血清可溶性信號(hào)素4D水平與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病發(fā)生的相關(guān)性研究

匡龍，趙良平，尤濤，徐衛(wèi)亭，陳建昌

·專(zhuān)題研究·

血清可溶性信號(hào)素4D水平與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病發(fā)生的相關(guān)性研究

匡龍，趙良平，尤濤，徐衛(wèi)亭，陳建昌

目的探討血清可溶性信號(hào)素4D(sSema4D)水平與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病(冠心病)發(fā)生的相關(guān)性。方法選取2013年5月—2014年5月因胸悶、胸痛于蘇州大學(xué)附屬第二醫(yī)院就診并接受冠狀動(dòng)脈造影的患者297例為研究對(duì)象，根據(jù)量化冠狀動(dòng)脈造影將患者分為冠心病組(177例)和對(duì)照組(120例)，并將冠心病組患者分為穩(wěn)定型冠心病(95例)和急性冠脈綜合征(82例)。入院即刻抽取外周靜脈血，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測(cè)血清sSema4D水平。結(jié)果冠心病組和對(duì)照組患者年齡、高血壓檢出率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0．05)。兩組患者性別、吸煙率、糖尿病檢出率及空腹血糖(FPG)、總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL－C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL－C)、sSema4D水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．05)。冠心病組中，急性冠脈綜合征患者sSema4D水平為(8．70±2．19)μg/L，高于穩(wěn)定型冠心病患者的(6．50±2．60)μg/L(t =6．034，P＜0．001)。多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，LDL－C〔OR=6．665，95%CI(1．206，36．844)，P =0．030〕和sSema4D〔OR=5．013，95%CI(1．807，13．904)，P=0．002〕進(jìn)入回歸方程，是冠心病發(fā)生的危險(xiǎn)因素。sSema4D水平預(yù)測(cè)冠心病發(fā)生的最佳截點(diǎn)為5．58μg/L，靈敏度為83．8%，特異度為78．1%，受試者工作特征曲線(ROC曲線)下面積為0．913〔95%CI(0．847，0．978)，P＜0．001〕。結(jié)論高水平sSema4D是冠心病發(fā)生的危險(xiǎn)因素，其預(yù)測(cè)冠心病的發(fā)生有較高的靈敏度和特異度。

冠心病;信號(hào)素類(lèi);危險(xiǎn)因素

匡龍，趙良平，尤濤，等．血清可溶性信號(hào)素4D水平與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病發(fā)生的相關(guān)性研究［J］．中國(guó)全科醫(yī)學(xué)，2015，18(36):4412－4415．［www．chinagp．net］

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冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病(冠心病)是危害人類(lèi)健康的重大疾病之一，主要病理表現(xiàn)為冠狀動(dòng)脈發(fā)生粥樣硬化病變引起血管管腔狹窄或阻塞，主要病理機(jī)制為血管內(nèi)皮功能受損、脂質(zhì)沉積以及慢性炎性反應(yīng)［1］。近年研究表明，血小板通過(guò)激活炎性反應(yīng)、釋放促炎細(xì)胞因子、介導(dǎo)相關(guān)脂蛋白調(diào)節(jié)、促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞變性等途徑，在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用［2－3］。信號(hào)素4D(Sema4D)是新發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞因子，在血小板表面表達(dá)，并隨著血小板活化裂解脫落到血漿中，形成可溶性Sema4D(sSema4D)，進(jìn)而通過(guò)促進(jìn)炎性反應(yīng)、誘導(dǎo)血小板活化及粥樣斑塊內(nèi)新生血管形成等參與動(dòng)脈粥樣硬化與血栓形成［4］。而關(guān)于sSema4D水平在冠心病發(fā)生中的作用，國(guó)內(nèi)外報(bào)道較少。本研究通過(guò)比較冠心病和非冠心病人群血清sSema4D水平的差異，探討sSema4D水平與冠心病的關(guān)系。

