CD4+T細胞凋亡率對高血壓疾病患者眼底病變的影響

徐 昕，魏建麗，袁愛娟

(1.寧波市第二醫(yī)院眼科，浙江 寧波 315010；2.寧波市眼科醫(yī)院眼底內(nèi)科，浙江 寧波 315040；3.寧波市鄞州人民醫(yī)院產(chǎn)科，浙江 寧波 315040)

CD4+T細胞凋亡率對高血壓疾病患者眼底病變的影響

徐 昕1，魏建麗2，袁愛娟3

(1.寧波市第二醫(yī)院眼科，浙江 寧波 315010；2.寧波市眼科醫(yī)院眼底內(nèi)科，浙江 寧波 315040；3.寧波市鄞州人民醫(yī)院產(chǎn)科，浙江 寧波 315040)

目的 探索妊娠期高血壓疾病患者(PIH)的外周血CD4+T細胞凋亡率及其對眼底病變的影響。方法 選取2012年1月至2014年1月鄞州人民醫(yī)院產(chǎn)科接收的68例妊娠期高血壓疾病患者作為PIH組(眼底病變組)，而同期接收的38例正常分娩產(chǎn)婦作為對照組(無眼底病變組)，檢測并分析產(chǎn)前和產(chǎn)后外周靜脈血CD4+T細胞凋亡率，并分析對眼底病變的影響。結(jié)果 產(chǎn)前各組CD4+T細胞凋亡率比較有顯著性差異(F=7.335，P<0.05)。產(chǎn)前PIH組CD4+T細胞凋亡率較對照組顯著增加(t=5.192，P<0.05)。產(chǎn)前PIH 輕度組CD4+T細胞凋亡率較PIH中度、重度組顯著增加(t值分別為8.554、7.783，均P<0.05)。產(chǎn)后各組CD4+T細胞凋亡率比較差異無顯著性差異(F=2.934，P>0.05)。不同眼底病變程度患者產(chǎn)前和產(chǎn)后CD4+T細胞凋亡率比較均無顯著性差異(F值分別為1.433、2.041，均P>0.05)，產(chǎn)前和產(chǎn)后眼底病變分級與PIH程度均呈顯著正相關(guān)(r值分別為0.577、0.639，均P<0.05)。結(jié)論 妊娠期高血壓疾病患者的眼底病變隨患者臨床病情的加重而呈加重的趨勢，且產(chǎn)后較產(chǎn)前普遍好轉(zhuǎn)，外周血CD4+T細胞凋亡對PIH的發(fā)生及病情發(fā)展具有一定的預(yù)警作用，但外周血CD4+T細胞凋亡在PIH患者視網(wǎng)膜病變的發(fā)生、發(fā)展中的作用有待進一步研究。

妊娠期高血壓；外周血；CD4+T細胞凋亡率；眼底病變

近年來的相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)[1]，妊娠期高血壓疾病的發(fā)生、發(fā)展與細胞的異常凋亡導(dǎo)致母體對胎兒產(chǎn)生免疫耐受紊亂具有一定的相關(guān)性，而目前對于外周血CD4+T細胞凋亡在妊娠期高血壓疾病及視網(wǎng)膜病變的發(fā)生、發(fā)展中的影響報道較少，本研究旨在探討妊娠期高血壓疾病患者外周血CD4+T細胞凋亡率對眼底病變的影響，以為妊娠期高血壓及視網(wǎng)膜病變的防治提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年1月至2014年1月鄞州人民醫(yī)院產(chǎn)科住院部收治的68例妊娠期高血壓疾病(pregnancy induced hypertension，PIH)患者作為PIH組(眼底病變組)，均符合《婦產(chǎn)科學(xué)(第7版)》中診斷標準[2]，眼底檢查由同一專業(yè)醫(yī)師進行，于散瞳后應(yīng)用直接檢眼鏡檢查眼底，所有患者均存在不同程度眼底病變，依據(jù)《眼科學(xué)》中相關(guān)標準對眼底病變進行分期[3]，其中Ⅰ級19例，Ⅱ級34例，Ⅲ級15例。68例患者年齡在22～40歲，平均(29.66±3.76)歲，包括初產(chǎn)婦40例和經(jīng)產(chǎn)婦28例，孕周均在30～42周，平均為(36.78±2.87)周。另選取同期接收的38例正常分娩產(chǎn)婦作為對照組(無眼底病變組)，年齡23～41歲，平均(30.59±4.29)歲，包括初產(chǎn)婦23例和經(jīng)產(chǎn)婦15例，孕周均在31～42周，平均為(36.93±2.03)周。兩組均排除原發(fā)性高血壓疾病者；伴有其他妊娠并發(fā)癥者；兩組研究對象年齡、孕周及孕產(chǎn)情況比較均無顯著性差異(均P>0.05)，有可比較性。

