min分離血清,保存于-80℃的冰箱待測。運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附法(M600酶標(biāo)儀，上海研卉生物科技有限公司)進(jìn)行hepcidin、sCD40L及PDGF-BB檢測，其中hepcidin試劑盒、sCD40L試劑盒及PDGF-BB試劑盒購自武漢博士的生物技術(shù)有限公司，嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并在450 nm波長處測定樣本吸光度(A值)，計(jì)算血清中hepcidin、sCD40L及PDGF-BB的濃度。運(yùn)用D280全自動(dòng)生化分析儀(上海富勒生物科技有限公司)進(jìn)行速率法檢測血清LDH水平。

2 結(jié)果

2組患者治療前后血清hepcidin、sCD40L、PDGF-BB及LDH水平比較

治療后，2組患者h(yuǎn)epcidin、PDGF-BB及LDH水平降低(P<0.05)，sCD40L水平升高(P<0.05)。與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組患者h(yuǎn)epcidin、PDGF-BB及LDH水平較低(P<0.05)，sCD40L水平較高(P<0.05)。見表1。

表1 2組患者治療前后血清hepcidin、sCD40L、PDGF-BB及LDH水平比較Tab.1 Comparison of serum hepcidin, sCD40L, PDGF-BB and LDH levels pre-and post-treatment between two groups ±s)

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對(duì)照組治療后比較，compared with control group post-treatment

3 討論

惡性淋巴瘤是嚴(yán)重影響人類健康進(jìn)而威脅人類生命的一種血液系統(tǒng)惡性腫瘤[7]。其發(fā)病機(jī)制是：與機(jī)體免疫機(jī)制有關(guān)，當(dāng)機(jī)體內(nèi)出現(xiàn)癌細(xì)胞對(duì)免疫具有抑制作用，機(jī)體不產(chǎn)生感染肝細(xì)胞的免疫反應(yīng)，機(jī)體的免疫動(dòng)能修復(fù)后，被感染的肝細(xì)胞再次啟動(dòng)，引起肝細(xì)胞的壞死；機(jī)體內(nèi)B淋巴細(xì)胞在其作用下含量明顯降低，作用時(shí)間縮短，出現(xiàn)體液免疫功能異常。

本研究結(jié)果顯示，治療后2組hepcidin水平均明顯降低(P<0.05)，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比，hepcidin水平降低顯著(P<0.05)。鐵調(diào)素(hepcidin)是一種控制鐵代謝副作用[8]，抑制腸道內(nèi)鐵元素的吸收和單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)鐵進(jìn)行釋放，于惡性淋巴瘤發(fā)病機(jī)制中尤為重要。白介素-6(IL-6)與hepcidin合成分泌具有重要影響的炎癥因子，貧血的發(fā)生與鐵代謝以及hepcidin合成分泌密切相關(guān)。Hepcidin主要參與肝臟合成、鐵代謝，抑制細(xì)胞內(nèi)鐵釋放作用[9]，在巨噬細(xì)胞內(nèi)聚集，于腸道內(nèi)被吸收，紅細(xì)胞生成利用率降低。治療后2組sCD40L水平均明顯增高(P<0.05)，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比，sCD40L水平升高顯著(P<0.05)。sCD40L是一種位于胞質(zhì)外區(qū)，具有刺激B淋巴細(xì)胞活化的跨膜糖蛋白[10]。sCD40L的有效成分是CD40L，生物活性強(qiáng)。sCD40L可以增加血管系統(tǒng)的生物學(xué)功能，水平增高提示機(jī)體內(nèi)癌細(xì)胞數(shù)量減少。實(shí)驗(yàn)組運(yùn)用利妥昔單抗，sCD40L水平增高，提示淋巴癌細(xì)胞數(shù)量降低。2組PDGF-BB水平明顯降低(P<0.05)，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比，PDGF-BB水平明顯降低(P<0.05)。PDGF是一種與新生腫瘤生長發(fā)展以及轉(zhuǎn)移關(guān)系緊密的血管新生調(diào)控因子，正常人體內(nèi)PDGF分泌被抑制，水平較低，但患有實(shí)體瘤患者體內(nèi)表達(dá)水平高[11]。血管的新生成為惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，血管的生長為腫瘤提供了氧以及營養(yǎng)物質(zhì)，當(dāng)腫瘤逐漸步入血管形成期，其生長速度無法被抑制。本文通過研究證實(shí)，實(shí)驗(yàn)組使用利妥昔單抗，PDGF-BB水平降低，細(xì)胞壞死以及血管形成被抑制，癌細(xì)胞得到控制。LDH是一種存在于心、腎、肝臟以及骨骼肌等內(nèi)的糖酵解酶以及糖異生酶系[12]。國際淋巴瘤預(yù)后指標(biāo)中LDH具有重要的預(yù)后作用，對(duì)惡性淋巴癌的診斷較為標(biāo)準(zhǔn)。本研究結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組LDH水平明顯降低(P<0.05)，證實(shí)利妥昔單抗具有緩解氧化還原反應(yīng)，降低淋巴癌發(fā)生的作用。

本研究通過52例對(duì)惡性淋巴瘤患者血清hepcidin、sCD40L、PDGF-BB與LDH水平進(jìn)行研究，證實(shí)了利妥昔單抗可以降低惡性淋巴瘤患者血清hepcidin、PDGF-BB與LDH水平，增高sCD40L水平的作用。

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(編校：王儼儼)

Effect of rituximab on serum hepcidin, sCD40L, PDGF-BB and LDH levels in patients with malignant lymphadenoma

YE Huang-yang, LV Xiao-jun, ZHANG Ying-hong, YAO Yong-huaΔ

(Department of Medical Oncology, The First Affiliated Hospital of Xiamen, Xiamen 361003,China)

ObjectiveTo explore the effect of rituximab on serum hepcidin (Hepc), soluble CD40 ligands (sCD40L), platelet derived growth factor-BB (PDGF-BB) and lactate dehydrogenase (LDH) in patients with malignant lymphadenoma.Methods52 patients with malignant lymphoma from the hospital were randomly divided into control group and experimental group. The control group were treated by cyclophosphamide, pirarubicin, vincristine and prednisone and the experiment group were treated on the basis of control group with rituximab. The serum hepcidin, sCD40L, PDGF-BB and LDH levels were compared after treatment.ResultsCompared with pre-treatment, the serum hepcidin, PDGF-BB and LDH levels were lower(P<0.05), the sCD40L level was higher(P<0.05) post-treatment. The serum hepcidin, PDGF-BB and LDH levels in experimental group post-treatment were lower, sCD40L level was higher than those in control group(P<0.05).ConclusionsThe rituximab could reduce serum hepcidin, PDGF-BB and LDH levels and elevate serum sCD40L level in patients with malignant lymphadenoma.

rituximab; soluble CD40 ligands; platelet derived growth factor-BB; lactic dehydrogenase

葉煌陽，男，本科，主任醫(yī)師，研究方向：惡性淋巴瘤，E-mail：yehuangyang@csco.org.cn；姚擁華，通訊作者，女，本科，主任醫(yī)師，研究方向：小兒惡性淋巴瘤，E-mail：1684907959@qq.com。

R733.4

A

1005-1678(2015)09-0136-03