1對(duì)象與方法

1．1研究對(duì)象選取2013年5月—2014年5月因胸悶、胸痛于蘇州大學(xué)附屬第二醫(yī)院就診并接受冠狀動(dòng)脈造影的患者297例為研究對(duì)象，其中男163例，女134例;平均年齡(60．5±14．8)歲。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)年齡＜18歲;(2)入院前接受過(guò)止血、凝血及抗纖溶藥物等治療;(3)近期有感染性疾病史;(4)合并嚴(yán)重肝腎功能不全、自身免疫性疾病、惡性腫瘤、腦出血和腦梗死。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者均知情同意。

1．2方法

1．2．1冠狀動(dòng)脈造影采用Judkins法經(jīng)橈動(dòng)脈或股動(dòng)脈行冠狀動(dòng)脈造影，根據(jù)量化冠狀動(dòng)脈造影判斷冠狀動(dòng)脈病變程度，若至少1支冠狀動(dòng)脈主干或其主要分支管腔狹窄≥50%，則判斷為冠狀動(dòng)脈病變，據(jù)此將患者分為冠心病組(177例)和對(duì)照組(120例)。結(jié)合患者癥狀、心電圖及血液檢測(cè)指標(biāo)，參考相關(guān)診斷指南［5－8］，將冠心病組患者分為穩(wěn)定型冠心病(95例)和急性冠脈綜合征(82例)。

1．2．2 sSema4D、血糖、血脂水平檢測(cè)入院即刻抽取外周靜脈血3～5 ml，取血清并保存于－80℃冰箱待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測(cè)血清sSema4D水平，試劑盒購(gòu)于上海鑫樂(lè)生物科技有限公司，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。入院次日清晨空腹抽取肘靜脈血4 m l，置于無(wú)菌干燥試管，采用BS－330邁瑞全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)空腹血糖(FPG)、總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL－C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL－C)水平。

1．3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 17．0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，正態(tài)分布的計(jì)量資料以(x±s)表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗(yàn);采用多因素Logistic回歸分析冠心病發(fā)生的危險(xiǎn)因素;采用受試者工作特征曲線(ROC曲線)評(píng)價(jià)sSema4D水平預(yù)測(cè)冠心病發(fā)生的價(jià)值。以P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2．1臨床資料兩組患者年齡、高血壓檢出率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0．05)。兩組患者性別、吸煙率、糖尿病檢出率及FPG、TC、TG、HDL－C、LDL－C、sSema4D水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．05，見(jiàn)表1)。冠心病組中，急性冠脈綜合征患者sSema4D水平為(8．70±2．19)μg/L，高于穩(wěn)定型冠心病患者的(6．50±2．60)μg/L，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t =6．034，P＜0．001)。

2．2冠心病發(fā)生危險(xiǎn)因素分析以性別、吸煙、糖尿病、LDL－C及sSema4D為自變量，以是否患有冠心病為因變量行多因素Logistic回歸分析，變量賦值見(jiàn)表2。結(jié)果顯示，LDL－C、sSema4D進(jìn)入回歸方程，是冠心病發(fā)生的危險(xiǎn)因素(P＜0．05，見(jiàn)表3)。

表2冠心病發(fā)生危險(xiǎn)因素的Logistic回歸分析變量賦值Table 2 Variable assignment of Logistic regression analysis of risk factors for coronary disease

表3冠心病發(fā)生危險(xiǎn)因素的多因素Logistic回歸分析結(jié)果Table 3 Result ofmultivariate Logistic regression analysis of risk factors for coronary disease

2．3 ROC曲線分析sSema4D水平預(yù)測(cè)冠心病發(fā)生的最佳截點(diǎn)為5．58μg/L，靈敏度為83．8%，特異度為78．1%，ROC曲線下面積0．913〔95%CI(0．847，0．978)，P＜0．001，見(jiàn)圖1〕。

表1對(duì)照組和冠心病組患者臨床資料比較Table 1 Comparison of clinical data between control group and CHD group