1.2 研究方法

兩組產(chǎn)婦均于產(chǎn)前和產(chǎn)后3～4d抽取其清晨空腹肘靜脈血液2mL置抗凝管中，于2h內(nèi)進行檢測。采用流式細胞儀(美國BD公司)測定外周血CD4+T細胞凋亡率，ANNEXINⅤ/PI凋亡試劑盒購自Biolegend公司，染色過程參考試劑盒專用說明書。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 各組間CD4+T細胞凋亡率

產(chǎn)前各組CD4+T細胞凋亡率比較有顯著性差異(P<0.05)。產(chǎn)前PIH組CD4+T細胞凋亡率較對照組顯著增加(見附圖，凋亡細胞比例為Q2+Q3)，且兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。產(chǎn)前PIH 輕度組CD4+T細胞凋亡率較PIH中度、重度組顯著增加，且差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)。產(chǎn)后各組CD4+T細胞凋亡率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

Q1)死細胞；Q2)中晚期凋亡細胞；Q3)早期凋亡細胞；Q4)活細胞。

附圖 ANNEXIN Ⅴ/PI染色后的細胞凋亡流式圖

Fig. Flow chart of cell apoptosis after ANNEXIN Ⅴ/PI staining

2.2 眼底病變與CD4+T細胞凋亡率分析

不同眼底病變程度患者產(chǎn)前和產(chǎn)后CD4+T細胞凋亡率比較均無顯著性差異(均P>0.05)，見表2。

Table 1 Comparison of CD4+T cell apoptosis rate among different groups

注：◆為PIH組與對照組比較，▲為PIH輕度組與中度組比較，★為PIH輕度組與重度組比較。

組別 產(chǎn)前 產(chǎn)后 例數(shù)(n)凋亡率例數(shù)(n)凋亡率對照組(0級)3858.03±6.404565.49±4.93PIH組6861.80±7.626160.11±5.77 Ⅰ級1960.64±7.212858.30±5.30 Ⅱ級3461.63±6.932562.94±6.36 Ⅲ級1563.10±7.22853.84±5.49F1.4332.041P0.8840.484

2.3 妊娠高血壓嚴重程度與眼底病變分級的相關(guān)性分析

產(chǎn)前和產(chǎn)后眼底病變分級與PIH程度均呈顯著正相關(guān)(r值分別為0.577、0.639，均P<0.05)，說明高血壓越嚴重，眼底病變越嚴重，PIH患者眼底改變隨臨床病情加重而加重。

3 討論

3.1 妊娠期高血壓疾病的發(fā)病機制及患者眼底病變的原因

妊娠期高血壓疾病(PIH)是妊娠期特有而常見的并發(fā)癥之一，常出現(xiàn)于妊娠中晚期，同時也是導(dǎo)致早產(chǎn)等不良出生結(jié)局和孕產(chǎn)婦死亡的主要原因，其發(fā)病率高達7%～10%，嚴重威脅母嬰安全，但對于其發(fā)病機制目前尚不十分清楚[4-5]。近些年，隨著肥胖孕婦逐漸增多，PIH的發(fā)生率逐漸增加，而其最基本的病理變化為全身小動脈痙攣及周圍循環(huán)障礙而導(dǎo)致血壓升高，視網(wǎng)膜血管又是全身最容易窺見的部位，持續(xù)的小動脈痙攣可使視網(wǎng)膜及視神經(jīng)出現(xiàn)功能障礙，因此，眼底檢查對評估PIH患者病情及進行相關(guān)治療具有重要意義[6]。

3.2 妊娠期高血壓疾病患者外周血CD4+T細胞凋亡率對眼底病變的影響

研究發(fā)現(xiàn)，胎盤的免疫耐受機制在妊娠過程中發(fā)揮重要作用，一旦此機制受到破壞則會導(dǎo)致病理妊娠，成為PIH發(fā)生和發(fā)展的最主要原因，且該機制的破壞由異常細胞凋亡引起[7]。凋亡是機體清除體內(nèi)感染、變異或衰老細胞并維持其自身的正常生理狀態(tài)的主要調(diào)節(jié)方式，相關(guān)研究已證實，人體細胞凋亡與多種生理過程密切相關(guān)。PIH的發(fā)生與機體的細胞免疫功能失調(diào)有關(guān)，而CD4+T在其中扮演重要角色，CD4+T細胞具有免疫抑制效應(yīng)，可抑制T細胞對自身抗體、外源及胎兒的免疫反應(yīng)。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，產(chǎn)前PIH組CD4+T細胞凋亡率較對照組顯著增加(P<0.05)，而PIH 輕度組CD4+T細胞凋亡率較PIH中度、重度組顯著增加且差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，提示PIH患者的發(fā)病早期，患者外周血中CD4+T細胞會出現(xiàn)過度凋亡而導(dǎo)致其凋亡率顯著增加，但隨患者病情的進展，機體自身會進行相應(yīng)的調(diào)節(jié)而使外周血中CD4+T細胞凋亡逐漸恢復(fù)正常。產(chǎn)后各組CD4+T細胞凋亡率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，說明產(chǎn)后PIH患者高血壓嚴重程度較產(chǎn)前得到明顯改善。此外，本研究還發(fā)現(xiàn)，不同眼底病變程度患者產(chǎn)前和產(chǎn)后CD4+T細胞凋亡率比較均無顯著性差異(均P>0.05)，提示CD4+T細胞在PIH視網(wǎng)膜病變發(fā)生發(fā)展過程中的作用尚不明確。但相關(guān)分析結(jié)果提示，產(chǎn)前和產(chǎn)后眼底病變分級與PIH程度均呈顯著正相關(guān)(均P<0.05)，說明高血壓越嚴重，眼底病變越嚴重，PIH患者眼底改變隨臨床病情加重而加重。視網(wǎng)膜血管是全身唯一可用肉眼看見的小血管，其病變可作為該病嚴重程度的重要參數(shù)，臨床醫(yī)師可通過觀察眼底視網(wǎng)膜血管的變化了解全身的小血管的病變程度。因此，眼底檢查在判斷PIH患者的病情進展及嚴重程度方面具有重要的臨床應(yīng)用價值[8]。