圖1 sSema4D水平預(yù)測(cè)冠心病發(fā)生的ROC曲線Figure 1 ROC curves of sSema4D level predicting the risk of coronary disease

3討論

隨著研究的不斷拓展和深入，預(yù)測(cè)冠心病發(fā)生的新指標(biāo)逐漸被發(fā)現(xiàn)和證實(shí)。本研究結(jié)果顯示，源自血小板活化脫落的sSema4D與冠心病的發(fā)生有關(guān)，冠心病患者血清sSema4D水平高于非冠心病患者，高水平sSema4D是冠心病發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。

Sema4D是腦信號(hào)蛋白Semaphorin家族一員，2007年Zhu等［4］首次報(bào)道，鼠和人的血小板表面有Sema4D及其受體Plexin－B1、CD72表達(dá)，且在血小板活化時(shí)，Sema4D脫落釋放入血形成120 kD的sSema4D。雖然其結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變，但其仍保留有跨膜型Sema4D的生物學(xué)活性［9－10］。小鼠Sema4D基因敲除后，其血小板膠原受體信號(hào)受損，血小板功能受到抑制，表現(xiàn)為血栓形成障礙和動(dòng)脈粥樣硬化減少［4］。因此，Sema4D水平升高被認(rèn)為是血栓性疾病發(fā)生的危險(xiǎn)因素。

Sema4D在血小板活化、動(dòng)脈粥樣硬化及血栓形成等血栓病理過(guò)程中發(fā)揮一定作用。動(dòng)脈粥樣硬化是血管內(nèi)皮受損、脂質(zhì)沉積、炎性反應(yīng)、免疫反應(yīng)共同作用的結(jié)果［11］。Zhu等［12］研究發(fā)現(xiàn)，低密度脂蛋白受體基因敲除〔LDLR(－/－)〕小鼠經(jīng)高脂喂養(yǎng)6個(gè)月后主動(dòng)脈內(nèi)發(fā)生廣泛的脂質(zhì)沉積，而Sema4D敲除〔Sema4D (－/－)〕及LDLR(－/－)雙基因敲除小鼠主動(dòng)脈內(nèi)脂質(zhì)沉積明顯減少，提示Sema4D表達(dá)缺失可縮小動(dòng)脈粥樣硬化斑塊體積。

動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)新生血管形成與破裂在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展和不穩(wěn)定傾向密切相關(guān)。sSema4D是內(nèi)皮細(xì)胞遷移至動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)的重要導(dǎo)向分子，其水平升高導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)新生血管增多，影響動(dòng)脈粥樣硬化斑塊發(fā)生、發(fā)展與穩(wěn)定性［13］。Yukawa等［14］將載脂蛋白E基因敲除〔ApoE(－/－)〕小鼠和ApoE (－/－)及Sema4D(－/－)雙基因敲除小鼠正常飲食喂養(yǎng)6個(gè)月，免疫組織化學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，后者較前者主動(dòng)脈內(nèi)的粥樣硬化斑塊體積縮小，粥樣硬化斑塊內(nèi)新生血管形成減少，且巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)較輕。Sema4D參與動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程的另一途徑可能通過(guò)血小板活化過(guò)程實(shí)現(xiàn)，血小板活化后通過(guò)激活炎性反應(yīng)、促進(jìn)炎性細(xì)胞因子釋放、介導(dǎo)其內(nèi)皮黏附等參與動(dòng)脈粥樣硬化。

冠心病病理生理過(guò)程主要為冠狀動(dòng)脈粥樣硬化使血管管腔狹窄或阻塞。Sema4D已被證實(shí)參與了動(dòng)脈粥樣硬化形成［4］，因此，Sema4D在冠心病的發(fā)生過(guò)程中發(fā)揮了一定作用。急性冠脈綜合征為冠心病中的急、危類(lèi)型，其主要發(fā)病機(jī)制是冠狀動(dòng)脈不穩(wěn)定性斑塊破裂、出血，繼發(fā)急性血栓形成而使管腔嚴(yán)重狹窄或急性閉塞［15］。急性冠脈綜合征患者早期表現(xiàn)為血小板的活化，血小板激活后Sema4D水平明顯增加，進(jìn)而Sema4D脫落釋放，形成sSema4D［16］。釋放入血的sSema4D通過(guò)促進(jìn)血小板活化進(jìn)一步促進(jìn)血栓形成，形成惡性循環(huán)［4］。本研究結(jié)果顯示，急性冠脈綜合征患者血清sSema4D水平高于穩(wěn)定型冠心病患者，提示sSema4D水平與冠狀動(dòng)脈急性血栓事件有關(guān)。

綜上所述，高水平sSema4D影響動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的發(fā)生、發(fā)展及其穩(wěn)定性，與冠心病、冠狀動(dòng)脈急性血栓事件的發(fā)生密切相關(guān)。本研究樣本量較小，未能充分排除藥物等影響sSema4D水平的因素，尚需大規(guī)模、多中心研究進(jìn)一步探討sSema4D水平與冠心病發(fā)生的關(guān)系。

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本文鏈接:

Semaphorins家族是一類(lèi)以結(jié)構(gòu)中具有sema區(qū)域?yàn)楣餐卣鞯牡鞍?，Sema4D是其成員之一，Sema4D與受體叢狀蛋白B1和分化抗原簇72 (CD72)結(jié)合，通過(guò)多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，在神經(jīng)系統(tǒng)的軸突導(dǎo)向，免疫系統(tǒng)中T、B淋巴細(xì)胞的活化和免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。Sema4D在多種人體腫瘤組織中高表達(dá)，且對(duì)血管發(fā)生及腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移起重要作用。

Correlation Between Serum sSema4D Level and Coronary Disease

KUANGLong，ZHAOLiang－ping，YOUTao，etal．DepartmentofCardiology，theSecondAffiliatedHospitalofSoochowUniversity，Suzhou215004，China

ObjectiveTo investigate the correlation between serum sSema4D level and coronary disease．M ethods Enrolled 297 patients who

treatment and coronary arteriography in the Second Affiliated Hospital of Soochow University due to chest distress and chest pain from May 2013 to May 2014．According to quantified coronary arteriography，the patientswere divided into two groups:CHD group(n=177)and control group(n=120)．The patients of CHD group were divided into stable CHD(n=95)and acute coronary syndrome(n=82)．At admission，peripheral venous blood was sampled to determine the levels of serum sSema4D by ELISA．Results CHD group and control group were not significantly different(P＞0．05)in age and hypertension prevalence．The two groups were significantly different in gender，smoking，diabetic prevalence，F(xiàn)PG，TC，TG，HDL－C，LDL－C and sSema4D level(P＜0．05)．In CHD group，the sSema4D level of acute coronary syndrome was(8．70±2．19)μg/L，higher than that of stable CHD which was(6．5±2．60)μg/L(t=6．034，P＜0．001)．Multivariate Logistic regression analysis showed that LDL－C〔OR=6．665，95%CI(1．206，36．844)，P=0．030〕and sSema4D〔OR=5．013，95%CI(1．807，13．904)，P=0．002〕were risk factors for coronary disease．The optimal point for sSema4D level predicting coronary diseaseswas5．58μg/L，and the sensitivity and specificity were83．8%and 78．1%，with an AUC of 0．913〔95%CI(0．847，0．978)，P＜0．001〕．Conclusion High serum sSema4D level is a risk factor for coronary disease and has high sensitivity and specificity of predicting coronary disease．

Coronary disease;Semaphorins;Risk factors

R 541．4

A

10．3969/j．issn．1007－9572．2015．36．003

2015－06－14;

2015－11－16)

(本文編輯:吳立波)

215004江蘇省蘇州市，蘇州大學(xué)附屬第二醫(yī)院心臟內(nèi)科

徐衛(wèi)亭，215004江蘇省蘇州市，蘇州大學(xué)附屬第二醫(yī)院心臟內(nèi)科;E－mail:xuwt1968@aliyun．com