綜上所述，PIH患者的眼底病變隨患者臨床病情的加重而呈加重的趨勢，且產(chǎn)后較產(chǎn)前均有普遍好轉(zhuǎn)。外周血CD4+T細胞凋亡對PIH的發(fā)生及病情發(fā)展具有一定的預(yù)警作用，但外周血CD4+T細胞凋亡在PIH患者視網(wǎng)膜病變的發(fā)生、發(fā)展中的作用有待進一步研究。

[1]Fogle J E,Mexas A M,Tompkins W A,etal.CD4+CD25+Tregulatory cells inhibit CD8+IFN-gamma production during acute and chronic FIV infection utilizing a membrance TGF-beta-dependent mechanism[J].AIDS Res Hum Retroviruses,2010,26(2):201.

[2]樂杰,謝幸,林仲秋,等.婦產(chǎn)科學(xué)[M]. 7版,北京:人民衛(wèi)生出版社,2008:94-200.

[3]管懷進,顏華,雷寧玉,等.眼科學(xué)[M].2版,北京:科學(xué)出版社,2006:285.

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[7]曹衛(wèi)平,錢秋菊,溫堅,等.妊娠期高血壓患者外周血CD4+CD25+Foxp3+調(diào)節(jié)性T細胞的變化及意義[J].中國病理生理雜志,2010,26(7):1425-1427.

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[專業(yè)責任編輯：張欣文]

Effect of apoptosis rate of CD4+T cell on retinopathy in patients with pregnancy induced hypertension

XU Xin1, WEI Jian-li2, YUAN Ai-juan3

(1.OphthalmologyDepartmentofNingBoNo.2Hospital,Zhejiang,Ningbo315010,China; 2.InternalMedicineDepartmentofNingboOphthalmologicHospital,Zhejiang,Ningbo315040,China;3.GynecologyDepartmentofNingboYinzhouPeople’sHospital,Zhejiang,Ningbo315040,China)

Objective To explore the apoptosis rate of CD4+T cell in peripheral blood and its effect on retinopathy in patients with pregnancy induced hypertension (PIH). Methods From January 2012 to January 2014 68 inpatiants with PIH in obstetric department of Yinzhou People’s Hospital were collected as PIH group (retinopathy group), and 38 pregnant women with normal delivery at the same period were recruited in control group (non-retinopathy group). The prenatal and postnatal apoptosis rates of CD4+T cell in peripheral blood were detected, and the influences on retinopathy were analyzed. Results Prenatal apoptosis rate of CD4+T cell was significantly different among different groups (F=7.335,P<0.05), and it was higher in PIH groups than in the control group (t=5.192,P<0.05). Prenatal CD4+T cell apoptosis rate of mild PIH group was significantly increased than that of moderate PIH group and severe PIH group (tvalue was 8.554 and 7.783, respectively, bothP<0.05). Postnatal CD4+T cell apoptosis rate of all groups was not significantly different (F=2.934,P>0.05). Prenatal and postnatal CD4+T cell apoptosis rate showed no obvious difference between patients with different degree of retinopathy (Fvalue was 1.433 and 2.041, respectively, bothP>0.05), and prenatal and postnatal retinopathy grade were positively correlated with the extent of PIH degree (rvalue was 0.577 and 0.639, respectively, bothP<0.05). Conclusion The degree of retinopathy in PIH patients shows the same tendency with the degree of clinical symptoms, and the disease is improved after delivery. Peripheral blood CD4+T cell apoptosis has a certain role in early warning for occurrence and progression of PIH. However, further studies are needed to explore the role of CD4+T cell apoptosis in peripheral blood in the genesis and development of retinopathy in PIH patients.

pregnancy induced hypertension (PIH); peripheral blood; CD4+T cell apoptosis rate; retinopathy

2014-12-16

徐 昕(1974-)，女，副主任醫(yī)師，主要從事眼科臨床、眼底病的診治工作。

10.3969/j.issn.1673-5293.2015.03.084

R714.2

A

1673-5293(2015)-0633-03